降氮汤对5/6肾切除大鼠肾小球CTGF表达的影响

肾小球硬化是几乎所有肾脏疾病进展到终末期肾衰的共同通路 ,及早阻止甚或逆转肾小球硬化对防治终末期肾衰有重大意义。在肾小球硬化的发病机制中 ,细胞因子网络始终是人们研究的热点。通过中和或抑制某些细胞因子以阻止促炎症细胞因子网络已成为今后肾脏病治疗的重要方向。近年来的大量研究显示中药在这一领域有巨大潜力。结缔组织生长因子(CTGF)作为一种新发现的生长因子在转化生长因子β(TGFβ)的诱导下有促进肾小球硬化的作用 ,其作用日益受到重视。〔1〕 本研究旨在观察中药降氮汤对 5 6肾切除大鼠肾小球CTGF表达的影响 ,以探讨…     

补益脾肾方对阿霉素肾病大鼠肾间质转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨补益脾肾方对阿霉素肾病大鼠肾间质转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CT-GF)表达的影响。方法:将32只雄SD大鼠随机分为空白组、阿霉素肾病模型组、贝那普利治疗组、补益脾肾中药治疗组。采用一次性尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病模型,于造模后第2周对阿霉素肾病大鼠分别用贝那普利和中药治疗。于造模后第6周处死所有大鼠,切片做Masson染色观察肾小管及间质的病理变化;应用免疫组织化学方法检测肾组织中TGF-β1、CTGF的蛋白质表达。结果:补益脾肾法可以下调阿霉素肾病大鼠肾间质TGF-β1及CTGF的表达(P<0.05),延缓间质纤维化的进展。结论:中医补益脾肾方可以通过下调肾间质TGF-β1及CTGF的表达,延缓阿霉素肾病大鼠肾小管间质纤维化的进展。     

肾络通对大鼠系膜细胞外基质分泌及转化生长因子β1表达的影响

目的探讨肾络通药物血清对大鼠系膜细胞外基质不同成分的抑制作用及对转化生长因子β₁(TGFβ₁)表达的调节作用。方法以体外培养大鼠肾小球系膜细胞及血清药理学方法为基础,采用酶联免疫吸附试验检测细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的含量;采用逆转录多聚酶链反应(RTPCR)检测TGFβ₁mRNA的表达。结果细胞外基质FN,ColⅣ的含量与TGFβ₁mRNA的表达呈正相关关系,肾络通对二者均有抑制作用。结论肾络通能够减少细胞外基质的积聚,抑制TGF-β₁的分泌与表达,从而进一步明确了其防治多种肾小球疾病,延缓肾小球硬化的作用机制。     

尿毒康对慢肾衰阳虚大鼠肾组织TGFβ_1 CTGF表达的影响

目的:观察尿毒康对慢肾衰阳虚型模型大鼠肾组织TGFβ1、CTGF表达的影响。方法:40只SD雄性大鼠随机抽取10只作为正常对照组,对其余30只采用5/6肾切除改良法制作慢肾衰模型,待慢肾衰模型成功后,再随机分为慢肾衰阳虚模型组以及肾衰阳虚加中药组,对慢肾衰阳虚模型组给予口服丙基硫氧嘧啶,肾衰阳虚加中药组在此基础上加服尿毒康。8周后处死取肾脏进行免疫组织化学染色,检测TGFβ1、CTGF在肾组织中的表达。结果:与正常对照组比较,慢肾衰阳虚模型组TGFβ1、CTGF均较强表达(P<0.01);与慢肾衰阳虚模型组比较,肾衰阳虚加尿毒康组TGFβ1、CTGF的表达均明显较弱(P<0.05)。结论:尿毒康能减轻慢肾衰阳虚型大鼠肾纤维化,作用机制可能与降低TGFβ1、CTGF表达有关。     

生精胶囊对肾损害防护的机理研究

目的：观察生精胶囊对肾小球病肾病综合征大鼠转化生长因子β1（TGFβ1）、结缔组织生长因子（CTGF）、细胞外基质（ECM）的影响,探索中药制剂防护肾损害的可能机制。方法：将30只SD大鼠分为对照组、模型组、治疗组各10只。对照组不造模;模型组采用2次注射阿霉素（ADR）方法建立肾小球病肾病综合征的模型;治疗组造模同模型组,并于第1次注射ADR后每天1次中药制剂生精胶囊灌胃,各组均在4周后观察肾皮质部层黏连蛋白（LN）、纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ型胶原（ColⅣ）蛋白的表达;并检测肾皮质部TGFβ1 mRNA、CTGFmRNA的表达。结果：造模后模型组、治疗组LN、FN（治疗组除外）、c01Ⅳ蛋白表达半定量升高,与对照组比较,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）。治疗后治疗组LN、FN、ColⅣ蛋白表达半定量均有不同程度降低,与模型组比较,差异有显著性或非常显著性意义（P〈0．05,P〈0．01）。造模后模型组、治疗组TGFβ1 mRNA、CTGFmRNA表达量升高,与对照组比较,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）。治疗后治疗组TGFβ1 mR—NA、CTGFmRNA表达量有不同程度降低,与模型组比较,差异有显著性或非常显著性意义（P〈0．05,P〈0．01）。结论：中药制剂生精胶囊可通过下调细胞因子TGFβ1和CTGF的表达来降低ECM合成,减少ECM的积聚,从而拮抗细胞因子对肾脏的损害作用。     

甘草甜素对大鼠肾小球硬化早期的防护作用

目的探讨甘草甜素对大鼠肾小球硬化早期的保护作用。方法采用两次经尾iv阿霉素方法建立大鼠肾小球硬化模型。实验随机分为3组,模型组、甘草甜素治疗组和对照组。检测各组大鼠第4、6、8周各项指标的变化,包括24 h尿蛋白定量、血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、胆固醇(TC)和白蛋白(Alb)。各组取肾皮质进行光镜等组织病理学检测。应用免疫组织化学方法检测肾组织内转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白的表达。采用标准曲线法进行荧光定量PCR检测肾组织内TGF-β1、CTGF和金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)mRNA的表达。结果甘草甜素治疗组大鼠24 h尿蛋白定量、BUN、SCr、TC和Alb等指标与模型组相比较均有不同程度改善(P0.05)。肾小球硬化程度治疗组明显轻于模型组。治疗组与模型组比较肾组织内TGF-β1和CTGF蛋白表达均有不同程度降低,表达峰值下降(P0.05)。治疗组与模型组比较TGF-β1、CTGF和TIMP-1 mRNA表达均有不同程度降低,表达峰值下降(P0.05)。结论从蛋白和mRNA水平同时证实甘草甜素对TGF-β1、CTGF和TIMP-1的表达有明显的抑制作用,证实甘草甜素对大鼠肾小球硬化有早期保护作用。     

肾衰冲剂抑制残余肾转化生长因子－β1与组织金属蛋白酶抑制剂－1 mRNA的表达

目的：研究肾衰冲剂对大鼠残余肾转化生长因子－β1（TGF－β1），组织金属蛋白酶抑制剂－1（TIMP－1）mRNA过度表达的抑制作用。方法 ：制作大鼠5／6肾切除肾衰模型，分别予肾衰冲剂及党参，丹参，制大黄灌胃治疗1个月后取各组大鼠残余肾。用逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）法检测残余肾TGF－β1，和TIMP-1 mRNA的表达。结果：在鼠慢性肾衰模型组表现为TGF－β1，TIMP－1 mRNA的过度表达；经肾衰冲剂治疗后TGF－β1,TIMP-1 mRNA的表达降低（P＜0．01）。基组成单味药丹参，制大黄则有不同程度的作用，党参作用不明显。结论：肾衰冲剂减轻残余肾纤维化的病变与其抑制残余肾组织TGF－β1，TIMP－1 mRNA的过度表达有关。     

解毒复肾逐瘀方对肾纤维化大鼠CTGF及TGFβ_1表达的影响

目的：研究解毒复肾逐瘀方对肾纤维化的干预作用机制。方法：建立大鼠单侧输尿管结扎术（UUO）肾间质纤维化动物模型,观察给予解毒复肾逐瘀方治疗后肾间质病理变化及肾组织转化生长因子（TGFβ1）及结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。结果：解毒复肾逐瘀方能明显减少大鼠胶原沉积的面积含量。药物治疗组能抑制大鼠的TGFβ1及CTGF蛋白的表达。结论：解毒复肾逐瘀方能减轻肾间质纤维化的损伤,可能与抑制大鼠的TGFβ1及CTGF蛋白表达有关。     

溺毒清合剂对慢性肾衰竭大鼠纤维化指标的影响

目的:探讨溺毒清合剂延缓慢性肾衰的作用机理。方法:采用5/6肾切除造模方法复制大鼠慢性肾功能衰竭模型,实验分为假手术组、模型组、溺毒清低剂量组(简称溺低组)、溺毒清高剂量组(简称溺高组)、厄贝沙坦对照组(简称厄贝组)。对各组进行干预治疗,然后观察其肾功能变化。并对肾组织经行IV胶原、FN(纤维连接蛋白)、TGF-β(转化生长因子-β)等免疫组化检测,最后行肾组织病理检查。结果:溺毒清合剂可显著改善CRF大鼠肾功能,改善肾功能方面与厄贝沙坦相当。免疫组化显示溺毒清高剂量组比模型组IV胶原、FN、TGF-β表达减少。结论:溺毒清合剂可显著改善CRF大鼠的肾功能,通过降解Ⅳ型胶原等细胞外基质而抑制5/6肾切除大鼠残肾组织肾小球硬化,从而延缓慢性肾衰进展,与厄贝沙坦有相近的肾脏保护作用。     

益肾活血法对慢性肾衰竭大鼠TGF-β_1、CTGF的影响

目的探讨益肾活血法对慢性肾衰竭大鼠肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）的作用。方法采用腺嘌呤制备慢性肾衰竭动物模型,对模型大鼠灌胃益肾活血复方中药或尿毒清颗粒;运用免疫组化法观察肾组织TGF-β1、CTGF蛋白表达。结果益肾活血复方中药能降低肾间质中TGF-β1、CTGF蛋白的表达。结论益肾活血复方中药可通过抑制TGF-β1、CTGF的表达,干预肾间质纤维化,进而延缓慢性肾衰竭。     

肾衰泄浊汤对肾间质纤维化小鼠HGF、TGF β1的调节作用

目的:观察中药复方肾衰泄浊汤对肾间质纤维化小鼠肾组织肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子β1(TGFβ1)蛋白表达的调节作用,探讨其抗肾间质纤维化的机制。方法:将60只小鼠随机分为假手术组,模型组,中药低、高剂量组,苯那普利组,采用单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型,术后7天观察梗阻肾组织病理改变,用免疫组化方法检测肾组织HGF、TGFβ1蛋白,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及FN的表达。结果:中药高剂量组和苯那普利组较模型组小鼠肾组织HGF蛋白表达增强,TGFβ1蛋白表达减弱,而Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原、FN生成减少,两组无显著差异,而HGF表达与TGFβ1表达呈明显负相关。结论:肾衰泄浊汤可能是通过诱导HGF蛋白表达,抑制TGFβ1表达,抑制Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及FN等ECM的过度沉积,加强肾保护作用,对抗肾间质纤维化。     

中药复方对糖尿病大鼠肾脏TGF—β_1 mRNA表达的影响

目的:观察健脾益肾活血化瘀法组成的中药复方对早期糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质转化生长因子β1(TGFβ1)的影响,探讨其作用机理。方法:实验采用链脲佐菌素(STZ)按53mg/kg剂量腹腔一次性注射建立糖尿病肾病大鼠模型,造模成功后随机分为中药组(中药复方)、西药组(瑞泰)、模型组和正常组。灌胃8周后RT—PCR法检测大鼠肾皮质TGFβ1mRNA表达。结果:各治疗组与模型组比较均明显降低糖尿病大鼠肾皮质TGFβ1mRNA表达(P<0.01),且中药组优于西药组(P<0.01)。结论:中药复方通过降低糖尿病大鼠肾皮质TGFβ1mRNA的表达,从而起到保护肾脏,延缓肾脏病理损害,抑制糖尿病肾病形成的作用。     

肾络通对大鼠系膜细胞外基质分泌及转化生长因子β1表达的影响

目的: 探讨肾络通药物血清对大鼠系膜细胞外基质不同成分的抑制作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)表达的调节作用.方法:以体外培养大鼠肾小球系膜细胞及血清药理学方法为基础,采用酶联免疫吸附试验检测细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的含量;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA的表达.结果:细胞外基质FN,ColⅣ的含量与TGF-β1 mRNA的表达呈正相关关系,肾络通对二者均有抑制作用.结论:肾络通能够减少细胞外基质的积聚,抑制TGF-β1的分泌与表达,从而进一步明确了其防治多种肾小球疾病,延缓肾小球硬化的作用机制.     

益水生新饮对自发性高血压大鼠早期肾脏损伤的保护作用

目的：观察益水生新饮对自发性高血压大鼠（SHR）肾脏组织的保护作用及可能的机制。方法：将12 周龄雄性SHR 大鼠随机分成6 组,分别灌胃益水生新饮低、中、高3 个剂量,阳性药为苯那普利,设模型对照组和空白对照组。给药8 周后测血压并处死大鼠。检测大鼠尿微量白蛋白,血尿素氮和胱抑素水平;HE 及Masson 染色切片法观察各组大鼠肾脏病理改变;免疫组织化学方法检测肾组织TGF-β1,CTGF,FN 的表达变化。结果：与空白对照组比较,模型组SHR 大鼠血压明显升高;与模型对照组比较,益水生新饮低、中、高组和苯那普利组同期血压明显降低。与空白对照组比较,模型组尿微量白蛋白、血尿素氮及胱抑素水平升高;与模型对照组比较,益水生新饮中、高组和苯那普利组尿微量白蛋白、血尿素氮及胱抑素明显降低。病理检查提示,模型组比给药各组病变明显加重,出现肾小球肥大及肾小球基底膜非均质增厚并广泛空泡变性等病理改变。模型组大鼠肾组织TGF-β1,CTGF,FN 表达明显上调（P<0.01）,益水生新饮中、高剂量组及苯那普利组TGF-β1,CTGF,FN 表达明显下调（P<0.05）。结论：益水生新饮能够减轻SHR 大鼠早期肾脏肾小球硬化和肾间质纤维化的程度,起到延缓高血压肾损害的进展和肾脏保护的作用,其作用机制与TGF-β1,CTGF,FN 信号通路有关。     

化瘀通络中药对肾衰大鼠肾组织CTGF蛋白表达的实验研究

目的：采用蛋白质印迹法（Western Blot）检测化瘀通络中药肾络通对5／6肾切除肾衰大鼠残余肾结缔组织生长因子（CTGF）蛋白表达的影响。方法：5／6肾切除制备肾衰大鼠模型，随机分为假手术组、模型组、肾络通组和缬沙坦组，分别灌胃给药16周取材，应用Western Blot法检测肾组织CTGF蛋白的表达。结果：模型组与假手术相比，CTGF蛋白的表达明显增高；肾络通组CTGF蛋白表达较模型组显著降低。结论：肾络通可使慢性进展性纤维化肾组织CTGF蛋白表达下调，延缓5／6肾切除肾衰大鼠的病程进展，提示以CTGF为切入点，运用不同的有效中药组方对其加以研究，将为肾纤维化防治提供新的思路。     

肾小球硬化大鼠蛋白尿与转化生长因子β1相关性分析及活血补肾复方的干预作用

目的:探讨肾小球硬化大鼠蛋白尿与转化生长因子β₁(TGF-β₁)相关性以及活血补肾复方的干预作用。方法:采用单侧肾切除加注射阿霉素造模法,将实验动物随机分为正常对照组、模型组、西药对照组、中药防治组和中药治疗组。动态观察24h尿蛋白量,检测血浆和肾组织中TGF-β₁的含量。结果:蛋白尿在肾小球硬化大鼠模型中呈现出一定的变化规律;随着肾小球硬化的进展,血清TGF-β₁水平表现为升高趋势;活血补肾复方能够降低肾小球硬化初期尿蛋白量。结论:大鼠肾小球硬化模型组尿蛋白持续升高,血清和肾组织中TGF-β₁含量持续升高,活血补肾复方能够降低肾小球硬化大鼠初期(1～8周)蛋白尿量。     

绞股蓝皂苷对糖尿病肾病大鼠肾组织转化生长因子β1表达的影响

目的：探讨绞股蓝皂苷对糖尿病肾病大鼠肾脏中转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响，以了解其对早期糖尿病肾病的防治作用和分子机制。方法：采用单侧肾切除加STZ注射法改良复制糖尿病肾病模型，实验分为正常组、模型组、治疗组（绞股蓝皂苷高、中、低浓度及人参皂苷Rb1对照组），观察糖尿病肾病模型大鼠一般情况、生化指标、肾组织病理变化、肾脏中TGFβ1 mRNA及蛋白表达水平。结果：治疗组一般情况、生化指标、肾组织病理变化均优于模型组，同时TGFβ1 mRNA及蛋白表达水平也较模型组明显下调，其中中剂量组与人参皂苷Rb1对照组的作用相接近。结论：绞股蓝皂苷可用于治疗早期糖尿病肾病，其机制可能与下调TGFβ1高表达，减少肾小球系膜区ECM的积聚有关。     

金三莪对实验性肝纤维化大鼠TGF-β1、Smad3、Smad7及CTGF表达的影响

[目的]观察中药金三莪抗四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的疗效及作用机制。[方法]将50只Wistar大鼠分为正常对照组、模型对照组、中药治疗1组及2组 ,于造模第1周及第4周开始用金三莪治疗。免疫组化技术检测转化生长因子β1(TGF - β1)、Smad3、Smad7及结缔组织生长因子(CTGF)在肝内表达及其在细胞中的定位 ,肝组织电镜检查 ,放射免疫法检测血清透明质酸 (HA)含量。[结果]经中药金三莪治疗后肝纤维化大鼠肝组织内TGF - β1、Smad3及CTGF表达降低 ,而Smad7的表达增加 ,TGF - β1、Smad3及CTGF的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆 ,Smad7则主要在肝细胞浆表达。电镜检查中药治疗组大鼠肝细胞结构趋于正常 ,纤维组织变薄。模型组血清HA含量明显高于正常组 (P<0.01) ,中药治疗1、2组血清HA含量明显低于模型组 (P<0.05)。[结论]中药金三莪能有效地减轻四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的损伤及纤维化程度 ,其机制可能是抑制肝内TGF - β1、Smad3及CTGF并促进Smad7表达     

尿毒康对慢性肾衰竭阳虚大鼠肾组织纤维化的影响

目的：观察尿毒康对慢性肾衰阳虚型模型大鼠肾纤维化的影响。方法：40只SD雄性大白鼠随机抽取10只作为正常对照组,其余30只采用5／6肾切除改良法配合丙基硫氧嘧啶灌胃制成慢性肾衰阳虚模型。造模成功后,再随机分为慢性肾衰阳虚组以及尿毒康组各15只。8周后处死大鼠取肾脏进行免疫组织化学染色,检测Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白（FN）、转化生长因子β1（TGFβ1）、基质金属蛋白酶-2（MMP2）在肾组织中的表达。结果：与正常对照组比较,慢性肾衰阳虚组Ⅳ型胶原、FN、TGFβ1均表达较强（P〈0．01）,而MMP2表达较弱（P〈0．01）;与慢性肾衰阳虚模型组比较,尿毒康组Ⅳ胶原、FN、TGFβ1的表达均明显较弱（P〈0．05,P〈0．01）,MMP2表达较强（P〈0．05）。结论：尿毒康能减轻慢性肾衰阳虚型大鼠肾纤维化,作用机制可能与上调MMP2的表达及降低TGFβ1表达有关。     

肾衰冲剂缓解5/6肾切除大鼠肾小球硬化的实验研究

目的：研究扶正降浊的肾衰冲剂缓解慢性肾衰大鼠残余肾小球硬化的作用。方法：制作大鼠5／6肾切除肾衰模型，分别给予肾衰冲剂及主要单味药党参、丹参、制大黄灌胃，治疗1个月后检测大鼠血清Ⅳ型胶原（COL－Ⅳ）、层粘蛋白（LN）、纤维连接蛋白（FN）、Ⅲ前胶原（PC－Ⅲ）含量，图象分析残肾组织Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白的表达量。结果：肾衰冲剂可以降低血LN、COL－Ⅳ、PC-Ⅲ前胶原，提高血PN含量，减少残肾肾小球细胞外基质FN、Col-Ⅳ过量积聚。而党参、丹参、制大黄亦有各自一定的作用。结论：肾衰冲剂减轻肾小球硬化的机理在于减少残肾肾小球细胞外基质的增生。