微波照射对兔附睾管周组织超微结构及碱性磷酸酶细胞化学的影响

本文用微波(2450mHz)照射兔阴囊,使阴囊皮肤温度升至41～42℃,维持20min。用电镜观察照射后30min至4个月之间不同时间阶段附睾中段的附睾管周组织超微结构改变,同时还观察照射后12h至30d之间不同时间阶段,对附睾管周组织内碱性磷酸酶细胞化学的影响。照射后1/2～1h,即见平滑肌细胞和毛细血管内皮细胞呈现明显的形态学改变。24h～3d后,小管周组织增厚,其中的固有膜增厚内凸明显。3～4个月后,平滑肌细胞一般已恢复正常形态,但小管周组织的增厚和固有膜的内凸仍然存在。碱性磷酸酶分布于基膜、固有膜、最内层平滑肌细胞胞浆及其表面小泡。照射后12h碱性磷酸酶活动无明显改变,15d后明显减少,30d后接近正常。     

脂多糖诱发急性肺炎时中性粒细胞碱性磷酸酶细胞化学定位观察

目的 探讨脂多糖诱发急性肺炎时,大白鼠中性粒细胞碱性磷酸酶（ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ,ＡＬＰ）的超微定位及其在炎平过程中的相关功能。方法 采用腹腔内（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ,ＬＰＳ,一种提自大肠杆菌的内毒素）的方式诱发大白鼠急性肺炎,使中性粒细胞在肺内不同部位集聚。用铈作为捕捉剂,以检测ＡＬＰ活性。对照组为介质中除去底物或加入２ｍｍ０ｌ／Ｌ左旋咪唑。电镜下行酶活性定位     

镉对大鼠输精管损伤及锌保护的超微结构与葡萄糖-6-磷酸酶细胞化学的研究

目的研究小剂量氯化镉对大鼠输精管近、远段的影响及锌的保护作用。方法用１％氯化镉（２ｍｇ／ｋｇ体重）腹腔注射雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠后４ｈ到６０ｄ及镉、锌联合注射后３ｄ、１５ｄ取材。采用电镜观察和葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ－６－Ｐａｓｅ）电镜细胞化学定量研究。结果镉注射４ｈ后,输精管主细胞出现超微结构改变,３～７ｄ改变最明显,１５ｄ后有所减轻,６０ｄ后基本恢复正常。主细胞的主要改变为线粒体肿胀,内质网扩张及髓样结构增多。镉注射后４ｈ,远段主细胞Ｇ－６－Ｐａｓｅ反应产物明显减少,３ｄ最少,１５ｄ反应产物增多。镉、锌联合注射后超微结构及Ｇ－６－Ｐａｓｅ活性损伤均较单纯镉组轻。结论锌对镉所致大鼠输精管主细胞超微结构损伤及远段主细胞Ｇ－６－Ｐａｓｅ活性影响有明显保护作用。     

五氯酚对人胎盘碱性磷酸酶构象与活力的影响

目的;研究三氯酚对人胎盘碱性磷酸酶构象与活力的影响。材料和方法：应用荧光光度法检测不同浓度五氯酚溶液中人胎盘碱性磷酸酶的内源荧光发射光谱,用分光光度法测定其活力。结果：五氯酚浓度小于1．0mmol／L时,平衡态酶的内源荧光发射强度及其活力迅速下降,发射峰位明显红移;继续提高五氨酸浓度,其荧光发射强度与活力逐渐下降,发射峰位仍在缓慢红移;五氯酚浓度增至5．0mmol／L时,荧光淬灭,但酶仍保密51．4％的活力。结论：五氯酚抑制了酶活力,并使其构承发生了改变,但其整体构象并未破坏。     

骨形态发生蛋白7诱导骨膜细胞碱性磷酸酶的表达

背景：关于骨形态发生蛋白7作为刺激因子诱导细胞成骨的报道目前较少见。 目的：观察骨膜细胞经骨形态发生蛋白7诱导后碱性磷酸酶的表达。 方法：取材于成人胫骨骨膜,常规细胞培养法行骨膜细胞体外培养,分为实验组和对照组,分别加入骨形态发生蛋白7加成骨细胞培养辅助剂和单纯成骨细胞培养辅助剂,相差显微镜观察骨膜细胞形态特征及超微结构。每组分别在第7,14,21天设3个时间点,每个时间点设3个样本,采用碱性磷酸酶试剂盒法检测成骨细胞特异性标志物碱性磷酸酶表达情况。 结果与结论：骨膜细胞经分组培养后,第7天时,实验组和对照组骨膜细胞均有明显增殖,碱性磷酸酶的可被检测出,但量不多,细胞外形为梭形,实验组比对照组检测的碱性磷酸酶数量稍多;第14天时,实验组及对照组骨膜细胞均显著增殖,细胞外形由梭形变为宽梭形,实验组比对照组检测的碱性磷酸酶数量明显增多。第21天时,实验组及对照组骨膜细胞均增殖,其中实验组细胞增殖明显,细胞外形为宽梭形,实验组比对照组检测的碱性磷酸酶数量显著增多。经过统计学分析由骨形态发生蛋白7诱导的骨膜细胞的成骨标志物碱性磷酸酶阳性率明显高于对照组(P < 0.01)。提示骨膜细胞具有良好的成骨和再生能力, 骨形态发生蛋白7能诱导骨膜细胞加强碱性磷酸酶的表达,能诱导骨膜细胞向成骨细胞转化。     

镉对大鼠前列腺损伤及锌保护的超微结构与硫胺素焦磷酸酶细胞化学的研究

目的　研究镉对大鼠前列腺腹侧叶的超微结构影响及锌保护作用。　方法　小剂量氯化镉 (2 m g/ kg体重 )及锌腹腔内注射后用透射电镜观察及硫胺素焦磷酸酶 (TPPase)电镜细胞化学定量分析。　结果　镉注射后 4h,前列腺上皮主细胞出现轻微的超微结构改变 ,3～ 7d呈明显退变 ,15 d退变减轻 ,出现粗面内质网 (RER)形成的同心圆性小体 ,30～ 6 0 d基本恢复正常。镉注射后 4h,TPPase反应产物较正常组减少 ,3d和 15 d进一步减少。锌保护组较相应的单纯镉组的超微结构损伤轻 ,且 TPPase反应产物也较多。　结论　镉对大鼠前列腺腹侧叶上皮主细胞早期直接损伤较轻 ,所致 TPPase反应产物减少明显。锌对镉所致主细胞超微结构损伤及 TPPase活性降低均有保护作用     

Ataxin-3相互作用蛋白A3IP的克隆与细胞及组织定位的初步研究

目的 根据前期筛选到的与ataxin-3蛋白羧基端相互作用的A3IP部分序列,进行A3IP基因的克隆,并探讨其细胞及组织定位情况.方法 应用生物信息学及Northern印迹方法克隆A3IP基因并检测其转录本在人体组织和人脑不同部位的表达情况;应用Western印迹及免疫荧光方法检测A3IP蛋白在细胞中的表达及定位情况;应用免疫组织化学染色方法检测A3IP蛋白在人体各组织和人脑不同部位的表达及定位情况.结果 对A3IP基因序列全长阅读框进行了cDNA克隆及序列拼接;检测了A3IP的3个转录本(1 kb、1.35 kb、6 kb)在人体不同组织和人脑不同部位的表达谱;获得了A3IP-pEGFP在COS-7细胞和人大脑皮质、小脑、肌肉、周围神经、肝脏、肾脏的表达及定位情况.结论 所克隆的A3IP基因编码ataxin-3的一种相互作用蛋白A3IP,其3个剪切本在人体多种组织和人脑不同部位广泛表达,是一种细胞胞浆蛋白.     

小鼠及人正常组织谷胱甘肽－S－转移酶π基因与三种癌基因的分布和相互关系的研究

用Ｈａｂｉｇ改良法测定人及ＤＡＢ小鼠正常组织中谷胱甘肽－Ｓ－转移酶活性及π基因与３种癌基因的分布。人７种正常组织中ＧＳＴπＲＮＡ相对含量为４．８６～０．２５，以胎盘最高，其次为膀胱、肺、胃。小鼠的ＧＳＴ活性为１７．７～１２．４７，肝最高，其次为胃、肺和肾。ＧＳＴπＲＮＡ为１．９８～０．４２５，以胃最高，脾和肺次之，ＧＳＴ活性与ＧＳＴπＲＮＡ的检测结果基本一致。人７种正常组织中，Ｎ－ｒａｓ的相对含量为２０～２．９４，以胎盘含量最高，直肠、乳腺次之。Ｃ－ｍｙｃ为２３．４～７．３８，胎盘、肺、膀胱较高。ｖ－ｅｒｂ－Ｂ为９．０５～０．３８，以胎盘最高，直肠、胃次之。在小鼠６种组织中，Ｎ－ｒａｓ的基因相对含量为６．２３～１．０４，以肺、脾较高，胃、肝、心、肾次之。Ｃ－ｍｙｃ为１３．７６～５．３１，肺、胃较高。ｖ－ｅｒｂ－Ｂ为８．７２～２．０９，肺、胃较高，脾次之。说明ＧＳＴπ对肿瘤的发生有一定的制约作用。     

大鼠肝再生过程中碱性磷酸酶活性变化及其超微细胞化学研究

目的 研究2／3肝切除后大鼠肝再生过程中碱性磷酸酶(AKP)活性的变化及其细胞定位。方法 利用比色法对AKP活性进行定量分析;用酶的原位复性电泳技术分析再生肝中AKP的种类和活性变化;用电镜细胞化学方法研究酶定位。结果 在肝部分切除后的肝再生期间,AKP出现两个活性高峰(16h和19h),在每个活性高峰后,AKP均有显著下降;获得3种肝型AKP同工酶(140、160和180kD),其中180kD的AKP只在肝再生过程中出现;随着肝再生的进展,AKP活性出现在细胞的不同部位。结论 AKP在肝再生过程中起重要作用,可能参与细胞代谢、物质转运、DNA合成和细胞分化。     

碱性磷酸酶与钙化

在生物学钙化中，碱性磷酸酶（ＡＫＰ）的作用存在争议，即ＡＫＰ对于钙化的启动是否起关键性作用。ＡＫＰ如何发生作用，ＡＫＰ在什么条件下促使钙化发生。在钙化过程中，ＡＫＰ发生什么变化。本文对这系列问题进行了讨论，并对生物瓣的缓钙化问题进行了探讨。     

酶标荧光-97检测中性粒细胞碱性磷酸酶活性的新方法

目的 用一种新试剂酶标荧光-97(ELF-97)检测人血中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)活性,观察NAP阳性细胞数及阳性颗粒形态和分布.方法 用Ficoll为介质的等密度沉降分离法从全血中分离出中性粒细胞,固定后以ELF-97为底物进行酶细胞化学反应,荧光/微分干涉相差显微镜观察并摄片.结果 荧光显微镜下可见中性粒细胞内有明亮的黄绿色荧光颗粒,颗粒在细胞内的分布均匀,大小不一,51例健康成人血样NAP阳性率为(94.102±3.133)%.结论 ELF-97荧光检测法操作简便,灵敏度高,产物不容易扩散,重复性好,结果精确,可作为不同用途的碱性磷酸酶检测手段.     

克氏综合征睾丸体积大小与性激素的相关性及睾丸组织超微结构的研究

目的探讨克氏综合征睾丸体积大小与性激素的相关性及造成克氏综合征男性不育的发病机理。方法对20例克氏综合征患者和10例正常对照组血清进行性激素测定，同时作睾丸组织活检进行病理切片及电镜超薄切片观察。结果克氏综合征与正常对照组睾丸体积、生精小管直径和管壁厚度及血清FSH、LH、T之间均有极显著的差异（P〈0．001），患者睾丸体积大小与FSH和LH值呈负相关性，与T值呈正相关性；睾丸组织超微结构观察结果表明生精小管界膜有不同程度的显著异常变化，主要表现为界膜增厚及纤维化增生，基膜增厚及纤维化增生，肌样细胞的空泡状变性或去分化增生。支持细胞病理变化呈现多样性特征，胞质内有大量内质网呈空泡状变性，部分线粒体扩张。间质内血管壁明显增厚及血管内皮细胞肿胀，基膜及血管腔内大量胶原纤维增生。结论推导出患者睾丸体积大小与FSH、LH、T的多重相关回归方程；同时认为克氏综合征睾丸组织结构发生严重的纤维化增生，促使其生精细胞形成过程发生早期的、程度严重的障碍和病理学变化，这是造成其男性不育的主要原因。     

慢性肾性高血压大鼠脑组织磁共振成像观察和超微结构的研究

目的研究慢性肾性高血压大鼠脑核磁共振成像(MRI)的变化和相应部位超微结构的改变。方法将SD大鼠分为对照组和模型组。用双肾双夹法建立肾性高血压动物模型,术后饲养12个月,用磁共振成像结合电镜观察大鼠脑组织的变化。结果1．正常组大鼠的血压、MRI表现及超微结构未发现异常。2．慢性肾性高血压模型大鼠血压升高;侧脑室旁尾壳核区域T22WI像上可见明显的条状高信号;髓鞘结构松散,可见轴突与髓鞘间及髓鞘板层间形成宽大的裂隙,部分神经纤维缺失,髓鞘脱落。结论慢性肾性高血压大鼠脑内出现明显的条状高信号,提示脑部神经纤维的病变可能己比较严重。     

葡萄糖-6-磷酸酶在大白鼠心肌细胞超微结构的定位

葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)是内质网的标志酶,本研究观察了大白鼠左心室心肌细胞的G6Pase的定位。实验结果表明,G6Pase活性遍布于心肌细胞的肌浆网(内质网)腔内,包括肌原纤维之间的肌浆网小管、肌膜下池和核膜。尤其是酶的反应产物在肌原纤维处显示了肌浆网小管的特征性分布:即在A带处肌浆网小管排列紧密形成致密网格,而在I带处排列稀疏,形成多角形大网格。这种排列特点可能和肌肉的舒缩功能有关,在收缩时I带的细丝向A带粗丝处滑动,肌节缩短。在I带处肌浆网小管排列成大网格、稀疏,便于伸长或缩短,是适应性的分布。     

分离的大鼠睾丸曲细精管体外重组的观察

将生后15天和20天大鼠的睾丸,去被膜后以胶原酶反复消化,使Sertoli细胞和生精细胞分离。以HamF-12无血清培养基培养子(35℃)5％CO_2温箱。经过19天的连续培养及光镜和电镜样品观察,发现分离的曲细精管上皮细胞经过贴壁生长期(培养后1～6天),形成单层培养细胞。再经索状生长期(培养后6～14天),由单层细胞变成致密的细胞索,并释放出有头尾结构的蝌蚪形精子样细胞。最后经管状生长期(培养第14天以后),细胞索发育成细胞团和类似曲细精管样的结构。光镜和电镜下见其中有管周细胞、Sertoli细胞和各级生精细胞。本文对分离的曲细精管上皮细胞在体外重组成小管样结构和体外精子发生,进行了讨论。     

饮酒对小鼠睾丸生精小管一氧化氮合酶、增殖细胞核抗原表达及细胞凋亡影响的研究

目的　探讨酒精对小鼠睾丸的组织结构、内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)、增殖细胞核抗原 (PCNA)及细胞凋亡的影响。　方法　用 5 %、10 %及 15 % 3种不同浓度的酒精作用于 2 2d龄小鼠 ,取睾丸做石蜡切片、HE染色 ;用免疫组织化学方法检测睾丸eNOS、细胞增殖的变化 ;TUNEL法检测细胞凋亡的变化 ,并进行统计学分析。　结果　随着酒精浓度的增大 ,睾丸组织结构发生明显改变 ,生精小管的直径逐渐减小 ,eNOS阳性细胞面积密度逐渐增大 ,单位面积内PCNA阳性细胞和凋亡细胞数目增加 ,高浓度酒精组与其他组差异极显著 (P <0 0 1)。　结论　酒精可使生精小管的直径变小 ,eNOS及PCNA表达增强 ,凋亡细胞增加并随酒精浓度的增大而变化加重。这可能是过量饮酒导致生精细胞减少 ,生殖能力降低的重要因素。