神经酰胺诱导LX-2细胞凋亡抑制肝纤维发生的作用

目的:探讨神经酰胺对人源肝星状细胞株（HSCs）LX-2的影响以及在肝纤维化治疗中的作用,为寻求肝纤维化治疗的新方法提供理论依据。方法:体外培养人源肝星状细胞LX-2,分为正常细胞对照组及给药组（C2终浓度为30、45、60 μmol/L）,应用神经酰胺从头合成途径的限速酶即丝氨酸棕榈酰转移酶的特异性抑制剂多球壳菌素（myriocin）进一步分析神经酰胺的作用。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测LX-2的细胞增殖情况,酶消化法测定上清中羟脯氨酸（Hyp）的含量,比色法检测乳酸脱氢酶（LDH）的活性,Western blot法检测bax、bcl-2及caspase-3的蛋白表达量。结果:C2各浓度组对LX-2的增殖均有明显的抑制作用,且具有剂量依赖性（P<0.05）;LX-2经C2处理后细胞内羟脯氨酸含量显著下降（P<0.05）;LDH活性与对照组比较均无显著性差异;C2下调LX-2中抗凋亡蛋白bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白bax与凋亡执行效应分子caspase-3的表达（P<0.05）,bax/bcl-2比值增大。但是,以myriocin 15 μmol/L作用LX-2细胞24 h后,细胞增殖较对照组增多,羟脯氨酸的含量明显升高（P<0.05）;LDH活性与对照组比较无显著性差异;bcl-2蛋白表达上调,bax、caspase-3蛋白表达下调（P<0.05）,bax/bcl-2比值减小。结论:神经酰胺可通过上调bax和caspase-3的表达,下调bcl-2的表达而诱导LX-2细胞凋亡,同时抑制其增殖,从而减少羟脯氨酸的生成,产生抑制肝纤维发生的作用。     

小檗碱通过抑制肝星状细胞自噬改善小鼠肝纤维化

目的 研究小檗碱(BBR)对肝星状细胞(HSC)自噬与活化的调控及其抗肝纤维化作用。方法分别采用不同质量浓度BBR(0、2、5、10、20、50μmol/L)干预血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB,20μg/L)处理的LX-2细胞24 h,使用CCK-8法检测细胞活力;采用不同质量浓度BBR(0、2、5、10μmol/L)干预PDGF-BB(20μg/L)处理的LX-2细胞24 h或48 h,使用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)方法检测细胞增殖率,细胞划痕实验检测细胞迁移率。实时荧光定量聚合酶链式反应、免疫印迹法检测小檗碱(5μmol/L)对LX-2细胞α-SMA,COL1A1 mRNA及蛋白表达的影响;检测Atg5、 Becn1、 Atg7、 LC3、p62的表达。动物实验共18只小鼠,随机分为3组,对照组[橄榄油(Oil)+磷酸盐缓冲液(PBS)]、模型组[四氯化碳(CCl₄)+PBS]和药物干预组(CCl₄+BBR),每组6只小鼠,造模5周,2次/周。第3周开始给与BBR干预,2次/周,连续给药3周。造模5周后处死小鼠,检...     

葡萄籽提取物对PC12神经元毒性的研究

目的:考察葡萄籽提取物(grape seed extract,GSE)在体外对高分化的PC12神经元增殖的影响及机制。方法:采用MTT法考察GSE对PC12神经元增殖的影响,Western blot法检测GSE对PC12神经元中与凋亡相关的蛋白Bcl-2、Bax表达量的影响。结果:实验结果表明,低浓度的GSE(2.5μg/m L,5μg/m L)长时间作用72 h可促进PC12细胞增殖,10μg/m L GSE对PC12细胞增殖无影响,20μg/m L GSE作用48 h出现细胞毒性,30μg/m L,50μg/m L和100μg/m L GSE作用24 h即可抑制细胞增殖。GSE显著抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,对促凋亡蛋白Bax表达无影响。结论:20μg/m L以上浓度的GSE作用于PC12神经元会显著抑制其增殖,作用机制为减少了细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。     

番茄红素对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究番茄红素（lycopene,LP）对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 取对数生长期SKOV3细胞随机分为5组：正常对照组、LP（20、10、5μg/ml）组和顺铂（40μg/ml）组（阳性对照组）,每组10个复孔。给药干预48h后,观察比较各组细胞生长状况并采用MTT比色法测定细胞增殖抑制率;通过流式细胞术（flow cytometry）分析细胞周期的改变、检测细胞凋亡并计算细胞凋亡率,免疫印迹法（Western blot）检测caspase-3蛋白表达并进行半定量分析,反转录PCR（RT-PCR）技术检测Bax mRNA和bcl-2 mRNA表达并计算Bax/bcl-2表达比值。结果 与正常对照组比较,LP各组SKOV3细胞呈现不同程度的细胞脱壁、细胞间松散等病理性状态,以LP 20μg/ml组最为显著;LP（20、10μg/ml）组细胞增殖抑制率显著升高,细胞周期被阻滞于G₂/M期,细胞凋亡率显著升高,caspase-3蛋白表达量显著增高,bcl-2 mRNA表达显著下调、Bax mRNA表达显著上调,Bax/bcl-2表达比值显著升高,上述差异均具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论 LP具有抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖并促进其凋亡的作用,作用机制可能与LP能够有效提高caspase-3蛋白表达并下调bcl-2 mRNA表达、上调Bax mRNA表达、提高Bax/bcl-2表达比值有关。     

重组人生长激素对肝癌细胞MHCC-97H的作用及机制

目的探讨重组人生长激素（rhGH）对肝癌细胞MHCC-97H的作用及机制。方法以无血清培养液诱导肝癌细胞MHCC-97H凋亡,再以浓度为0μg/L（GH0组）、5μg/L（GH5组）、25μg/L（GH25组）、50μg/L（GH50组）、100μg/L（GH100组）和500μg/L（GH500组）的rhGH完全培养液进行培养,MTT法观察MHCC-97H细胞生长情况,流式细胞技术检测细胞凋亡率、细胞周期和细胞增殖指数,RT-PCR和Western blotting法分别检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白表达情况。结果与GH0组比较,GH25组、GH50组、GH100组和GH500组MHCC-97H细胞增殖明显,S期细胞百分比和细胞增殖指数显著增加（P〈0.05）;GH25组、GH50组和GH100组细胞凋亡率显著降低（P〈0.05）,Bax mRNA和蛋白表达显著降低（P〈0.05）,Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著增加（P〈0.05）。结论 rhGH体外显著促进肝癌细胞MHCC-97H增殖,并通过调节凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达来抑制无血清培养液诱导的细胞凋亡。     

苦参素对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞保护作用研究

目的:研究苦参素(Oxymatrine,OMT)对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞的保护作用。方法:于无菌环境下分离SD大鼠乳鼠心肌细胞并培养72 h后随机分为:空白对照组、缺氧/复氧(H/R)模型对照组、OMT(20、40、80μg/m L)干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/m L)干预组(阳性对照组),每组设10个复孔。药物干预6 h后,通过倒置光学纤维镜观察细胞形态;通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;检测细胞培养液中谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)和乳酸脱氢酶(LDH)释放量;测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量;通过酶联免疫法(ELISA)测定培养液中TNF-α、IL-1、IL-6含量水平;通过流式细胞仪检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,通过RT-PCR检测细胞中bcl-2 m RNA、Bax m RNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值。结果:与模型对照组比较,OMT 40、80μg/m L干预组乳鼠心肌细胞形态和生存状态均明显好转,存活率显著升高,培养液中AST、CPK、LDH释放量显著降低,细胞中SOD活性显著升高且MDA含量显著降低,细胞凋亡状况显著改善、凋亡率显著降低,细胞中bcl-2 m RNA表达显著上调且Bax m RNA表达显著下调,bcl-2/Bax表达比值显著升高,培养液中TNF-α、IL-6含量水平显著降低,上述差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01);其中OMT 80μg/m L干预组细胞中GSH-Px活性显著升高(P0.05),培养液中IL-1含量显著降低(P0.05)。结论:苦参素能够有效改善缺氧/复氧损伤心肌细胞形态、提高细胞存活率、改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤、降低细胞凋亡率、并抑制炎症反应,提示苦参素对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞具有保护作用。     

黄连素联合顺铂诱导人肺癌耐药A549/DDP细胞凋亡的实验研究

目的观察黄连素联合顺铂对A549/DDP细胞凋亡的影响并探讨其相关机制。方法以A549/DDP细胞为研究对象,分别加入12μg/m L的顺铂、浓度为20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L的黄连素+12μg/m L的顺铂,设置空白对照孔(PBS孔),分别用药物干预24 h、48 h、72 h,采用MTT法检测细胞增殖活性;各组用药干预48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法检测Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2的蛋白表达情况,Real-time PCR法检测Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2的m RNA表达水平。结果黄连素联合顺铂能够抑制A549/DDP细胞增殖(P0.01),并具有一定的时间-浓度依赖性。黄连素联合顺铂能够诱导耐药细胞A549/DDP凋亡(P0.01),且呈一定的浓度依赖性。不同浓度的黄连素联合顺铂使促凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-9、Bax在蛋白和m RNA水平表达上调(P0.05),而抗凋亡基因Bcl-2在蛋白和m RNA水平表达下调(P0.05)。结论黄连素联合顺铂抑制A549/DDP细胞增殖和促凋亡的分子机制可能是上调促凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-9、Bax的表达,下调抗凋亡基因Bcl-2的表达。     

水飞蓟宾对人肝星状细胞LX-2凋亡及α1(Ⅰ)胶原mRNA表达的影响

目的:观察水飞蓟宾对人肝星状细胞LX-2凋亡与a1(Ⅰ)胶原mRNA表达的影响.方法:人肝星状细胞株LX-2分为对照组与实验组,对照组以体积分数10%胎牛血清处理,实验组分别以体积分数10%胎牛血清和终浓度分别为6.25 mg/L、12.5 mg/L、25 mg/L、50 mg/L的水飞蓟宾处理48 h后,应用流式细胞仪Annexin/PI双染方法检测细胞凋亡.应用RT-PCR检测各组细胞α1(Ⅰ)胶原mRNA的表达.结果:12.5 mg/L、25 mg/L、50 mg/L水飞蓟宾可促进Lx-2细胞凋亡,细胞凋亡率随水飞蓟宾浓度增加而升高(P<0.05);不同浓度的水飞蓟宾明显降低LX-2细胞α1(Ⅰ)胶原mRNA的表达(P<0.05).结论:水飞蓟宾可促进肝星状细胞凋亡,抑制α1(Ⅰ)胶原mRNA的表达.     

草乌甲素对人肝星状细胞LX-2增殖及凋亡的影响

目的研究草乌甲素(bulleyaconitine A,BLA)对肝星状细胞LX-2增殖、凋亡以及相关凋亡蛋白表达的影响。方法体外培养LX-2细胞,分别给予不同BLA浓度处理24 h后采用CCK8法检测BLA对LX-2细胞的抑制率;流式细胞术检测LX-2细胞凋亡的情况;Western blot法检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达量。结果 BLA对LX-2细胞有明显抑制作用,BLA能使LX-2细胞处于S期、G2/M的细胞明显减少,差异均有统计学意义(t=9.71、4.88,P0.05),处于G1期的细胞显著增多,差异有统计学意义(t=9.71,P0.05);使Bax、Caspase-3蛋白表达量增加,Bcl-2表达降低。结论 BLA可能通过促进Bax、Caspase-3表达,抑制Bcl-2表达抑制LX-2细胞增殖,促进其凋亡。     

小檗碱对人肝癌SMMC-7721细胞 bcl-2、bax表达的影响

目的:研究小檗碱(Berberine)对体外培养肝癌SMMC-7721细胞bcl-2和bax表达的影响。方法:体外培养人肝癌SMMC-7721细胞,采用CCK8法测定Berberine不同浓度(0mmol/L、0.1mmol/L、0.2mmol/L、0.5mmol/L)及不同时间点(24h、48h、72h)对细胞增殖的影响,选取最适浓度和最适时间点,采用Western blot检测凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达。结果:CCK8发现Berberine对肝癌SMMC-7721细胞有显著的增殖抑制作用,在48h时间点和0.2mmol/L浓度条件下抑制最明显。Western blot检测结果发现,Berberine可致人肝癌SMMC-7721细胞bcl-2表达下调,bax表达上调,bax/bcl-2比值升高,促进凋亡发生。结论:Berberine抑制肝癌SMMC-7721细胞生长,通过上调bax蛋白、下调bcl-2蛋白,诱导凋亡。     

氧化苦参碱对视网膜母细胞瘤细胞凋亡的诱导作用及机制

目的氧化苦参碱对视网膜母细胞瘤细胞SM-106凋亡的诱导作用及机制。方法以不同作用时间(24 h、48 h、72 h)和不同作用浓度(12.5μl/m L、25μl/m L、50μl/m L、100μl/m L)氧化苦参碱处理视网膜母细胞瘤细胞SM-106,分别采用流式细胞仪及western blot检测视网膜母细胞瘤细胞SM-106细胞凋亡及其凋亡因子(Bax、Bcl-2)蛋白表达。结果氧化苦参碱可促进SM-106细胞体外凋亡,上调Bax蛋白表达及Bax/Bcl-2蛋白表达比值,下调Bcl-2蛋白表达,并呈现剂量及时间依赖性。结论氧化苦参碱可诱导视网膜母细胞瘤细胞SM-106凋亡,调控凋亡因子Bax、Bcl-2的表达是其可能作用机制。     

三氧化二砷诱导胃癌细胞凋亡及其对bcl-2基因和bax蛋白表达的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导胃癌细胞凋亡及其对bcl-2基因、bax蛋白表达的影响。方法分别以0μmol/L、1μmol/L、2μmol/L、4μmol/L和8μmol/L浓度的As2O3作用于胃癌SGC-7901细胞24 h、48 h和72 h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测法检测各组吸光度值、细胞生长抑制率,采用流式细胞仪(FCM)检测bcl-2基因和bax蛋白的表达情况。结果随着As2O3浓度的增高及作用时间的延长,MTT吸光度值逐渐降低,1μmol/L、2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L组分别与0μmol/L组比较,不同作用时间MTT吸光度值比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。1μmol/L的As2O3对细胞增殖抑制作用较小,随着As2O3浓度的增高及作用时间的延长,细胞增殖抑制率相应增加,2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L组分别与1μmol/L组比较,不同作用时间细胞增殖抑制率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同浓度的As2O3作用于SGC-7901细胞后,bcl-2基因呈低表达,bax蛋白呈高表达,bcl-2/bax比值降低且呈剂量依赖性,不同浓度As2O3组与对照组bcl-2基因、bax蛋白表达情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 As2O3对胃癌细胞的生长具有明显的抑制作用,其机制可能与下调bcl-2基因表达,上调bax蛋白表达从而诱导胃癌细胞的凋亡有关。     

紫草素对人肝癌细胞化疗增敏作用及机制研究

目的研究紫草素对人肝癌HepG_2细胞顺铂增敏作用并初探其可能的作用机制。方法取对数生长期人肝癌HepG_2细胞并分别给予紫草素组(紫草素0.5μg/ml)、顺铂组(顺铂40μg/ml)和联合干预组(紫草素0.5μg/ml+顺铂40μg/ml)干预治疗48 h,同步设空白对照组,每组设10个复孔(n=10)。检测细胞增值抑制率、细胞周期和细胞凋亡状况并计算细胞凋亡率及Bax mRNA、bcl-2 mRNA、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达情况。结果与顺铂组比较,联合干预组人肝癌HepG_2细胞增殖抑制率显著升高(P0.05),细胞周期G_0/G_1期显著延长(P0.05)、G_2/M期显著缩短(P0.01),凋亡细胞数量明显增多、细胞凋亡率显著升高(P0.01),Bax mRNA表达上调、bcl-2 mRNA表达下调(P0.05),且Bax/bcl-2比值显著升高(P0.01),Caspase-3蛋白表达上调(P0.05)。与空白对照组比较,紫草素组人肝癌HepG_2细胞周期G_0/G_1期延长、G_2/M期缩短,bcl-2 mRNA表达下调(P0.05)、Bax/bcl-2比值升高(P0.05),Caspase-3蛋白表达上调(P0.01)。结论紫草素具有提高人肝癌HepG_2细胞顺铂敏感性的作用,其机制可能与紫草素阻滞细胞周期及调节凋亡相关基因和蛋白表达有关。     

右美托咪定对脂多糖诱导RAW264.7细胞凋亡的影响

目的：探讨右美托咪定（ DEX）对脂多糖（ LPS）诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡的影响。方法：体外培养小鼠巨噬细胞系 RAW264.7,细胞随机分为正常对照组、LPS刺激组（10 mg/L）、DEX组（0.1、1、10、100μmol/L）和LPS＋DEX组（0.1、1、10、100μmol/L）;采用四甲基偶氮唑盐（ MTT）微量酶反应比色法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质免疫印迹法（ western blot）检测bax、bcl-2蛋白表达。结果：与正常对照组相比,DEX组（浓度为0.1、1、10μ mol/L ）对RAW 264.7细胞生存率、凋亡率以及bax、bcl-2的表达影响不明显（ P﹥0.05）;100μmol/L DEX对RAW264.7细胞生存率、凋亡率明显下降,bax的表达明显增加,bcl-2表达降低（P﹤0.05）;与 LPS刺激组相比,LPS＋DEX组（0.1,1,10μmol/L）可增加RAW264.7细胞的生存率,降低细胞凋亡率,bax表达降低,bcl-2表达增加（ P﹤0.05）,LPS＋100μmol/L DEX组细胞生存率显著降低,凋亡率显著增加,bax表达明显增加,bcl-2表达显著降低。结论：低浓度DEX（﹤10μmol/L）抑制LPS诱导RAW264.7细胞凋亡,高浓度则表现为增强作用。     

去氢木香内酯对人肝星状细胞增殖及凋亡的影响研究

目的 探讨去氢木香内酯(Dehy)对人肝星状LX-2细胞增殖及凋亡的影响,分析其可能的作用机制.方法 人肝星状LX-2细胞经不同浓度Dehy处理后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞术检测LX-2细胞增殖和周期分布,Hoechst 33342染色法及AV-PI双染法检测LX-2细胞凋亡情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白的表达.结果 给予不同浓度的Dehy作用48 h后,能够明显抑制LX-2细胞的增殖,阻滞细胞周期于S、G2/M期,同时诱导LX-2细胞的凋亡,呈浓度依赖性;Western blot结果显示,Dehy可促进P27、Bax的表达上调,Bcl-2的表达下调.结论 Dehy通过调节Bax、Bcl-2和P27的表达诱导人肝星状LX-2细胞的凋亡和周期的阻滞.     

氯胺酮对谷氨酸诱导大鼠大脑皮层星形胶质细胞自噬的影响

目的观察氯胺酮对谷氨酸诱导的大鼠大脑皮层星形胶质细胞自噬的影响。方法取新生大鼠大脑皮层,原代混合培养、分离、纯化获得星形胶质细胞。实验分3个组：对照组（C组,加入D-Hank＇s液）;谷氨酸组（G组,加入谷氨酸至终浓度125μmol/L）;谷氨酸和氯胺酮组（GK组,先加入谷氨酸至终浓度125μmol/L,30 min后加入氯胺酮至终浓度1 mmol/L）。用相差显微镜观察细胞形态变化,免疫荧光染色鉴定细胞种类及LC3蛋白在细胞内的表达,通过Western blot法检测beclin-1、bcl-2、LC3蛋白的表达变化。结果 G组细胞内beclin-1、beclin-1/bcl-2、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达较C组上升,bcl-2蛋白表达较C组下降（均P〈0.05）。GK组细胞内beclin-1、beclin-l/bcl-2、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达较G组下降,bcl-2蛋白表达较G组上升（均P〈0.05）。结论 125μmol/L谷氨酸能促进星形胶质细胞发生自噬和凋亡,1 mmol/L氯胺酮可抑制谷氨酸诱导星形胶质细胞发生的自噬和凋亡。     

Wnt5a对肝星状细胞增殖、迁移和衰老的调控作用

目的 寻找抗纤维化的治疗方案和治疗靶点具有重要意义。文章旨在探讨Wnt蛋白家族成员5a(Wnt5a)对肝星状细胞(HSCs)增殖、克隆形成、迁移能力以及衰老的影响。方法 构建胆汁淤积性肝纤维化大鼠模型，利用芯片分析差异表达的基因。用不同浓度的TGF-β₁刺激肝星状细胞，将实验分为3组，分别为只加完全培养基的对照组以及用5μg/L和10μg/L TGF-β₁刺激的处理组，通过qRT-PCR、Western blot和免疫荧光检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原α1(COL1A1)和Wnt5a的表达。Wnt5a的siRNA(si-Wnt5a)转染LX-2细胞后，通过qRT-PCR和Western Blot检测LX-2细胞中α-SMA、COL1A1、Wnt5a的mRNA和蛋白表达；通过CCK-8、集落形成、Transwell、划痕、β-半乳糖苷酶染色分别检测LX-2细胞的增殖、集落形成、迁移能力以及细胞的衰老情况。利用生物信息学网站预测与Wnt5a有靶向关系的miRNAs, STRING数据库分析与Wnt5a有相互作用的蛋白，并用Cytosc...     

三丁基氯化锡诱导下丘脑神经元细胞凋亡的模型研究

目的:建立三丁基氯化锡(TBTC)诱导的新生雌性大鼠下丘脑神经元细胞凋亡模型,并探讨相关机制。方法:取新生24 h以内的雌性SD大鼠,分离下丘脑神经元细胞进行原代培养。免疫荧光染色法鉴定下丘脑神经元纯度后,分别暴露于含不同浓度TBTC(0、100、150、200、250、300μg/L)的培养基中。孵育24 h后,CCK-8检测各组细胞存活率,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,Hoechst 33258染色观察凋亡细胞核形态,透射电镜观察细胞形态的改变,Western blot检测凋亡相关蛋白JNK、p-JNK的表达。结果:免疫荧光染色鉴定神经元纯度约为92.23%。与TBTC 0μg/L组相比,各浓度TBTC干预24 h对下丘脑神经元细胞的生长均有抑制作用,其相对存活率均显著降低(P0.01),且呈浓度依赖性;与TBTC 0μg/L组相比,不同浓度的TBTC作用24 h后,下丘脑神经元细胞均出现不同程度的细胞凋亡,其细胞凋亡率均显著升高(P0.01),且呈浓度依赖性。Hoechst 33258染色显示,TBTC 150μg/L组下丘脑神经元细胞核呈致密浓染的高强度蓝色荧光,细胞核出现明显的凋亡形态。透射电镜观察显示,TBTC 150μg/L组出现细胞核固缩并发生裂解,染色质边集化,可见多个凋亡小体;与TBTC 0μg/L组相比,TBTC 150μg/L组细胞p-JNK蛋白表达显著增多,p-JNK/JNK蛋白表达比值显著上调(P0.01)。结论:TBTC 150μg/L干预24 h可诱导下丘脑神经元细胞凋亡,其损伤机制与上调p-JNK蛋白表达有关。     

白杨素对5- 氟尿嘧啶诱导人肝癌Bel-7402 细胞凋亡的增敏机制研究

目的 探讨白杨素对5- 氟尿嘧啶（5-FU）诱导肝癌Bel-7402 细胞凋亡的增敏作用。方法 白 杨素单独或联合5-FU 作用Bel-7402 细胞,用MTT 法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡与周期分 布变化;Western blotting 检测Bcl-2、Bax、Bad 及Cleaved Caspase-3 蛋白。结果 50 ～ 250μmol/L 白杨 素作用Bel-7402 细胞48 h 呈浓度依赖性的抑制细胞活力,且100μmol/L 白杨素组细胞存活率为（82.261± 7.793）%。100μmol/L 白杨素单独作用24 h 对Bel-7402 细胞活力和凋亡均无影响（P >0.05）。与空白对照 组比较,100μmol/L 白杨素作用24 h 后,不同浓度5-FU（12.5、25.0 及50.0μg/ml）作用48 h 对Bel-7402 细胞活力的抑制作用增强（P <0.05）;25.0μg/ml 5-FU 诱导Bel-7402 细胞凋亡率增加（P <0.05）;G2/M 期 细胞比例升高（P <0.05）;促凋亡蛋白Bax、Bad 及Cleaved Caspase-3 蛋白表达水平上调（P <0.05）;抗凋亡 蛋白Bcl-2 表达水平下调（P <0.05）。结论 白杨素增强5-FU 诱导人肝癌Bel-7402 细胞凋亡,其机制可能 与线粒体凋亡通路激活有关。     

大蒜素抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长的实验研究

目的 研究大蒜素抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长的作用,并探讨其可能的作用机制。方法 以不同浓度大蒜素（12.5、25、50μg/ml）和顺铂（40μg/ml）分别干预对数生长期Ishikawa细胞,采用MTT法检测Ishikawa细胞增殖抑制;通过流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡状况,采用Western blot法检测Ishikawa细胞中caspase-3蛋白表达,RT-PCR法检测Ishikawa细胞中Bax mRNA、bcl-2 mRNA表达并计算Bax/bcl-2表达比值。结果 大蒜素能够显著提高子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖抑制率、阻滞Ishikawa细胞周期于G₂/M期,提高细胞凋亡率、上调caspase-3蛋白和Bax mRNA表达、下调bcl-2 mRNA表达、提高Bax/bcl-2表达比值,且上述作用均具有一定的剂量依赖性。结论 大蒜素对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖具有抑制作用以及促其凋亡的作用,从而表现出其抑制Ishikawa细胞生长的作用;作用机制可能与大蒜素能够改变Ishikawa细胞周期以及调节凋亡相关基因、蛋白表达有关。