丹参和枸杞对中波紫外线损伤角质形成细胞的保护作用

目的:观察丹参和枸杞对中波紫外线(UVB)损伤角质形成细胞的保护作用及作用机制。方法:用丹参和枸杞对HaCaT细胞进行预处理24小时,采用20、40、60mJ/cm2剂量的UVB照射细胞,以MTT法检测细胞生存率,以酶联免疫吸附实验检测细胞上清液中TNF-α及IL-1β的分泌量。结果:角质形成细胞损伤程度与UVB照射剂量有关,丹参和枸杞均可提高UVB照射后角质形成细胞的生存率,丹参可抑制角质形成细胞释放TNF-α和IL-1β;枸杞只抑制TNF-α的释放,而对IL-1β无明显抑制作用。结论:UVB对角质形成细胞有损伤作用,且与剂量相关;丹参、枸杞可以通过降低UVB引起的炎症因子TNF-α和(或)IL-1β的分泌从而减轻紫外线辐射引起的皮肤损伤。     

蒿甲醚对紫外线照射后HaCaT细胞表达Fas和Bcl-2的影响

目的为探讨一定剂量不同波长紫外线照射HaCaT细胞后,不同浓度蒿甲醚对HaCaT细胞表达凋亡相关蛋白Fas和Bcl-2的影响.方法采用45.00 mJ/cm2剂量的UVB及4.00 J/cm2剂量的UVA照射培养的HaCaT细胞(永生化角质形成细胞),以羟氯喹及不同浓度的蒿甲醚进行干预处理,应用流式细胞仪检测紫外线辐照及羟氯喹和蒿甲醚处理后HaCaT细胞Fas和Bcl-2蛋白水平的变化.结果(1)与未照射组相比UVA、UVB照射均可使HaCaT细胞表达Fas增加;(2)与UV组相比UVA加羟氯喹,UVB、UVA加25μg/mL蒿甲醚组使HaCaT细胞表达Fas减少;(3)与未照射组相比UVA、UVB照射可使HaCaT细胞表达Bcl-2减少;(4)与UV组相比UVA加25μg/mL蒿甲醚组和UVB加100μg/mL蒿甲醚组可以使HaCaT细胞表达Bcl-2增加.结论小剂量(25μg/mL、50μg/mL)蒿甲醚与凋亡相关的Fas和Bcl-2的表达有关.     

光老化人角质形成细胞模型的构建

目的:探讨中波紫外线(UVB)辐射导致人角质形成细胞(HaCaT细胞)光老化的模型构建及机制研究.方法:体外培养HaCaT细胞分为空白组和实验组,模型组细胞用不同照射剂量的UVB照射,空白组细胞不予紫外线照射,采用CCK-8法检测细胞相对活力,筛选出最适合的照射剂量用于建立光老化模型;应用同样的方法体外培养HaCaT细...     

氯喹对内毒素血症小鼠的保护作用以及对细胞因子的影响

目的　探讨氯喹对内毒素血症小鼠的保护作用以及抑制内毒素引起的细胞因子释放情况。方法　清洁级昆明小鼠 40只 ,随机分为LPS、氯喹、氯喹 +LPS和对照组 ,每组动物 10只。LPS组 ,给予 10mg kg的LPS ;氯喹组 ,给予 2 0mg kg的氯喹 ;LPS +氯喹组在给予 2 0mg kg氯喹后 ,立即给予 10mg kg的LPS ;对照组给予注射用水 ,注射体积为 2 0 0 μl 2 0g。观察尾静脉给药后 7h内小鼠的死亡率。体外培养小鼠ANA 1细胞 ,观察培养体系中预先加入氯喹 3h后 ,不同浓度的LPS引起的TNF α、IL 6的释放情况。结果　氯喹可降低内毒素引起的小鼠死亡 ,死亡率由 10 0 %降低为 5 0 % (P <0 0 5 ) ;培养体系中预先加入氯喹后LPS引起的TNF α、IL 6的释放显著降低 ,尤其以IL 6的下降最明显 ,在LPS(4 0 μg ml)刺激组IL 6降幅可达 68倍之多。结论　氯喹对内毒素血症小鼠具有显著保护作用 ,可明显抑制内毒素引起的细胞因子释放 ,提示氯喹可能是治疗内毒素血症的有效药物     

窄谱中波紫外线调控干扰素 诱导角质形成细胞胸腺活化调节趋化因子分泌机制的研究

目的 探讨窄谱中波紫外线（UVB）照射HaCaT细胞对胸腺活化调节趋化因子(thymus- and activation-regulated chemokine, TARC)的影响,并探讨其内在机制。方法 HaCaT细胞被分为窄谱UVB照射实验组和未经窄谱UVB照射的对照组。窄谱UVB照射剂量为10mJ/cm2。采用酶联免疫吸附实验技术检测了窄谱UVB照射对干扰素 诱导HaCaT细胞TARC蛋白的合成分泌的影响;采用 Northern杂交技术检测了窄谱UVB照射对HaCaT细胞TARC mRNA的表达的调控;结果 窄谱UVB照射可下调干扰素- 诱导角质形成细胞TARC蛋白的合成分泌,实验组TARC蛋白浓度为（194.5 27.8）pg/mL,对照组为（293.5 23.4 ）pg/mL,照射后24h TARC蛋白的分泌被抑制了大约33.78%。Northern杂交检测发现TARC mRNA的表达被抑制了31%。结论 窄谱UVB照射下调干扰素 诱生的TARC的蛋白合成分泌和mRNA的表达,提示TARC被下调可能与窄谱UVB所致的免疫抑制相关。 [关键词] 角质形成细胞;紫外线;胸腺活化调节趋化因子1     

黄芩等中药提取物对紫外线诱导的角质形成细胞HSP27、HSP70及IL-10表达的影响

目的：研究黄芩、红景天、甘草及党参提取物对紫外线损伤角质形成细胞HSP27、HSP70及IL—10表达的影响。方法：在永生化人角质形成细胞株（HaCaT细胞）培养体系中分组加入5％及10％黄芩、红景天、甘草及党参,并于预先UVB辐射前加入相关药物进行干预处理。ELISA法检测IL-10。FQ—RT—PCR法检测各组细胞HSP27、HSP70基因mRNA表达。结果：UVB照射未加药组HaCaT细胞后细胞表达IL-10的水平明显高于正常对照组,加药组UVB照射HaCaT细胞分泌IL-10的水平明显低于未加药组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。UVB照射未加药组HaCaT细胞后细胞表达HSP27、HSP70的水平有所增加,而加药组UVB照射HaCaT细胞后细胞表达HSP27、HSP70的水平明显增加,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：黄芩、红景天及甘草对细胞分泌IL-10水平降低,HSP27、HSP70在基因表达水平升高。提示上述中药可能通过改变IL-10、HSP27、HSP70的途径发挥对细胞的保护作用,具有研究开发成为紫外线防护药物价值。     

人参皂苷Rb1与红景天苷对抗皮肤光老化作用的研究

目的:观察人参皂苷Rb1与红景天苷对中波紫外线(ultraviolet B,UVB)辐照后人角质形成细胞光产物水平的影响及人参皂苷Rb1和红景天苷光保护作用机制。方法:使用含10%小牛血清的RMPI-1640培养液培养人角质形成细胞HaCaT,定量(60 J.cm-2)UVB照射细胞,MTT法检测细胞增殖活性;培养液中加入人参皂苷Rb1和红景天苷,测定UVB照射细胞后细胞中超氧化物岐化酶(SOD)、谷光甘肽(GSH)、氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量的变化。结果:在暴露于UVB后,经人参皂苷Rb1和红景天苷处理,细胞内抗氧化酶SOD、GSH、CAT的活性提高,MDA的产生减少,与未用药组比较差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:人参皂苷Rb1和红景天苷具有增加人角质形成细胞内抗氧化酶活性、抑制脂质过氧化反应及抗氧化作用,可以用于对抗皮肤光老化。     

γ射线照射对添加剂红细胞保存过程中细胞因子含量的影响

目的 :研究γ射线照射对添加剂红细胞保存过程中细胞因子含量的影响 .方法 :6例健康无偿献血者全血离心制备添加剂红细胞 ,以剂量为 2 5Gy的γ射线照射后 4℃保存5wk ,分别于 1,3,5wk取样用ELISA法测定IL 1β,IL 6 ,IL 8和TNF α的含量 (ng·L-1) ,并设自身对照 .结果 :对照组和照射组的细胞因子含量均随保存时间延长而显著增加 ,对照组中IL 1β含量在保存后由保存前的 0 .4 7± 0 .0 7增加至18.85± 0 .79,IL 6含量在保存后由保存前的 0 .0 7± 0 .0 2增加至 0 .5 6± 0 .0 4 ,IL 8含量在保存后由保存前的 16 .4 6±0 .4 2增加至 2 90 .0 7± 2 .4 4 ,TNF α含量在保存后由保存前的0 .18± 0 .0 1增加至 4 .4 3± 0 .33,照射组中IL 1β含量在保存后由保存前的 0 .4 5± 0 .0 6增加至 0 .6 9± 0 .0 4 ,IL 6含量在保存后由保存前的 0 .0 6± 0 .0 1增加至 0 .31± 0 .0 3,IL 8含量在保存后由保存前的 16 .4 0± 0 .5 4增加至 2 3.4 5± 1.85 ,TNF α含量在保存后由保存前的 0 .17± 0 .0 1增加至 1.2 5±0 .0 7,但对照组中细胞因子含量增加更为明显 ;而在同一保存时间对照组中细胞因子含量高于照射组 .结论 :γ射线照射添加剂红细胞可抑制保存过程中细胞因子含量的增加 ,可预防非溶血性发热输血反应与相     

竹叶总黄酮对UVB诱导HaCaT细胞氧化损伤的保护作用

目的?研究了竹叶总黄酮对紫外线B(UVB)诱发HaCaT角质细胞氧化损伤的保护效果和机制。方法?HaCaT细胞经竹叶总黄酮预处理24?h后,以辐射剂量为20?mJ/cm2的UVB照射细胞2?h后,MTT法测定细胞生存率。同时测定细胞内活性氧(ROS)水准,脂质过氧化程度,抗氧化酶(超氧化物歧化酶,SOD;过氧化氢酶,CAT和过氧化物歧化酶,GSH-Px)并利用RT-PCR法分析其mRNA转录水准。ELISA法分析TNF-α和IL-6分泌量。结果?竹叶总黄酮可有效地抑制UVB导致的细胞氧化损伤并提高其细胞生存率。与对照组相比,竹叶总黄酮还能有效降低受损细胞内ROS水准,脂质过氧化程度,并提高SOD、CAT和GSH-Px等3种内源性抗氧化酶的活性及其它们的mRNA转录水平。此外,竹叶总黄酮还能抑制UVB所造成受损细胞分泌TNF-α和IL-6炎性细胞因子的能力。结论?竹叶总黄酮可通过降低细胞内ROS水平,抑制细胞脂质过氧化,调节细胞内氧化酶的活性抑制UVB导致的HaCaT细胞氧化损伤。此外,竹叶总黄酮还可降低UVB所诱发的TNF-α和IL-6分泌。      

黄芪甲苷对长波紫外线损伤人真皮成纤维细胞的保护作用

目的观察长波紫外线（UVA）照射所致人真皮成纤维细胞损伤及黄芪甲苷预处理对细胞的保护作用。方法用20μg/ml黄芪甲苷预处理培养人成纤维细胞,2h后以5、10J/cm2剂量的UVA照射细胞并继续培养24h,使用四甲基偶氮唑蓝还原（MTT）法检测细胞活性,以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测IL-6和TNF-α的分泌量,比色法检测细胞上清液中的谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）含量的变化。结果黄芪甲苷对培养的成纤维细胞无明显毒性;UVA照射24h后,成纤维细胞出现增殖活性下降,IL-6和TNF-α分泌量增加,GSH-Px和CAT活力明显下降,黄芪甲苷处理则可抑制上述改变（均P〈0.05）。结论黄芪甲苷预处理可明显抑制UVA照射引起的成纤维细胞活性下降,其机制可能与其有效抑制炎性细胞因子分泌和增强细胞抗氧化能力有关。     

清热颗粒质量标准研究

目的评价自制清热颗粒制剂的质量,建立其标准的鉴定方法。方法采用薄层色谱法对自制清热颗粒的主药板蓝根、黄芩、栀子、枳壳、赤芍进行鉴别,发现问题及时采取措施进行修正;对其他指标按照2005年版《中华人民共和国药典》（一部）中药材标准亦进行了评定。结果通过修改提取方法、调整展开剂等,采用薄层色谱法能准确鉴别板蓝根、黄芩、栀子、枳壳、赤芍等主药;其他指标均符合国家标准,并且能建立相应的评定方法。结论自制清热颗粒制剂符合国家有关标准,并且能有简便易行、阴性亦无干扰的鉴别方法以及可行的评定方法。     

清热颗粒质量标准研究

目的评价自制清热颗粒制剂的质量,建立其标准的鉴定方法。方法采用薄层色谱法对自制清热颗粒的主药板蓝根、黄芩、栀子、枳壳、赤芍进行鉴别,发现问题及时采取措施进行修正;对其他指标按照2005年版《中华人民共和国药典》(一部)中药材标准亦进行了评定。结果通过修改提取方法、调整展开剂等,采用薄层色谱法能准确鉴别板蓝根、黄芩、栀子、枳壳、赤芍等主药;其他指标均符合国家标准,并且能建立相应的评定方法。结论自制清热颗粒制剂符合国家有关标准,并且能有简便易行、阴性亦无干扰的鉴别方法以及可行的评定方法。     

UVB对HaCaT细胞凋亡的影响

①目的　探讨紫外线B(UVB)对HaCaT细胞凋亡的影响及其作用机制。②方法　取培养的HaCaT细胞 ,用 30mJ/cm2 的UVB照射后继续培养 18h ,以流式细胞术检测细胞的凋亡率、线粒体膜电位和细胞内游离Ca2 +水平 ,用透射电镜观察细胞的超微结构。③结果　UVB照射增加了HaCaT细胞的凋亡率 (t =5 .2 36 ,P <0 .0 1) ,降低了线粒体膜电位 (t=6 .897,P <0 .0 1) ,升高了细胞内游离Ca2 + 水平 (t =6 .0 4 6 ,P <0 .0 1)。细胞的超微结构因UVB照射而遭到严重破坏 ,胞浆内的细胞器大量减少 ,线粒体严重空泡化 ,髓样小体形成 ,核内染色质成块并边聚。④结论　线粒体膜电位的下降和胞内游离Ca2 + 的升高可能参与了UVB诱发HaCaT细胞凋亡的过程     

姜黄素对中波紫外线照射HaCaT细胞凋亡的影响

目的研究姜黄素对中波紫外线（UVB）照射HaCaT细胞凋亡的影响。方法使用MTT法测定不同浓度姜黄素对UVB照射HaCaT细胞增殖的影响;流式细胞仪测定细胞凋亡率;分光光度法检测反映出细胞内caspase-3及cas-pase-9活性的改变。结果 UVB照射HaCaT细胞后细胞增殖较未接受UVB照射组明显下降（P〈0.05）,细胞凋亡率可增加5%以上;对姜黄素做预处理后,UVB照射可在一定程度上抑制HaCaT细胞增殖,尤其是当浓度在10.0μmol/L时,细胞凋亡明显,caspase-3及caspase-9的活性也明显增加。结论姜黄素能增强中波紫外线诱导HaCaT细胞的凋亡,这一过程可能是通过激活caspase-3及caspase-9而实现的。     

五味子甲素衍生物联苯双酯的紫外防护作用及机制研究

目的  探讨联苯双酯（DDB）对中波紫外线（UVB）的防护作用及其相关机制研究,为临床应用提供理论依据。方法  DDB和维生素C对照检测五味子甲素衍生物DDB对超氧阴离子（O2-）的清除率。MTT法测定DDB、UVB对人永生化角质形成细胞（HaCaT）、人真皮成纤维细胞（FB）生长的影响及DDB对UVB的防护作用。通过Giemsa染色,从形态学上观察DDB对UVB损伤的防护作用。激光共聚焦观察活性氧簇（ROS）及检测其荧光强度。结果  实验结果表明,相同浓度DDB具有强的清除O2-的能力;DDB对HaCaT、Fb细胞无毒性且可防护UVB损伤。Giemsa染色后,形态学上发现DDB可以明显抑制细胞的凋亡。DDB可抑制HaCaT细胞外ROS的生成。结论  五味子甲素衍生物DDB对UVB有明显的防护作用,DDB作用机制是通过其抗氧化活性抑制UVB辐射引起的氧化应激及细胞凋亡等,起到紫外线防护作用,有望开发成为有效的抗氧化剂和紫外防护产品。

     

柴胡的药性及功用考证

从历代本草记载及临床应用可见柴胡具有味苦、辛,性微寒,归肝、胆经等特点,能够解表退热、截疟、疏肝解郁、升举阳气,适用于肝郁气滞证、中气下陷证、少阳证、外感发热等,常与黄芩、黄芪、升麻、香附等药物配伍以增效。现代研究多认为柴胡具有解表退热,疏肝解郁,升举阳气等功效,适用于外感发热,病邪在少阳寒热往来,疟疾,肝郁所致胁痛、乳胀、月经不调,气虚下陷之脱肛、子宫脱垂、胃下垂等。     

Differential Responses to UVB Irradiation in Human Keratinocytes and Epidermoid Carcinoma Cells

ObjectiveTo examine UVB-induced responses in normal human keratinocytes (HaCaT) and epidermoid carcinoma cells (A431) at the cellular and molecular level, and investigated the protective effect of salidroside.MethodsCells irradiated by UVB at various dosage and their viability was assessed by MTT assays, cell cycle was analysed by flow cytometry. The expression of NF-κB, BCL-2, and CDK6 after 50 J/m² UVB irradiation were detected by RT-PCR and western blotting.ResultsOur results confirmed greater tolerance of A341 cells to UVB-induced damage such as cell viability and cell cycle arrest, which was accompanied by differential expression changes in NF-κB, BCL-2, and CDK6. UVB exposure resulted in HaCaT cells undergoing G₁-S phase arrest. When treated with salidroside, HaCaT survival was significantly enhanced following exposure to UVB, suggesting great therapeutic potential for this compound.ConclusionTaken together, our study suggests that A431 respond differently to UVB than normal HaCaT cells, and supports a role for NF-κB, CDK6, and BCL-2 in UVB-induced cell G₁-S phase arrest. Furthermore, salidroside can effectively protect HaCaT from UVB irradiation.