5/6肾切除大鼠肾脏病理学动态变化

目的探讨5／6肾切除(5／6NT)大鼠肾脏病理形态学动态变化。方法通过5／6NT大鼠在不同的时间段对肾组织标本进行光镜及电镜检查，观察肾脏病理动态变化情况。结果5／6NT大鼠肾脏病理变化为：第2周，肾小球增大，系膜细胞轻度增生，肾小管扩张；第8周，系膜重度增生，肾间质炎细胞浸润和增宽；第12周出现局灶节段性硬化的肾小球，肾问质轻度纤维化；第40周时，大部分肾小球纤维化、硬化，肾间质重度纤维化。结论5／6肾切除模型符合人类肾纤维化的病理改变，是研究慢性肾衰竭、肾纤维化的理想动物模型。     

5/6肾切除大鼠肾组织时钟基因的表达

目的 研究5/6肾切除大鼠肾时钟基因per2、bmal1及时钟输出基因dbp 的表达节律.方法 SPF级雄性Wistar大鼠,随机分为模型组和假手术组.造模次日置于12 h∶12 h明暗交替的环境饲养.第12周分别在7AM(ZT0),11AM(ZT4),3PM(ZT8),7PM(ZT12),11PM(ZT16),3AM(ZT20)各时间点两组各处死5只大鼠.Real-time PCR法检测肾bmal1、per2、dbp mRNA表达.结果 假手术对照组与模型组per2在ZT8时为谷值点(T),在ZT16~ZT20达到峰值(P),模型组per2的峰值提前4 h,两组P/T分别为2.49、2.47;模型组与假手术组肾bmal1 mRNA 表达的近日节律相似:于ZT4时为峰值点、ZT20为谷值点,但假手术组则自峰值点迅速下降,于ZT12~ZT20在谷值波动.模型组与假手术组dbp mRNA表达趋势相反:假手术组在ZT4及ZT20为谷值点,其余各时间点表达水平均较高,模型组dbp mRNA表达峰值点在ZT16,其余各时间点均在较低水平波动.结论肾组织中时钟基因per2、bmal1及时钟输出基因dbp mRNA的表达呈近日节律,慢性肾衰时该节律发生变化.     

大鼠5／6肾切除慢性肾衰竭模型的制作

目的：制作大鼠5／6肾切除建立慢性肾衰竭模型。方法：大鼠5／6大部分肾切除诱发慢性肾衰竭,测定血清中肌酐、尿素氮的含量,取肾组织进行Masson染色,评价模型的制作效果。结果：5／6肾切除后大鼠血清中尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、血肌酐（se-rum creatinine,SCR）的含量明显增高,肾脏病理 Masson 染色组织学检查发现肾小球节段性硬化、肾小管萎缩、肾间质节段性纤维化。结论：成功建立大鼠5／6肾切除慢性肾衰竭模型,血液生化指标及形态学符合肾衰竭病理生理特点。     

结缔组织生长因子在肾切除大鼠肾脏中的表达和氟伐他汀的调节作用

目的　观察结缔组织生长因子 (CTGF)mRNA在 5 / 6肾切除大鼠肾皮质的表达特点和羟甲基戊二酰辅酶A(HMG CoA)还原酶抑制剂氟伐他汀的调节作用。方法　将 2 4只 5 / 6肾切除大鼠随机分为未治疗的 5 / 6肾切除组 (模型组 ,12只 )和氟伐他汀治疗的 5 / 6肾切除组 (治疗组 ,12只 ) ,另设6只假手术大鼠作为对照。氟伐他汀治疗 (7mg·kg-1·d-1) 13周后 ,检测尿蛋白排泄、血清尿素氮和肌酐含量 ,用RT PCR法检测肾皮质CTGFmRNA表达 ,免疫组织化学检测肾小球转化生长因子 β1(TGF β1)、IV型胶原和纤连蛋白的表达水平 ,并评价肾脏病变和肾小球硬化指数 (GSI)。 结果　实验终止时 ,模型组尿蛋白排泄 (30 5 4mg/ 2 4h)显著高于假手术组 (5 6mg/ 2 4h ,P <0 0 1) ,氟伐他汀治疗的大鼠尿蛋白排泄 (2 30 9mg/ 2 4h)明显低于模型组 (P <0 0 5 )。与假手术组相比 ,模型组血清尿素氮(P <0 0 1)和肌酐 (P <0 0 5 )水平均明显增高 ,氟伐他汀治疗使血清尿素氮和肌酐的含量明显降低。模型组GSI为 4 1 8± 11 5 ,明显高于假手术组 (2 2± 1 3,P <0 0 1) ,治疗组GSI(2 3 4± 6 1)明显低于模型组 (P <0 0 5 )。肾皮质CTGFmRNA表达水平约为假手术组的 3倍 (P <0 0 1) ,而在治疗组其表达水平减少 5 5 4 %。肾小球TGF     

来氟米特对肾大部切除大鼠肾脏的保护作用

目的探讨来氟米特对肾大部切除大鼠肾脏纤维化的影响。方法将大鼠随机分为假手术组和手术组,术后3d再将手术组大鼠随机分为来氟米特组和Nx组。8周后测尿蛋白 ,血肌酐和肝功能 ;取肾组织做病理检查 ;用免疫组织化学法检查巨噬细胞特异性抗原CD68的表达。结果Nx组大鼠肾脏出现肾小球硬化和肾间质纤维化 ;和Sham组相比CD68表达明显升高 (P<0.05);LEF组肾脏纤维化明显减轻 ,CD68表达比Nx组明显下降 (P<0.05)。结论来氟米特可抑制巨噬细胞增殖和浸润 ,减轻肾脏纤维化 ,从而保护肾功能。     

用改良的5/6肾切除法制作的大鼠慢性肾衰竭模型

目的:改进5/6肾切除大鼠慢性肾衰竭动物模型的手术方法。方法:游离肾动脉夹闭其中1～2个分支30秒,解除夹闭,根据缺血范围选择性切除左肾上、下极及左肾外侧缘约2/3肾组织。1周后切除右肾。结果:5/6肾切除后的大鼠出现尿蛋白增多、血清肌酐、尿素氮升高、内生肌酐清除率下降;肾脏病理检查出现肾小球硬化、肾小管萎缩、间质纤维化。结论:用改良的5/6肾切除法成功制作了大鼠慢性肾衰竭动物模型。     

六味地黄丸对大鼠5/6肾切除肾功能的影响

目的探讨六味地黄丸对大鼠5/6肾切除肾功能的作用。方法采用大鼠5/6肾切除模型及细胞立体形态学技术,观察大鼠残肾肾功能的动态变化及其可能的作用机制。结果六味地黄丸具有降低5/6肾切除大鼠BUN、肌酐水平及提高肾小球滤过率(GFR)的作用,与模型组相比差异具有显著性意义(P<0.05);形态学研究显示,造模8周时六味组残肾肾小球的体积较大,肾间质纤维化程度较模型组轻;细胞形态学研究显示,六味组肾小球的面数密度NA参数小于模型组,差异具有显著性意义(P<0.05)。结论六味地黄丸具有改善5/6肾切除大鼠残肾肾功能的作用,其改善残肾肾功能的作用与六味地黄丸提高肾小球的体积密切相关。     

参麦注射液对5/6肾切除大鼠肾脏的保护作用研究

目的：探讨参麦注射液对5／6肾切除大鼠肾小球、肾小管的保护作用。方法：采用5／6肾切除造成大鼠肾功能衰竭模型，使用光学显微镜观测参麦注射液腹膜透析后肾小球、肾小管形态结构的变化。结果：参麦注射液具有促进受损的肾小球、肾小管修复作用，其作用与参麦注射液抗肾间质炎相关。结论：参麦注射液具有保护5／6肾切除大鼠肾脏的作用，这种保护作用与其抗肾间质炎功能相关。     

钙拮抗剂对5/6肾切除大鼠的肾脏保护作用

目的进一步探讨钙拮抗剂对进行性肾小球损伤保护作用的机制，本文观察了心痛定对５／６肾切除大鼠的治疗效应。方法：设置３个观察组：（１）对照组，进行５／６肾切除，术后喂正常饮食；（２）心痛定组，术后喂含０．２％心痛定的饲料；（３）依那普利组，术后喂含５０ｍｇ／Ｌ依那普利的水。分别观察血压，尿蛋白及肾功能的变化，并于术后第８周处死大鼠，测定其残余肾的组织形态学指标：系膜区面积，丝球体面积及体积和肾小球硬化指数。结果：心痛定组、依那普利组大鼠血压、尿蛋白、血浆尿素氮和肌酐均较对照组有所下降（Ｐ＜０．０１）；心痛定组系膜区面积和丝球体体积分别为（１．５３±０．４１）×１０３μｍ２、（１．２３±０．２７）×１０６μｍ３；较对照组（２．２４±０．５５）×１０３μｍ２和（１．５０±０．３３）×１０６μｍ３明显减少（Ｐ值均＜０．０１），依那普利组则无明显变化。结论：心痛定、依那普利均有降低肾衰模型大鼠血压、尿蛋白和氮质血症的作用，然而仅心痛定可减小大鼠肾小球系膜区面积和肾小球体积，从而减轻肾小球硬化的形成     

肾络通对5/6肾切除肾衰竭大鼠残余肾组织PAI-1蛋白表达的影响

目的观察肾络通对5/6肾切除肾衰竭大鼠残余肾组织纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)蛋白表达的影响。方法5/6肾切除制备肾衰竭大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、肾络通组和缬沙坦组,分别灌胃给药16周取材,应用蛋白质印迹法检测肾组织PAI-1蛋白的表达。结果模型组与假手术组相比,PAI-1蛋白的表达明显增高(P<0.01);肾络通组PAI-1蛋白表达较模型组显著降低(P<0.05),与缬沙坦组比较无明显差异。结论肾络通可下调慢性进展性纤维化肾组织PAI-1蛋白表达,改善纤溶系统的失衡,延缓5/6肾切除肾衰大鼠的病程进展。     

肾脏特异性表达新基因在肾脏组织中的分布

目的Collectrin为新近克隆的肾脏特异性表达基因.该研究观察Collectrin在不同种属(人类、大鼠和小鼠)肾脏组织中的分布和表达,为探讨Collectrin的生物学功能奠定基础.方法采用原位杂交及免疫组化染色检测其在不同种属肾脏组织中的定位表达.结果人和大鼠Collectrin基因及蛋白产物主要在肾脏集合管细胞表达,与既往在小肾组织中的研究结果一致,除此而外,人和大鼠Collectrin在肾远曲小管细胞中也有表达.结论在人、大鼠与小鼠三个不同种属中Collectrin主要定位表达在肾脏集合管细胞.     

小鼠Collectrin正反义真核表达载体的构建及其功能

目的:构建新基因Collectrin的正反义真核表达载体,研究其与细胞生长的关系.方法:以PCR的方法扩增Collectrin的开放阅读框序列,与载体pcDNA3.1/V5-His相连构成融合基因表达质粒.将重组后的质粒进行细菌转化,质粒扩增、纯化后,测序鉴定Collectrin的正义及反义序列.以脂质体介导的方法体外转染肾皮质集合管细胞系(M-1).以β-Gal staining的方法测定转染效率.分别行逆转录-PCR和Western blot,检测不同融合基因转染后细胞Collectrin mRNA和蛋白水平的表达变化.以四甲基偶氮唑蓝(MTF)参入法分别在第24小时、第48小时测定不同融合基因转染后细胞增殖活性.结果:M-1细胞在融合基因转染第24小时转染效率最高.Collectrin正义转染组较反义、空载体和正常对照组在核酸和蛋白水平表达量都显著增高,Collectrin反义转染组蛋白表达较其他组明显下调.反义转染组细胞较其他组明显减少.结论:成功构建了Collectrin正义及反义真核表达载体,Collectrin是维持细胞生长存活的重要元件.     

部分肾切除大鼠肾组织蛋白酶B的表达与肾脏纤维化的关系

目的探讨组织蛋白酶B(cathepsin B,CB)在5/6肾切除大鼠肾组织纤维化发生发展中的作用.方法取健康Wister大鼠80只,随机分成假手术组和手术组.每组分为术后15、30、60、90d 4个时相点,每组每时相点10只大鼠.采用生物化学、形态计量、免疫组化技术观察大鼠肾功能、肾组织形态学、肾组织蛋白酶B和Ⅳ型胶原表达.结果CB主要在肾近曲小管上皮细胞内表达;手术组大鼠术后15、30d近曲小管CB表达增多,在增生的系膜细胞内也有较多CB表达,术后60、90d时肾小管上皮细胞CB表达逐渐减少,CB表达与肾小球硬化比率、病变肾小管肾间质体积分数和Ⅳ型胶原表达显著负相关.结论正常大鼠肾CB主要在近曲小管上皮细胞内表达;大鼠5/6肾切除术后早期,CB表达代偿性增强,这对于减轻肾组织纤维化有积极意义,随着术后时间延长,损伤因素占主导地位,CB表达的代偿逐渐减弱,参与肾组织纤维化的发生机理.     

60Co射线、5-Fu、顺铂对SGC-7901胃癌细胞增殖基因表达的影响

目的 探讨＾６０Ｃｏ射线、５－Ｆｕ、顺铂对ＳＧＣ－７９０１胃癌细胞增殖基因表达的影响及其意义。方法 以ＳＧＣ－７９０１胃癌细胞作为研究对象,采用免疫组化方法检测胃癌细胞中Ｐ５３、ＣｅｒｂＢ－２、Ｒｂ基因的表达情况。结果 ＾６０Ｃｏ、５－Ｆｕ、顺铂可使ＳＧＣ－７９０１胃癌细胞生长变慢,倍增时间延长,抑制吕细胞增殖,并使增殖相关基因表达水平明显降低。结论 本研究证实,＾６０Ｃｏ、５－Ｆｕ、顺铂对胃癌细     

Hyperphosphatemia-induced hyperparathyroidism in 5/6 nephrectomized rats: development of a new animal model

Background We require a stable model to understand the molecular mechanism by which isolated hyperphosphatemia induces hyperparathyroidism secondary to chronic renal failure. The present study established a rat model of hyperphosphatemia-induced secondary hyperparathyroidism in chronic renal failure.
Methods Twenty-nine rats with 5/6 nephrectomy （Nx） were divided into three groups and were fed for 10 weeks on a high phosphate diet （1.2% phosphate） starting from three different post-Nx time points. Parathyroid hormone mRNA in parathyroid gland was measured by real-time PCR and parathyroid cell hyperplasia was tested by proliferating cell nuclear antigen （PCNA） assay.
Results The 10 rats fed a high phosphate diet starting from the fourth week post-Nx had isolated hyperphosphatemia and excess synthesis/secretion of parathyroid hormone, and hyperplasia of the parathyroid glands were induced （r=0.86-0.97, P 〈0.001）, but the levels of serum calcium and 1,25（OH）2D3 did not change. Conclusion A rat model of hyperphosphatemia-induced secondary hyperparathyroidism in chronic renal failure was established by 5/6 Nx and 10 weeks-high phosphate diet starting from the fourth week post-Nx.     

5/6肾切除大鼠早期模型中p38MAPK的动态变化

目的：研究5/6肾切除大鼠模型中p38MAPK磷酸化的动态表达情况。方法：82只雄性SD大鼠分为两组：5/6肾切除模型组72只,假手术对照组10只。模型组造模完成后,分别于肾切除早期（术后1/2h、1h、3h、6h、12h、1d、2d、4d）相应时间点处死,每组9只,假手术组于术后12h处死,称量各组体重及残余肾重,计算肥大指数;下腔静脉取血留取血清测定血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）;以Western blotting免疫印迹法检测肾皮质磷酸化p38MAPK活性的表达情况;以病理光镜和电镜观察肾小球、肾小管及肾间质组织形态学及超微结构的变化。结果：模型组与对照组相比,肾脏呈代偿性肥大,肥大指数增高（P〈0.05）,Scr和BUN升高（P均〈0.01）。免疫印迹法显示5/6肾切除术后1/2h、1h、3h、6h、12h磷酸化p38信号呈递增趋势,尤以12h信号最强,之后信号减弱,2d时几乎不可见,4d有较弱的信号,假手术组未见明显信号。光镜下,发现肾小球有轻度系膜细胞增生,基质增宽不明显,肾小管偶有轻度变性,间质偶有炎性细胞浸润。电镜下,偶见足突局灶融合。结论：5/6肾切除大鼠在造模完成后12h时磷酸化p38MAPK表达最强。     

Smad2,3,4,7蛋白在大鼠5/6肾切除肾衰模型中的定位和表达变化

目的　研究Smad2 ,3 ,4,7蛋白在 5 6肾切除模型中的定位和表达变化。方法　Wistar大鼠行 5 6肾切除 ,分别于模型 4、8、12周处死大鼠。用免疫组化检测Smad2、Smad3、Smad4和Smad7蛋白的定位和表达 ;纤维化程度通过测定肾组织羟脯氨酸含量来判断。结果　Smad2、Smad3和Smad4主要在肾小球和肾小管上皮细胞内有表达 ,而Smad7主要在肾小球表达。随着肾功能衰竭的加重 ,肾小球Smad2、Smad3和Smad4蛋白表达逐渐增加 ,而Smad7蛋白表达却逐渐下降 ,并伴有肾组织羟脯氨酸含量的明显增高。结论　TGF β Smad信号通路参与了肾间质纤维化进程 ,Smad2 ,3 ,4高表达和Smad7负调控不足是本模型TGF β高表达导致肾小球硬化加重的主要原因之一。     

肾舒胶囊对5/6肾切除大鼠残余肾脏的保护作用及机制

目的　探讨肾舒胶囊对 5 / 6肾切除大鼠残余肾脏的保护作用及机制。方法　制作大鼠 5 / 6肾切除模型 ,1周后随机分为模型组、肾舒胶囊治疗组、苯那普利治疗组 ,同时作假手术对照。肾舒胶囊治疗组及苯那普利治疗组分别给予肾舒胶囊及苯那普利灌胃。术后 12周检测大鼠体重、血压、2 4h尿蛋白定量、肾功能 ,观察肾脏组织病理学改变 ,检测肾组织中血小板源性生长因子 (PDGF)、转化生长因子 β1(TGF β1)、Ⅳ型胶原 (Col Ⅳ )mRNA表达。结果　肾舒胶囊能显著降低 5 / 6肾切除大鼠 2 4h尿蛋白量 ,改善肾功能 ,抑制PDGF、TGF β1、Col ⅣmRNA表达的上调 ,肾脏组织病理显示它能明显抑制残余肾脏的代偿性肥大 ,减轻肾小球硬化及肾间质纤维化 ,其效果和苯那普利相当。结论　肾舒胶囊能延缓 5 / 6肾切除大鼠残余肾脏的病变进展。其作用机制与抑制系膜细胞增殖及细胞外基质积聚有关。     

贝那普利对5/6肾切除大鼠残余肾VEGF表达及MVD变化的影响

目的:观察血管紧张素转化酶抑制剂(angiotesin converting enzyme inhibitor,ACEI)类药物贝那普利对5/6肾切除大鼠残余肾血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达及微血管密度(microvessel density,MVD)的影响.方法:以SD大鼠建立5/6肾切除肾衰模型,将5/6肾切除大鼠分为模型组、贝那普利组,并设假手术组.灌药8周后取残余肾做组织病理检查,判断肾小球硬化、肾小管间质损伤程度,用免疫组织化学方法检测肾组织VEGF表达及CD141阳性MVD,并与肾小球硬化指数(glomerulosclerosis index,GSI)、肾小管间质损伤指数(tubulointerstitial score,TIS)、血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)及肌酐(creatinine,Cr)做相关分析.结果:灌药8周后贝那普利组与模型组比较,尿蛋白(urine protein,UP)、BUN和Cr明显降低,残余肾GSI和TIS明显降低(P＜0.05),VEGF表达、MVD明显升高(P＜0.05);肾脏VEGF表达与MVD呈显著正相关(P＜0.05),肾脏VEGF表达和MVD与GSI,TIS,BUN及Cr呈显著负相关(P＜0.05).结论:5/6肾切除大鼠残余肾VEGF表达下调、MVD减少,且与残余肾纤维化密切相关;贝那普利可通过上调残余肾VEGF表达及增加MVD,从而降低CSI和TIS,缓解肾纤维化,保护肾功能.     

涤毒灌肠方对5/6肾切除大鼠血与尿硫酸吲哚酚含量的影响

目的：探讨涤毒灌肠方对5/6肾切除大鼠血、尿硫酸吲哚酚含量的影响。方法 SD大鼠80只,随机抽取8只作为空白对照组,其余72只行5/6肾切除术复制慢性肾衰模型,将造模成功的60只大鼠随机分为模型对照组、药用炭治疗组、涤毒灌肠方高、中、低剂量组,用药周期为56 d。测量大鼠血清肌酐、尿素氮,高效液相色谱-质谱分析法测定血、尿硫酸吲哚酚的含量。结果灌肠方各剂量组和药用炭组血硫酸吲哚酚含量明显下降(P<0.05),且高、中剂量组比药用炭组下降更为明显(P<0.05);灌肠方高、中剂量组、药用炭组尿硫酸吲哚酚含量明显下降( P<0.05),且高剂量组比药用炭组更为明显( P<0．05)。结论涤毒灌肠方降低5/6肾切除大鼠血、尿中硫酸吲哚酚含量可能是其干预肾衰竭的作用机制之一。