人脑胶质瘤中CD133的表达及其意义

目的 探讨CD133 mRNA在人脑胶质瘤组织中的表达及其与病理分级的相关性.方法 用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)对43例胶质瘤患者、16例正常脑组织标本(均为急性颅脑损伤患者行内减压术切除的脑组织)进行CD133 mRNA检测.结果 (1)43例胶质瘤组织中CD133 mRNA表达全部呈阳性,而16例正常脑组织标本中仅有1例CD133 mRNA表达呈弱阳性.病例组和正常对照组CD133 mRNA的阳性率分别为100%和6.25%.病例组和对照组CD133 mRNA表达阳性率差异有统计学意义(P＜0.01).(2)在病例组中,参照1993年WHO分级标准分为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级组,计算分组的标本CD133 mRNA与β-actin mRNA灰度比值.Ⅰ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差异有统计学意义(P＜0.01),Ⅲ、Ⅳ级之间CD133 mRNA表达均高于Ⅰ级;Ⅱ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差异有统计学意义(P＜0.01),Ⅲ、Ⅳ级之间CD133 mRNA表达均高于Ⅱ级.(3)相关性分析:CD133 mRNA表达量与胶质瘤病理分级呈正相关性(r=0.987,P＜0.001).结论 检测胶质瘤组织中CD133 mRNA的表达可用于胶质瘤患者的诊断及恶性程度和预后的判断.     

葡萄糖转运蛋白3、神经生长因子与胶质瘤

胶质瘤来源于神经上皮组织,是颅内最常见肿瘤,其发生率、复发率、致残致死率均较高。目前胶质瘤的临床疗效不理想,且其发生原因、恶化及促发因素仍不明确。GLUT3主要表达于脑内神经元细胞,是脑内最主要的葡萄糖转运蛋白;NGF主要来源于中枢神经系统,并对细胞的生长增殖、修复起作用。二者在胶质瘤中均有较高表达,为进一步了解GLUT3和NGF在脑胶质瘤的发生、发展中的作用,促进胶质瘤的临床诊断和治疗,本文对这方面的研究进展作一综述。     

颅脑损伤大鼠皮质HIF-1α和GLUT-3的表达及意义

目的探讨颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)大鼠皮质脑组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和葡萄糖转运蛋白-3(GLUT-3)的表达变化,并进行相关性研究。方法 108只SD大鼠随机分为正常对照组(n=12)和实验组(n=96)。实验组采用自由落体打击法建立大鼠颅脑损伤模型,正常对照组不做处理。分别采用RT-PCR及免疫组化检测伤后1、4、8、12 h及1、3、7、14 d挫伤灶周围HIF-1α和GLUT-3 m RNA及蛋白的表达。结果 RT-PCR结果显示:实验组HIF-1α和GLUT-3 m RNA在伤后4 h升高,12 h达高峰,7 d基本正常;伤后4 h~3 d与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。Western blot检测显示:实验组HIF-1α和GLUT-3蛋白在伤后4 h表达升高,1 d达高峰,7 d降至正常水平;伤后4 h~3 d与正常对照组差异均有统计学意义(P0.05)。相关性分析表明:HIF-1α与GLUT-3在m RNA及蛋白水平均呈正相关(r=0.894,P0.05;r=0.921,P0.05)。结论 TBI后脑组织HIF-1αm RNA及蛋白的表达上调,可能介导GLUT-3的表达增加,从而发挥神经保护作用。     

人脑胶质瘤中垂体瘤转化基因的表达及其意义

目的 探讨垂体瘤转化基因(PTTG)在胶质瘤的诊断及恶性程度和预后判断中的临床意义.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western-blot)对65例胶质瘤患者进行PTTG mRNA和PTTG蛋白检测.结果 (1)65例胶质瘤组织中PTTG蛋白和PTTG mRNA表达全部呈阳性.(2)计算分组的标本PTTG mRNA和与β-actin mRNA灰度比值:Ⅰ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差别有统计学意义(P<0.01),Ⅲ、Ⅳ级之间PTTG mRNA表达均高于Ⅰ级;Ⅱ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差别有统计学意义(P<0.01),Ⅲ、Ⅳ级之间PTTG mRNA表达均高于Ⅱ级.计算分组的标本PTTG蛋白和与β-actin吸光度比值:四组之间任意两两比较,差别均有统计学意义(P<0.01).(3)相关性分析:PTTG蛋白和PTTG mRNA表达水平与胶质瘤病理分级均呈正相关性(P<0.001).结论 (1)PTFG的mRNA和蛋白的表达与胶质瘤病理分级呈正相关.检测FTTG的mRNA和(或)蛋白的表达,可以作为胶质瘤诊断、判断预后的一个可靠指标.(2)检测PTTG的mRNA的表达,从分子病理方面将可以弥补传统病理的局限性,在脑肿瘤的诊断、治疗和预后评估中将发挥重大的作用.     

富亮氨酸胶质瘤失活基因在胶质瘤中的表达

目的 探讨胶质瘤组织富亮氨酸胶质瘤失活基因1(LGI1)mRNA的表达及与细胞增殖活性之间的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法对30例脑胶质瘤组织、2例脑膜瘤、2例瘤旁及2例颅脑损伤内减压脑组织标本进行半定量检测,同时采用S-P免疫组化法检测Ki-67标记指数.结果 脑胶质瘤组的LGI1 mRNA表达水平低于正常脑组织和脑膜瘤(P＜0.05).脑胶质瘤中,WHO Ⅳ级的胶质瘤LGll mRNA表达低于WHOⅡ级和Ⅲ级胶质瘤(P＜0.05),与Ki-67标记指数呈负相关关系(r=-0.621,P＜0.01).结论 LGI1基因的表达与Ki-67标记指数呈负相关,提示LGI1与胶质瘤的发生关系密切.     

葡萄糖转运蛋白-3及缺氧诱导因子1α在星形细胞瘤中的表达

目的 探讨葡萄糖转运蛋白-3(GLUT-3)和缺氧诱导因子(HIF)-1α在星形细胞瘤中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化染色和RT-PCR方法检测80例星形细胞瘤患者肿瘤组织中GLUT-3和HIF-1α表达情况,另取10例星形细胞瘤周围做内减压切除的正常脑组织为对照.结果 GLUT-3在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级星形细胞瘤中阳性表达率分别为35%、60%、80%、100%,HIF-1α在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级星形细胞瘤中阳性表达率分别为20%、50%、75%、95%,两者呈正相关关系(r=0.550,P=0.000).GLUT-3 mRNA表达在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级星形细胞瘤中分别为0.19±0.03、0.45±0.12、0.67±0.11、0.89±0.19,HIF-1α mRNA在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级星形细胞瘤中分别为0.21±0.06、0.48±0.11、0.72±0.16、0.93±0.12,各级别间比较差异均有统计学意义(P=0.000),且GLUT-3 mRNA、HIF-1αmRNA表达强度与星形细胞瘤的病理分级呈正相关关系(r=0.887,P=0.000;r=0.813,P=0.000),二者之间也呈正相关关系(r=0.530,P＜0.05).结论 GLUT-3与HIF-1α表达强度和星形细胞瘤的病理分级成正相关,可以作为判断星形细胞瘤生物学行为的重要指标.

Abstract：

Objective To explore the expressions and clinical significances of glucose transporter protein-3 (GLUT-3) and hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α) in astrocytoma. Methods The astrocytoma tissues from 80 patients with astrocytoma were chosen as experimental group; and the normal cerebral tissues from another 10 patients performed depression around the astrocytoma were chosen as control group. Immunohistochemistry and RT-PCR were employed to detect the GLUT-3 and HIF-1α expressions in these tissues. Results The protein of GLUT-3 in grade Ⅰ, grade Ⅱ, grade Ⅲ and grade Ⅳ astrocytomas were positively expressed, respectively, as 35%, 60%, 80% and 100% by immunohistochemistry; the protein of HIF-1α in grade Ⅰ, grade Ⅱ, grade Ⅲ and grade Ⅳ astrocytomas were positively expressed, respectively, as 20%, 50%, 75% and 95% by immunohistochemistry; positive correlation was noted between the protein levels of GLUT-3 and HIF-1α (r=0.550, P=0.000). The mRNA levels of GLUT-3 in grade Ⅰ, grade Ⅱ, grade Ⅲ and grade Ⅳ astrocytomas were expressed, respectively,as 0.19±0.03, 0.45±0.12, 0.67±0.11 and 0.89±0.19 by RT-PCR; the mRNA levels of HIF-1α were expressed, respectively, as 0.21 ±0.06, 0.48±0.11, 0.72±0.16 and 0.93±0.12 by RT-PCR; and the mRNA expression level of GLUT-3 were positively correlated to that of HIF-1α (r=0.530, P=0.000).Significant difference between each 2 different pathological grades of astrocytoma was noted (P＜0.05). The mRNA expression levels of GLUT-3 and HIF-1α were positively correlated to the pathological grades of astrocytomas (r=0.887, P=0.000; r=0.813, P=0.000). Conclusion The expression of GLUT-3 and HIF-1α in astrocytoma are significantly correlated to tumors' pathology grade, which can be taken as a useful marker for predicting the biological behavior.     

尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体在胶质瘤中的表达

目的 研究人脑胶质瘤组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA)及其受体（uPAR)的表达,探讨uPA、uPAR的表达与人脑胶质瘤恶性程度的关系。方法 采用半定量逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法,对49例人脑胶质瘤手术切除标本、U251等3株胶质瘤细胞,12例内减压术中切除的正常脑组织标本的uPA mRNA和uPAR mRNA表达水平进行检测。结果 随着胶质瘤恶性度的升高,其uPA及uPAR mRNA表达率和表达水平逐渐增高。U251等3株胶质瘤细胞也表达了较高水平的uPA及uPAR mRNA,而正常组织表达率及表达水平极低。结论 人脑胶质瘤中纤溶酶原激活系统活性较高,uPA、uPAR基因的高表达反映了胶质瘤的恶性生物学行为。     

脑缺氧缺血对GLUT1和GLUT3合成的影响

目的 探讨脑缺氧缺血(HI)对葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1，GLUT1)和葡萄糖转运蛋白3(glucose transporter 3，GLUT3)合成的影响。方法 在成功建立了缺氧缺血新生大鼠模型的基础上，应用免疫组化方法检测缺氧缺血新生大鼠脑内海马和皮质部位GLUT1和GLUT3的合成情况。结果 正常情况下，海马和皮质部位GLUT1和GLUT3的合成量随日龄增加而增高。海马部位的合成量高于皮质部位；缺氧缺血可引起GLUT1和GLUT3的合成增加，HI后24h时达到高峰，其后呈下降趋势，尤其是GLUT3在HI后7d降至极低水平。皮质部位的合成量高于海马部位。结论 HI可调控脑内GLUT1和GLUT3水平，使其在HI后短期内合成增高，以增加脑内葡萄糖的转运，适应无氧酵解增加的需要。     

RECK基因在脑胶质瘤细胞中的表达及其临床意义

目的探讨肿瘤抑制基因RECK作为胶质瘤预后指标的潜在价值，及相关金属蛋白酶MMP-9、MMP-2在胶质瘤中的变化与RECK的相互关系。方法应用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测58例胶质瘤及12例良性脑肿瘤组织，3例正常脑组织中RECK、MMP-9和MMP-2 mRNA的表达情况。结果RECK在58例胶质瘤中19例表达相对定量值〉0．50，39例表达相对定量值〈0．50；12例良性肿瘤及3例正常脑组织中表达相对定量值均〉0．50。RECK表达相对定量值〉0．50的肿瘤患者有较好的预后（P〈0．05）。RECK表达与MMP-2和MMP-9的表达在脑胶质瘤中无相关性。结论RECK在脑肿瘤组织中表达与患者生存时间之间有显著的相关性。RECK表达相对值〈0．50可以作为脑胶质瘤患者预后的准确标记物。     

BDNF在人脑胶质瘤的表达和意义

目的研究脑源性神经营养因子（BDNF）在人脑胶质瘤内的表达以及他们与胶质瘤病理分级的关系。方法用免疫组织化学亲合素-生物素过氧化物酶复合物法（ABC法）和Westernblot检测了5例正常人脑组织和80例胶质瘤样本中BDNF表达水平。结果免疫组化和Westernblot结果显示正常人脑和各级胶质瘤组织内均有BDNF表达,阳性反应物主要位于胞浆。BDNF在胶质瘤中的蛋白水平高于正常脑组织（P〈0．05）,且随胶质瘤病理级别的增加而逐渐增高（P〈0．05）。结论胶质瘤中BDNF表达随病理级别增高而增加,提示BDNF在胶质瘤的发生过程中起重要作用。     

葡萄糖转运蛋白1型在脑肿瘤中的表达及意义

目的探讨葡萄糖转运蛋白1型(Glucose transporter-1,GLUT1)在脑肿瘤中的表达及其意义。方法 收集55例颅脑手术标本,包括46例脑肿瘤患者和9例正常脑组织,采用单克隆抗体的GLUT1免疫组织化学SP法进行染色。结果 7例低度恶性胶质瘤中的3例和全部13例高度恶性胶质瘤不同程度的表达GLUT1;10例良性脑膜瘤中的3例和全部5例恶性脑膜瘤为阳性表达;6例垂体瘤中的3例和5例表皮样囊肿也异常表达;所有正常脑组织均未见表达。结论 四种脑肿瘤均可不同程度表达GLUT1,尤其在恶性肿瘤为明显,其与脑肿瘤的恶性程度相关。     

IDH1 R132H突变对不同级别胶质瘤的影响及相关因素分析

目的 检测人脑不同级别胶质瘤组织中IDH1 R132H突变及胶质瘤细胞系IDH1表达情况,探讨IDH1 R132H突变对不同级别胶质瘤的影响.方法 采用q-PCR法检测U87、U251、LN-229、HS683、U118等胶质瘤细胞系中IDH1表达情况,回顾性收集70例经手术切除、病理确诊的胶质瘤组织标本(实验组)及同...     

DLC1基因在人脑胶质瘤组织中的表达

目的 探讨抑癌基因DLC1在人脑胶质瘤组织中的表达和功能.方法 收集广州医学院第二附属医院神经外科自2007年1月至2009年6月手术切除的胶质瘤标本39例及同期行颅脑减压术治疗的颅脑损伤患者的正常脑组织10例,实时荧光定量PCR检测DLC1 mRNA的表达;将质粒pCS2-DLC1转染体外常规培养的人胶质瘤细胞株U251,同时用空载体pCS2-MT转染作为对照组,转染后36 h应用Western blot检测DLC1表达标签蛋白Mvc,应用MTT检测U251细胞增殖能力的变化.结果实时荧光定量PCR结果显示胶质瘤组织中DLC1 mRNA表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P=0.000),且Ⅰ级胶质瘤组织DLC1 mRNA的表达水平高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级,差异有统计学意义(平均秩次分别为44.20、30.23、32.25、31.0,H=18.818,P=0.001);Western blot检测结果显示DLC1标签蛋白Mvc在pCS2-DLCI转染组细胞呈过表达,在pCS2-MT转染组细胞无明显表达;MTT检测显示pCS2-DLC1转染组U251细胞吸光度值高于pCS2-MT转染组,差异有统计学意义(P=0.002).结论 高表达的DLC1可能促进胶质瘤的形成和发展.     

黑色素瘤抗原-1,-3基因在脑胶质瘤中的表达及意义

目的 探讨肿瘤特异性黑色素瘤抗原（MAGE）-1、-3基因作为胶质瘤的免疫检测和治疗、基因治疗分子标志物的可行性。方法 采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测52例胶质瘤、6例正常脑组织、5例脑脓肿、10例脑膜瘤组移标本中MAGE-1、MAGE-3mRNA的表达。结果 脑胶质瘤中MAGE-1、MAGE-3mRNA阳性表达率分别为64．5％、55．8％，MAGE-1及MAGE-3mRNA同时表达22例（42.3％）。正常脑组织、脑脓肿和脑膜瘤均不表达MAGE-1和MAGE-3mRNA。在胶质瘤组织中MAGE-1、MAGE-3mRNA的表达均与病理级别和病人生存时间有关（P＜0．05），而与性别、年龄、肿瘤部位及肿瘤直径无关（P＞0．05）MAGE-1的表达与MAGE-3的表达有关（P＜0．05）。结论 基于MAGE-1和MAGE-3在胶质瘤中的高表达率，可利用这两种蛋白作为靶分子进行免疫治疗，同时也可作为一种临床有用的随访指标。     

大鼠局灶性脑缺血半暗带葡萄糖转运子3 mRNA的表达

目的 研究大鼠局灶性脑缺血不同缺血时间皮质半暗带和中心区葡萄糖转运子3（GLUT3）转录水平的表达规律。方法 用插线法建立大鼠局灶性脑缺血模型，剥取缺血半暗带及中心区皮质组织，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR），测定GLUT3mRNA水平的变化。结果 缺血半暗带GLUT3mRNA在缺血3小时升高，24小时达到高峰，96小时后基本恢复正常。缺血中心区GLUT3mRNA在缺血后3小时有一短暂的升高，随后迅速下降呈低水平表达。结论 GLUT3在缺血半暗带的表达上调，有可能是机体对缺血损伤的保护性反应。     

磷脂酶C-γ1在胚胎及新生小鼠脑组织的表达及意义

目的研究磷脂酶C-γ1在胚胎及新生小鼠脑组织的表达。方法制备胚胎及新生小鼠脑组织标本,进行石蜡包埋并切片,采用免疫细胞化学方法检测磷脂酶C-γ1的表达情况,并进一步利用Western blot技术对磷脂酶C-γ1的表达进行初步定量。结果免疫组织化学的结果表明,在胚胎脑组织中磷脂酶C-γ1的表达比较广泛,各种细胞均有表达,没有细胞特异性；而在出生后5d的脑组织,磷脂酶C-γ1特异地表达于大脑皮质层及神经核团内的神经元,周围的神经胶质细胞不表达。Western blot的结果表明,在胚胎各个组织(脑、四肢、心、肾、胃、胰等)中脑的表达最高,脑内的表达又随胚胎发育过程胚胎第11天(E11)、E14、E18、出生后5d逐渐降低。结论磷脂酶C-γ1相关信号通路对于小鼠胚胎脑的发育具有重要生物学作用,可能对于脑神经元发育、生长、分化等具有重要作用。     

Cyclin D1/D2/D3在大鼠脑胶质瘤组织中的表达

目的 探讨cyclin D1/D2/D3在大鼠脑胶质瘤组织中的表达.方法 将体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞(细胞数为3×105个)借助动物立体定向仪接种于Wistar大鼠左侧尾状核区,解剖标本,行组织病理学检查及GFAP、cyclin D1/D2/D3免疫组化检测.结果 cyclinD1/D2/D3均呈阳性表达.cyclin D1/D3主要在细胞胞核表达,cyclin D2主要在胞浆表达,部分在胞核表达,不同存活期荷瘤鼠瘤组织中cyclin D1/D2/D3表达量不同.结论 cyclinD1/D2/D3过分表达参与调节大鼠脑胶质瘤增殖.荷瘤鼠生存期与cyclin D家族蛋白的表达呈负相关关系.     

胶质细胞瘤复发前后Cyclin D1和P16的表达

目的　探讨CyclinD1,P16在胶质瘤复发前后表达改变及其意义。方法　采用免疫组织化学LsABC法对 4 5例复发胶质瘤瘤组织、瘤旁脑组织和 10例正常脑组织CyclinD1,P16蛋白表达进行检测 ,统计分析CyclinD1,P16表达水平与胶质瘤分级、肿瘤复发的关系。结果　正常脑组织 ,瘤旁脑组织和胶质瘤组织CyclinD1表达依次升高 ,而P16的表达依次下降 ;肿瘤复发CyclinD1表达增强 ,P16的表达减弱。结论　CyclinD1与P16的表达与胶质瘤恶性进程和复发密切相关。     

Cyclin D1/D2/D3 在大鼠脑胶质瘤组织中的表达

目的探讨细胞周期素(cyclin)D1/D2/D3在大鼠脑胶质瘤动物模型肿瘤组织中的表达.方法将体外培养大鼠C6胶质瘤细胞(细胞数为3×105个),借助动物立体定向仪接种于Wistar大鼠左侧尾状核区,解剖标本,行组织病理学检查,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化定性监测.随后检测肿瘤组织中cyclin D1/D2/D3蛋白表达.结果 cyclinD1/D2/D3均呈阳性表达.cyclin D1/D3主要在细胞核表达;cyclinD2则主要在胞浆表达,部分细胞核呈阳性,不同存活期荷瘤鼠其瘤组织中cyclin D1/D2/D3表达量不同.结论 cyclinD1/D2/D3的过分表达,对大鼠脑胶质瘤细胞增殖的失控起着一定的调节作用.荷瘤鼠生存期与cyclin D族的表达量呈负相关关系.