手足口病不同标本类型病原检出率对比分析

目的对比分析手足口病患儿咽拭子和肛周拭子标本的病原检出率。方法采用实时荧光定量PCR技术对310例手足口病患儿的咽拭子和肛周拭子标本进行肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)、肠道通用型病毒检测。结果 310例患儿的咽拭子、肛周拭子标本中,肠道通用型病毒阳性率分别为73.87%、89.68%,EV71阳性率分别为14.52%、20.00%,Cox A16阳性率分别为6.45%、9.35%。两种类型标本中肠道病毒通用型、肠道病毒EV71型、柯萨奇病毒Cox A16型阳性检出率差异均有统计学意义(P<0.05)。结论手足口病患儿肛周拭子病原标本检出率高,提倡及时优先采集肛周拭子标本。     

实时荧光RT-PCR法在手足口病患儿病原检测中的应用

目的:了解核酸检测(RT-PCR)法在抚顺市手足口病患儿病原谱调查中的应用价值,为疾病防控提供依据。方法:在全市范围内收集2013年和2014年疑似手足口病患儿咽拭子、肛拭子标本,使用人肠道病毒通用引物、肠道病毒71型(EV71)引物和萨奇病毒A组16型(Cox A16)引物,采用实时荧光RT-PCR方法进行病原核酸检测。结果:2013年检测标本461份,其中EV71阳性16份,Cox A16阳性316份,其他肠道病毒阳性46份。2014年检测标本253份,其中EV71阳性112份,Cox A16阳性57份,其他肠道病毒阳性35份。两年标本肠道阳性率平均为81.51%,其中EV71型和Cox A16型占阳性标本总数的86.08%。结论:实时荧光RT-PCR方法因具有操作简便、快速和特异性高的优点,非常适合于手足口病患儿病毒核酸的快速分型。EV71型和Cox A16型肠道病毒是抚顺市近两年引起手足口病患儿感染的主要病原体。     

实时荧光PCR技术在手足口病原学检查中的应用

目的：采用实时荧光PCR法检测手足口病患儿病原体。方法：收集40例本市确诊手足口病患儿的肛拭子样本,进行肠道病毒筛选和柯萨奇病毒16型与肠道病毒71型鉴别与分析。结果：实时荧光PCR法检测40例患儿肛拭子标本使用通用型试剂盒检出22例阳性,其中9例为CVA-16感染,12例为EV71感染,发病3 d内采集标本检出阳性患儿占75%。结论：CVA-16和EV71肠道病毒是手足口病的主要病原体,手足口病病毒检出率与标本的采集时间相关性,实时荧光PCR技术对手足口病的病原诊断具有重要价值。     

双重实时荧光PCR在手足口病快速检测中的应用

目的 探讨双重实时荧光PCR 技术检测手足口病肠道病毒的应用效果.方法 用单一实时荧光PCR先检测标本中的肠道病毒通用病毒核酸,肠道病毒通用病毒核酸阳性再分别用双重实时荧光PCR及单一实时荧光PCR检测CoxA16型和EV71型特异性核酸,比较两种方法检测结果.结果 240份标本中肠道病毒通用型核酸阳性157份,双重实时荧光PCR法CoxA16阳性111份,EV71阳性1份,其他肠道病毒45份,单一实时荧光PCR法CoxA16阳性109份,EV71阳性1份,CoxA16+EV71阳性2份,其他肠道病毒45份.EV71和其他肠道病毒符合率为100%.结论 双重实时荧光PCR 检测技术可以准确检测手足口病肠道病毒,且特异性强、灵敏度高,又可以快速得到检测结果,是一种快速检测手足口病病毒的方法.     

湖北省2015年手足口病实验室确诊情况分析

目的分析湖北省2015年手足口病病原学特征,为手足口病科学防控提供依据。方法对手足口病临床诊断病例标本用实时荧光定量PCR法进行肠道病毒检测及EV 71、Cox A16特异性核酸检测。结果全年共检测粪便标本1 308份、咽拭子标本5 131份、疱疹液137份,粪便标本检测阳性率最高。2015年实验室确诊手足口病病例2 880例,其中EV 71、Cox A16和其他肠道病毒感染的构成比分别为21.0%、20.7%和58.3%。EV 71、Cox A16和其他肠道病毒均为男性病例多于女性.三者病例均以1~3岁组为主。4~6月为发病顶峰,Cox A16比EV 71和其他肠道病毒发病峰提前一个月。结论 2015年湖北省手足口病病原主要由其他肠道病毒引起,发病具有明显季节、人群特征。应做好重点人群、重点时段监测,同时进一步加强其他肠道病毒病原深入研究.     

2012-2018年西宁地区手足口病病原检测结果分析

目的分析2012-2018年西宁地区手足口病病原学特点,为手足口病防控提供科学依据。方法应用实时荧光RT-PCR法对2012-2018年西宁地区疑似手足口病病例咽拭子标本进行肠道病毒71型(enterovirus 71,EV 71)、柯萨奇病毒A组16型(coxsackie virus A16,Cox A16)和非EV 71/非Cox A16的其他肠道病毒(其他EV)进行核酸检测,并对结果进行分析。结果共检测标本2855份,检出核酸阳性标本2176份,病毒核酸阳性率为76.22%,其中EV 71、Cox A16和其他肠道病毒核酸阳性率分别为28.68%、25.09%和46.23%,以其他肠道病毒为主要型别。发病人群集中在1~5岁组,构成比为91.04%(1981/2176);男性病例阳性率稍高于女性(χ^2=8.647,P=0.004);全年均有发病,发病高峰在6~7月,具有明显的季节性。结论西宁地区各年手足口病病原谱有所不同,近几年其他肠道病毒所占比例逐渐增大,应加强对EV 71和Cox A16以外其他肠道病毒的监测,为更好地做好手足口病的防控工作提供病原学依据。     

泰安市2013年手足口病病原体检测结果分析

目的对2013年泰安市手足口病病例进行病原体检测和分析。方法对临床诊断为手足口病病例的粪便标本505份,用实时荧光定量PCR筛选出肠道病毒通用引物阳性的标本,再分别使用Cox A 16和EV71型的特异引物进行分类检测。结果标本总肠道病毒阳性率为95.05%（408/505）,Cox A 16阳性率为31.09%（157/505）,EV71阳性率为27.92%（141/505）,其他肠道病毒阳性率为36.24%（183/505）,Cox A 16的阳性率高于EV71。发病年龄多为1-6岁,男性多于女性。结论 2013年度泰安市的手足口病疫情以EV71和Cox A 16并发为主,采用分子生物学方法检测手足口病的病原体,对手足口病的监测及防控具有重要作用。     

2010~2013年濉溪县手足口病病原学及流行病学特征分析

目的了解本地区手足口病(HFMD)病原及流行病学特征,为HFMD防治提供科学依据。方法 251例临床诊断手足口病患者来自濉溪县医院2010年1月至2013年12月住院病例,采集咽拭子标本,应用实时荧光RT-PCR法检测标本中的人肠道病毒(HEV)、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)特异性核酸,分析手足口病的流行病学特征。结果251例HFMD患者标本,肠道病毒阳性率为28.69%(72/251),EV71阳性率为19.92%(50/251),Cox A16阳性率为6.77%(17/251),其他HEV阳性率为1.99%(5/251)。72例检测阳性病例中,EV71阳性病例50例占69.44%,Cox A16 17例占23.61%,CoxA16在年检测阳性率方面有统计学意义(P<0.05),EV71病毒在每年病原检测比例中都处于较高水平,为2010~2013年手足口病的优势病原。流行高峰主要是每年的3~6月份,发病年龄主要集中在1~3岁幼儿,肠道病毒检测阳性率在性别、年龄、流行季节方面比较无差异统计学意义(P>0.05)。结论 2010~2013年手足口病流行中,病原体主要为以EV71和Cox A16,其中EV71是优势病毒型,应加强1~3岁婴幼儿手足口病的预防和监测。     

2012年武汉地区手足口病肠道病毒分型与临床特征分析

目的:了解武汉地区手足口病肠道病毒分型和临床特征,为手足口病预防及治疗提供依据。方法:采集手足口病患者咽拭子标本,采用实时荧光定量法检测CA16、EV71和通用型肠道病毒,同时搜集手足口病患儿的临床资料,分析不同病毒型手足口病患儿临床特征。结果:2012年1-12月共收集手足口病咽拭子标本3 083例,其中EV71阳性765例,阳性率为24.81%;CA16病毒阳性559份,阳性率为18.13%;EV71和CA16双阳性61例,阳性率为1.99%;通用型肠道病毒阳性1 698例,阳性率55.07%。1-3岁是手足口病高发年龄段,各病毒型均表现为男性多于女性。3 083例手足口病患者,临床上均有手、足、口或臀部皮疹,大部分患者有发热,部分患者伴有神经系统症状。EV71感染者出现发热、神经系统症状及白细胞增多的比例高于CA16和通用型肠道病毒阳性者。通用型肠道病毒阳性患者出现肺部并发症比例多于EV71感染者。结论:武汉市2012年手足口病主要由EV71、CA16及通用型肠道病毒引起,且以通用型肠道病毒为主。了解不同病毒型手足口病临床特征,对于手足口病预防和治疗具有重要意义。     

寨卡病毒与寨卡病毒病

寨卡病毒为有包膜的RNA病毒,属于黄病毒科黄病毒属成员,主要通过埃及伊蚊叮咬传播,于1947年首次在乌干达寨卡森林的恒河猴中发现,此后主要在非洲、美洲、亚洲及太平洋地区散发流行.2015年起,寨卡病毒病疫情在中南美洲(主要是巴西)快速扩散,该病主要临床特征为发热、皮疹、关节痛或结膜炎,并与新生儿小头畸形、格林-巴利综合征有关.实验室检测方法包括PCR检测病毒RNA和检测血清中的中和抗体IgM.目前尚无特异性的抗病毒药物和疫苗.主要的预防措施是提高个人防护意识,防止蚊虫的叮咬.本文从流行病学、生物学、致病机制与检测方法等方面综述了寨卡病毒及其所致疾病的最新研究进展,为这种新发病原体的防控提供参考.     

登革病毒和基孔肯雅病毒检测技术进展

登革病毒(Dengue virus,DENV)和基孔肯雅病毒(Chikungunya fever,CHIKV)都是虫媒病毒,具有相同的传播媒介、流行区域和季节分布。这两种病毒还会造成几乎相同的临床表现,特别是在感染的初始阶段,两者无任何可以鉴别的临床特征。而这两种病毒感染的治疗和临床管理策略是截然不同的,因此早期准确诊断是必要的。正确的诊断对于疾病监测、疫情控制、疫苗研究和药物开发非常重要。目前的检测技术,目标是检测病毒,病毒成分(抗原或核酸),或宿主的免疫产生的抗体。本文主要描述登革病毒和基孔肯雅病毒检测技术的概况,以及两者诊断技术上的研究进展。     

细胞培养与PCR法检测生殖器疱疹病毒的对比研究

目的:比较不同方法检测生殖器疱疹病毒感染的效率。方法:采用病毒培养和PCR法检测疑为生殖器疱疹病毒感染者标本60例,并用PCR作病毒分型。结果:根据病史及临床表现确诊的生殖器疱疹患者标本60例中,病毒培养法阳性36例,阳性率60%(36/60);PCR检测单纯疱疹病毒(HSV)阳性45例,阳性率75%(45/60),和病毒培养相比,差异非常显著(χ2=26.76,P<0.01);PCR分型结果显示阳性标本均为单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)。水疱和脓疱标本的病毒培养和PCR检测阳性率均较高(80.0%~93.3%),糜烂、结痂、斑丘疹标本检测中PCR阳性率(20.0%~66.7%)高于病毒培养(0~33.3%)。结论:对疑为生殖器疱疹患者作病原学诊断,采集水疱、脓疱标本进行病毒分离或PCR检测较佳。     

Human immunodeficiency virus and hepatitis C virus co-infection

Hepatitis C virus (HCV) infection is a major cause of liver disease and hepatocellular carcinoma worldwide, as well as the leading cause of liver transplantations in the United States. As a result of similar modes of transmission, approximately 30% of HIV-infected individuals are co-infected with HCV. Among intravenous drug users, almost 90% of people infected with HIV are also infected with HCV. Because of treatment with highly active anti-retroviral therapy, HIV-infected individuals have improved survival and are no longer suffering from opportunistic infections and malignancy as in years past. As a result, co-infection with HCV has now become a frequent cause of morbidity and mortality in HIV-infected individuals. Furthermore, liver disease secondary to HCV infection is now the leading cause of hospital deaths in HIV-infected people in the US. HIV infection accelerates the course of HCV-related liver disease and viremia. It is less clear whether HCV infection affects the clinical course of HIV; however, HCV-related liver disease can limit many individuals from receiving anti-HIV therapy. HIV/ HCV co-infection is common, and serious. Physicians caring for HIV-infected patients worldwide must now address hepatitis C virus co-infection.     

A comparison of bluetongue virus and EHD virus: electronmicroscopy and serology

Bluetongue virus, BT(8), and the virus of epizootic hemorrhagic disease (EHD) of deer, NJ-55, were plaque purified and compared electronmicroscopically and serologically. The latter included a plaque reduction neutralization test, the agar gel precipitin test, and the complement fixation test. The viruses were indistinguishable morphologically, but antigenically different. A plaquing technique was described for EHD virus.     

汉滩病毒S基因-重组痘苗病毒的制备和表达鉴定

目的 :制备和鉴定汉滩病毒 (HTNV)S基因 重组痘苗病毒 ,为进一步建立肾综合征出血热 (HFRS)患者HTNV核衣壳蛋白特异性细胞毒T淋巴细胞 (CTL)的靶细胞奠定基础。　方法 :用野生型痘苗病毒和HTNVS基因 重组痘苗病毒分别感染Vero细胞 ,进行病毒扩增和滴度测定。用PCR和斑点杂交鉴定重组痘苗病毒基因组中的HTNVS基因 ,用间接免疫荧光和westernblot检测核衣壳蛋白的表达。　结果 :制备了含HTNVS基因的重组痘苗病毒 ,滴度为 4 .0 2× 10 7。该重组痘苗病毒基因组中存在HTNVS基因 ,它在Vero细胞中能有效地表达核衣壳蛋白。　结论 :制备了较高滴度、能有效表达HTNV核衣壳蛋白的重组痘苗病毒。     

加强对乙型肝炎和丙型肝炎病毒准种的研究

生物的变异是生物为了适应环境的不断变化，维持生存和种族繁衍的需要而采取的一种十分重要和必要的应对措施，也是生物进化的基础，这是生物界普遍存在的现象。     

狂犬病及其病毒

目的：分析狂犬病病毒的结构及狂犬病发病特点和危害性，提出预防对策。方法：狂犬病现况分析研究法。结果：狂犬病是由狂犬病毒所致，对人类危害极大。对带病毒犬咬伤者，除应急做伤口处理，还须在72h内注射抗狂犬病毒疫苗，接种越早，预防效果愈好。结论：人狂犬恙病迄今为止尚无特效疗法。但是，应用基因工程研制的无毒口服疫苗可望成为人畜共患狂犬病新的换代产品，使狂犬病早日消灭。     

Cross-reactivity between caprine arthritis-encephalitis virus and type 1 human immunodeficiency virus

BACKGROUND: Caprine arthritis encephalitis (CAE) is caused by the lentivirus caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV), a member of the Retroviridae family that also includes the human immunodeficiency virus (HIV). Serum of CAEV-infected goats cross-reacts with HIV-1 antigens in enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) tests. We attempted to identify the proteins responsible for this cross-reactivity. METHODS: Fifty selected human sera (30 positive, 10 negative, and 10 indeterminate to HIV-1 by Western blot) and 50 selected goat sera (33 positive and 17 negative to CAEV by ELISA) were evaluated. Human and goat sera were tested by Western blot against HIV-1 and CAEV antigens. RESULTS: Cross-reactivity between surface glycoproteins gp120 (HIV-1) and gp135 (CAEV) was specific. Positive reaction of human sera to CAEV gp135 was more intense than that of goat sera to HIV-1 gp120. Surface glycoprotein sequences of the two viruses were compared by Lasergene software (Dynex Technologies, Inc., Chantilly, VA, USA). Three homologous regions were identified: the first in the internal domain of gp120; the second in the beta3 loop, and still another-with the greatest homology-in a short sequence of the proximal region of the external domain of gp120 between loops beta4 and beta8. CONCLUSIONS: Surface glycoproteins of HIV-1 and CAEV share structural regions essential for viral adsorption and for induction of neutralizing antibodies. Thus, human contact with CAEV eventually could be a possible source of HIV-1 false positive reactions and must be considered in the interpretation of HIV serologic results.