雄激素依赖性和雄激素非依赖性前列腺癌差异膜抗原的筛选

目的:探讨雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌细胞差异表达膜蛋白的筛选方法。方法:提取雄激素依赖性前列腺癌(androgen dependent prostate cancer, ADPC) 细胞株LNCaP 和雄激素非依赖性前列腺癌(androgen independentprostate cancer, AIPC) 细胞株PC-3 膜蛋白作为抗原,采用免疫共沉淀方法,与ADPC 和AIPC 患者的血清各3 例交叉孵育,行Western 印迹检测,比较、识别杂交后差异表达蛋白条带,串联质谱分析鉴定,细胞免疫荧光和组织免疫组织化学方法验证。结果:共获得11 个差异表达的膜蛋白(Neural-Cadherin precursor,ER60 precursor, Claudin-4 等);细胞免疫荧光结果显示Claudin-4 在LNCaP 和PC-3 细胞存在明显差异,在ADPC 组织中阳性表达率(34.3%) 低于AIPC 组织中阳性表达率(72.4%, P<0.05)。结论:本研究所采用的方法筛选前列腺癌差异表达膜蛋白具有可行性;Claudin-4 可能在雄激素非依赖性前列腺癌的发生和发展中发挥重要的作用。     

活化的STAT3蛋白质抑制剂PIAS3在前列腺癌中的表达及意义

目的 比较活化的STAT3蛋白质抑制剂(PIAS3)在人雄激素依赖性前列腺癌(ADPC)和雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)中的表达情况,探讨其表达与前列腺癌发生雄激素非依赖的关系.方法 应用cDNA芯片技术筛选出AIPC中的上调基因PIAS3.分别用免疫组织化学、Western印迹及半定量RT-PCR技术检测PIAS3在ADPC和AIPC组织及细胞系中的差异表达.结果 (1)基因芯片结果显示PIAS3基因在ADPC和AIPC中表达有显著性差异,在AIPC中明显高表达.(2)半定量RT-PCR显示PIAS3mRNA在AIPC细胞中的表达水平高于ADPC细胞.(3)Western印迹结果显示:PIAS3蛋白质在AIPC细胞系中表达水平显著高于ADPC细胞系.(4)免疫组化检测结果显示PIAS3在前列腺癌中表达阳性,在AIPC中PIAS3阳性表达率明显高于ADPC,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PIAS3的表达水平和前列腺癌的雄激素依赖情况相关,在AIPC中表达水平显著高于ADPC.提示PIAS3基因对雄激素受体的调节发挥了重要作用,使前列腺癌细胞在无雄激素的条件下继续增殖,可能是雄激素非依赖发生的关键.     

类固醇受体辅活化子-1在雄激素非依赖性前列腺癌中表达的研究

目的:探讨类固醇受体辅活化子-1(SRC-1)在雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)的表达和临床意义.方法:采用免疫组化法检测15例AIPC、20例雄激素依赖性前列腺癌(At)pc)、20例前列腺增生(BPH)标本SRC-1的表达.结果:SRC-1在AIPC、ADPC、BPH表达的阳性率分别为(73.16±9.02)、(55.50±4.32)、(49.00±2.83),AIPC与ADPC、BPH之间SILC-1表达的阳性率有显著的差异(P<0.01).根据前列腺癌的不同分级,SKC-1在高、中、低分化肿瘤表达的阳性率分别为(57.00±8.25)、(66.67±9.93)、(75.67±6.02),组间的差异具有显著统计学意义(P<0.01).对肿瘤的不同分期,SKC-1表达的阳性率分别为(71.67±11.20)(D)、(69.33±5.20)(C)、(59.67±6.06)(B)、(52.17±5.27)(A),相邻分期之间SKC-1表达的阳性率差异不显著(P0.05).结论:前列腺癌复发可能与SKC-1表达升高有关.     

miR-221对于前列腺癌细胞系侵袭功能的机制研究

目的评价miR-221在前列腺癌细胞系中表达的变化对其神经内分泌样转化及其侵袭功能的影响。方法以Northern blot检测LNCaP,LNCaP-AI两种前列腺癌细胞系中7种microRNA的表达变化;细胞转染法检测在雄激素剥夺环境中LNCaP和LNCaP-AI细胞系中miR-221的作用;CCK-8法检测细胞在不同阶段的生长增殖水平;Transwell法检测转染细胞的侵袭能力;qRT-PCR和Western blot检测转染的细胞中神经元特异性烯醇化酶(NSE)及dishevelled-2(DVL2)表达的变化。结果与雄激素依赖性前列腺癌(ADPC)的细胞系LNCaP相比,miR-221在雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)的细胞系LNCaP-AI中明显高表达。通过转染使miR-221在LNCaP细胞系中高表达可促进细胞的NSE表达,加速其神经内分泌样分化。而在LNCaP-AI细胞系中下调miR-221水平则会升高靶基因DVL2的表达水平,并增强LNCaP-AI细胞的迁移和侵袭能力。结论该实验证实在AIPC和ADPC细胞系中miR-221存在表达差异。miR-221可促进前列腺癌细胞的神经内分泌样转化,这可能是导致前列腺癌雄激素非依赖转化的重要原因。MiR-221可通过作用DVL2调节晚期前列腺癌细胞的转移和侵袭。     

核受体辅阻遏子在雄激素非依赖性前列腺癌中的表达及临床意义

目的探讨核受体辅阻遏子（nuclear receptor corepressor,NCoR）在雄激素非依赖性前列腺癌（androgen independent prostate cancer,AIPC）的表达和临床意义。方法采用免疫组化两步法检测15例AIPC、20例雄激素依赖性前列腺癌（androgen dependent prostate cancer,ADPC）、20例前列腺增生（benign prostatic hyperplasia,BPH）标本雄激素受体（androgen receptor,AR）和NCoR的表达。结果NCoR在AIPC、ADPC、BPH表达的阳性率分别20％、80％、95％,AIPC与ADPC和BPH之间NCoR表达的阳性率有极显著的差异（P〈0．01）。NCoR在低分化、中分化、高分化前列腺癌（Pca）表达的阳性率分别为24％、73％、100％,组间差异具有显著性（P〈0．05）。对肿瘤的不同分期,NCoR表达的阳性率为22％（D）、66％（C）、100％（B）、100％（A）,D期与A、B、C期之间以及C期与A、B期之间NCoR表达的阳性率差异极显著（P〈0．01）。结论Pca产生雄激素非依赖特性可能与NCoR表达下降有关。     

雄激素受体和Wnt信号通路在前列腺癌中的作用

Wnt信号通路的异常激活在大部分肿瘤(如前列腺癌)的发生发展中具有十分重要的作用;前列腺癌的发生发展和雄激素非依赖性前列腺癌(androgen-independent prostate cancer, AIPC)的转化关键在于雄激素受体(androgen receptor, AR),AR信号通路是前列腺癌研究的主要目标.AR信号通路受许多信号通路的影响,本文主要对Wnt信号通路、AR及其相互作用在前列腺癌中的作用作一综述.     

雄激素受体在雄激素非依赖性前列腺癌中的作用

前列腺癌是常见的男性恶性肿瘤之一,绝大多数前列腺癌依赖雄激素的刺激,雄激素的作用通过雄激素受体(androgen receptor,AR)介导[1].晚期前列腺癌的治疗通常是通过手术或药物去势去除睾丸产生的雄激素,并使用AR拮抗剂(称为最大雄激素阻断疗法).雄激素去势治疗后复发的前列腺癌(被称为雄激素非依赖性前列腺癌)只有一小部分对再次激素治疗有反应,且这种反应通常很微弱,持续时间短.尽管如此,绝大多数雄激素非依赖性前列腺癌表达AR,AR呈现出转录活性且可能是肿瘤细胞生长所必需的[2].因此,尽管这些肿瘤在临床上表现为雄激素非依赖性,但是它们似乎保留了雄激素受体依赖性.现将对雄激素非依赖性前列腺癌中雄激素受体的作用及其机制进行综述.     

神经内分泌分化与前列腺癌关系的研究进展

随着越来越多的目光投向前列腺癌的神经内分泌分化,人们在认识前列腺癌的发生和进展方面取得了较大的进步。由于神经内分泌细胞缺乏雄激素受体并可能导致前列腺癌的雄激素非依赖性的发生,使之与肿瘤的进展密切相关。晚期前列腺癌激素治疗主要是通过抑制雄激素的产生并阻断其受体的功能,但这并不能减少神经内分泌分化的癌细胞。相反,这些癌细胞可能通过旁分泌网络刺激前列腺癌雄激素非依赖性分化的发生,使其更多地增殖,从而导致肿瘤的进展。现回顾神经内分泌细胞在前列腺癌中的作用,包括可能的分子机制及其与前列腺癌恶性演进的关系,同时展望前列腺癌在该领域治疗和研究。     

人前列腺不同生长发育期雄激素受体表达变化

目的检测雄激素受体(AR)在人前列腺不同生长发育时期表达的变化,探讨它们变化的病理意义。方法采用免疫组化两步法检测10例胎儿前列腺(EP)、10例正常前列腺(NP)、20例前列腺增生(BPH)、20例雄激素依赖性前列腺癌(ADPC)和15例激素非依赖性前列腺癌(AIPC)组织的AR表达。结果 EP细胞浆和细胞核均有AR表达,且间质细胞AR表达先于腺上皮AR表达。NP组织的AR表达主要集中在上皮细胞核,与EP相比,基底细胞和间质细胞AR表达明显减少,而BPH组织的腺上皮细胞和间质细胞均有AR的较强表达。AR在前列腺癌(Pca)的表达位于癌细胞核,AIPC的AR表达比ADPC明显增强。结论 AR表达的变化与人前列腺不同生长发育时期和前列腺癌的发生发展密切相关。     

雄激素非依赖性前列腺癌LNCaP-AI细胞亚系模型的建立

目的利用雄激素递减法建立雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)细胞亚系模型LNCaP-AI。方法利用活性炭/葡聚糖处理的血清模拟去雄激素环境培养LNCaP细胞,逐渐递减培养基中雄激素10 d,然后在无雄激素环境中继续培养6个月,培养出能够在无雄激素环境中生长的LNCaP-AI细胞亚系。采用MTT和ELISA法检测LNCaP-AI细胞在去雄激素环境下的增殖能力和前列腺特异性抗原(PSA)的水平。结果 LNCaP细胞在去雄激素环境培养初期生长缓慢,细胞形态呈神经内分泌样改变,经过6个月的连续无雄激素培养,细胞恢复以前的形态和生长。MTT检测表明LNCaP-AI细胞能够在去雄激素环境中生长,通过ELISA检测PSA的分泌提示LNCaP-AI细胞能够在去雄激素环境中恢复分泌PSA的功能。结论激素递减法成功的建立了AIPC细胞亚系模型LNCaP-AI,利用该模型能够模拟前列腺癌由雄激素依赖发展为雄激素非依赖的过程。