谷氨酸在低氧性脑损伤中的作用

目的：探讨谷氨酸（Glu)在低氧性脑损伤的作用机制。方法：实验采用氨基酸分析和放免技术，研究缺氧后12，24，48h脑组织Glu和钙调蛋白（CaM) 含量的变化以及钙／钙调蛋白激酶Ⅱ（Ca^2 /CaM-PKⅡ）活性的影响及其机制。结果：缺氧组脑组织Glu、CaM含量在缺氧后48h明显高于12，24h和对照组；缺氧组脑组织Ca^2 /CaM-PKⅡ活性在缺氧后48h明显低于12，24h和对照组；而N－甲基－D－天冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂地佐环平（MK－801）和钙通道拮抗剂尼莫地平（nimodipine)可对抗这种改变。结论：缺氧后Glu的兴奋毒引起脑损伤和Ca^2 /CaM-PKⅡ的活性下降，主要由NMDA受体介导和胞外Ca^2 内流增加有关。     

钙在嗜铬细胞瘤细胞缺氧性脑损伤中的作用研究

目的观察缺氧后大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞内游离钙的浓度(犤Ca2+犦i)、环磷酸腺苷(cAMP)、钙调蛋白(CaM)和钙调蛋白激酶II(Ca2+/CaM-PKII)的变化。方法采用放免技术,从细胞水平进一步观察缺氧对PC12细胞的毒性、细胞内犤Ca2+犦i变化,cAMP、CaM和Ca2+/CaM-PKII的变化。结果缺氧组PC12细胞cAMP、CaM含量在缺氧后24h明显高于正常对照组;Ca2+/CaM-PKII活性明显低于正常对照组。结论犤Ca2+犦i、cAMP、CaM和Ca2+/CaM-PKII在缺氧PC12细胞损伤机制中起了重要的作用。     

钙在嗜铬细胞瘤细胞缺氧性脑损伤中的作用研究

目的 观察缺氧后大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞内游离钙的浓度（[Ca^2 ]i)，环磷酸腺苷（cAMP），钙调蛋白（CaM)和钙调蛋白激酶Ⅱ（Ca^2 /CaM-PKⅡ）。方法 采用放免技术，从细胞水平进一步观察缺氧对PC12细胞的毒性，细胞内[Ca^2 ]i变化，cAMP,CaM和Ca^2／CaM-PKⅡ的。结果 缺氧组PC12细胞cAMP,CaM含量在缺氧后24h明显高于正常对照组：Ca^2 /CaM-PKⅡ活性明显低于正常对照组。结论 [Ca^2 ]i,cAMP,CaM和Ca^2 /CaM-PKⅡ在缺氧PC12细胞损伤机制中起了重要的作用。     

褪黑素对吗啡戒断大鼠海马神经细胞内游离钙和钙调蛋白的影响

目的　探讨褪黑素对吗啡戒断大鼠海马神经细胞内游离钙 ( [Ca2 ]i)和钙调蛋白 (CaM)的影响。方法　以剂量递增法连续 5d皮下注射吗啡成瘾模型。用流式细胞术测定海马神经细胞内游离钙和钙调蛋白活性。结果　①与对照组比较 ,吗啡成瘾大鼠海马神经细胞内游离钙含量和钙调蛋白活性明显升高 (P <0 0 1)。纳洛酮催促戒断后细胞内游离钙含量迅速下降 (P <0 0 1) ,但钙调蛋白相对活性无显著变化 (P >0 0 5 )。②与纳洛酮催促组比较 ,褪黑素可以抑制吗啡戒断大鼠海马神经细胞内CaM活性和游离钙含量的迅速下降 (P <0 0 5 )。结论　吗啡成瘾及戒断直接影响大鼠海马神经细胞内游离钙含量和钙调蛋白活性。MT对吗啡戒断综合征的抑制作用可能与MT对海马神经细胞内游离钙和钙调蛋白的调控有关     

Ca2+-钙调蛋白在M3R介导逼尿肌细胞收缩中的作用

背景:毒蕈碱受体在调节逼尿肌细胞收缩过程中起重要作用,其受体亚型M3R直接介导逼尿肌细胞收缩。Ca2 是刺激逼尿肌细胞收缩的直接因素,Ca2 有数十种受体结合蛋白质,Ca2 通过与不同受体蛋白结合调节不同反应。目的:探讨Ca2 -钙调蛋白在M3R介导逼尿肌细胞收缩中的作用。设计:以逼尿肌细胞为观察对象,对比观察。单位:解放军第三军医大学西南医院泌尿中心。材料:实验在重庆西南医院中心实验室完成,实验动物选择健康雌性Wistar大鼠。方法:将原代培养逼尿肌细胞分为实验组和对照组,接种于6孔培养板上培养,实验组培养细胞70%融合时加入1×10-4mmol/L卡巴胆碱和毒蕈碱受体亚型M2R拮抗剂,分别阻断M3R、M2R,采用Ca2 浓度和钙调蛋白活性检测试剂盒分别测定两组逼尿肌细胞Ca2 浓度和钙调蛋白活性。主要观察指标:两组细胞内[Ca2 ]i浓度、钙调蛋白活性变化。结果:实验组的[Ca2 ]i和钙调蛋白的平均通道荧光对数值高于对照组(3.26±0.38,2.06±0.12,P<0.01);(2.87±0.34,2.14±0.24,P<0.05)。结论:实验结果提示Ca2 -钙调蛋白以信号传导途径参与了M3R介导逼尿肌细胞收缩的调节过程。     

强啡肽A在新生鼠缺氧、缺血性脑损伤中的阿片样和非阿片样受体机制

目的：探讨强啡肽A1-13在新生鼠缺氧、缺血性脑损伤中作用的受体机制。方法：将7d龄新生鼠左侧颈总动脉结扎并在低氧环境下制成半球性脑缺氧、缺血模型，伤后即刻向小脑延髓池注射阿片k受体拮抗剂nor-BNI或N-乙酰-D-门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801，比较其对损伤后脑含水量、脑内强啡肽A1-13免疫活性物质(ir-DynA1-13)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果：给予nor-BNI或MK-801均可降低损伤后的脑含水量，给药后皮层、海马ir-DynA1-13和/或MDA水平在脑损伤后的升高被部分逆转，SOD活性也部分恢复。MK-801恢复SOD活性的作用明显而nor-BNI的作用较弱。结论：强啡肽A1-13对新生鼠缺氧、缺血脑损伤的影响，很可能是通过阿片受体和NMDA受体途径共同作用而实现的，其影响的环节可能有所不同。     

电磁脉冲对大鼠海马N-甲基-D-天门冬氨酸受体活性的影响

目的　观察电磁脉冲 (EMP)辐射对大鼠海马组织中N 甲基 D 天门冬氨酸 (NMDA)受体的影响 ,以深入探讨EMP致学习记忆障碍的机制。方法　EMP辐射条件为 6× 10 4V/m ,脉冲上升时间 2 0ns ,脉宽 3 0 μs ,频率 2 .5脉冲 /min ,作用 2min。二级雄性Wistar大鼠 3 2只 ,随机分为EMP组 (n =2 6)和对照组(n =6)。EMP组大鼠分别于辐射后即刻 ,3h ,6h ,2 4h和 48h断头取脑 ,剥离海马 ,制备膜受体蛋白 ,以3 H Glu为配基进行放射性配基 受体结合实验。结果　EMP辐射后即刻大鼠海马中NMDA受体的Kd值开始下降 ,辐射后 3h下降最显著 (与对照组相比 ,P <0 .0 5 ) ,6h渐有恢复 ,48h恢复至正常水平 ;受辐射的大鼠海马中NMDA受体的Bmax值于辐射后 3h和 6h显著下降 (与对照组相比 ,均P <0 .0 5 ) ,2 4h渐有恢复 ,辐射后 48hBmax值明显升高 ,超过对照组水平 (P <0 .0 5 )。结论　EMP辐射可引起大鼠海马组织中NMDA受体亲和力升高及受体密度下降。提示NMDA受体密度、亲和力的改变以及NMDA Ca2 NO路径的兴奋毒性作用可能参与了EMP致实验动物认知障碍的分子机制。     

磷酸肌酸钠对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护效应及机制

目的 观察外源性磷酸肌酸钠(Phosphocreatine,PCr)对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用及其作用机制.方法 Wistar雄性大鼠36只,随机(随机数字法)分为三组(n=12):假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)、PCr预处理组(PCr组).采用Pulsinelli四血管法建立大鼠脑缺血-再灌注损伤模型,I/R组电凝双侧椎动脉,暴露并夹闭双侧颈总动脉,10 min后开放;PCr组在双侧颈总动脉夹闭前60 min尾静脉缓慢注射PCr 150 mg·kg-1,I/R组夹闭前60 min输注等容量生理盐水;Sham组仅穿线不夹闭.再灌注48 h后处死大鼠,TUNEL法检测大脑皮质区细胞凋亡,计算凋亡指数;测定大脑皮质区钙调蛋白(calmodulin,CaM)的活性和丙二醛(malondiadehyde,MDA)含量变化;光镜下观察大脑皮质区病理形态学变化.结果 与Sham组比较,PCr组和I/R组皮质区病理损伤明显,凋亡细胞增多,CaM活性显著增强,MDA含量明显升高(P＜0.01);与I/R组比较,PCr组皮质区病理损伤明显减轻,凋亡细胞数减少,CaM活性及MDA含量显著降低(P＜0.01).结论 PCr预处理能显著减轻脑缺血-再灌注损伤,减少皮质区神经元凋亡,其机制可能与它减轻钙平衡紊乱和氧自由基代谢异常有关.     

雄激素干预后缺氧缺血新生大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的变化

目的:观察雄激素干预缺氧缺血性脑病新生大鼠后,鼠脑匀浆中超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的变化。方法:实验于2004-02在西安交通大学第二医院完成。选择7d龄一级SD大鼠56只。随机抽签法分成假手术对照组8只、缺氧缺血性脑损伤 生理盐水组24只、缺氧缺血性脑损伤 雄激素组24只,按照取材时间的不同,缺氧缺血性脑损伤 生理盐水组和缺氧缺血性脑损伤 雄激素组又分为缺氧缺血后6,24,48h3个时间点,每个时间点8只。制备缺氧缺血性脑损伤模型,取颈正中切口,游离左颈总动脉,结扎并缝合切口,恢复2～3h后置于约5L自制常温常压密闭容器中,以1.0～2.0L/min的速度输入含体积分数0.08的氧气和体积分数0.92的氮气的混合气体,约2.5h后取出。假手术组仅做颈正中切口,游离左颈总动脉,但不结扎。缺氧缺血性脑损伤 雄激素组在缺氧缺血后立即给予腹腔注射丙酸睾丸酮25mg/kg’缺氧缺血性脑损伤 生理盐水组给予等量生理盐水作对照。然后分别于缺氧缺血性脑损伤后6,24,48h后断头取脑制作脑匀浆,以硫代巴比妥法测定丙二醛含量;黄嘌呤氧化酶发光法测定超氧化物歧化酶。结果:在实验过程中,缺血性脑损伤 生理盐水组死亡7只;缺血性脑损伤 雄激素组死亡4只;假手术组无死亡。故假手术组8只、缺血性脑损伤 生理盐水组17只、缺血性脑损伤 雄激素组20只大鼠进入结果分析。①假手术组脑组织匀浆中超氧化物歧化酶活性为(60.67±7.26)kNU/g;缺氧缺血性脑损伤 生理盐水组缺氧缺血后6h超氧化物歧化酶活性开始降低,24h降至最低值,与假手术组比较差异均有显著性意义(P<0.05),48h后逐渐恢复后仍低于正常水平,与假手术对照组比较差异无显著性意义(P>0.05);缺氧缺血性脑损伤 雄激素组脑组织中超氧化物歧化酶活性缺氧缺血后6,24,48h均明显高于缺氧缺血性脑损伤 生理盐水组,差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01),与假手术组接近。②假手术组脑组织中丙二醛含量为(2.45±0.87)μmol/g’缺氧缺血性脑损伤 生理盐水组缺氧缺血后6h丙二醛含量开始升高,24h升至最高,与假手术对照组比较差异均有显著性(P<0.05或P<0.01),48h后逐渐恢复后仍高于假手术组的水平,但差异无显著性(P>0.05);缺氧缺血性脑损伤 雄激素组缺氧缺血性脑损伤后6,24h脑组织中丙二醛含量均明显低于缺氧缺血性脑损伤 生理盐水对照组,差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);48h后丙二醛含量仍低于生理盐水组,但差异无显著性(P>0.05)。结论:雄激素可能通过减少抗氧化剂的消耗和抑制氧自由基的生成以减轻新生鼠缺氧缺血后神经细胞的损伤。     

Ca^2＋-钙调蛋白在M3R介导逼尿肌细胞收缩中的作用

背景：毒蕈碱受体在调节逼尿肌细胞收缩过程中起重要作用，其受体亚型M3R直接介导逼尿肌细胞收缩。Ca^2＋是刺激逼尿肌细胞收缩的直接因素，Ca^2＋有数十种受体结合蛋白质，Ca^2＋通过与不同受体蛋白结合调节不同反应。 目的：探讨Ca^2＋-钙调蛋白在M3R介导逼尿肌细胞收缩中的作用。 设计：以逼尿肌细胞为观察对象，对比观察。 单位：解放军第三军医大学西南医院泌尿中心。 材料：实验在重庆西南医院中心实验室完成，实验动物选择健康雌性Wistar大鼠。 方法：将原代培养逼尿肌细胞分为实验组和对照组，接种于6孔培养板上培养，实验组培养细胞70％融合时加入1&;#215;10^-4mmol／L卡巴胆碱和毒蕈碱受体亚型M2R拮抗剂，分别阻断M3R、M2R，采用Ca^2＋浓度和钙调蛋白活性检测试剂盒分别测定两组逼尿肌细胞Ca^2＋浓度和钙调蛋白活性。 主要观察指标：两组细胞内[Ca^2＋]i浓度、钙调蛋白活性变化。 结果：实验组的[Ca^2＋]i和钙调蛋白的平均通道荧光对数值高于对照组（3．26&;#177;0．38，2．06&;#177;0.12，P〈0．01）；（2．87&;#177;0.34，2．14&;#177;0．24，P〈0．05）。 结论：实验结果提示Ca^2＋-钙调蛋白以信号传导途径参与了M3R介导逼尿肌细胞收缩的调节过程。