血小板保存期间释放潜在的免疫调节因子

背景血小板与止血和炎症过程有关,近期的研究已证实血小板促进免疫和炎症主要通过CD40／CD40L途径。本文的目的是研究浓缩血小板在保存期间细胞活素物的聚集。研究设计与方法从血浆分离制备混合浓缩血小板,再悬浮于临床使用级介质中保存;于保存的0,1,2,3和5天时取样分析,无补充(即无可溶蛋白稀释)。用特异的酶联免疫吸附法测定白细胞介素(IL)-6、IL-8、血小板衍生的生长因子(PDGF)-AA、可溶的CD40配体(sCD40L)、RANTES和转化生长因子-β的产生。结     

一次性采血5联袋在手工制备浓缩血小板中的应用

用白膜回浆法生产制备手工浓缩血小板时[1],常常是利用常规分离系统即一次性采血3联袋用无菌接口机连续接口转移袋2次.由于需连续接口转移袋2次,使分离白膜后用血浆管路中的白膜冲回白膜袋难以实现;再者转移袋的管带长,常使白膜层附着于管壁,导致血小板回收率不够高.为此,我们开发了改进分离系统即1次性采血5联袋手工制备浓缩血小板,大大提高了血小板回收率,现报告如下.     

浓缩血小板血浆对造血干细胞增殖分化作用的研究

目的观察浓缩血小板血浆对外周血造血干细胞增殖分化的作用。方法使用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞后进行培养;按在IMDM培养液中加入血浆的不同分为3组:浓缩血小板保存0d(A组)和5d血浆组(C组)、单采血小板保存5d血浆组(B组);A、B、C组在培养的1、3、7d时取细胞进行瑞氏染色观察细胞形态,流式细胞术检测CD41+、CD61+细胞的增殖情况,C组在培养0、23h时流式细胞术检测CD34+CD38+、CD34+CD38-的增殖情况。结果浓缩血小板保存5d血浆组(C组)培养23h后CD34+CD38-、CD34+CD38+细胞分别扩增了3.12±1.45倍、0.98±0.45倍;浓缩血小板保存0d血浆组(A组)、单采血小板保存5d血浆组(B组)和浓缩血小板保存5d血浆组(C组)培养3d后CD41+细胞分别扩增了1.16±0.36倍、1.28±0.67倍和18.72±3.73倍;CD61+细胞分别扩增了1.67±0.55倍、4.01±1.43倍和19.32±4.32倍。结论浓缩血小板保存5d的血浆具有促进造血干细胞快速增殖的作用,并能在体外诱导巨核系细胞的分化。     

不同方式放置白膜制备浓缩血小板质量指标比较

目的探讨全血分离白膜静置2h后,血小板恒温保存箱振荡过夜保存白膜袋及静置室温过夜保存白膜袋,对制备浓缩血小板回收率及血小板质量指标的影响。方法对124份400mL新鲜全血进行容量检测和血常规计数,随机选取其中53份当日分离白膜静置2h后置血小板恒温保存箱振荡过夜保存为实验组,剩余71份当日分离白膜后静置室温过夜保存为对照组,两组白膜于次日制备浓缩血小板。然后对两组浓缩血小板进行p H、葡萄糖、血小板聚集率及血小板低渗休克反应相对变化率(HSR)的测定。结果白膜振荡过夜保存和静止过夜保存后制备的浓缩血小板计数分别为(7.23±2.21)×10~(10)和(7.17±2.08)×10~(10),实验组高于对照组,差异无统计学意义。但是血小板回收率则是实验组为68.69%±19.21%,高于对照组血小板回收率62.07%±11.37%,差异有统计学意义。实验组和对照组制备的浓缩血小板pH值分别为7.23±0.08和7.12±0.14,GLU(mmol/L)分别为20.57±1.26和19.32±1.41,血小板聚集率分别为92.65%±3.02%和88.82%±3.43%,差异均无统计学意义。实验组浓缩血小板HSR为81.50%±8.57%,明显高于对照组浓缩血小板74.30%±11.55%,差异有统计学意义。结论两种方式放置白膜袋所制备的浓缩血小板,检测指标均符合国家质量标准,但血小板回收率和体外功能检测指标HSR显示白膜静置后振荡过夜方式制备的浓缩血小板可能更具有优势。     

六联采血袋制备浓缩血小板制剂的质量分析

目的比较2种采血袋制备手工浓缩血小板制剂的质量。方法分别用四联采血袋和六联采血袋各采集400 mL全血30袋,白膜法制备浓缩血小板,并评价血小板质量相关指标。结果六联袋制备的浓缩血小板质量:容积为(37.97±5.70)mL/2 U、Plt计数为(8.06±1.41)×1010个/2 U、RBC混入量为(2.64±0.83)×109个/2U,其他多项生化指标均较四联袋略好;四联袋所制浓缩血小板的质量:体积为(45.60±4.32)mL/2 U,Plt计数为(5.63±2.04)×1010个/2 U,RBC混入量为(4.73±2.37)×109个/2 U,2组相比差异具统计学意义(P<0.05)。结论六联袋制备手工浓缩血小板质量优于现有四联袋分离系统,值得推广应用。     

国产塑料联袋的质量与应用观察

本文介绍了国产塑料联袋的质量及临床使用效果,并与澳大利亚同类产品进行了对比。国产塑料袋对离心力的耐受性能、抗凝剂和添加液的质量以及塑料袋的膜透气性等,均与澳大利亚土塔公司的产品质量相同,但在制备工艺上劣于澳大利亚袋。用国产塑料袋制备的血液成分提高了质量,己达到澳大利亚及美国 AABB 的标准。全血和浓缩红细胞在4℃可保存35天;浓缩血小板每袋血小板数量可达到5.5×10~(10)以上(从400ml 血分离),在22±2℃水平振荡可保存3天;冷沉淀中因子Ⅷ的活性每袋可达100iu 以上,临床输血安全有效,无不良反应。     

冰冻保存血小板再浓缩及临床应用

国内外就血小板冰冻保存的方法已进行了较多的研究 ,目前较典型的方法有 3类 :一是在富血小板血浆中加入终浓度为 4%的二甲基亚砜 ( DM-SO) ,- 80℃冻存 [1,2 ] 。二是先制备成浓缩血小板 ,再加入终浓度 4%～ 6%的 DMSO,- 80℃冻存 [3 ,4] ;或在浓缩血小板中加入 1 2 %的高浓度保护剂冻存 ,临用时需洗涤血小板[5] 。三是近年来开始应用的冰冻保存机采血小板。保存富血小板血浆 ,由于血浆量大 ,DMSO含量较多 ,对人体有一定副作用 ,限制了临床输注剂量 ,影响临床疗效。而先制成浓缩血小板后加 DMSO冻存的方法 ,由于高浓度的 DMSO在加…     

保存液保存高浓度血小板的产率和体外质量

与血浆保存的浓缩血小板（PC）相比，血小板保存液（PAS）保存的PC具有的优点是减少了血浆含量，从而减少过敏和发热输血反应，适合ABO血型不相配的血小板输注，使更多的血浆可用于蛋白分离。近米，病原体灭活的可能性更增加了使用PAS保存PC的兴趣，因为PC中血浆含量少，是一些病原体灭活方法的先决条件。     

室温静置对制备血小板方法的影响

目的探讨采用白膜法制备浓缩血小板,将全血分离后的白膜室温静置2 h后,对浓缩血小板回收率的影响。方法对60份室温保存和运输的新鲜全血200 mL采集后6 h内,进行容量检测和血小板计数,随机选取其中30袋分离白膜后室温静置2 h后分离血小板为静置组,剩余30份分离白膜后立即离心分离血小板为对照组。然后对两2浓缩血小板进行计数测定血小板回收率。结果静置组和对照组的浓缩血小板回收率分别为53.59%和40.66%,静置组明显高于对照组(P0.05)。结论 2种方法所制备的浓缩血小板,检测指标均符合国家质量标准,但静置2 h后分离白膜方法制备的浓缩血小板回收率更高。     

保存液保存高浓度血小板的产率和体外质量

与血浆保存的浓缩血小板(PC)相比,血小板保存液(PAS)保存的PC具有的优点是减少了血浆含量,从而减少过敏和发热输血反应,适合ABO血型不相配的血小板输注,使更多的血浆可用于蛋白分离.近来,病原体灭活的可能性更增加了使用PAS保存PC的兴趣,因为PC中血浆含量少,是一些病原体灭活方法的先决条件.     

γ-射线辐照对保存期浓缩血小板质量的影响

[目的]研究不同剂量的-射线辐照在保存期内对浓缩血小板质量的影响。[方法]将每袋浓缩血小板分为3组,将其中两组标本分别用35Gy、70Gy辐照（Biobeam8000辐照仪）另一组标本作为对照组。在辐照的第1、5（保存期末）天分别检测浓缩血小板的pH值、葡萄糖、乳酸、乳酸脱氢酶（LDH）、乳酸脱氢酶溢出率。[结果]辐照组与对照组各项代谢指标在辐照后第1天和第5天均无显著性差异（P〉0．05）;保存过程中,各组葡萄糖逐渐消耗,乳酸不断产生,pH值随之下降,乳酸脱氢酶溢出增多,乳酸脱氢酶的溢出率逐渐增高。[结论]在保存期内,70Gy的辐照剂量对浓缩血小板制品的质量无显著性影响,与普通血小板制品相同。     

四种血小板制品滤除白细胞效果的实验研究

目的观察过滤对血小板的影响,遴选适于过滤的血小板制品。方法对机采血小板、手工浓缩血小板和相应的两种冰冻血小板进行过滤,观察血小板回收率、白细胞去除率和血小板聚集率等多项血小板功能指标。结果机采血小板回收率为86．81％,手工浓缩血小板回收率仅为73．08％;两种冰冻血小板制品损失量达60%～70％;过滤后机采血小板达到去白细胞标准,而手工血小板未达到去白细胞标准;过滤对液态保存血小板制品的功能无明显影响,但手工浓缩血小板功能低于机采血小板。结论冰冻保存的血小板制品不适于去白细胞过滤;手工浓缩血小板制备工艺尚需进一步改进和提高,并研制与之相适应的去白细胞滤器;机采血小板质董拔好．国产滤器可达到去白细胞标准．是当前适于滤除白细胞的血小板制品。     

全血采集后即时制备与贮存过夜后制备的浓缩血小板质量比较

目的评价不同储存模式制备的浓缩血小板的质量。方法 2018年7—8月随机抽取60名献血者,分别采用六联采血袋采集全血400 mL/人(袋),均分为即时(制备)组:采集的全血置22℃保存和运输,并于采血后6 h分离制备浓缩血小板;过夜(制备)组:采集的全血于22℃保存、运输并过夜贮存,采血后24 h分离制备去白悬浮红细胞及浓缩血小板;2组均采用白膜法制备浓缩血小板。取2组浓缩血小板的标本作细菌培养及血细胞计数,比较血小板含量、容量及混入红细胞、白细胞的量。同时比较2组血小板代谢及功能性指标:血小板聚集率(%)、HSR、CD62p阳性表达率以及pH值。结果对即时组和过夜组的60袋浓缩血小板的标本进行细菌培养,结果显示:需氧菌与厌氧菌均为阴性,均无细菌生长。即时组和过夜组2组浓缩血小板质量控制项目结果,均符合《全血及成分血质量要求》(GBl8469-2012)的相关规定。2组浓缩血小板的血小板含量及白细胞混入量比较,差异无统计学意义(P0.05),红细胞混入量和浓缩血小板的容量比较,差异有统计学意义(P0.05)。2组血小板体外功能指标检测结果显示,血小板聚集率、HSR、CD62p表达率及pH值差异均无统计学意义。结论全血即时分离制备与全血过夜分离制备的浓缩血小板功能性指标及活化程度相近,均符合国标要求。结合本站工作实际,采用即时法制备浓缩血小板符合本站的制备状况,我们须充分利用各种设备,确保血液制备的安全、有效。     

离心力对制备浓缩血小板聚集功能的影响

目的探讨离心力对制备浓缩血小板聚集功能的影响。方法使用多联袋ACD-B采集抗凝全血400 m l,以不同的离心力制备浓缩血小板,测定用离心法制备浓缩血小板过程中血小板聚集功能的变化。结果在1000×g 9 m in轻离心组、4650×g 6 m in重离心组、BC-PC法组及对照组的血小板聚集功能,组与组之间比较有显著性差异(P<0.01)。结论通过对离心法制备浓缩血小板过程中血小板聚集功能测定,表明离心力对血小板功能有明显的损害。     

保存期内不同时间制备去白细胞混合浓缩血小板制剂的质量研究

目的探讨浓缩血小板保存期内不同时间制备的去白细胞混合浓缩血小板制剂的质量。方法采用2种时间点制备去白细胞混合浓缩血小板:方法 1为常规制备方法,将采血后24 h内经白膜法制备的5袋同型浓缩血小板汇集后去除白细胞,并在血小板保存箱内振荡保存7 d;方法 2为改良法,将采血后24 h内经白膜法常规制备的浓缩血小板在血小板保存箱内振荡保存,d5将同型5袋浓缩血小板汇集,用一次性白细胞输血过滤器过滤处理,制备成混合浓缩血小板制剂,再在血小板保存箱内保存2 d。2种方式制备的混合浓缩血小板制剂各15袋,检测保存0d,5 d和7 d时血小板含量、红细胞混入量、血小板代谢情况及炎性因子含量等质量指标。结果 2种方法制备的产品质量在常规的保存5 d均可达到国家标准。改良法血小板保存d7与常规法d7比较,细胞因子IL-6(84.80±13.45vs 3.83±0.44)pg/m L,IL-10(67.90±12.02 vs 14.93±2.98)pg/m L,TNF-!(43.17±5.12 vs 7.58±0.71)pg/m L明显升高,差异具统计学意义(P值0.01),其它指标没有明显差异。结论浓缩血小板在制备后5 d内均可再进行汇集成混合浓缩血小板制剂。     

浓缩血小板保存过程中补体含量的变化

浓缩血小板在制备与保存时易造成血小板的活化与损伤。我们对浓缩血小板保存过程中的补体含量进行了测定,探讨补体级联反应的激活在血小板活化中的作用与意义。一、材料和方法１浓缩血小板制备：采用富含血小板血浆（ＰＲＰ）法,于血小板保存箱内保存５天,并于保存前...     

-80℃保存机采浓缩血小板的实验研究

血小板在成分输血中的地位已越来越重要 ,输注比例正逐年显著提高 ,血小板的体外保存也因此成为国内外输血医学的研究热点 [1 ,2 ]。笔者用两年多的时间对 -80℃保存机采浓缩血小板 (以下简称冰冻血小板 )进行了较深入的实验研究 ,比较了不同保存时期冰冻血小板的功能及回收率 ,现将实验结果报告如下。材料与方法1　主要仪器设备　 CS-3 0 0 0 Plus血细胞分离机 ;TYXN-91 A智能血液凝集仪 ;F-82 0血细胞计数仪 ;局部 1 0 0级净化间 ;-80℃深低温冰箱。2　冰冻血小板的制备、保存与解冻　选择符合国家规定体检标准的献血者 ,依照 CS-3 0…     

保存前与保存后过滤减少WBC后的混合浓缩血小板的质量

背景 因白细胞对输血者有不良作用而一般都应用少白细胞浓缩血小板,但保存前与保存后去除白细胞对血小板制剂质量的影响尚不明确。研究设计和方法 使用白细胞滤器(PXL-8,Pall Corp)对保存前、后5天的混合浓缩血小板的进行过滤去除白细胞。从过滤前、后第1、第5天和保存第9天的浓缩血小板中取样,测定细胞计数、生化值、血小板糖蛋白表达,凝血酶生成和IL-6、IL-8、INF-α、转化生长因子-β1(TGF-β1)以及过敏毒素C3a和CAa浓度。结果 新鲜和保存5天的浓缩血     

DMSO冰冻保存对血小板表面CD62表达的影响

随着医疗技术水平的不断提高，浓缩血小板的临床使用量不断增加，为了解决血小板的应急供应，一些采供血单位开展了血小板的冰冻保存工作。为了观察冰冻保存对血小板活化的影响，笔者检测了冰冻保存前后的血小板表面CD62分子表达，现报告如下。     

4℃冷藏保存血小板计数与形态学变化

目的对比分析4℃静置冷藏保存血小板与22℃振荡保存血小板在不同保存条件下的血小板计数及形态学变化,为研究制定冷藏保存血小板技术提供实验室依据。方法对4℃静置冷藏保存的手工汇集浓缩血小板(实验组)于保存到d1、3、5、7、10、14、21的7个时间点和22℃振荡保存的手工汇集浓缩血小板(对照组)于保存到d1、3、5、7、10的5个时间点进行血样采集,观察对比2组血小板常规计数、瑞斯染色涂片及血小板扫描电子显微镜检测结果。结果 4℃静置冷藏保存手工汇集浓缩血小板21 d内和22℃振荡保存5 d内,血小板计数变化均不明显(P0.05)。22℃振荡保存手工汇集浓缩血小板的MPV和PDW值5 d内组间差异有统计学意义,呈现增大趋势(P0.05),4℃冷藏保存手工汇集浓缩血小板14 d内MPV及PDW无明显变化(P0.05)。瑞斯染色涂片显示,4℃冷藏保存手工汇集浓缩血小板保存到21 d血小板形态、大小变化不明显,血小板胞质致密均匀、着色较深,形态不规则、多数近圆形、大小不等,有少许血小板聚集。22℃振荡保存手工汇集浓缩血小板显示血小板胞质稀松、着色较浅,数量较少。扫描电镜下4℃冷藏保存到10 d时,血小板明显活化、聚集成团,血小板表面凹凸不平,有明显的长伪足形成。而22℃振荡保存到7、10 d时血小板数量较少、有聚集、部分周围出现空晕,形态近圆形,无明显伪足、活化不明显。结论 4℃冷藏保存手工汇集浓缩血小板10-14 d与22℃振荡保存手工汇集浓缩血小板5 d相比,其血小板计数、细胞形态、血小板膜及胞质结构均优于22℃振荡保存。