染矽尘大鼠血浆一氧化氮、一氧化氮合酶的变化

目的　探讨染矽尘不同时点大鼠血浆NO (一氧化氮 )、NOS (一氧化氮合酶 )的变化。方法　采用析因分析的研究设计进行实验 ;气管注射染尘方法建立动物模型 ;称量法测定脏器系数 ;硝酸还原酶法测定血浆NO水平 ;NOS催化L Arg法测定血浆NOS活性。结果　在染尘后第 30天时 ,实验组血浆NO水平高于对照组 (P <0 0 5) ,其他时点差异没有显著性 ,但有升高趋势 ;在染尘后第 2 1、 30、 60天时 ,实验组血浆NOS活力显著低于对照组。控制时间因素进行偏相关分析结果显示实验组血浆NO水平和血浆NOS活力为负相关 (r=- 0 367,P =0 0 2 8)。结论　矽尘可导致大鼠血浆NO水平升高和血浆NOS活力的降低     

染矽尘大鼠肺组织匀浆一氧化氮含量、一氧化氮合酶活力的研究

研究表明,当暴露于矽尘等炎性刺激物作用时,肺泡巨噬细胞和肺中性粒细胞一氧化氮(nitricoxide,NO)生成增加,并上调诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide,iNOS)基因表达。但是,有研究认为矽尘并不能够直接增加培养的肺泡巨噬细胞产生NO;还有研究认为NO可能是肺纤维性结节形成的调节因子。这些研究提示NO及NOS的变化与矽尘对肺的作用有关。本研究测定了染尘后不同处理时点肺匀浆NO含量和NOS活力,并进行相关分析,以期能有助于解释矽尘对肺的作用。     

中枢神经系统中一氧化氮和一氧化氮合酶研究进展

近５年来,一氧化氮是一氧化氮合酶在生物医学领域内的研究方兴未艾。其广泛而重要的生理及病理作用得到日益推陈出新的认识。本综述了中枢神经系统中一氧化氮的生物不性质,生理作用,病理作用及机制,一氧化氮合酶的分型及其特性以及一氧化氮和一氧化氮合酶的常用检测方法等方面的研究进展。     

一氧化氮合酶／一氧化氮与月经周期

一氧化氮合酶(NOS)催化精氨酸生成一氧化氮(NO)，NO是一高活性自由基，参与体内多种生理和病理过程。NOS在子宫内膜的表达水平随月经周期变化。NO在子宫内膜局部通过改变血管活性、诱导细胞凋亡参与月经的调控。     

锌对慢性染铅大鼠海马一氧化氮合酶活力和神经元型一氧化氮合酶蛋白及基因表达的影响

微量元素锌 (Zn)在作为学习记忆功能的主要中枢结构海马中具有重要的生物学功能 ,能增强一氧化氮合酶 (NOS)活力[1] 。铅 (Pb)是环境中广泛存在的强神经毒物 ,可引起接触者学习记忆能力的缺陷。铅和锌都是二价金属离子 ,在机体的各部位都是相互影响、相互作用的 ,铅可能在海马中与锌竞争或替换锌或干扰锌的神经生理作用而干扰海马功能 ,引起认知功能障碍[2 ] 。我们在前期实验[3 ] 的基础上 ,通过观测补充ZnSO4对染铅 (PbAc)大鼠海马NOS活力、神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)蛋白和基因表达的影响 ,进一步研究大鼠慢性染铅时铅对学习记…     

急性光气吸入对大鼠抗氧化酶及一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的　研究光气急性吸入对机体抗氧化酶活力以及一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法　利用三光气在N ,N 二甲基甲酰胺作用下分解生成光气的方法 ,设对照组采用SD大鼠进行动态恒量染毒 ,2h后处死实验动物 ,取肺组织测定湿干比 ,取全血、血清和肝组织分别测定谷胱甘肽硫转移酶 (GST)、过氧化氢酶 (CAT)、超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、NO、NOS活力和总蛋白含量。结果　染毒组实验动物的肺湿干比明显大于对照组 ,差异有显著性(P <0 .0 1) ,血清和肝组织匀浆的GST活力明显升高 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,血清和肝组织中SOD、全血CAT以及全血、血清、肝组织GSH Px活力明显提高 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,血清和肝组织匀浆NO含量明显降低 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,NOS活力明显升高 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　大鼠光气急性吸入可以明显改变机体抗氧化酶系的活力 ,并且存在着一定程度的急性肝损伤 ,而这种损伤与活性氧密切相关 ,但多种抗氧化酶活力的升高却提示抗氧化治疗非光气急性中毒救治的首选。     

染矽尘大鼠肺匀浆、血浆一氧化氮、一氧化氮合酶的关系

目的：探讨染矽尘大鼠肺匀浆一氧化氮（NO）水平，一氧化氮合酶（NOS）活力与血浆NO水平，NOS活力变化的关系，方法：采用析因设计进行实验，采用气管注射染矽尘（40mg/只）方法建立动物模型；采用硝酸还原酶法测定血浆、肺组织匀浆NO水平，采用NOS催化L－Arg法测定血浆，肺匀浆NOS活力；采用SPSS 8．0和SAS6．12统计分析软件进行数据分析。结果：实验组动物肺匀浆NO水平与血浆NO水平，血浆NOS活力分别有正（r=0.3972,P=0.016)和负相关关系（r=-0.4204,P=0.011)；实验组动物肺匀浆NOS活力与血浆NO水平，血浆NOS活力之间相关关系不显著（P＞0．05），结论：矽尘可能导致血浆NO水平、NOS活力和肺匀浆NO水平，NOS活力变化，他们之间可能存在相关关系，提示矽尘所致血浆NO水平，NOS活力和肺浆浆NO水平，NOS活力变化有不同的机制。     

铅对大鼠海马一氧化氮合酶活力及表达的影响

目的 通过研究铅对大鼠海马一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活力及表达的影响。分析海马不同亚区ＮＯＳ活力变化与铅对海马长时程增强（ＬＴＰ）影响的关系。方法 Ｗｉｓｔａｒ大鼠采用饮水加２０、２００、２０００μｇ／ｍｌ醋酸铅（ＰｂＡｃ）方法染毒３个月后,用Ｙ－迷宫法测试大鼠神经行为的改变;用原子吸收法测定血液与海马中铅的含量;用ＮＡＤＰＨ－黄递酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组化法和免疫组化法检测海马ＮＯＳ的活力及表达情况。     

铅对大鼠肾脏一氧化氮合酶、一氧化氮影响的研究

目的：探讨慢性染铅过程中大鼠肾脏一氧化氮合酶（NOS），一氧化氮（NO）的变化。方法：Wistar大鼠经饮水加0．0，18．4，184．0mg/L醋酸铅（PbAc)方法染毒，结果：高剂量组大鼠肾脏NOS活力30d后低于对照组（P＜0．05），低剂量染铅组大鼠肾脏NOS活力60d后低于对照组（P＜0．05），低剂量染铅组肾脏NO含量在各时间点上均有降低趋势，但差异无统计学意义（P＞0．05），高剂量组大鼠肾脏NO含量在60d,90d后低于对照组（P＜0．05），结论：铅可导致肾脏NOS活力降低，NO含量降低，可能是铅对肾脏产生细胞毒作用的机制。     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与心血管疾病关系

一氧化氮(nitric oxide,NO)是生物体内重要的信使分子和效应分子,在心血管系统里,NO具有扩张血管、调节血压、抑制血小板聚集、自细胞黏附和抑制血管平滑肌细胞增殖等多种生物学作用.NO由内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)催化左旋精氨酸(L-精氨酸,L-argininine,L-Arg)和分子氧生成,eNOS是其生物合成的关键酶.eNOS基因突变可能影响eNOS蛋白的功能和活性,对NO的生成有重要影响[1-3].本研究对eNOS基因多态性与心血管疾病研究进展综述如下.     

内皮型一氧化氮合成酶基因G894T变异与早发冠心病的关系

目的 探讨内皮型一氧化氮合成酶基因第7外显子G894T变异(Glu298Asp)与早发冠心病之间的关系。方法 以医院为基础的病例对照研究，选择新诊断的冠心病患者为研究对象。男性55岁以前及女性65岁以前患冠心病为早发冠心病。以132例早发冠心病患者为病例组，172例迟发冠心病患者为对照组。运用PCR-限制性片段长度多态性检测G894T变异。结果 G894T变异基因型频率早发冠心病组(TT、GT、GG频率分别为6.06％、20．45%、73．48%)显著高于迟发冠心病组(TT、GT、GG频率分别为1.74％、11.63％，86.63％)(P=0.01)。T等位基因频率早发冠心病组(16．29％)也显著高于迟发冠心病组(7．56%)(P=0.001)，OR=2.38，95％CI：1.38～4.16。在α=0.05显著性水平上，用多元逐步非条件logistic回归调整性别、吸烟、饮酒、超重后，G894T变异对早发冠心病仍具有显著影响(P=0.01)，OR=2.25，95％CI：1.19～4.26。结论 eNOS基因G894T变异可能是早发冠心病发病的重要危险因素之一。     

Chronic ethanol ingestion increases nitric oxide production in the lung.

Chronic ethanol (EtOH) ingestion increases the incidence of acute respiratory distress syndrome. The mechanisms underlying EtOH-induced susceptibility to lung injury continue to be defined. This study examines the hypothesis that EtOH increases endothelial nitric oxide synthase (eNOS) expression and activity in the lungs of a rat model of chronic EtOH ingestion. Male Sprague-Dawley rats were fed liquid diets containing EtOH (36% of calories) or maltose-dextrin as an isocaloric substitution for EtOH (control) for 6 weeks. Selected animals were also treated with the angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitor lisinopril (3 mg/l in diet) for 6 weeks. At study completion, animals were sacrificed, and lung tissue was collected for assays of nitric oxide (NO) metabolism or pulmonary microvascular endothelial cells (MVEC) were isolated for analysis of NO release. Compared to the control diet, chronic EtOH ingestion increased lung H2O2 production, eNOS expression and activity, lung cyclic guanosine monophosphate (cGMP) content, and levels of protein nitration and oxidation. MVEC from animals with chronic EtOH ingestion released greater amounts of NO. EtOH-induced increases in lung H2O2 production, eNOS expression and activity, cGMP content, protein nitration and oxidation, and MVEC NO production were all attenuated by treatment with lisinopril. Chronic EtOH ingestion stimulates ACE-dependent increases in NO production in the lung. These novel findings indicate that chronic EtOH ingestion increases reactive species production in the lung parenchyma and provide new insights into mechanisms by which EtOH causes phenotypic alterations in the lung and alters the lung's response to inflammatory stimuli.     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与冠心病关系

目的探讨内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因内含子4可变串联重复序列（VNTR）多态性与早发冠心病的关系。方法以医院为基础的病例对照研究，选择新诊断的冠心病患者为研究对象。男性≤55岁及女性≤65岁患冠心病为早发冠心病，以188例早发冠心病患者为病例组，315例迟发冠心病患者为对照组。应用聚合酶链反应（PCR）技术检测eNOS基因内含子4VNTR多态性。结果eNOS基因内含子4VNTRc／c、c／b、b／b、b／a、a／a基因型频率，早发冠心病组分别为0．53％，0．00％。81．38％，16．49％，1．60％；迟发冠心病组分别是0．00％。0．32％，77．46％，20．32％，1．90％。c／c＋c／b＋b／b与b／a＋a／a基因型在2组之间分布差异无统计学意义（P=0．268，OR=1．294，95％CI=0．8202．043）。c、b、a等位基因频率。早发冠心病组分别是0．53％。89．63％，9．84％；迟发冠心病组分别是0．16％。87．78％。12．06％。c＋b与a的等位基因频率在2组间分布差异无统计学意义（P=0．280，OR=1.257,95％CI=0．8301．904）。在n=0．05显著性水平上，用多元逐步非条件Logistic回归分析调整性别、吸烟、饮酒、收缩压、体质指数、腰臀比、甘油三酯和总胆固醇后，eNOS基因内含子4VNTR多态性与早发冠心病也无显著相关（P=0．427。OR=0．819，95％CI=0．500-1．341）。结论eNOS基因内含子4VNTR多态性可能不是早发冠心病发病的危险因素。     

三氯乙烯对人角质形成细胞一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的研究三氯乙烯(TCE)对体外培养的人角质形成细胞(KC)一氧化氮(NO)合成和一氧化氮合酶(NOS)表达及活力的影响,探讨TCE的皮肤细胞毒性机制。方法无血清培养的正常人KC与0.125、0.25、0.5、1.0、2.0mmol/L的TCE共培养4h,分别于染毒后12、24、48、72h测定培养液中NO含量和NOS活力,分析其时间—剂量—效应关系,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测诱导型NOS(iNOS)mRNA的表达情况。结果低剂量组(0.125和0.25mmol/L)NO含量与iNOS活力在染毒后各时点与对照组相比均无差异;0.5mmol/L组NO含量与iNOS活力均在染毒后48h开始升高,分别为(32.19±4.75)μmol/L[对照组:(23.70±3.11)μmol/L,P<0.05]和(1.15±0.02)×103U/L[对照组:(0.77±0.06)×103U/L,P<0.05],随着染毒浓度的升高,0.5～2.0mmol/L组NO量与iNOS活力呈上升趋势,而且上升出现的时间提前,1.0和2.0mmol/L组分别于染毒后24和12h出现升高;NO释放的增加总是与iNOS活力升高一致,而结构型NOS(cNOS)活力在各剂量组的各时点均无变化;RT-PCR结果显示TCE可以诱导iNOSmRNA转录水平增高。结论TCE可以诱导人角质形成细胞NO合成增加,大量产生的NO与iNOS基因的上调有关,这一机制可能参与了TCE的皮肤细胞毒性。     

宫内缺血缺氧后胎鼠脑NO含量和NOS活性的变化及山莨菪碱干预的影响

目的:探讨孕鼠子宫胎盘缺血后胎鼠脑组织中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性的变化及山莨菪碱(654-2)对其的影响。方法:利用子宫动脉钳夹法对妊娠第17天孕鼠实施单侧子宫动脉缺血手术,制成孕鼠子宫动脉缺血模型。缺血组孕鼠的另一侧子宫动脉不钳夹,相应为正常对照组。将孕鼠随机分为654-2治疗组和非654-2治疗组。对654-2治疗组,自取下血管夹后24 h(即妊娠第18天)始,每间隔24 h向其腹腔内注射654-2(1 mg/kg.d),连续注射3天;非654-2治疗组不作注射。于妊娠第21天,对所有孕鼠行剖宫产术,所获胎鼠迅速断头处死。测定胎鼠脑组织中NO含量和NOS活性。结果:①缺血组胎鼠脑NO、NOS均显著高于正常组的测定值(P<0.01);②对于正常组,654-2宫内干预与否,胎鼠脑NO、NOS的测定值无显著差别(P>0.05);③对于缺血组,654-2宫内干预胎鼠脑NO、NOS均显著低于654-2宫内未干预者(P<0.05)。结论:宫内缺血缺氧后胎鼠脑组织NO含量和NOS活性显著增高,NO和NOS可能是H IE病理机制中的一个重要因素。山莨菪碱对于宫内缺氧缺血性脑损伤具有保护作用。     

线粒体一氧化氮合酶与炎症及败血症休克

一氧化氮(NO)和其他细胞因子是炎症和败血症休克中重要的细胞内信使和分子标志物。重症炎症可引发败血症休克,损害组织线粒体。败血症休克分子机制之一就是由于线粒体一氧化氮合酶(mtNOS)持续催化NO生成,导致过量过氧化亚硝酸阴离子(ONOO_)产生,使线粒体功能异常,肌肉收缩功能减弱。在炎症和败血症休克过程中脏器的化学发光(其发射光在440~600nm)与自发光不同,很可能由于NO和ONOO_与其他化学物质反应,形成自由基时所激发的。因此,用表面化学发光法监测原位炎症和氧化应激,是非常客观的指标。     

铅暴露对生长发育期大鼠不同脑区一氧化氮合酶活力的影响

目的　观察低水平铅暴露对生长发育期大鼠不同脑区一氧化氮合酶 (NOS)活力的影响。方法　SD大鼠经饮含 0 .0 2 5 %、0 .0 5 0 %、0 .0 75 %醋酸铅水方法染毒 ,建立生长发育期低水平铅中毒的大鼠模型 ,应用荧光测定法测定大鼠海马、小脑、大脑皮层、脑干的NOS活力。结果　出生 2 1d ,3组铅暴露组海马、小脑NOS活力 [海马 :(1.5 3± 0 .2 0 )、(1.6 6± 0 .2 3)、(1.88± 0 .32 )U mgpro ,小脑 :(0 .87± 0 .2 4 )、(0 .85± 0 .0 9)、(0 .91± 0 .18)U mgpro]明显低于对照组 [海马 :(2 .36± 0 .18)、小脑 (1.4 1± 0 .18)U mgpro](海马F =14 .4 15 ;小脑F =7.933,均P <0 .0 1) ;出生 7、14、2 1d ,0 .0 75 %醋酸铅组大鼠大脑皮层NOS活力 [7d :(1.2 9± 0 .14 )、14d :(1.0 3± 0 .15 )、2 1d :(0 .6 9± 0 .10 )U mgpro]明显低于对照组 [7d :(2 .5 4± 0 .31)、14d :(1.6 4± 0 .2 2 )、2 1d :(1.2 4± 0 .14 )U mgpro],0 .0 2 5 %组 [7d :(2 .4 2±0 .19)、14d :(1.5 9± 0 .17)、2 1d :(1.2 7± 0 .12 )U mgpro],0 .0 5 0 %组 [7d :(2 .5 6± 0 .5 3)、14d :(1.77±0 .19)、2 1d :(1.2 4± 0 .10 )U mgpro](F =4 2 .6 30 ,P <0 .0 5 ) ,对照组、0 .0 2 5 %组、0 .0 5 0 %组之间两两比较 ,差异无显著性     

妊高征患者胎盘组织中NOSTRIN表达的研究

目的:观察内皮型一氧化氮合酶运输介导物(endothelial n itric oxide synthase traffic inducer,NOSTR IN)在妊高征(pregnancy induced hypertension syndrom e,PIH)患者胎盘组织中的表达,探讨其在血管病变中的作用。方法:HE染色观察胎盘绒毛血管病变;硝酸还原酶法测定胎盘组织中的NO代谢产物亚硝酸基/亚硝基(NO2ˉ/NO3ˉ);分光光度法测定胎盘组织中eNOS的活性;W estern b lot检测胎盘血管组织中NOSTR IN蛋白质的表达。结果:HE染色可见PIH组胎盘细小血管壁增厚,管壁纤维素样坏死发生率显著高于对照组(P<0.01);PIH组孕妇胎盘组织中的NO2ˉ/NO3ˉ为(27.53±7.48)μmol/mg,与对照组(54.27±9.53)μmol/mg比较显著降低(P<0.01);PH I组患者胎盘组织eNOS活性(12.826±3.61)U/mg与对照组(21.720±3.83)U/mg比较显著降低(P<0.01);W estern b lot显示,两组胎盘组织中均有58kDa的NOSTR IN蛋白质表达,但PIH组表达量明显增高(P<0.01)。PIH组胎盘组织中NOSTR IN表达水平与eNOS活性呈负相关(r=-0.58,P<0.01)。结论:NOS-TR IN表达增加参与了妊高征患者胎盘绒毛血管的病变过程。