七氟醚预处理对大鼠肝缺血-再灌注后心肌损伤的影响

目的 探讨七氟醚预处理对大鼠肝缺血-再灌注后心肌损伤的影响及可能机制.方法 健康雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组(Sham组,n=10)、肝缺血一再灌注组(IR组,n=10)和七氟醚预处理组(S组,n=10)三组.建立大鼠肝缺血-再灌注模型,S组大鼠在阻断入肝血流前吸入2.5%七氟醚30 min,IR组和s组大鼠肝缺血45 min再灌注120 min.分别测定各组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、心肌型肌酸激酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶1(LDH1)浓度及心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)浓度,光镜观察心肌组织形态学.结果 与Sham组比较,S组和IR组血清ALT、AST、CK-MB、LDH1浓度均明显升高(P<0.05);心肌组织MDA、TNF-α和IL-6浓度明显升高(P<0.05),SOD活性明显降低(P<0.05).与IR组比较,S组血清ALT、AST、CK-MB、LDH1浓度明显降低(P<0.05);心肌组织MDA、TNF-α和IL-6浓度明显降低(P<0.05),SOD活性明显升高(P<0.05).Sham组心肌肌束及细胞形态正常,IR组和S组可见肌束断裂、细胞边界不清及炎症细胞浸润,S组改变较IR组轻微.结论 七氟醚预处理可减轻大鼠肝缺血-再灌注后心肌损伤,其作用机制可能与减少氧自由基的释放和抑制炎症反应有关.     

硫化氢对大鼠内毒素性急性肺损伤炎性细胞因子的影响

目的 观察硫化氢(H2S)对脂多糖(LPS)所致大鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)炎性细胞因子的影响,探讨其对肺脏的作用机制.方法 雄性SD 大鼠共48只,随机分为六组,每组8只:空白对照组、LPS 组、LPS+NaHS 低剂量组、LPS+NaHS 中剂量组、LPS+NaHS 高剂量组及LPS+PPG 组.所有大鼠均检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-10浓度的变化,取肺组织检测肺组织中IL-1β、IL-10、黏附分子-1(ICAM-1)mRNA基因表达变化及肺组织NF-κB p65活性变化.结果 与空白对照组比较,LPS组大鼠血清中IL-1β和IL-10浓度,肺组织中IL-1β、IL-10和ICAM-1 mRNA基因表达和NF-κB p65活性均明显升高(P<0.01).与LPS组比较,LPS+NaHS低、中、高剂量组血清中IL-1β浓度、肺组织中IL-1βmRNA基因表达和NF-κB p65活性均明显降低;LPS+NaHS中、高剂量组血清中IL-10浓度和IL-10 mRNA基因表达明显升高,ICAM-1 mRNA基因表达明显降低(P<0.05或P<0.01).与LPS组比较,LPS+PPG组血清中IL-1β浓度、肺组织中IL-1β和ICAM-1 mRNA基因表达及NF-κB p65活性均明显升高,血清中IL- 10浓度和肺组织中IL-10 mRNA基因表达明显降低(P<0.05或P<0.01).结论 H2S对内毒素诱导的ALI大鼠有保护性作用,其作用机制可能与H2S调节炎性细胞因子的生成有关.     

头孢哌酮钠联合左氧氟沙星对创伤弧菌脓毒症大鼠组织中NSE S-100β蛋白和炎症因子的影响

目的 观察创伤弧菌脓毒症大鼠血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100β蛋白和脑组织炎症因子的动态变化及头孢派酮钠联合左氧氟沙星的干预.方法 100只SD大鼠随机分正常对照组(A组,n=10)、创伤弧菌脓毒症组(B组,n=40)、抗菌药物干预组(C组,n=40)和抗菌药物对照组(D组,n=10)左后肢皮下注射创伤弧菌构建大鼠脓毒症模型,腹腔注射头孢派酮钠180 mg/kg和左氧氟沙星18 mg/kg干预.观察B、C组大鼠染菌后6、12、24、48 h血清NSE、S-100β,脑组织TNF-α、IL-6、IL-10转录和蛋白水平及光镜变化.结果 与A组比较,B组大鼠血清NSE、S-100β蛋白均明显升高(P<0.05),24 h达峰值.与相同时间点B组比较,C组血清NSE、S-100β 12、24、48 h均有明显减低(P<0.05).与A组比较,B组大鼠脑组织各时间点TNF-α、IL-6、IL-10转录和蛋白水平均明显升高(P<0.05),其中TNF-α在6 h即达峰值,而IL-6水平12 h达峰值,IL-10水平在48 h达峰值.与B组相同时间点比较,6、12、24 h点C组大鼠脑组织TNF-α水平明显降低,12、24、48 h点脑组织IL-6水平亦明显下调,而脑组织IL-10水平在各时间点均较B组明显升高(P<0.05).光镜下B组大鼠脑组织间质水肿严重,组织结构紊乱,炎症细胞侵润,血管扩张.C组大鼠脑组织间质水肿减轻,炎症细胞侵润程度降低.结论 NSE、S-100β蛋白的表达随着脑组织炎症的加重逐渐升高,敏感地反应创伤弧菌脓毒症脑损伤的变化.使用头孢哌酮和左氧氟沙星能有效抑制脑组织炎症反应,减轻脑损伤,减低血清NSE、S-100β蛋白的水平.     

参附注射液对食管癌根治术单肺通气后炎症反应的影响

目的:探讨参附注射液对食道癌根治术所致肺损伤的保护作用。方法:60例限期行食道癌根治术患者,随机分为参附注射液组(n=30)和对照组(n=30)。于麻醉诱导后参附注射液组按1 m L/kg静脉给予参附注射液,对照组给予等容量的生理盐水。于单肺通气开始时(T0)、单肺通气1 h(T1)、恢复双肺通气3 h时(T2)各监测时间点抽取动脉血5 m L,用酶联免疫吸附法(ELISA)法测定血浆中白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度。结果:两组患者T1、T2时点的血浆IL-6、IL-8和TNF-α的水平均较T0明显升高(P<0.05)。参附注射液组在T2时点的血浆IL-6、IL-8水平以及T1、T2时点的血浆TNF-α水平均明显低于对照组(P<0.05)。结论:参附注射液减轻了食道癌根治术单肺通气期间及其后血浆炎症因子IL-6、IL-8和TNF-α的水平,减轻了炎症反应。     

硫化氢对油酸诱导急性肺损伤大鼠细胞外基质的调节作用

目的 探讨外源性硫化氢(H2S)对油酸诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠细胞外基质(ECM)的调节作用.方法 雄性SD大鼠35只,随机分为对照组(n=5)、油酸组(n=15)、油酸+硫氢化钠(NaHS)组(n=15).油酸组大鼠尾静脉注射油酸0.1 mL/kg;油酸+NaHS组先腹腔注射NaHS 56 μmol/kg(溶于0.5 mL生理盐水中),30 min后再尾静脉注射油酸0.1 mL/kg.以上两组均分为2、4、6 h三个观察点,每个点5只.对照组大鼠尾静脉注射0.1 mL/kg生理盐水,观察6 h.在观察时间结束后,麻醉大鼠,行支气管肺泡灌洗,灌洗液(BALF)沉渣行瑞士染色进行中性粒细胞(PMN)分类计数;取右肺上叶,计算湿重/干重(W/D)值;用ELISA法检测血浆、肺组织匀浆基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平;用敏感硫电极法检测H2S水平.结果 与对照组比较,油酸组2、4、6 h PMN显著升高(P均<0.01);与油酸组比较,油酸+NaHS组各时间点PMN显著降低(P均<0.05).与对照组比较,油酸组2、4、6 h肺W/D值显著升高(P均<0.01);与油酸组比较,油酸+NaHS组4、6 h肺W/D值显著降低(P均<0.05).与对照组比较,油酸组2、4、6 h血浆、肺组织匀浆H2S水平显著降低(P均<0.01);与油酸组比较,油酸+NaHS组血浆、肺组织匀浆H2S水平4、6 h显著升高(P均<0.05).与对照组比较,油酸组2、4 h血浆、肺组织匀浆及6 h血浆MMP-9水平显著升高(P均<0.05);与油酸组比较,油酸+NaHS组4 h 血浆MMP-9水平显著降低(P<0.05),2、6 h血浆、肺组织匀浆及 4 h 肺组织匀浆MMP-9水平降低,但差异无统计学意义(P均>0.05).与对照组比较,油酸组4 h 血浆、肺组织匀浆及6 h肺组织匀浆TIMP-1水平显著降低(P均<0.05);与油酸组比较,油酸+NaHS组2、4、6 h血浆、肺组织匀浆TIMP-1水平升高,但差异无统计学意义(P均>0.05).结论 外源性H2S可能通过调节肺组织MMP-9和TIMP-1水平的变化,发挥对油酸诱导大鼠ALI 的细胞外基质的调节作用.     

骨髓间充质干细胞移植对光气吸入性肺损伤大鼠肺组织及血浆炎症因子的干预作用

目的:观察骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMD-MSCs)移植对光气吸入性肺损伤大鼠肺组织及血浆炎症因子的干预作用。方法:96只雄性SD大鼠随机分为:空气对照组(A组)、BMD-MSCs干预对照组(AM组)、光气染毒组(PH组)、光气染毒后BMD-MSCs干预组(PM组),每组8只。染毒组按8.33 mg/L动态恒量染毒5min。PM组染毒后即刻经尾静脉注射10~6 BMD-MSCs。4组分别于模型完成后6、24、48h处死大鼠,取肺组织行病理检查及肺湿/干比、血气分析,取血浆行Bio-Plex细胞因子检测。结果:PH组较A组TNF-α浓度明显升高(P0.05);PM组较PH组TNF-α浓度降低(P0.05)。PM组与PH组血浆IL-4浓度6h、24h均降低,以PM组下降更明显(P0.05);48h明显升高,以PM组升高更明显(P0.05)。PH组较A组IL-10浓度高(P0.05);PM组较PH组IL-10浓度高(P=0.013)。结论:经尾静脉注射BMD-MSCs后可以使大鼠血浆中抗炎因子IL-4和IL-10逐渐升高,促炎因子TNF-α逐渐下降,提示其对光气致急性肺损伤大鼠肺具有保护作用。     

大黄对急性肺损伤大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液中炎症细胞因子表达的影响

目的:探讨大黄对实验性急性肺损伤(ALI)大鼠炎症细胞因子在血浆和肺泡灌洗液中表达的影响.方法:用舌下静脉注射内毒素(LPS)的方法复制ALI模型,将145只雄性Wistar大鼠随机分成LPS组、对照组、大黄治疗组和地塞米松治疗组;分别测定大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-8含量.结果:与对照组相比,LPS组血浆和支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-8均明显升高(P均<0.05),而地塞米松治疗组和大黄治疗组则均明显下降(P<0.05或P<0.01).结论:LPS诱导的大鼠ALI表现为肺和全身炎症反应;大黄和地塞米松能减轻肺和全身炎症反应,其机制可能是通过抑制TNF-α、IL-1β和IL-8活性来实现的.     

中青年H型高血压患者同型半胱氨酸水平与炎症因子和瘦素的相关性分析

目的 探讨中青年H型高血压患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平与炎症因子和瘦素(Leptin)水平的相关性.方法 选取2017年7月至2019年6月来该院心内科住院诊断为H型高血压的中青年患者150例作为研究对象,其中男104例,女46例,平均年龄(51.21±5.71)岁.所有研究对象均在入院当天测量血压、身高和体质量等,并计算体质量指数(BMI),第2天清晨空腹抽取静脉血检测Hcy、空腹血糖(FBG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、Leptin水平.按照血浆Hcy水平将150例患者分为3组:Hcy<10μmol/L设为低Hcy组(42例),Hcy10～20μmol/L设为中Hcy组(54例),Hcy>20μmol/L设为高Hcy组(54例).比较3组患者各检测指标的差异,分析Hcy与Leptin、IL-6、TNF-α、IL-10、hs-CRP的相关性,并用Logistic回归分析Hcy水平升高的危险因素.结果 3组患者FBG、HDL-C、LDL-C、TC、收缩压、舒张压、TG、BMI水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);3组患者IL-6、hs-CRP、TNF-α、Leptin水平随Hcy水平的升高而明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);而IL-10则随Hcy水平的升高而明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).Hcy与Leptin、IL-6、TNF-α、hs-CRP均呈正相关,(r=0.714、0.691、0.683、0.675,P<0.05),与IL-10呈负相关(r=-0.643,P<0.05).Logistic回归分析显示,Leptin、IL-6、TNF-α、hs-CRP是中青年H型高血压患者Hcy水平升高的危险因素.结论 中青年H型高血压患者Hcy水平与炎症因子和Leptin水平密切相关.     

大承气汤对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺泡巨噬细胞NF-κB活性及其炎性细胞因子表达的影响

目的 研究大承气汤(Dachengqi Decoction,DD)对ARDS大鼠肺泡巨噬细胞NF-κB活性及其炎性细胞因子表达影响,探讨大承气汤抗炎作用的分子机制.方法雄性Wistar大鼠65只,随机分为对照组(n=12)、ARDS模型组(n=21)、大承气汤治疗组(n=16)、地塞米松治疗组(n=16).对照组用0,5mL生理盐水替代大肠杆菌脂多糖(LPS)尾静脉缓慢注射;模型组LPS按1 mg/kg·0.5mL)腹腔注射,16 h后按5 mg/(kg·0.5 mL)经气管缓慢滴入,6 h后动脉血气分析验证造模成功,连续观察3 d;大承气汤治疗组造模成功后DD按生药2.31 g/(kg·d)连续灌胃3 d;地塞米松治疗组造模成功后开始腹腔内注射地塞米松2mg/,kg,连续治疗3 d.各组72 h后行动脉血气分析、病理学检验和评分观察疗效;运用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELLSA)检测血浆和支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)和IL-10水平,评价全身和肺部促炎因子/抗炎因子平衡状态;BCA法测定PAN核蛋白浓度,蛋白免疫印迹法(western Blotting)检测肺泡巨噬细胞(pul-monary alveolar macrophage,PAM)核因子-κB(nucleus factor-κH;NF-κB)活性,评价叻对PAM炎性细胞因子转录活性影响.所有试验数据均用采用SPSS 13.0统计分析软件进行处理,计量指标以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用方差分析(LDS-t检验),以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 ①DD降低ARDS大鼠血浆TNF-α作用不显著[(510.97±76.20)pg/mL,(476.16±98.03)pg/mL,P>0.05],降低IL-1作用显著[(381.99±34.30)pg/mL,(300.69±50.99)pg/mL,P<0.05],但对IL-10水平无影响[(345.30±78.52)pg/mL,(345.916±67.72)pg/mL,P>0.05];DD显著降低ARDS大鼠BALF中TNF-α水平(130.94±33.51 pg/mL,(106.59±26.64)pg/mL,P<0.05)和IL-1水平[(82.5±25.36)pg/mL,(63.89±22.96)pg/mL,P<0.05],使IL-10水平显著升高[(77.09±26.05)pg/mL,(148.05±53.50)pg/mL,P<0.01].DD显著降低ARDS大鼠PAM核蛋白水平[(5.35±2.44)μg/μL(3.54± 2.01)μg/μL,P<0.05],对NF-κB活性(电泳条带光密度值×面积/参照物比值)具显著抑制作用[(1.45±0.71),(1.11±0.28),P<0.05].结论DD主要通过降低IL-1水平来调节ARDS大鼠全身促炎介质/抗炎介质平衡;对局部肺损伤的调节作用主要通过抑制前炎症介质(TNF-α)的生成,同时又显著降低IL-1水平和升高IL-10水平重新建立局部促炎因子/抗炎因子平衡.DD可以抑制ARDS大鼠PAM中NF-κB活性,从而抑制促炎介质(TNF-α,IL-1)的产生.DD这种多靶点双向调节作用在调节免疫平衡,保护靶器官免受过度损伤发挥积极作用.     

硫化氢在脓毒症大鼠肺损伤中的作用

目的 探讨硫化氢(H2S)在脓毒症大鼠肺损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为4组:对照组(Ⅰ组)15只,脓毒症组(Ⅱ组)15只,脓毒症+PAG(H2S代谢酶CSE抑制剂)组(Ⅲ组)15只,脓毒症+NaHS(H2S供体)预处理组(Ⅳ组)15只.采用盲肠结扎穿孔法制作脓毒症大鼠模型,观察各组动物的行为学特征,测定肺组织H2S浓度、肺组织CSE mRNA的表达、肺组织湿干重比(W/D)、肺组织MPO水平、肺组织TNF-α和IL-1β的表达,观察肺组织形态学改变.结果 CLP模型组动物出现呼吸加快,与Ⅰ组比较,Ⅱ组动物肺组织H2S、W/D、TNF-α、IL-1β水平明显升高(P＜0.01),MPO活性明显增加(P＜0.01),肺组织CSE mRNA的表达明显升高(P＜0.01);与Ⅱ组比较,Ⅲ组动物呼吸频率接近,肺组织H2S、W/D、TNF-α、IL-1β水平明显降低(P＜0.01),MPO活性明显减弱(P＜0.01),肺组织CSE mRNA的表达明显降低(P＜0.01);与Ⅱ组比较,Ⅳ组动物呼吸频率明显加快,少数出现呼吸衰竭,肺组织W/D、TNF-α、IL-1β水平明显升高(P＜0.01),MPO活性明显增强(P＜0.01),肺组织CSE mRNA的表达有所降低,但差异无统计学意义(P＞0.05);四组肺组织光镜下损伤由轻到重依次为:Ⅰ、Ⅲ、Ⅱ、Ⅳ.结论 给予内源性H2S抑制剂可以使脓毒症大鼠肺组织W/D、TNF-α、IL-1β、MPO水平明显降低,减轻肺组织炎症及水肿损伤,给予外源性H2S可以加重肺炎症损伤.     

胸部爆震伤致兔急性呼吸窘迫综合征模型的建立及相关因素分析

目的 构建室内胸部爆震伤致兔急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型并分析其发生机制及早期死亡原因,为研究肺爆震伤早期预警体系和治疗方法提供依据.方法 按照不同炸药量和致伤距离所产生的压强,将60只新西兰大白兔按随机数字表法分为5个致伤组和1个无致伤对照组.伤后观察存活率和组织病理学,并监测病理生理学指标、肺含水量.结果 冲击波压强低于1 210.5 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa,A、B组)时,肺损伤较轻,表现为点状肺挫伤,肺简明损伤评定分级法(ALS)均在2级内,动物伤后24 h内全部恢复,长期存活无并发症.冲击波压强高于2 036.1 mm Hg(D、E组)时,肺损伤过重,表现为广泛的肺挫伤、肺门撕裂伤和肺内大血肿,AIS均大于5级,动物于伤后1 h内全部死亡.冲击波压强为1 917.3 mm Hg(C组)时,肺表现为广泛而恒定的挫伤,累及4个肺叶以上,AIS 4～5级,伤后6 h内出现动脉氧分压下降;肺组织可见肺泡壁水肿,部分肺泡壁断裂,肺泡融合;肺泡内充满大量炎性细胞,偶见透明膜形成.与对照组比较,C组兔致伤6 h肺湿/干重比值即显著升高(6.46±0.24比3.98±0.19,P＜0.01),血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)即明显升高[血浆TNF-α(ng/L):328.89±6.26比62.12±2.98,BALF TNF-α(ng/L):164.87±4.59比29.51±1.12;血浆IL-6(ng/L):128.51±4.13比19.32±1.53,BALF IL-6(ng/L):94.97±1.14比22.72±0.19,均P＜0.05].结论 在1 917.3 mm Hg爆炸压强的密闭环境下,冲击伤可诱导兔发生ARDS;TNF-α及IL-6参与爆震伤致ARDS的形成与发展;特定环境下,肺脏破裂致气胸为早期死亡原因,而冲击波致循环系统功能紊乱也是引起早期死亡的重要原因.

Abstract：

Objective To reproduce acute respiratory distress syndrome (ARDS) model in rabbit induced by chest blast injury and to analyze the pathogenesis and causes of early death in order to provide the basis for the early diagnosis of lung blast injury and its early-warning system to facilitate an early treatment.Methods Sixty healthy New Zealand white rabbits were divided into six groups according to the different explosion distance with the random number table method. The survival rate and its resulting pathological changes were observed and patho-physiological indexes and lung fluid content were determined at sequential time points post-explosion. Results Shock wave pressure less than 1 210. 5 mm Hg (1 mm Hg=0. 133 kPa,group A, B) resulted in limited injury to the lung within grade-2 as assessed with the abbreviated injury scale (AIS). The rabbits in these groups recovered soon and survived without any complication. Shock pressure higher than 2 036. 1 mm Hg (group D, E) caused severe injuries to the lung, including deep laceration, disruption of lung hilus and large hematoma in the lung, and the injury severity of lungs was assessed above grade-5 as assessed with AIS. All rabbits died within 1 hour post-explosion. The groups described above failed to meet the demand of an ARDS model for the present study. Shock wave pressure at 1 917. 3 mm Hg (group C) produced extensive contusion from grade-4 to grade-5 as assessed with AIS. The rabbits survived in poor general condition, and arterial partial pressure of oxygen (PaO2) lowered within 6 hours. Pathological examination showed extensive and constant multi-focal bleeding involving more than four lobes. The alveolar wall was edematous, with partial rupture and alveolar fusion in lung tissues was observed in the group C. Alveoli were filled with inflammatory cells, and hyaline membrane was formed occasionally. Compared with control group, the wet to dry weight ratio (W/D) in lungs increased obviously (6.46±0. 24 vs. 3. 98±0. 19, P＜ 0. 01) in group C within 6 hours postinjury. The contents of tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) in plasma and bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were also increased distinctly compared with the control group [TNF-α (ng/L) in plasma: 328. 89± 6.26 vs.62.12±2. 98, TNF-α (ng/L) in BALF: 164.87±4.59 vs. 29. 51±1.12; IL-6 (ng/L) in plasma: 128. 51±4.13 vs. 19.32±1.53: IL-6 (ng/L) in BALF: 94.97±1.14 vs. 22.72±0. 19, all P＜0. 05]. Conclusion In an airtight environment, rabbit ARDS model can be reproduced successfully by blast injury with 1 917.3 mm Hg explosion pressure; TNF-α and IL-6 are involved in the pathogenesis and development of ARDS in blast injury. Pneumothorax as a result of lung rupture is the chief reason for early death and dysfunction of circulatory system is also an important reason in producing early death.     

骨髓间充质干细胞对烟雾吸入性损伤兔早期炎症因子分泌的影响

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对烟雾吸入性损伤早期外周血及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β、IL-6、IL-10)分泌的影响.方法 全骨髓培养法体外培养兔MSCs,用流式细胞术鉴定.将56只健康新西兰大耳白兔按随机数字表法分为正常对照组(C组,n=8)、烟雾吸入性损伤组(S组,n=24)、烟雾吸入性损伤+MSCs移植组(M组,n=24),后两组再分为伤后2、4、6 h亚组,每组8只.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆及肺组织匀浆液中促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6及抗炎因子IL-10的含量.结果 与C组比较,S组各时间点血浆促炎、抗炎因子均显著升高;各时间点肺组织促炎因子显著升高,抗炎因子无明显变化.与S组比较,M组各时间点血浆促炎因子显著下降,抗炎因子显著升高[6 h时TNF-α(μg/L):1.7±1.7比4.1±1.6,IL-1β(ng/L):9.9±1.7比21.2±2.6,IL-6(μg/L):1.0±0.3比1.3±0.2,IL-10(ng/L):15.2±4.4比7.9±3.5,均P＜0.05];各时间点肺组织促炎因子显著降低,而抗炎因子仅在4 h、6 h显著升高[6 h时TNF-α(ng/L):503.0±156.4比587.7±171.2,IL-1β(ng/L):0.4±0.2比0.6±0.2,IL-6(ng/L):155.2±13.7比350.2±20.3,IL-10(ng/L):23.3±5.4比11.0±5.6,均P＜0.05].结论 MSCs移植能降低烟雾吸入性损伤早期促炎因子水平,升高抗炎因子水平,改善全身炎症反应,对烟雾吸入性损伤肺组织具有一定的保护作用.

Abstract：

Objective To explore the effect of bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) engraftment on secretion of tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukins (IL-1β, IL-6, IL-10) in peripheral blood and lung homogenates in the early stages of smoke inhalation injury. Methods MSCs were proliferated by the method of whole marrow culture and identified by flow cytometry. Fifty-six healthy New Zealand rabbits were randomly divided into control group (C group, n=8), smoke inhalation injury group (S group, n=24)and smoke inhalation injury+MSCs engraftment group (M group, n=24). The latter two groups were subdivided into 2, 4, 6 hours after injury subgroups, with 8 rabbits in each group. The levels of TNF-α,IL-1β, IL-6 and IL-10 in peripheral blood and lung homogenates were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results Compared with C group, concent of pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines in peripheral blood at each time point in S group were increased significantly.The concent of pro-inflammatory cytokines in lung homogenate at each time point in S group was significantly higher than thoae in C group, and that of anti-inflammatory cytokines showed no significant changes.Compared with the S group, concent of pro-inflammatory cytokines in peripheral blood in M group was decreased significantly, and that of anti-inflammatory cytokines was increased significantly [6 hours TNF-α(μg/L):1.7±1.7 vs. 4.1±1.6, IL-1β (ng/L): 9.9±1.7 vs. 21.2±2.6, IL-6 (μg/L): 1.0±0.3 vs.1.3 ± 0. 2, IL-10 (ng/L): 15. 2 ± 4. 4 vs. 7. 9 ± 3.5, all P＜0.05]. Concent of pro-inflammatory cytokines at each time point in M group was decreased significantly when compared with S group in lung homogenate,while only anti-inflammatory cytokine at 4 hours and 6 hours was increased significantly [6 hours TNF-α (ng/L): 503. 0±156. 4 vs. 587.7±171.2, IL-1β (ng/L): 0.4±0.2 vs. 0.6±0.2, IL-6 (ng/L): 155.2±13.7 vs. 350.2±20.3, IL-10 (ng/L): 23.3±5.4 vs. 11.0±5.6, all P＜0.05]. Conclusion MSCs engraftment could decrease pro-inflammatory cytokines and increase anti-inflammatory cytokines in the early stages of smoke inhalation injury, thus amelioratea inflammatory reaponse, which confers protective effect on smoke inhalation injury.     

白细胞介素-6/糖蛋白130/转录激活因子3通路在百草枯诱导小鼠急性肺损伤中的作用机制

目的基于肺特异性白细胞介素-6(IL-6)敲除小鼠研究IL-6/糖蛋白130(gp130)/转录激活因子3(STAT3)通路在百草枯(PQ)诱导急性肺损伤(ALI)中的作用。方法野生型C57BL/6J小鼠分为IL-6野生型(IL-6 WT)组、IL-6 WT+PQ组,采用Sftpc(肺表面活性蛋白C基因)-Cre⁺小鼠与IL-6^FLOX/FLOX小鼠交配的方式得到肺特异性IL-6敲除小鼠并分为IL-6 KO组、IL-6 KO+PQ组,单次腹腔注射PQ诱导ALI,比较四组小鼠肺组织病理改变、肺泡动脉氧分压差(PA-aO₂)、肺组织湿/干质量比值(W/D)、IL-6/gp130/STAT3通路、核转录因子-κB(NF-κB) p65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)的差异。结果与IL-6 WT组比较,IL-6 WT+PQ组小鼠肺组织出现了典型的ALI病理改变,肺组织胞浆蛋白中IL-6、gp130、p-STAT3、TNF-α、IL-1β表达水平及胞核蛋白中NF-κB p65的表达水平、PA-aO₂、W/D明显增加(P <0.05);与IL-6 WT+PQ组比较,IL-6 KO+PQ组小鼠肺组织病理改变明显改善,肺组织胞浆蛋白中IL-6、gp130、p-STAT3、TNF-α、IL-1β的表达水平及胞核蛋白中NF-κB p65的表达水平、PA-aO₂、W/D明显降低(P <0.05)。结论 IL-6/gp130/STAT3通路激活与PQ诱导ALI有关。     

硫化氢对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注后TNF-α和IL-1β表达的影响

[目的]探讨硫氢化钠（NaHS）预处理对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注后肝功能变化的影响及对肝组织肿瘤坏死因子α（T N F-α）和白介素-1β（IL-1β）表达的影响。[方法]30只肝硬化大鼠随机分为3组（n＝10）,包括假手术组（Sham组）,肝脏缺血再灌注损伤组（HIRI组）和NaHS预处理组（NaHS组）。再灌注末取腔静脉血检测肝功能指标：谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）浓度。取部分肝组织酶联免疫吸附法（ELISA）检测 TNF-α和IL-1β表达情况。[结果]再灌注末,HIRI组、NaHS组 ALT、AST、TNF-α和IL-1β表达明显高于Sham组, NaHS组低于 HIRI组,且差异均有显著性（ P ＜0．05）。[结论]NaHS预处理能提高肝硬化大鼠抵抗肝脏缺血再灌注损伤的能力,其机制可能是通过抑制炎症反应实现。     

烟碱对心肌缺血/再灌注损伤大鼠炎症细胞因子的影响

目的 探讨烟碱对心肌缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠炎症细胞因子的影响.方法 50只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、I/R组、烟碱高剂量(400μg/kg)组、烟碱低剂量(40μg/kg)组及α-银环蛇毒素(α-BGT,1μg/kg)组5组,每组10只.采用结扎心脏左冠状动脉前降支30 min、再灌注90 min制作大鼠心肌I/R损伤模型;假手术组仅穿线不结扎.制模前30 min各药物组颈静脉注射相应剂量药物干预,假手术组和I/R组给予等量生理盐水.于再灌注末取右颈动脉血,测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、IL-10浓度和肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)活性;然后处死动物,取缺血区心肌组织测定髓过氧化物酶(MPO)活性;采用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应检测心肌组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白及mRNA表达,并观察心肌超微结构.结果 与假手术组比较,I/R组血浆TNF-α、IL-8、IL-10、CK-MB、cTnI、心肌MPO活性及ICAM-1蛋白和mRNA表达均显著升高[TNF-α(ng/L):158.7±32.7比31.5±5.8,IL-8(ng/L):0.71±0.06比0.30±0.04,IL-10(ng/L):69.0±7.8比41.4±4.3,CK-MB(U/L):2 540±169比1 120±102,cTnI(μg/L):26.2±4.6比0.9±0.2,MPO(U/g):4.2±0.6比1.6±0.4,ICAM-1蛋白:0.210±0.025比0.100±0.018,ICAM-1 mRNA:1.82±0.23比1.18±0.20,P＜0.05或P＜0.01],病理学显示心肌组织损伤较重.与I/R组比较,烟碱高剂量组血浆TNF-α、IL-8降低[TNF-α(67.3±9.8)ng/L,IL-8(0.47±0.04)ng/L],IL-10升高[(147.5±12.5)ng/L],CK-MB、cTnI及心肌MPO活性、ICAM-1蛋白和mRNA均降低[CK-MB(1 282±145)U/L,cTnI(4.7±1.4)μg/L,MPO(2.5±0.4)U/g,ICAM-1蛋白0.140±0.026,ICAM-1 mRNA 1.31±0.25,P＜0.05或P＜0.01],心肌组织损伤减轻;而烟碱低剂量组和α-BGT组上述指标与I/R组比较差异无统计学意义.结论 烟碱可阻断内皮细胞表达黏附分子,阻断中性粒细胞黏附、游出,改善抗炎/促炎反应平衡,从而拮抗大鼠心肌I/R损伤时的过度炎症反应.     

2型糖尿病合并下肢血管病变患者网膜素-1与炎性因子检测的意义

目的探讨网膜素-1(omentin-1)与炎性因子与2型糖尿病(T2DM)患者下肢血管病变(LVD)的相关性。方法将126例T2DM患者分为T2DM组(68例)与T2DM+LVD组(58例),选择健康体检者40例纳入对照组,比较各组体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、血压、空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血脂、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、omentin-1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和超敏C反应蛋白(hs-CRP),分析血浆omentin-1水平与其他指标的相关性,分析omentin-1的影响因素和T2DM患者发生LVD的影响因素。结果 T2DM组与T2DM+LVD组BMI、WHR、DBP、2FBG hPG、HbA1c、TC、TG、LDL-C、FINS、HOMA-IR、TNF-α、IL-6、hs-CRP均高于对照组,T2DM+LVD组病程长于T2DM组,对照组、T2DM组和T2DM+LVD组DBP、HbA1c、LDL-C、TNF-α、IL-6、hs-CRP呈升高趋势,omentin-1、ABI呈降低趋势,差异均有统计学意义(P0.05);omentin-1与ABI呈正相关(P0.05),与FPG、HbA1c、LDL-C、TNF-α、IL-6、hs-CRP均呈负相关(P0.05);TNF-α、ABI、HbA1c是血浆omentin-1水平的独立影响因素;omentin-1、TNF-α、IL-6和HbA1c是T2DM患者发生LVD的影响因素。结论 omentin-1可能参与了T2DM患者LVD的发生和发展,其血浆水平不仅受到糖脂代谢的影响,还可能受到炎性因子的影响。     

经中心静脉途径注入腺病毒转载的核转录因子-κB抑制因子基因治疗大鼠感染性急性肺损伤

目的 观察经中心静脉途径注入腺病毒转载的核转录因子-kB(NF-kB)抑制因子(IkB)基因对感染性急性肺损伤(ALI)的治疗作用。方法 按随机数字表法将30只SD大鼠分为假手术组、ALI模型组、IkB治疗组,每组10只。IkB治疗组经中心静脉注入滴度为1×109 pfu腺病毒转载的IkB基因1 ml,假手术组和模型组注人生理盐水1 ml;然后模型组和IκB治疗组经尾静脉注入脂多糖(LPS,5 mg/kg)1ml复制ALI模型,假手术组则注入生理盐水1 ml。观察7d后大鼠的动脉血气分析,肺湿/干重(W/D)比值,血浆肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量,肺组织NF-κBp65蛋白表达及光镜下肺组织病理改变,并计算肺损伤评分。结果 模型组死亡1只大鼠,其余大鼠均存活。3组间pH值、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)比较无明显差异;动脉血氧分压(PaO2)假手术组最高,模型组最低。模型组血浆TNF-α (μg/L)、IL-6(ng/L)含量明显高于假手术组(TNF-α：5.20±1.09比3.01±0.46;IL-6:540.28±100.78比214.45±61.37,均P＜0.05);IkB治疗组血浆TNF-α和IL-6含量明显低于模型组(TNF-α.3.70±0.96比5.20±1.09;IL-6:356.49±60.58比540.28±100.78,均P＜0.05),其中TNF-α含量已恢复至假手术组水平。肺W/D比值：假手术组最低(4.49±0.36),模型组最高(5.78±0.43),IκB治疗组居中(5.33±0.38);肺损伤评分（分）：假手术组最低（0.17±0.41）,模型组最高(2.29±0.76),IκB治疗组居中（1.57±0.53）;肺NF-κB免疫组化评分（分）：假手术组最低(1.00±0.89),模型组最高(9.43±1.13),IκB治疗组居中(4.00±1.15);上述指标3组间两两比较差异均有统计学意义(均P＜0.05)。结论 经中心静脉途径注入腺病毒转载的IκB基因,可降低ALI大鼠血中炎症因子TNF-α、II-6含量,抑制NF-κB活化,减少肺水含量和肺泡塌陷以及肺实变,从而减轻肺损伤。     

低分子肝素雾化吸入对急性肺损伤兔炎性因子的影响

目的探讨低分子肝素雾化吸入对急性肺损伤(ALI)的抗炎治疗作用。方法健康纯种白兔24只,随机分成3组(n=8):正常对照组,生理盐水雾化组和低分子肝素雾化治疗组。各组分别测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6)和白介素-1(IL-1)的浓度。结果与正常对照组相比,生理盐水雾化组血清炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1浓度显著升高(P0.05);而低分子肝素雾化治疗组血清中上述三种炎性因子浓度虽然仍比正常对照组高,但较生理盐水雾化组相比,血清TNF-α、IL-6和IL-1浓度显著下降(P0.05)。结论低分子肝素雾化吸入治疗急性肺损伤可以发挥抗炎作用,减轻炎症反应,具有一定的保护和治疗作用。     

血浆肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6和内皮素在高血压合并糖耐量异常患者中的变化及其意义

目的:观察原发性高血压(EH)合并糖耐量异常(IGT)患者血浆肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-alpha,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及内皮素(ET)水平的变化。方法:入选EH患者82例,其中合并IGT者42例,糖耐量正常(NGT)者40例;同时随机挑选血压正常健康人(NT)40例为NT组作为对照。采用ELISA法测定血浆中TNF-α、IL-6含量。结果:EH组血浆TNF-α、IL-6、ET明显高于NT组[TNF-α,EH组(27.80±4.73)ng/mL,NT组(23.83±2.28)ng/mL,P<0.05;IL-6,EH组(90.62±18.09)ng/mL,NT组(76.76±12.81)ng/mL,P<0.05;ET,EH组(39.46±10.77)ng/mL,NT组(30.92±4.0)ng/mL,P<0.01]。多因素logistic回归分析,EH合并IGT与TNF-α、IL-6、FPG、2hPG呈正相关(β为1.247、1.180、0.516、0.140,均P<0.05)。结论:EH合并IGT患者血浆TNF-α、IL-6、ET增高,提示EH合并IGT患者体内炎症反应进一步增加及ET水平进一步升高。