核转录因子-κB活化介导内毒素抑制白蛋白的表达

目的在原代大鼠肝细胞培养体系中,观察内毒素诱导白蛋白表达的下降是否由核转录因子(nuclear factor-κB,NF．KB)活化介导。方法原代大鼠肝细胞随机分为5组,分别经生理盐水、1μg／ml、0．01μg／ml、0．1μg／ml和1μg／ml内毒素,分别作用后24h检测肝细胞NF-κB的表达(凝胶电泳迁移率测定,EMSA)与白蛋白的变化(酶链免疫检测法,EIA)。同时,另一组肝细胞使用NF-κB特异性阻断剂SN50预处理30min后,再用1μg／ml内毒素刺激24h后观察白蛋白的变化。结果内毒素组肝细胞白蛋白的表达明显下降,而NF-κB的表达较生理盐水组明显增强,并且白蛋白表达受抑和NF-κB活化随内毒素浓度的提高明显增强。三种浓度的SN50均可完全阻断内毒素诱导的白蛋白表达的下降。结论核转录因子NF-κB的活化参与了内毒素抑制肝细胞白蛋白的表达,是导致感染时白蛋白表达下降的重要原因。     

人血白蛋白细菌内毒素检查法的比较

人血白蛋白细菌内毒素检查法的比较中国药品生物制品检定所１０００５０云志宏，刘大英，陈雪岩，卢莲玉，肖林家兔热原实验法在药品生物制品质量控制方面起着非常重要的作用，但该法存在的许多难以克服的缺点［１］常给实验带来诸多麻烦。细菌内毒素检查法［２］克服了家...     

异常白蛋白血症的分子研究进展

已命名的异常白蛋白血症目前已超过了100多种,大约存在60多个位点的氨基酸突变(定期更新的网址ht-tp://www.album in.org/)。异常白蛋白的发生率大约为1∶3 000~1∶10 000,我院的调查结果发病率为1/6 050[1]。根据DNA突变发生在白蛋白整条链上的位置不同分3大类:(1)突变位点在前肽链或附近,使白蛋白原不能转变成白蛋白(白蛋白原氨基端的6个氨基酸残基突变后不被信号肽酶识别);(2)DNA单点突变位点位于氨基酸残基313~382之间;(3)突变位点在多肽链C末端。一、白蛋白的分子结构人白蛋白是由585个氨基酸残基组成的非糖基化球状血清蛋白(相对分…     

异常白蛋白血症的分子研究进展

已命名的异常白蛋白血症目前已超过了100多种,大约存在60多个位点的氨基酸突变（定期更新的网址http：／／www．albumin．org／）。异常白蛋白的发生率大约为1：3000～1：10000,我院的调查结果发病率为1／6050。根据DNA突变发生在白蛋白整条链上的位置不同分3大类：（1）突变位点在前肽链或附近,使白蛋白原不能转变成白蛋白（白蛋白原氨基端的6个氨基酸残基突变后不被信号肽酶识别）;（2）DNA单点突变位点位于氨基酸残基313～382之间;（3）突变位点在多肽链C末端。     

内毒素单克隆抗体的实验研究

内毒素血症是临床上较难控制的一种疾病，死亡率高达２０％￣６０％，其诊断试验－鲎试验，因其非特异性的缺陷，经常出现假阳性结果，给临床造成误诊。内毒素单克隆抗体自问世以来，迅速发展。为内毒素血症提供了特异、敏感、快速的诊断工具，为其治疗提供了一种特异的免疫制剂。但是，它的应用却受到了内毒素种属差异和体内外各种因素的限制。本文对该方面的研究现状作一综述。     

改善低蛋白血症患者血浆白蛋白浓度的护理研究

目的　探讨有效改善低蛋白血症患者血浆白蛋白浓度的护理措施。方法　运用配对设计研究法 ,对 30例低蛋白血症患者进行配对研究 ,在医嘱应用人血白蛋白治疗过程中 ,对观察组患者进行饮食干预和改变输液顺序 ,观察每对患者的血浆白蛋白浓度变化值 ,进行统计学分析比较。结果　 2组患者治疗前、后血浆白蛋白浓度比较 (P <0 .0 0 1,P <0 .0 1) ,差异有显著性 ;但血浆总蛋白浓度比较 ,观察组明显改善 (P <0 .0 0 1) ,对照组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;每对患者治疗前、后血浆白蛋白及总蛋白浓度的增长值比较 ,观察组明显高于对照组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,差异有显著性。结论　饮食干预与输液顺序的调整有助于提高血浆白蛋白和总蛋白水平。     

用HB-H-7树脂吸附血浆内毒素和炎症细胞因子的体外实验研究

目的 通过体外实验探讨使用HB-H-7树脂吸附血浆内毒素及炎症细胞因子的有效性和安全性.方法 静态吸附实验:树脂与内毒素阳性患者血浆按1∶10比例混合,置37 ℃恒温水浴振荡2 h.动态吸附实验:将内毒素阳性患者血浆经过装有树脂的自制灌流器中灌流2 h.测定灌流前后血浆内毒素、炎症细胞因子、蛋白质和电解质浓度,计算吸附率.比较静态与动态不同吸附方式以及不同温度血浆灌流前后(30、60、120 min)血浆内毒素浓度的变化,并计算吸附率.结果 静态吸附实验中,用HB-H-7树脂吸附后,血浆内毒素和炎症细胞因子含量均显著降低(P均<0.05),内毒素、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1、6、8的吸附率分别为99.2%、55.0%、57.0%、75.0%、42.0%;而对蛋白质影响较小(P均<0.05);对电解质无明显影响(P均>0.05).动态与静态血浆内毒素吸附率比较差异无统计学意义(99.8%比99.1%,P>0.05),37 ℃与25 ℃下血浆内毒素吸附率比较差异亦无统计学意义(99.8%比99.9%,P>0.05).结论 HB-H-7树脂对内毒素及炎症细胞因子有明显吸附效果,对蛋白质影响较小,对电解质无明显影响.     

烧伤内毒素血症研究的若干进展

感染是烧伤后最常见的并发症,成为首要的致死原因。特别是革兰氏阴性杆菌如绿脓杆菌、大肠杆菌等侵袭所致脓毒症,对患者生命威胁极大。而此类细菌所产生的致病因子——内毒素在其发病中可能起着举足轻     

内毒素致伤大鼠肺组织促炎与抗炎细胞因子mRNA表达的时相性研究

目的 研究不同剂量内毒素致伤大鼠肺组织促炎和抗炎细胞因子mRNA表达的时相性,并探讨这些细胞因子在全身炎症反应失控和急性肺损伤中的可能作用。方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同剂量脂多糖(LPS)致伤大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-4、IL-10和IL-13的mRNA表达。结果 随着LPS剂量增加,TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10和IL-13的mRNA表达均增强(与生理盐水对照组比较,P均<0.01);LPS≥6 mg/kg组上述细胞因子表达显著高于此剂量以下组(P均<0.01)。表达峰值时间:TNF-α为1 h,IL-6为4 h,其他均在2 h。结论 内毒素致急性肺损伤中,TNF-α是早期表达的促炎细胞因子,而IL-6在炎症进一步发展中发挥作用;抗炎细胞因子IL-4、IL-10、IL-13高表达亦可能促进炎症的放大而不是起保护作用。     

The cytokine-mediated imbalance between coagulant and anticoagulant mechanisms in sepsis and endotoxaemia

Disseminated intravascular coagulation (DIC) is a frequently occurring complication of sepsis and may contribute to multiple organ failure. More insight into the pathogenesis of this derangement of the coagulation system is necessary to develop more effective therapeutic strategies for this condition. Recently, more detailed knowledge on the pathogenetic pathways involved in DIC has been obtained by the study of models of experimental bacteraemia and endotoxaemia in human subjects and non-human primates. The mechanisms that lead to activation of coagulation, potentiated by the simultaneous depression of physiological inhibitory systems and to impaired function of the fibrinolytic system, are outlined in this review. In addition, the mediatory role of various cytokines in the derangement of coagulation is discussed.     

The cytokine-mediated imbalance between coagulant and anticoagulant mechanisms in sepsis and endotoxaemia

Disseminated intravascular coagulation (DIC) is a frequently occurring complication of sepsis and may contribute to multiple organ failure. More insight into the pathogenesis of this derangement of the coagulation system is necessary to develop more effective therapeutic strategies for this condition. Recently, more detailed knowledge on the pathogenetic pathways involved in DIC has been obtained by the study of models of experimental bacteraemia and endotoxaemia in human subjects and non-human primates. The mechanisms that lead to activation of coagulation, potentiated by the simultaneous depression of physiological inhibitory systems and to impaired function of the fibrinolytic system, are outlined in this review. In addition, the mediatory role of various cytokines in the derangement of coagulation is discussed.     

二烯丙基三硫对急性肺损伤小鼠肿瘤坏死因子-α表达及核转录因子-kB活性的影响

目的 探讨二烯丙基三硫（DATS）对脂多糖（LPS）致急性肺损伤（ALI）小鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达及核转录因子-kB（NF—kB）活性的影响。方法 复制LPS致ALI小鼠模型。实验动物按随机数字表法分为生理盐水对照组、ALI模型组、DATS预防组、DATS治疗组和DATS对照组。采用酶联免疫吸附法（ELLSA）测定各组血清和肺组织匀浆上清液中TNF—α浓度；用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测各组肺组织TNF-α mRNA表达；凝胶电泳迁移率改变分析（EMSA）检测肺组织NF—kB活性。结果 ALI模型组2h血清及肺组织TNF—α含量明显升高（P均〈0．01），6h有所降低，但仍高于生理盐水和DATS对照组（P均〈0．01）；DATS预防组2h和6h血清及肺组织TNF—α含量较ALI模型组均明显降低（P〈0．05或P＜0．01），但DATS治疗组无明显效果（P均〉0．05）。ALI模型组2h肺组织TNF—α mRNA表达较生理盐水对照组和DATS对照组均明显升高（P均〈0．01），DATS预防组可明显抑制肺组织中TNF—α mRNA表达（P〈0．05），但DATS治疗组无明显效果。ALI模型组肺组织NF～kB活性较生理盐水对照组和DATS对照组均明显升高（P均〈0．05），DATS预防组可明显抑制肺组织NF—kB活性（P〈0．05），但DATS治疗组的抑制效果不明显。结论 预先给予DATS可抑制LPS诱导的ALI小鼠肺组织NF—kB活性和TNF—α mRNA表达，减少血清及肺组织中TNF—α的生成，具有一定的抗ALI作用。     

脂多糖诱导大鼠肝脏中两类磷脂酶A_2激活及基因表达

目的 :观察脂多糖 (L PS)在大鼠肝脏中诱导磷脂酶 A2 (PL A2 )亚型的激活和基因表达情况。方法 :大鼠腹腔注射脂多糖 (L PS,2 mg/ kg)后不同时间取血 ,分别测定分泌型 PL A2 (s PL A2 )活性和前列腺素 E2(PGE2 )含量 ,用 Western blot检测肝脏中胞浆型 PL A2 (c PL A2 )蛋白的表达和时间进程 ;采用免疫组化法检测s PL A2 和 c PL A2 蛋白在肝脏中的表达 ;用 m RNA斑点杂交法检测 s PL A2 、c PL A2 m RNA在脏器中的转录水平。结果 :L PS可以时间依赖方式升高大鼠血清 s PL A2 活性、PGE2 含量以及肝脏中 c PL A2 蛋白表达 ;免疫组化显示肝细胞可表达两类 PL A2 ,且 L PS可加强其表达 ;肝脏及其它脏器中均有两类 PL A2 m RNA转录 ,受 L PS刺激后反应各不相同 ,而在肝脏中均有加强。结论 :L PS可明显增强大鼠肝脏中两类 PL A2 的基因转录和蛋白表达 ,同时可引起血中 PL A2 活性增高和花生四烯酸代谢产物明显增高 ;肝脏可能是炎性反应中外周血 PL A2活性及脂类介质的主要来源 ,L PS对肝脏中两类 PL A2 的诱导可能成为促进全身性过度炎性反应的启动因素     

蛋白酶抑制剂对内毒素致大鼠肾功能损害的保护作用

目的 探讨蛋白酶抑制剂对内毒素所致大鼠肾功能损伤的作用及其可能机制。方法 健康雄性Wistar大鼠32只，随机分为对照组（n=6），内毒素（LPS）组（n=10，静脉注射LPS5mg／kg），大剂量乌司他丁（UT）干预组（n=8，腹腔注射UT100kU／kg和LPS5mg／kg），小剂量UT干预组（n=8，腹腔注射UT50kU／kg和LPS5mg／kg）。给予LPS2h后用乌拉坦麻醉大鼠，测定动脉血气、血浆内皮素-1（ET-1）、乳酸、肌酐（Cr）水平；行肾组织病理学检查；穿刺膀胱取尿，测定N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）。结果 LPS组动脉血pH值、动脉血氧分压（PaO2）、动脉血二氧化碳分压（PaO2）、剩余碱（BE）均明显低于对照组（P均〈0．01）；两个UT干预组动脉血pH值、PaO2、PaCO2和BE均明显高于LPS组（P〈0．05或P〈0．01）。LPS组血浆ET-1水平明显高于对照组（P〈0．01），两个UT干预组均明显低于LPS组（P均〈0．01），两个UT干预组之间差异无显著性（P〉0．05）。LPS组乳酸水平明显高于对照组（P〈0．001）；两个UT干预组均明显低于LPS组（P均〈0．01）；两个UT干预组间比较差异无显著性（P〉0．05）。LPS组血浆Cr及尿NAG均较对照组明显升高（P均〈0．01）；两个UT干预组血浆Cr及尿NAG水平均较LPS组明显降低（P均〈0．01），两个UT干预组间比较差异均无显著性（P均〉0．05）。肾脏病理检查可见LPS组肾小球大致正常，而肾小管上皮细胞空泡变性，部分上皮细胞崩解、脱落，管腔扩张，两个UT干预组肾小管病理变化均较LPS组减轻，不同剂量组间形态差异无显著性。结论 蛋白酶抑制剂UT能够减轻LPS所致的大鼠肾脏损伤。     

创伤弧菌脓毒症大鼠肝细胞Fas mRNA表达的动态变化研究

目的探讨大鼠创伤弧菌(VV) 脓毒症时肝细胞Fas mRNA表达量的动态变化情况。 方法制作大鼠VV 脓毒症模型(VV 组), RT-PCR法测定染菌后各时间点大鼠肝细胞Fas mRNA表达量。结果VV模型组感染创伤弧菌后大鼠肝细胞Fas mRNA其表达量明显增加 (P﹤0.05)，染菌后2 h、6 h的表达量最高，9 h后开始降低，但在染菌16 h的表达量仍明显高于正常对照组(P﹤0.05)。结论VV脓毒症可致肝组织中Fas mRNA表达量增加，早期明显增高，并持续维持在高水平。     

Simultaneous expression of type I procollagen mRNA and albumin in cirrhotic human liver.

The gene expression of human type I procollagen was investigated in cirrhotic human liver by using in situ hybridization with nonradioactive DNA probes. Using in situ hybridization can provide direct evidence for the cell type capable for type I collagen synthesis in tissues. T-T dimerized DNA probes were used and DNAs hybridized in situ were detected immunohistochemically using specific antibodies against T-T dimer. The data demonstrated that type I collagen is synthesized in hepatocytes and stellate cells in pseudolobules and in fibroblasts in Glissons capsules in cirrhotic human livers. We indicated hepatocytes morphologically and functionally by using immunohistochemical localization of albumin, which was used as a marker of hepatocyte, since albumin is synthesized exclusively by hepatocytes.     

严重腹腔感染大鼠组织Toll样受体2/4基因表达及其调节机制

目的 :研究腹腔感染后主要脏器 Toll样受体 (TL R) 2 / 4 m RNA表达的变化规律及组织分布特点 ,并对其诱生机制进行初步探讨。方法 :采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CL P)造成严重脓毒症模型。动物分为正常对照组(10只 )、假手术组 (10只 )、CL P组 (6 0只 )及杀菌 /通透性增加蛋白 (BPI)治疗组 (2 0只 )。分别检测肝、肺、肾、小肠组织 TL R2 / 4 m RNA表达及血浆肿瘤坏死因子α(TNFα)和白介素 10 (IL 10 )水平。结果 :CL P后 2 h肝、肺、肾及小肠组织中 TL R2 / 4 m RNA表达开始增高 ,伤后 6～ 12 h各组织 TL R2 / 4 m RNA表达迅速达峰值。 TL R4 m RNA表达于伤后 2 4～ 4 8h开始下降 ,CL P后 72 h趋于伤前范围甚至阴性 ,而 TL R2 m RNA表达则持续增高至 72 h。早期给予 BPI治疗后 ,动物 12～ 2 4 h肝、肺、肾及小肠组织 TL R2 m RNA水平均显著降低(P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,同时 CL P后 12 h各组织 TL R4 m RNA表达亦不同程度下调 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。BPI治疗组伤后 12 h血浆 TNFα水平显著降低 (P<0 .0 5 ) ,恢复至伤前正常范围 ,但伤后 2 4 h血浆 IL 10水平显著升高 (P<0 .0 1)。结论 :严重腹腔感染可迅速上调体内多器官 TL R2 / 4的基因表达 ,诱导促炎细胞因子产生 ,TL Rs表达与内毒素的直接刺激作用密