黄芪多糖体外抗病毒性心肌炎试验研究

目的：研究黄芪多糖（APS）对柯萨奇B3病毒（CVB3）所致的VERO和大鼠原代心肌细胞病变抑制作用、病毒繁殖抑制反应，并测定其对大鼠原代心肌细胞培养上清液中心肌酶（LDH、CK—MB）活性的影响。方法：在VERO细胞、大鼠原代心肌细胞中加入不同稀释度黄芪多糖后，感染柯萨奇B3病毒，观察细胞病变，MTT染色比较各组间活细胞数的变化，病毒繁殖抑制实验比较半数组织感染量（TCID50）的差别；紫外分光光度法测定心肌细胞培养上清液LDH和CK—MB活性。结果：黄芪多糖在VERO和心肌细胞实验中可有效抑制柯萨奇B3病毒引起的细胞病变（P〈0.01）及病毒的繁殖，对心肌细胞释放心肌酶也有一定的抑制作用（P〈0．05）。结论：黄芪多糖对柯萨奇B3病毒感染的VERO和心肌细胞具有保护作用。在一定浓度下可降低心肌酶的释放。其作用机制尚需做进一步实验来探讨。     

黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染心肌细胞内质网应激及促凋亡信号因子作用

目的:研究黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78、GRP94及促凋亡信号分子JNK、p-JNK、Caspase 12表达的影响。方法:实验分3组,对照组(正常细胞)、柯萨奇病毒感染组(正常细胞+柯萨奇B3病毒)、黄芪总黄酮组(正常细胞+柯萨奇B3病毒+黄芪总黄酮)。采用免疫组织化学方法检测培养乳鼠心肌细胞α-SMA蛋白,采用Western blotting技术检测各组心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78、GRP94、p-JNK、JNK及Caspase 12表达。结果:1与对照组比较,柯萨奇B3病毒感染组心肌细胞GRP78、GRP94表达增多(P0.01),黄芪总黄酮组心肌细胞GRP78、GRP94表达减少(P0.01)。与对照组比较,柯萨奇B3病毒感染组心肌细胞p-JNK及Caspase 12表达增多(P0.01),黄芪总黄酮组心肌细胞p-JNK及Caspase 12表达减少(P0.01)。各组心肌细胞JNK表达无差异(P0.05)。结论:柯萨奇B3病毒可引发心肌细胞内质网应激,并使促凋亡信号分子p-JNK、Caspase 12表达增多,引发心肌细胞凋亡;黄芪总黄酮抑制柯萨奇B3病毒感染心肌细胞内质网应激,并抑制心肌细胞凋亡,该实验结果可能是其对病毒性心肌炎的作用机制之一。     

吉林地区心脏病患者柯萨奇B组病毒感染情况分析

心脏病是一种严重危害人类健康的多发病、常见病。引发心脏病的原因很多，其中由病毒引发的心脏病占有较大比例。能引起心脏病的常见病毒是柯萨奇病毒，特别是柯萨奇B组病毒最为多见。有关心脏病柯萨奇B组病毒感染情况的报道较多，特别是在心肌炎和克山病的病因研究牛报道较多，但未见有关吉林地区心脏病柯萨奇B组病毒感染情况的报道。本文收集心脏病患者1298例抗柯萨奇B组病毒抗体检测结果，分析柯萨奇B组病毒在心肌炎、心包炎、扩张型心肌病和心肌梗塞等疾病中的感染情况，为心脏病的病因研究提供基础数据。     

黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染心肌细胞动作电位的作用

目的探讨黄芪总黄酮（TFA）对嗜心性柯萨奇B3病毒（CVB3m）感染心肌细胞动作电位的作用。方法采用体外培养小鼠新生心肌细胞方法,建立柯萨奇B3病毒感染心肌细胞模型,应用膜片钳技术中电流钳记录柯萨奇B3病毒感染心肌细胞动作电位。结果应用TFA组与柯萨奇B3病毒感染模型组相比较,动作电位幅值（APA）下降,差异有统计学意义（P=0．0065,n=8）,动作电位时程（APD）明显延长（P=0．00724,n=8）。结论黄芪总黄酮可显著降低柯萨奇B3病毒感染心肌细胞动作电位幅值（APA）,延长动作电位时程（APD）。     

心肌细胞感染病毒后钙、钾通道电流及其表达改变和牛磺酸的作用

目的 观察心肌细胞感染病毒后心肌细胞钙，钾通道电流及通道表达改变和牛磺酸的作用。方法 （1）体外心肌细胞感染病毒；用胰蛋白酶和胶原酶消化法分别获得大鼠，乳鼠培养和分离的心肌细胞并感染柯萨奇B3病毒，用于检测Ca^2 跨膜内流，电压依赖性钙通道电流（Lca)和外向钾通道电流（Iout)。（2）在体小鼠感染病毒；BALB/c小鼠腹腔内注射柯萨奇B3病毒7d后取出心脏用于检测电压堆呀性钙通道α1亚单位抗原和电压调控性钾通道（Kv)mRNA的表达。相应各组加入不同剂量的牛磺酸并观察其作用。结果 （1）感染柯萨奇B3病毒后Ca^2 跨膜内流量及Ica增加，牛磺酸对其有抑制作用。（3）柯萨奇B3病毒感染out明显增大。牛磺酸可使病毒感染后的Iout趋于恢复正常。（3）柯萨奇B3病毒感染后小鼠心肌出现强电压依赖性钙通道α1亚基抗原阳性信号。Kv1.2,Kv2.1,Kv4.2mRNA与3种探针的杂交信号亦明显增强，牛磺酸可使增强的阳性信号减弱。结论 柯萨奇B3病毒感染后心肌细胞钙，钾离子通道电流及表达均增加，牛磺酸可通过抑制其改变而发挥对感染病毒心肌细胞的保护作用。     

原位逆转录PCR法检测心肌组织中的柯萨奇B3病毒RNA

目的　探讨柯萨奇B3病毒感染与心肌炎及扩张型心肌病的病原学关系。方法　应用生物素标记的核苷酸直接掺入法 ,建立了原位逆转录PCR反应技术 ,检测心肌炎、扩张型心肌病患者的心肌活检标本及正常心肌的尸检标本中的柯萨奇B3病毒。结果　 16例病理学及临床诊断为心肌炎患者的心肌组织中 ,7例检测到柯萨奇B3病毒RNA ;14例病理学及临床诊断为扩张型心肌病的患者心肌组织中 ,5例检测到柯萨奇B3病毒RNA ;16例正常心肌标本中检测结果均为阴性。结论　部分心肌炎及扩张型心肌病患者心肌组织中存在柯萨奇B3病毒RNA ,提示柯萨奇B3病毒感染与部分心肌炎及扩张型心肌病的发病有关。     

长春地区10年间柯萨奇B组病毒感染的流行病学调查分析

由于地方病防治工作的发展，克山病的流行已基本得到控制，柯萨奇B组病毒在克山病研究中的致病机理已有大量报道，柯萨奇B组病毒在人群中广泛流行越来越被研究工作者重视。开展柯萨奇B组病毒的流行病学调查工作，不仅对于病毒性心肌炎的防治，而且对克山病的防治工作都具有深远的现实意义和历史意义。随着分子生物学技术的发展，运用核酸杂交方法从克山病尸检标本中发现有CoxB组病毒的RNA，进一步提示克山病与CoxB组病毒感染有关[１]，那么，非病区的长春地区柯萨奇病毒感染情况怎样呢？多年来我们一直从事柯萨奇B组病毒抗体IgM的检测…     

维生素E对柯萨奇B3病毒感染的心肌细胞保护作用的研究

目的 探讨维生素E抗柯萨奇病毒及对感染病毒的心肌细胞的保护作用。方法 应用一定浓度的维生素E作用于柯萨奇病毒B3感染的心肌细胞，待病毒对照组细胞病变达 时，以MTT法测定细胞存活率，应用全自动生化分析仪测定细胞上清液中的心肌酶活性。结果 实验组的细胞存活率明显高于病毒对照组，心肌酶活性明显低于病毒对照组。结论 维生素E有一定的抗病毒作用，并对病毒感染的心肌细胞具有保护作用。     

克山病尸检心肌标本柯萨奇B组病毒RNA片段的序列分析

目的通过原位核酸杂交技术和RT-PCR技术探讨柯萨奇B组病毒感染与吉林亚急型克山病的关系.方法以柯萨奇B组病毒基因组的一段共同序列做寡核苷酸探针,于5′端行生物素标记,检测亚急型克山病患者尸检心肌组织标本中柯萨奇病毒的感染率;选取阳性标本做RT-PCR,并对PCR产物进行核苷酸序列分析,比较其与柯萨奇B组病毒各血清型之间的差异.结果 9例亚急型克山病患者尸检心肌组织标本中有7例原位核酸杂交结果阳性,阳性率为77.78%;所选3例原位核酸杂交结果阳性标本RT-PCR均有长541 bp的DNA条带出现,测序结果表明该片段与柯萨奇病毒B3同区域序列一致,与B1、B4、B5的同源性较大.结论亚急型克山病患者体内有柯萨奇B组病毒RNA存在,柯萨奇病毒可能在克山病的发生发展中扮演重要的角色.     

蟾甘合剂对柯萨奇B3病毒的抑制作用

目的探讨蟾甘合剂体内外抗病毒作用及机理。方法采用细胞培养法、MTT法检测蟾甘合剂的抗病毒作用;通过不同的给药时间、途径研究其抗病毒作用的环节;建立病毒性心肌炎模型,通过组织病理学检查法观察蟾甘合剂对柯萨奇B3病毒感染动物的保护作用。结果蟾甘合剂具有抑制柯萨奇B3病毒繁殖的作用,并能有效预防及控制小鼠心肌炎的发生与发展。结论蟾甘合剂对柯萨奇B3病毒感染引起的心肌炎具有预防及治疗作用。     

黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染心肌细胞钠电流的作用

目的探讨黄芪总黄酮（TFA）对嗜心性柯萨奇B3病毒（CVB3m）感染心肌细胞钠电流的作用。方法采用体外培养小鼠新生心肌细胞方法,建立柯萨奇B3病毒感染心肌细胞模型,采用全细胞膜片钳记录技术记录心室肌细胞钠电流（INa）。结果应用黄芪总黄酮（TFA）组与柯萨奇B3病毒感染模型组相比较,INa峰值从（-7．79±1．53）nA下降到（-5．64±1．67）nA,差异有统计学意义（P〈0．01,n=6）。结论黄芪总黄酮可显著降低柯萨奇B3病毒感染心肌细胞钠电流的幅值。     

心脏病和其他疾病患者中的柯萨奇B病毒特异性IgM反应

除急性中枢神经系统感染和流行性胸痛外,柯萨奇 B 病毒尚可引起急性心包炎和急性心肌炎。据称在瓣膜性心脏疾病患者的心内膜中已检测出柯萨奇 B 病毒抗原,但从柯萨奇 B 病毒诱致的心脏疾病患者中却很少能分离出病毒,而且也仅偶而能检测到抗体滴度显著增高者。可能是因为心脏病变发生于柯萨奇 B 病毒感染的晚期,故通常仅根据高滴度柯萨奇 B 中和抗体来诊断。然而,可能由于曾有亚     

柯萨奇病毒感染引起亚急性甲状腺炎一例

应用PCR法对柯萨奇B组病毒及柯萨奇病毒抗体IgM（抗CBV－IgM）的测定，发现心肌炎、扩张性心肌病由柯萨奇B组病毒感染引起较为多见。我们检出一例亚急性甲状腺炎患者问萨奇B组病毒PCR阳性，同时柯萨奇病毒抗体IgM阳性。现报道如下。患者，女性，38岁。因左侧颈部疼痛伴畏寒发热入院。一月前出现左侧甲状腺部位疼痛伴畏寒发热，食欲下降，消瘦。入院时检查：体温375℃，脉搏92次／分钟，甲状腺无明显肿大，左侧可触及一个2.5×3．0cm大小,质中有明显压痛肿块。B超检查：双侧甲状腺炎性图像改变，大小上（、甲状腺功能：l。261儿”nil…     

心肌炎心肌病与免疫

一、心肌炎与病毒免疫 心肌炎最常见的原因是病毒感染,虽然细菌、立克次体、原虫及其它因素也可致病。流行病学证明2～5％感染病毒者会累及心脏。其中肠道病毒(包括柯萨奇病毒、ECHO病毒以及脊髓灰质炎病毒)是心肌炎的主要病原微生物。柯萨奇病毒分A、B两组,A组又分24型,B组分6型。人类心肌炎以B组柯萨奇病毒(以下简称CB)最常见。当CB流行时,12％受感染者可出现急性心肌炎。此外,腺病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒、肝炎病毒、流感病毒及腮腺炎病毒也可引起心肌炎. 出生6个月后对心肌炎的易感性明显下降,至     

柯萨奇-腺病毒受体在扩张型心肌病心肌中的表达及意义

目的探讨柯萨奇-腺病毒受体(CAR)在扩张型心肌病(DCM)心肌组织中的表达及其在DCM发病中的意义.方法利用多聚酶链反应(PCR)技术检测20例原位异体心脏移植的DCM受体心肌组织以及5例正常对照心肌组织中柯萨奇B组病毒(CVB)、腺病毒(ADV)基因,采用免疫组化及逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测心肌柯萨奇-腺病毒受体mRNA及蛋白表达水平.结果20例DCM心肌标本中,柯萨奇B组病毒阳性7例(柯萨奇病毒组),腺病毒阳性5例(腺病毒组);其余8例柯萨奇B组病毒、腺病毒均阴性(其它组),5例正常对照柯萨奇B组病毒、腺病毒也均为阴性.正常对照和其它组心肌中均无柯萨奇-腺病毒受体mRNA及蛋白表达,而在柯萨奇病毒组和腺病毒组其表达水平明显增加,但两组之间比较,差异无显著性.结论柯萨奇-腺病毒受体表达上调可能是导致柯萨奇病毒或腺病毒易感性增加,促使病毒性心肌炎向扩张型心肌病转化的重要原因.     

辛伐他汀对柯萨奇B3病毒感染小鼠心肌早期的保护作用（英文）

目的探讨辛伐他汀对急性柯萨奇B3病毒感染小鼠心肌早期的作用。方法将柯萨奇B3病毒感染小鼠随机分为两组:对照组（n=15）及辛伐他汀治疗组（n=15）,分别给予生理盐水及辛伐他汀14 d。第6天时,各组分别随机处死6只。结果辛伐他汀治疗组其心脏质量（69±13mg）较对照组（96±16mg）减轻（P<0.01）;心肌炎症及坏死程度减轻,心肌病理积分（8.0%±7.3%vs22.9%±10.6%）显著降低（P<0.01）;14 d生存率明显升高（P<0.05）。结论辛伐他汀治疗可减轻心肌病理损害,对早期感染柯萨奇B3病毒小鼠心肌有保护作用。     

黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染心肌细胞内向整流钾电流的作用

目的探讨黄芪总黄酮（TFA）对嗜心性柯萨奇B3病毒（CVB3m）感染心肌细胞内向整流钾电流的作用,以明确TFA降低病毒性心肌炎小鼠心律失常发生率作用机制。方法采用体外培养小鼠新生心肌细胞方法,建立柯萨奇B3病毒感染心肌细胞模型,采用全细胞膜片钳记录技术记录心室肌细胞内向整流钾电流（IK1）。结果应用黄芪总黄酮（TFA））组与柯萨奇B3病毒感染模型组相比较,IK1峰值从（-10．11±1．57）nA增加到（-12．25±1．64）nA,差异有统计学意义（P〈0．05,n=6）。结论黄芪总黄酮可增加柯萨奇B3病毒感染心肌细胞内向整流钾电流（IK1）的幅值,这可能是黄芪总黄酮降低病毒性心肌炎小鼠心律失常发生率作用机制之一。     

柯萨奇B组病毒感染心肌炎患者血清中铜锌钙镁含量的分析

实验研究结果表明,克山病与微量元素Se、Zn、Ca、Mg等有关。近年来用原位核酸杂交和套式聚合酶联反应等技术,从各型克山病心肌标本中均发现有柯萨奇B组病毒或肠道病毒RNA的存在,其阳性率从61.5%到90%。证明很多克山病病人确有肠道感染,特别是柯萨奇B组湿病毒感染在克山病发病中的作用。本实验研究了柯萨奇B组病毒感染心肌炎患者血清中Cu、Zn、Ca、Mg等微量元素含量分析。以资在研究克山病病因及发病机制中参考。现     

柯萨奇B组病毒的RACE扩增与序列分析

目的探讨3'RACE(rapidamplificationofcDNAends)技术检测柯萨奇B组病毒(CVB)的可行性,并建立相应的实验检测方法。方法首先自行设计柯萨奇B组病毒6个型别病毒基因组的一条通用引物sp1;然后从柯萨奇病毒(CVB1￣CVB6)感染的Hela细胞,提取总RNA,用引物sp1结合OligodT进行3'RACE扩增,将产物克隆到pGEM-T载体上,挑取阳性菌落进行序列测定,与标准株进行同源性比对。结果获得了柯萨奇B组病毒6个型别的3'末端扩增产物及其核苷酸序列,同源性分析的结果显示扩增毒株与标准株之间的核苷酸同源性在95%￣99%之间,氨基酸同源性在98%￣100%之间。结论设计的引物“sp1”是柯萨奇B组病毒6个型别病毒基因组的一条通用引物;该引物结合OligodT进行的3'RACE扩增可用于柯萨奇B组病毒的检测。     

硫酸酯化及羧甲基化虎奶多糖的抗病毒作用

目的 研究硫酸酯化及羧甲基化虎奶多糖的抗病毒作用效果及作用机理,探讨虎奶多糖应用于因柯萨奇病毒（ＣＶＢ３）导致克山病疾病预防的可能性。方法 采同变抑制法,在增养的Ｈｅｌａ细胞上测定硫酸酯化和羧甲基化虎奶多糖对ＨＳＶ－２和ＣＶＢ３２种病毒的抑制作用;用ＥＬＩＳＡ法测定这些多糖对ＨＢｓＡｇ的破坏作用。结果 ２种不同取代度的羧甲基化虎奶多糖及３种不同取代度的硫酸酯化虎奶多糖在浓度分别为０．５、０．２５、