IL-2、IL-4、GM-CSF对食管癌引流淋巴结细胞生长及分泌细胞因子的影响

目的 探讨不同刺激剂对食管癌肿瘤引流淋巴结(TDLN)细胞生长和分泌细胞因子的影响.方法 术中切取TDLN进行培养,根据培养基中添加刺激剂不同分为三组,A组:添加IL-2;B组:添加IL-2+IL-4+GM-CSF;C组:添加IL-2+IL4+GM-CSF+自身肿瘤细胞抗原(tAg).计数培养第1、7、14、21天的细胞数,采用FCM测定TDLN细胞中CD3+、CD4+、CD8+、CD56+、CD83+细胞的比例,采用ELISA和Griess法测定培养上清液中IL-12、IFN-γ、TNF-а和NO水平.结果 三组间收获细胞数相似(F=1.689,P=0.127),第14天收获细胞数明显多于第7、21天(P<0.001),第7天与第21天相似(P0.05).收获的细胞中,三组CD4+、CD8+、CD83+细胞比例差异显著(P<0.05).三组TNF-а仅水平相近(P=0.302),但在第14天明显高于第7、21天(P<0.05),第7天与第21天时相似(P0.05).三组的IFN-γ、IL-12和NO含量比较,P<0.05.三组的IFN-γ水平在培养第14、21天均明显高于第7天(P相似文献   

食管癌TDLN细胞对食管癌裸鼠移植瘤的体内抑瘤作用

目的探讨肿瘤引流区淋巴结细胞对食管癌裸鼠移植瘤的体内杀伤作用,为其临床应用提供依据。方法将30只食管癌移植瘤裸鼠模型随机分为对照组、IL-2组、LAK组、I-TDLN组及G-TDLN组。分别予生理盐水、IL-2、LAK细胞及体外培养的I-TDLN、G-TDLN细胞局部注射干预。分别于干预后1、2、3、4周测定各组肿瘤抑制率;干预后4周测定各组肿瘤细胞凋亡率;观察肿瘤组织病理学变化。结果 TDLN组各时点肿瘤抑制率均明显高于对照组、IL-2组及LAK组,G-TDLN组高于I-TDLN组（P均〈0.05）,各组肿瘤抑制率均逐渐升高,于第3周达高峰;对照组、IL-2组、LAK组、I-TDLN组、G-TDLN组细胞凋亡率依次升高,P均〈0.05。LAK组及TDLN组肿瘤组织均有T淋巴细胞和DC浸润,但TDLN组明显多于LAK组。结论体外培养的食管癌TDLN细胞在体内可抑制食管癌移植瘤生长,其机制为直接杀伤肿瘤细胞并诱导肿瘤细胞凋亡。本研究为食管癌TDLN细胞用于临床食管癌的细胞免疫治疗提供了理论依据。     

同种异型抗CD3单抗对细胞因子诱导的杀伤细胞体外扩增的影响

目的探讨同种异型抗CD3单克隆抗体（UCHT1、OKT3）对细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）增殖、表型及细胞毒功能的影响。方法分离7位健康志愿者外周血单核细胞,IFN-γ培养24 h后分别加入UCHT1（VCHT1组）、OKT3（OKT3组）及IL-1a、IL-2体外培养,于培养第3、7、10、12、14和21天比较扩增倍数;并选取培养第14天的细胞采用流式细胞仪分析CD3、CD8和CD56分子的表达,比较CIK细胞对K562细胞系的细胞毒作用。结果培养第10、12、14、21天OKT3组扩增倍数显著高于UCHT1组（P均〈0.05）;平均CD3＋CD8＋阳性细胞频数在培养第14天明显高于UCHT1组（P〈0.05）,平均CD5＋6细胞频数UCHT1组高于OKT3组（P〈0.05）;平均CD 3＋CD 5＋6细胞频数UCHT1组也高于OKT3组,但无统计学差异。对K562细胞的细胞毒作用,UCHT1组有高于OKT3组的趋势（当效靶比为20∶1时,P=0.078）。结论在保证细胞扩增倍数的情况下,选择UCHT1更适用于体外扩增CIK细胞。     

自体DC体外增强结肠腺癌患者TDLN细胞的抗肿瘤活性

目的:探讨自体树突状细胞(DC)体外对结肠腺癌患者肿瘤引流区淋巴结(TDLN)细胞抗肿瘤活性的增强作用．方法:分离肿瘤患者的外周血单个核细胞 (PBMC)经IL-4,GM-CSF和TNF-α诱导其成熟,并以自体肿瘤冻融抗原预致敏,诱导其中的DC．另外,分离结肠癌患者的TDLN细胞, 在含有IL-2的培养体系中培养,并将TDLN 细胞分为3组:第1组为肿瘤抗原致敏的DC加 TDLN细胞(DC组);第2组冻融的肿瘤抗原加 TDLN细胞(Ag组);第3组不加DC及肿瘤抗原作为对照组(L组)．比较3组TDLN细胞对结肠腺癌细胞系LS174T和黑色素瘤细胞系A375的杀伤作用．结果:DC组对LS174T细胞系的杀伤作用明显优于Ag组与L组(效靶比为20:1时,56．13％±7．33％ vs 42．46％±7．68％,33．50％±7．00％, P<0．001:效靶比为10:1时,44．85％±6．50％ vs 30．50％±9．17％,26．75％±8．88％,P<0．001); 而对A375细胞,各组细胞的杀伤作用没有明显差异．结论:自体DC可明显增强结肠癌患者TDLN 细胞的杀伤作用．     

MUC1/CD3 BsAb介导的LAK细胞对MCF-7细胞的体外杀伤作用

目的观察MUC1／CD3双特异性抗体（BsAb）介导下淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK细胞）对过度表达MUC1基因的乳腺癌MCF-7细胞株的杀伤作用。方法化学耦连法制备MUC1／CD3双特异性抗体（BsAb）。显微镜下计数A组（BsAb＋MCF-7＋LAK）、B组（a—CD3＋MCF-7＋LAK）、C组（a—MUC1＋MCF-7＋LAK）、D组（a—CD3＋a—MUC1＋MCF-7＋LAK）及E组（RPMIl640培养基＋MCF-7＋LAK）LAK—MCF-7细胞数目,并计算LAK细胞与MCF-7细胞的结合率。MTT法检测各组LAK细胞对MCF-7细胞的杀伤率。结果A组MCF-7细胞和LAK细胞的结合率及LAK细胞对MCF-7细胞的杀伤率均明显高于B、C、D、E组（P均〈0．05）。结论MUC1／CD3BsAb能显著提高LAK细胞与乳腺癌MCF-7细胞的结合率,并显著提高LAK细胞对乳腺癌MCF-7细胞的杀伤率。     

Flt3L刺激体外培养小鼠骨髓源CD8α＋树突状细胞及其成熟状态分析

目的建立体外快速制备大量具有免疫活性的小鼠骨髓来源不成熟CD8α＋DCs方法。方法实验分2组。Fh3L组：将小鼠骨髓前体细胞用含终浓度为100ng／mlFlt3L的BMDC培养基混悬后接种于细胞培养皿中,每平皿10ml,37C培养至第7d收集细胞;GM-CSF＋IL4组：将骨髓前体细胞用含终浓度为20ng／mlGM-CSF、5ng／mlIL-4的BMDC培养基混悬后接种于细胞培养皿中,每平皿10ml,分别于37℃培养第3d和第5d半量换液,培养第7d收集细胞,采用磁选法分离CD11c＋ BMDCs,用流式细胞仪检测。结果Flt3L刺激组CD11c＋ BMDCs得率为（95．07±0．09）％,GM-CSF＋IL-4刺激组为（83．97±0．43）％,差异有统计学意义（P〈0．01）。Flt3L刺激组CD11c＋ CD8α＋BMDCs得率为（9．83±0．33）％,GM-CSF＋IL-4刺激组刺激组为（4．06±0．17）％,差异有统计学意义（P〈0．01）。Flt3L刺激组CD11c＋ CD8α＋ BMDCs表面几乎不表达CD40、CD80、CD86,仅低表达MHCI、MHCII,处于未成熟阶段。结论采用Fh3L刺激小鼠骨髓前体细胞的方法可获得大量未成熟的CD11c＋ CD8α＋ BMDCs,方法简单,得率较高,为开展CD8α＋DCs相关基础和临床研究奠定了基础。     

IL－2／抗IL－2抗体复合物体外诱导扩增外周血CD56^＋淋巴细胞的实验研究

目的探索一种在体外从人外周血单个核细胞（PBMC）扩增CD56^＋淋巴细胞的方法。方法以干细胞培养基（SCGM）为基础培养基,设计IL-2／抗IL-2抗体（IL-2／抗IL-2抗体质量比为1／20）实验组以及IL-2＋IL-15、相应因子浓度的IL-2和抗IL-2抗体三个对照组,从PBMC中诱导扩增CD56^＋淋巴细胞,流式细胞仪检测第7、10天CD3／CD56表达率,四甲基偶氮唑蓝法检测CD56^＋细胞对肿瘤细胞株K562的杀伤活性。结果培养第7、10天时,CD56^＋细胞分别扩增了（24．67±3．14）和（31．63±5．01）倍,其中CD3^＋CD56^＋和CD3^-CD56^＋细胞分别扩增（110．93±19．10）、（7．8±1．17）和（157．60±46．31）、（12．03±1．64）倍,实验组与对照组比较扩增倍数差别有统计学意义（P〈0．05）。培养第10天,效／靶比10：1时,实验组CD56^＋细胞对K562细胞的杀伤率为（83．46±1．56）％,与对照组比较具有更强细胞毒性作用（P〈0．05）。结论在SCGM为基础培养基条件下,IL-2／抗IL-2抗体复合物能更有效地扩增CD56^＋细胞毒性免疫效应细胞,为肿瘤过继免疫治疗提供了一种扩增外周血CD56^＋淋巴细胞的新方法。     

食管癌引流淋巴结细胞诱导肿瘤细胞凋亡机制探讨

目的 探讨食管癌引流淋巴结(TDLN)细胞诱导肿瘤细胞凋亡的机制.方法 将TDLN细胞分为3组进行培养.TDLN-Ⅰ组培养基中添加IL-2,TDLN-Ⅱ组添加IL-2 + IL-4 +GM-CSF,TDLN-Ⅲ组添加IL-2+IL-4+GM-CSF+自身食管癌细胞抗原(tAg).用术中切取的食管癌组织块建立荷瘤裸鼠模型,随机分为空白对照组、IL-2组、TDLN-Ⅰ组、TDLN-Ⅱ组、TDLN-Ⅲ组,分别给予生理盐水、IL-2及相应TDLN细胞.利用流式细胞术检测瘤细胞凋亡率和Fas、FasL、Bax、Bcl-2、survivin蛋白的表达.结果 对照组、IL-2组、TDLN-Ⅰ组、TDLN-Ⅱ组、TDLN-Ⅲ组肿瘤细胞的凋亡率分别为6.4%±3.1%、11.1%±1.3%、22.0%±2.8%、23.3%±1.9%、33.6%±5.2%,两两比较,P均＜0.05;Fas蛋白的FI值分别为1.38±0.02、1.39±0.09、1.36±0.06、1.34±0.11、1.32±0.05,两组相比,P均＞0.05;FasL蛋白的FI值分别为1.45±0.09、1.49±0.11、1.50±0.15、1.47±0.06、1.49±0.08,两组相比,P均＞0.05;Bax蛋白的FI值分别为1.18±0.08、1.20±0.12、1.48±0.18、1.56±0.08、1.66±0.07.结论 TDLN细胞可能通过影响Bax/Bcl-2和survivin蛋白表达诱导肿瘤细胞凋亡.     

IL-2I、L-21诱导人外周血单个核细胞及其抗肿瘤作用

目的探讨IL-2I、L-21对人外周血单个核细胞（PBMC）的诱导增殖和表型改变的影响及其体外抗瘤作用。方法取PBMC细胞,调整浓度为1×10^6个/ml,分为四组I,L-2组加入IL-2 100 IU/mlI,L-21组加入IL-21 100IU/ml,联合组加入IL-2 50 IU/ml和IL-21 50 IU/ml,对照组加入0.1 ml生理盐水,台盼蓝染色法计数各组活细胞,流式细胞仪检测各组PBMC表型;以上述四组为效应细胞（E）,以对数生长期的4种肿瘤细胞（人胃癌细胞系M85,胃癌细胞系BGC823,结肠癌细胞系HCT116,结直肠腺癌细胞系HCT8）为靶细胞（T）,稀释靶细胞5×10^3个/孔,E∶T为1∶1和2∶1,MTT法测定细胞毒性（杀伤率）。结果联合组活细胞计数高于IL-2组I、L-21组、对照组,P均〈0.05;联合组I、L-2组和IL-21组CD3^-/CD56^＋、CD3^＋/CD56^＋水平高于对照组,P〈0.05或0.01;联合组对4种肿瘤细胞的杀伤率均高于其余三组I,L-2组I、L-21组高于对照组,P均〈0.05。结论 IL-2联合IL-21的协同刺激作用,可有效地刺激PBMC的增殖和表型改变,对4种消化道肿瘤细胞株均有较强的杀伤力。     

支气管哮喘大鼠CD4^＋CD25^＋T细胞的变化及地塞米松干预作用的研究

目的研究支气管哮喘（简称哮喘）大鼠模型支气管肺泡灌洗液（BALF）、血液、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞的变化,及地塞米松对CD4^＋CD25^＋T细胞的影响。方法50只SD大鼠随机分为5组,空白对照（A）组,哮喘（B）组,地塞米松1（C）组、地塞米松2（D）组,地塞米松3（E）组。A组第1天给予腹腔注射生理盐水1ml,第15～21天每天给予生理盐水雾化。B、C、D、E组用卵蛋白建立哮喘大鼠模型,第1天,每只大鼠腹腔注射抗原1ml（卵蛋白1mg＋灭活百日咳杆菌9×10。个＋氢氧化铝干粉100mg）混悬液,第15～21天给予1％的卵蛋白雾化30min,C、D、E组于雾化后分别给予腹腔注射地塞米松0．2mg／kg、1mg／kg、2mg／kg。采用流式细胞仪检测的方法,观察大鼠体内BALF、外周血、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞的变化及使用不同剂量地塞米松后对其的影响。结果B组BALF、外周血、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞表达占CD4^＋T细胞的百分比分别是（42．21±5．62）％、（12．69±2．70）％、（11．15±1．05）％,A组结果分别是（18．76±5．85）％、（6．21±1．73）％、（7．85±2．13）％。B组与A组比较,差异均具有统计学意义（P〈0．01,P〈0．01,P〈0．05）;C组、D组、E组BALF中CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的百分比表达分别是（10．49±4．03）oA、（13．28±5．12）％、（7．51±5．39）％,显著低于A组和B组,（P〈0．05,P〈0．01）;外周血中,C组（6．03±1．43）％、D组（4．88±0．95）％与A组（6．21±1．73）％比较,差异无统计学意义,E组（3．49士0．62）％与C组、A组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。脾脏中,c组（7．25±1．82）%、D组（8．63±3．18）％与A组（7．85±2．13）％比较,差异无统计学意义,E组（3．38±1．37）％与C组、D组、A组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋T细胞在哮喘大鼠体内有明显的优势表达,可能是哮喘发病的机制之一。地塞米松可以抑制CD4^＋CD25^＋T细胞的表达。BALF内CD4^＋CD25^＋T细胞的变化与外周血和脾脏的变化具有一致性,监测外周血或脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞变化可了解肺部情况。     

急性ITP患儿外周血中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr细胞、IL-7水平变化及意义

目的探讨急性特发性血小板减少性紫癜（AITP）的发病机制。方法选择35例AITP患儿（AITP组）和30例健康查体者（对照组）,用流式细胞仪检测外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T（Tr）细胞数量及占CD4^＋细胞比例,ELISA法检测血浆中IL-7水平。结果AITP组和对照组外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr细胞／CD;细胞分别为0．11±0．04、0．15±0．02,IL-7分别为（2．32±0．53）、（0．44±0．80）pg／ml,P均〈0．05;AITP组外周血IL-7水平与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr细胞／CD;细胞呈负相关（r=0．71,P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr细胞数量减少、IL-7水平升高可能在AITP发病中具有重要作用,机制为降低有效免疫抑制作用,导致自身反应性T细胞激活增多、凋亡减少,促进血小板破坏。     

布鲁杆菌病患者体内T细胞免疫功能研究

目的探讨布鲁杆菌病人体内T淋巴细胞及相关细胞因子的变化。方法用流式细胞术检测外周血单个核细胞中CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞和CD4／CD8比例;用ELISA法检测血清中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-5。结果试验组外周血CD4^＋T细胞和CD4／CD8比例明显高于对照组（P〈0．05）,而CD8^＋T细胞与对照组相比无显著差异（P〉0．05）;试验组血清中IFN-γ和IL-2水平明显高于对照组（P〈0．05）,而IL-4和IL-5水平与对照组相比无显著差异（P〉0．05）。结论布鲁杆菌感染后T细胞免疫主要表现为Th1功能增强,这可能对机体清除病原菌有重要意义。     

日本血吸虫虫源性抗原诱导效应性B细胞分化的研究

目的 目的 观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原 （SEA） 和可溶性成虫抗原 （SWAP） 诱导小鼠效应性B细胞分化情况。方 方 法 法 SEA、 SWAP和脂多糖 （LPS） 分别体外刺激小鼠脾脏单个核细胞和脾脏CD19+ B细胞, 72 h后采用流式细胞术检测 CD19+ IL?6+ 及CD19+ IFN?γ+ 细胞比例; 用酶联免疫吸附试验 （ELISA） 检测抗原刺激后脾脏B细胞培养上清中IL?6和IFN?γ 水平。用SEA、 SWAP、 PBS分别和不完全弗氏佐剂混合免疫小鼠, 每周1次, 共3次, 末次免疫后7 d取小鼠脾脏, 流式细胞 术检测CD19+ IL?6+ 及CD19+ IFN?γ+ 细胞比例, 用ELISA法检测培养上清中IL?6和IFN?γ水平。 结果 结果 SEA与LPS可以体 外诱导脾脏单个核细胞和脾脏B细胞分化为CD19+ IL?6+ B细胞 （F = 5.099, P < 0.05; F = 6.951, P < 0.05）, 并刺激脾脏B细 胞分泌IL?6 （F = 55.184, P < 0.01）; SEA免疫小鼠后, 可以在体内刺激小鼠脾脏B细胞分泌IL?6 （F = 19.244, P < 0.01）, 并诱 导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+ IL?6+ B细胞 （F = 14.904, P < 0.05）。SWAP可以体外诱导脾脏单个核细胞分化为 CD19+ IFN?γ+ B细胞 （F = 3.277, P < 0.05）, 但不能单独诱导脾脏B细胞分化为IFN?γ+ B细胞, 也不能刺激脾脏B细胞分泌 IFN?γ; SWAP免疫小鼠后, 可以在体内刺激小鼠脾脏B细胞分泌IFN?γ （F = 31.886, P < 0.01）, 并诱导其分化为CD19+ IFN? γ+ B细胞 （F = 49.873, P < 0.01）。 结论 结论 日本血吸虫SEA可以优势诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+ IL?6+ B细胞, 而 SWAP可以优势诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19+ IFN?γ+ B细胞, 但依赖于其他免疫细胞的参与。     

慢性HBV感染者CD8^＋ T细胞免疫反应的研究

目的观察不同慢性HBV感染者外周血CD8^＋ T细胞的细胞内毒性颗粒和细胞因子的表达水平。方法用rHBcAg作为刺激剂,采用免疫荧光染色结合流式细胞术分析慢性乙型肝炎中度、重度患者以及无症状HBV携带者外周血CD8^＋ T细胞的IFN-γ/IL-4和穿孔素/颗粒酶B表达水平。结果慢性乙型肝炎重度患者CD8^＋T细胞的穿孔素及颗粒酶B百分率显著高于正常对照（P〈0.01）和HBV携带者（P〈0.05,P〈0.01）,中度患者显著高于正常对照（P〈0.05）。2组慢性乙型肝炎IFN-γ＋/CD8^＋ T细胞（Tc1）百分率均高于正常对照和HBV携带者（P〈0.05）。HBV携带者CD8^＋T细胞的穿孔素和颗粒酶B表达以及Tc1百分率与健康对照差异无统计学意义。IL-4^＋/CD8^＋ T细（Tc2）表达各组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 CD8^＋ T细胞中穿孔素/颗粒酶B表达率的增加以及Tc1细胞增加与慢性HBV感染的肝损伤有关。     

Th17细胞、RORγt在肺纤维化大鼠模型中的表达及意义

目的初步探讨Thl7细胞及其维甲酸受体相关孤儿受体(retinoid-ralated orphan receptorγt,RORγt)在肺纤维化中的作用。方法 64只雄SD大鼠随机分为对照组(N)、肺纤维化模型组(B组)、地塞米松治疗组(D)。采用气管内注入博来霉素致大鼠肺纤维化模型.苏木精-依红(HE)观察肺组织病理形态学变化并测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量;PCR检测肺部RORγtmRNA的表达;流式细胞术计数肺组织CD4+IL-17+Th17细胞;ELISA测血清IL-17水平.结果 (1)B、D组肺组织病理呈现逐渐由肺泡炎至纤维化动态改变过程,B、D组肺组织内HYP含量在不同时间点均高于N组(P<0.05),28 d时数值最高;(2)与N组比较,B、D组在不同时间点肺组织中TH17细胞和RORγtmRNA、血清中IL-17表达均明显增高(P<0.05),以造模7d最为显著。结论 TH17细胞、RORγtmRNA和血清IL-17表达增高在肺纤维化形成过程中起重要作用。     

不同阶段 HBV 相关 ACLF 患者外周血 DC 及T 淋巴细胞免疫功能特点研究

目的：比较不同阶段的 HBV 相关慢加急性（亚急性）肝衰竭（HBV-ACLF）患者外周血树突状细胞（DC）、T淋巴细胞（TC）相关细胞免疫功能,阐述 DC-TC 轴在 HBV-ACLF 发病过程中可能的细胞免疫学机制。方法HBV-ACLF患者30例,分为早期组15例与中晚期组15例,另设健康对照组8例,以外周血来源的 PBMC 体外分离诱导培养 DC 与TC,应用流式细胞计数检测 DC 细胞表型 HLA-DR、CD80、CD86、CD83、CD1α的表达率,及 TC 表面分子 CD3＋、CD4＋ T、CD8＋ T 淋巴细胞百分比,并检测 DC 上清液中 IFN-α、IL-4的分泌水平,比较不同阶段 HBV-ACLF 患者免疫细胞及炎性因子表达的差异。结果与健康人比较,HBV-CLF 患者 DC 表型 HLA-DR、CD1α、CD83、CD80、CD86表达率显著下降（t 值分别为5．3356、13．269、10．8742、13．3685和23．021,均 P ＜0．01）,DC 分泌因子 IFN-α显著升高（t 值为16．4569,P ＜0．01）;TC 表面分子 CD3＋、CD4＋ T、CD4＋／CD8＋细胞比值显著下降（t 值分别为7．4441、12．5557、11．0771,均 P ＜0．01）, CD8＋ T 细胞百分比显著上升（t＝4．4359,P ＜0．01）;HBV-ACLF 患者中晚期组 DC 表型 CD83、CD86表达率显著低于早期组（P 值分别为：0．0000,0．0057）,DC 分泌因子 IFN-α表达在早期组显著增多（P ＝0．0000）,IL-4表达在中晚期组显著增多（P ＝0．0000）,TC 表面分子中晚期组 CD4＋ T 细胞百分比、CD4＋／ CD8＋细 胞 比 值 显 著 下 降 （P 值分别为：0．0268、0．0002）,CD8＋ T 细胞百分比显著上升（P ＝0．0001）。结论不同阶段 HBV-ACLF 患者的 DC、TC 功能状态均表现为细胞免疫功能低下,中晚期患者的细胞免疫功能更为低下;HBV-ACLF 全病程存在促／抑炎性细胞因子功能紊乱,早期患者存在炎症因子过度释放,中晚期患者存在抗炎症细胞因子表达增强。     

糖尿病大鼠高血糖持续时间对细胞免疫功能的影响

目的：探讨糖尿病大鼠的高血糖状态持续时间对大鼠体内细胞免疫功能的影响。方法采用链脲佐菌素注射成功制备糖尿病大鼠模型共20只,随机分为四组,每组5只。 A组：成模后血糖升高4 d皮下注射胰岛素,控制血糖在8～12 mmol/L之间;B组：成模后血糖升高持续8 d皮下注射胰岛素控制血糖;C组：成模后血糖升高持续2周皮下注射胰岛素控制血糖;D组：未控制血糖。以正常血糖大鼠5只为正常对照组。对糖尿病大鼠分别于4 d、8 d、15 d及4周取外周血用流式细胞仪检测CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋及CD4＋CD25＋/CD4＋T淋巴细胞比率,以评价不同高血糖持续状态对正常机体细胞免疫功能的影响。结果（1）与正常对照组相比,A组及B组大鼠4、8、15 d及4周的各项细胞免疫指标无明显变化。（2） C组大鼠在15 d外周血CD4＋比例下降,CD8＋比例升高,CD4＋/CD8＋比值明显下降（ P＜0.05）。经控制血糖后,C组大鼠在4周时外周血CD4＋比例较15 d时明显升高（P＜0.05）,但仍明显低于正常对照组（P＜0.05）。（3）D组大鼠在15 d及4周外周血CD4＋比例下降,CD8＋比例升高,CD4＋/CD8＋比值明显下降（P＜0.05）。（4）各组大鼠各阶段的CD4＋CD25＋/CD4＋T淋巴细胞比值与正常对照组大鼠差异无统计学意义（ P＞0.05）。结论高血糖持续时间超过2周以上即可对大鼠体内细胞免疫功能产生部分影响。在高血糖持续时间超过2周后糖尿病大鼠体内细胞免疫功能明显紊乱,表明长期高血糖可以对糖尿病个体免疫功能产生较大影响。     

树突状细胞增强细胞因子诱导的杀伤细胞抗神经胶质瘤细胞作用及机制研究

目的探讨细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）与树突状细胞（DC）共培养后DC-CIK混合细胞抗神经胶质瘤细胞的免疫作用。方法分离健康人外周血单个核细胞,分别于体外诱导DC和CIK,然后共培养成DC-CIK细胞。实验分DC组、DC-CIK组、DC-T组和CIK组。Elisa试剂盒检测各组培养上清中IL-12和IFN．1的含量,流式细胞仪检测细胞表型,CCK一8法体外检测对神经胶质瘤细胞的杀伤活性。结果DC-CIK组培养上清中IL-12和IFN-1的含量分别为（110．24±2．22）mg／L和INF·Y／（913．46±20．64）mg／L,明显高于其它三组（P〈0．05）。DC—CIK组cDi细胞（61．34-1．31）％、CD3／CD56细胞（29．4±1．03）％也明显增加（P〈0．05）。对神经胶质瘤细胞的杀伤活性,DC—CIK组为（54．67±2．62）％,与DC组（19．44±1．07）％、DC—T组（21．27±1．85）％和CIK组（36．52±2．06）％比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论DC—CIK细胞能诱导明显的神经胶质瘤细胞杀伤活性,为颅内肿瘤的免疫治疗提供了依据。     

心肌梗死患者CD4~+CD25~+Foxp3~+ T细胞检测及意义

目的探讨心肌梗死患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞的水平及意义。方法采用流式细胞分析法,检测20例急性心肌梗死患者(AMI组)、21例陈旧性心肌梗死患者(OMI组)和36例健康体检者(对照组)外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞水平。结果 AMI组、OMI组的CD4+CD25+T细胞/CD4+T细胞比例分别为(7.20±1.96)%和(7.55±1.77)%均低于对照组的(8.81±1.50)%(P0.05);CD4+CD25+Foxp3+T细胞/CD4+T细胞比例AMI组为(1.42±0.38)%和OMI组为(1.46±0.55)%均比对照组(1.75±0.58)%低(P0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞比例降低可能打破了外周免疫耐受,参与了心肌梗死患者动脉粥样硬化的发生发展。