miR-454-3p对鼻咽癌CNE-2细胞上皮-间质转化的调控机制

目的探讨miR-454-3p对鼻咽癌CNE-2细胞上皮-间质转化（EMT）的调控机制。方法收集2017年1月至2018年12月柳州市中医医院就诊的95例鼻咽癌患者的血清和鼻咽癌组织标本及健康体检者30例的血清,采用RT-qPCR检测miR-454-3p和E-盒结合锌指蛋白2（ZEB2）血清水平和mRNA的表达,对鼻咽癌组织中miR-454-3p和ZEB2mRNA的表达进行相关性分析。将CNE-2细胞随机分为Control组、miR-454-3pmimic组、Mimic-NC组、miR-454-3pmimic+ZEB2plasmid组和miR-454-3pmimic+vector组,采用Transwell实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Westernblot检测ZEB2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达。双荧光素酶实验验证miR-454-3p与ZEB2的靶向关系。结果鼻咽癌患者血清miR-454-3p水平低于健康体检者,差异有统计学意义（P＜0.05）。鼻咽癌Ⅲ、Ⅳ期患者鼻咽癌组织miR-454-3p相对表达水平低于Ⅰ、Ⅱ期患者,ZEB2mRNA相对表达水平则升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。miR-454-3p与ZEB2mRNA的表达呈负相关（r=-0.734,P＜0.01）;与Mimic-NC组比较,miR-454-3pmimic组ZEB2、N-cadherin、Vimentin表达水平均降低,E-cadherin表达水平升高,侵袭细胞数及迁移率均降低,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,过表达ZEB2可逆转miR-454-3pmimie对EMT的抑制作用。双荧光素酶实验显示miR-454-3p可靶向ZEB23''UTR。结论miR-454-3p在鼻咽癌患者血清及癌组织中呈低表达,可通过靶向调控ZEB2的表达水平进而抑制鼻咽癌细胞EMT。     

miR-615-5p通过IGF2/PI3K/AKT信号通路调控胃腺癌发生发展的作用机制

目的 微小RNA-615-5p(miR-615-5p)已被报道在多种癌症中发挥重要作用,但对miR-615-5p在胃腺癌中的作用机制尚不完整。文章旨在探讨miR-615-5p在胃腺癌中的临床意义及功能相关性。方法 利用qRT-PCR技术检测miR-615-5p在临床胃腺癌组织及细胞株中的表达情况;将细胞分组：过表达对照组(转染control mimics)和miR-615-5p过表达组(转染miR-615-5p mimics)、低表达对照组(转染control inhibitor)和miR-615-5p低表达组(转染miR-615-5p inhibitor),选择表达miR-615-5p最低的HGC细胞进行过表达,表达miR-615-5p相对较高的MGC细胞进行敲减,qRT-PCR技术检测干预效率。利用细胞克隆形成实验、平板划痕实验、Transwell迁移实验等检测胃癌细胞功能的改变,蛋白质印迹法用来检测miR-615-5p对目的蛋白IGF2(IGF2)的影响以及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的水平。结果 miR-615-5p在人胃腺癌组织中表达水平明显低于癌旁正常组织[(0.42±...     

miR-21-3p靶向STAT3促进银屑病角质形成细胞增值的研究

目的 探讨miR-21-3p及其靶蛋白信号转导子和转录激活子3蛋白（STAT3）在寻常型银屑病发生过程中角质形成细胞的作用意义。方法 对皮肤组织中STAT3蛋白表达情况的检测选择免疫组织化学法,对健康人群皮肤组织及银屑病患者皮损组织miR-21-3p表达量的检测选择实时荧光定量PCR法,靶基因STAT3和miR-21-3p关系的检测选择双荧光素酶报告基因。化学合成miR-21-3p模拟物、抑制剂,瞬时转染HaCaT细胞,对不同分组细胞进行CCK8、流式细胞凋亡实验,探究分析miR-21-3p调控细胞表型主要作用。对于转染细胞中STAT3蛋白表达情况,选择Western Blot检测。结果 寻常型银屑病患者皮肤组织中miR-21-3p呈高表达（P＜0.05）。STAT3免疫组化阳性表达定位于细胞浆,在银屑病组患者皮损组织阳性表达率为82.22%（37/45）高于正常皮肤组织（P＜0.01）。双荧光素酶报告基因显示miR-21-3p与STAT3存在结合,呈靶向关系。miR-21-3p mimics促进HaCaT细胞增殖活性,抑制细胞凋亡;miR-21-3p inhibitor抑制HaCaT细胞的增殖能力,促使细胞趋向凋亡。miR-21-3p转染HaCaT过表达可对STAT3蛋白表达量产生促进,相反则降低（F=48.632, P＜0.01）。结论 miR-21-3p呈现正调控关系,能够靶向调控STAT3;两者共同作用参与并加重银屑病的病程,并抑制患者细胞凋亡,调节角质形成细胞增值活性     

CircPIP5K1A靶向调节miR-101-3p影响结直肠癌SW480细胞生长、迁移、侵袭和凋亡的作用机制

目的 探究CircPIP5K1A靶向调节miR-101-3p对结直肠癌(CRC)SW480细胞生长、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法 qRT-PCR检测人CRC组织、邻近正常组织、CRC细胞株SW480、正常结肠上皮细胞FHC中CircPIP5K1A、miR-101-3p水平;将si-NC、si-CircPIP5K1A、si-CircPIP5K1A+inhibitor NC、si-CircPIP5K1A+miR-101-3p inhibitor分别转染至SW480细胞并命名为si-NC组、si-CircPIP5K1A组、si-CircPIP5K1A+inhibitor NC组、si-CircPIP5K1A+miR-101-3p inhibitor组,未做任何处理的SW480细胞记为NC组。双荧光素酶报告基因实验验证CircPIP5K1A与miR-101-3p的关系;qRT-PCR检测SW480细胞中CircPIP5K1A、miR-101-3p表达;CCK-8法检测SW480细胞增殖情况;流式细胞术检测SW480细胞凋亡率;Transwell检测SW480细胞侵袭、迁移数量;Western ...     

MicroRNA-31-3p靶向调控Sema4C表达对宫颈癌顺铂耐药性的作用及其机制研究

目的 探讨人宫颈癌细胞microRNA-31-3p(miR-31-3p)的表达及其靶向调控Sema4C表达对顺铂耐药性的作用机制研究。方法 取对数生长期Hela细胞,分别转染miR-31-3p mimics (miR-31-3p mimics组)、空白质粒（对照组）,以及在转染miR-31-3p mimics的基础上过表达Sema4C (miR-31-3p mimics+Sema4C组)。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-31-3p的表达,Western blotting检测转染mimics后Hela细胞Sema4C蛋白的表达,CCK-8法检测不同浓度顺铂作用下Hela细胞的耐药性变化。结果 miR-31-3p在宫颈癌细胞Hela中低表达（P <0.05）。miR-31-3p mimics组、miR-31-3p mimics+Sema4C组miR-31-3p相对表达量高于对照组（P <0.05）,且miR-31-3p mimics组与miR-31-3p mimics+Sema4C组miR-31-3p相对表达量比较,差异无统计学意义（P>0.05...     

miR-203a-3p通过ALOX15途径抑制胃癌细胞铁死亡

目的探讨miR-299-3p靶向调控OCT4B1对结直肠癌细胞SW480增殖、迁移、侵袭及凋亡的作用。 方法将SW480细胞分为NC组、mimics组、inhibitor组,采用MTT法检测细胞活力,结晶紫染色检测单克隆形成数,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞侵袭能力,qRT-PCR测定细胞miR-299-3p和OCT4B1 mRNA,蛋白免疫印迹法测定OCT4B1蛋白表达。荧光素酶报告基因检测miR-556-3p对SW480细胞OCT4B1活性的调控作用。 结果与NC组比较,miR-299-3p水平、细胞凋亡率mimics组升高,inhibitor组降低,且mimics组高于inhibitor组(P＜0.05);OCT4B1 mRNA和蛋白水平、细胞穿膜数、细胞存活率、单克隆形成数mimics组降低,inhibitor组升高,且mimics组低于inhibitor组(P＜0.05)。 结论miR-299-3p过表达可抑制结直肠癌细胞SW480增殖、迁移、侵袭,促进其凋亡,可能与miR-299-3p抑制OCT4B1 mRNA和蛋白表达有关。     

miR-21-3p靶向VEGFA调节PI3K/AKT信号通路对子痫前期大鼠肾损伤的影响

目的:探究microRNA-21-3p(miR-21-3p)通过靶向血管内皮生长因子A(VEGFA)调节磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路对子痫前期(PE)大鼠肾损伤的改善作用。方法:将60只孕鼠随机分为正常组、模型组、mimics NC组、miR-21-3p mimics组、miR-21-3p inhibitor组。除正常组外,其余4组建立PE模型,造模成功后,mimics NC组注射miRNA-NC空质粒腺病毒载体; miR-21-3p mimics组注射携带miR-21-3p基因腺病毒载体; miR-21-3p inhibitor组注射携带抑制miR-21-3p基因表达腺病毒载体,连续7d。实验结束后动脉取血,检测血清中SCr、BUN、IL-6、TNF-α以及尿液中尿蛋白水平;采用HE染色法制作切片,光镜观察肾组织病理变化; RT-PCR法检测miR-21-3p、VEGFA mRNA相对表达水平; Western Blot法检测VEGFA、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-21-3p与VEGFA的靶向...     

miR-584对人胶质母细胞瘤侵袭和迁移能力的影响

目的探讨miR-584对人胶质母细胞瘤U251细胞侵袭和迁移能力的影响。方法将化学合成的miR-584-3p在脂质体Lipofectamine 2000的介导下,瞬时转染人胶质母细胞瘤U251,细胞分为空白对照组(无转染,其他条件相同)、mimics NC组(转染miR-584-3p mimics阴性对照序列)、miR-584-3p mimics组(转染miR-584-3p mimics)、inhibitor NC组(转染miR-584-3p inhibitor阴性对照序列)和miR-584-3p inhibitor组(转染miR-584-3p inhibitor)。Real-time PCR法检测细胞中miR-584-3p的表达水平;CCK-8法检测细胞增殖能力;划痕实验和Transw ell小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果与空白对照组和mimics NC组相比,miR-584-3p mimics组的miR-584-3p表达上调约100倍(P<0.05),细胞增殖能力无明显差异(P>0.05),细胞侵袭和迁移能力明显下降(P<0.05);与空白对照组和inhibitor NC组相比,miR-584-3p inhibitor组的miR-584-3p表达下调至空白对照组的5%(P<0.05),细胞增殖能力无明显差异(P>0.05),细胞侵袭和迁移能力显著增强(P<0.05)。结论 miR-584-3p mimics转染抑制了U251细胞的侵袭和迁移能力;miR-584-3p inhibitor转染能增强U251细胞的侵袭和迁移能力。     

lncRNA TTN-AS1通过靶向miR-204-3p调控胃癌细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化

目的：探讨长链非编码RNA肌联蛋白反义RNA 1（lncRNA TTN-AS1）是否可通过靶向微小RNA-204-3p（miR-204-3p）调控胃癌细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化（EMT）。方法：采用qRT-PCR法检测胃癌组织、癌旁组织中TTN-AS1、miR-204-3p的表达量;体外培养人胃癌细胞AGS,分别将si-NC、si-TTN-AS1、miR-NC、miR-204-3p mimics、si-TTN-AS1与anti-miR-NC、si-TTN-AS1与anti-miR-204-3p转染至AGS细胞;采用qRTPCR法检测AGS细胞中TTN-AS1、miR-204-3p的表达量;采用Transwell小室实验检测迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验检测TTN-AS1、miR-204-3p的靶向关系。结果：胃癌组织中TTN-AS1的表达水平比癌旁组织增加约2.90倍（P ＜0.05）,miR-204-3p的表达水平比癌旁组织减少约0.57倍（P ＜0.05）;转染si-TTN-AS1或转染miR-204-3p mimics可明显减少迁移及侵袭细胞数（P ＜0.05）;双荧光素酶报告实验证实TTN-AS1可靶向结合miR-204-3p;共转染si-TTN-AS1与anti-miR-204-3p可明显增加迁移及侵袭细胞数（P ＜0.05）。结论：抑制TTN-AS1表达可通过上调miR-204-3p的表达从而抑制胃癌细胞迁移、侵袭及EMT。     

miR-129-5p靶向HMGB1对胰腺癌细胞凋亡的作用研究

目的：研究miR-129-5p调控HMGB1表达在胰腺癌细胞凋亡中的作用。方法：以未处理的胰腺癌SW1990细胞作为对照组（Control组），用脂质体转染法将mimics-NC（空载体）、miR-129-5p mimics、inhibitor-NC（空载体）、miR-129-5p inhibitor分别转染SW1990细胞作为mimics-NC组、miR-129-5p过表达组（miR-129-5p mimics组）、inhibitor-NC组、miR-129-5p低表达组（miR-129-5p inhibitor组），通过在线靶基因预测网站Target genes预测miR-129-5p与HMGB1是否存在结合位点，双荧光素酶基因报告实验验证miR-129-5p与HMGB1的靶向关系。采用qRT-PCR检测各组细胞中miR-129-5p的表达水平，Western blot法检测HMGB1蛋白及凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2表达。Hoechst染色观察细胞凋亡变化。结果：与mimics-NC组及Control组比较，miR-129-5p mimics转染显著上调miR-12...     

miR-148-3p抑制剂下调Akt2调控HUVECs细胞增殖及凋亡机制研究

目的 探究微RNA(miR)-148-3p对模拟角膜新生血管形成常见体外细胞模型人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的增殖及凋亡的影响。方法 实验分2个阶段,第1阶段,HUVECs分为：空白对照组(以HUVECs不作任何处理)、NC inhibitor组(转染NC inhibitor)、miR-148-3p inhibitor组(转染miR-148-3p inhibitor)。采用CCK-8法检测抑制miR-148-3p表达对HUVECs增殖能力的影响;TargetScan筛选miR-148-3p潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验进行验证;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Akt2表达水平变化;第2阶段,HUVECs分为：NC组(转染过表达质粒Akt2的阴性对照)、Akt2组(转染过表达Akt2质粒);NC inhibitor组、miR-148-3p inhibitor组、miR-148-3p inhibitor+Akt2组(共转染miR-148-3p inhibitor和过表达Akt2质粒),采用CCK-8法检测miR-148-3p inhibitor和Akt2对HUVECs...     

miR-671-3p靶向调控CKAP4对人脑胶质瘤细胞增殖及迁移的影响

目的探讨miR-671-3p靶向调控细胞骨架相关蛋白4(CKAP4)对人脑胶质瘤细胞增殖及迁移的影响。 方法收集术后脑胶质瘤组织及配对癌旁正常组织标本,检测其miR-671-3p和CKAP4表达水平。将人脑胶质瘤U251细胞株分为miR-671-3p NC组、miR-671-3p mimic组和miR-671-3p inhibitor组,并转染相应质粒。采用实时荧光定量PCR测定miR-671-3p表达,CCK-8实验测定细胞增殖能力,Transwell实验测定细胞迁移能力。Western blotting测定CKAP4表达水平。 结果人脑胶质瘤组织中miR-671-3p、CKAP4表达水平高于癌旁正常组织(P＜0.05)。细胞增殖率、迁移率miR-671-3p mimic组高于miR-671-3p NC组,miR-671-3p inhibitor 组低于miR-671-3p NC组(P＜0.05)。miR-671-3p对CKAP4具有靶向调节作用。miR-671-3p mimic组CKAP4蛋白表达量低于miR-671-3p NC组,miR-671-3p mimic组低于miR-671-3p inhibitor组(P＜0.05)。 结论miR-671-3p可靶向调控CKAP4促进人脑胶质瘤细胞增殖及迁移能力。     

miR-1-3p抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖、迁移并诱导其凋亡

目的 探讨在肝癌细胞SMMC-7721中微小RNA(miR)-1-3 p的表达变化对其增殖、迁移和凋亡的影响及miR-1-3p的作用机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-1-3p和CAAP1的相对表达量;SMMC-7721细胞按miR-1-3p过表达载体(miR-1-3p组)、pcDNA3组、miR-1-3p inhib-itor组和NC inhibitor组(对照组)分别转染,采用qRT-PCR检测转染效果,CCK-8实验检测细胞增殖能力,克隆形成实验观察并比较组间克隆形成率,流式细胞术和Western blot检测细胞凋亡及CAAP1蛋白表达,划痕和Transwell实验观察SMMC-7721迁移和侵袭.利用miRDB、TargetScan、miRanda数据库预测miR-1-3 p靶基因,双荧光素酶报告验证miR-1-3和CAAP1靶向性.结果 miR-1-3p在SMMC-7721细胞中的表达明显低于正常肝细胞LO2,差异有统计学意义(P<0.05);miR-1-3p上调,SMMC-7721增殖、迁移和侵袭能力显著下降,凋亡显著增强,而下调miR-1-3p的表达则作用相反;miR-1-3p和CAAP1具有靶向性;miR-1-3p过表达明显抑制CAAP1表达.结论 miR-1-3p上调可能通过与CAAP1的3'-UTR结合抑制SMMC-7721细胞增殖、侵袭、迁移.     

LncRNA PURPL调节miR-342-3p/PIK3R1轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探究长链非编码RNA(PURPL)调节微小RNA-342-3p(miR-342-3p)/磷脂酰肌醇-3激酶调节亚基1(PIK3R1)轴对肝癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:细胞实验：将si-NC、si-PURPL、si-PURPL+inhibitor NC、si-PURPL+miR-342-3p inhibitor分别转染至肝癌细胞Huh-7细胞并命名为si-NC组、si-PURPL组、si-PURPL+inhibitor NC组、si-PURPL+miR-342-3p inhibitor组,未做任何处理的Huh-7细胞记为NC组。双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA PURPL、miR-342-3p、PIK3R1的关系;qRT-PCR检测人正常肝细胞系L02和人肝癌细胞系Huh-7中LncRNA PURPL、miR-342-3p表达;Western blot检测L02细胞、Huh-7细胞PIK3R1蛋白水平;MTT法检测Huh-7细胞增殖情况;流式细胞术检测Huh-7细胞凋亡率;Transwell检测Huh-7细胞侵袭数量;划痕试验测定Huh-7细胞迁移。体内实验：构建裸鼠异...     

miR-152-5p对肝癌细胞恶性生物学行为的抑制作用及其机制

目的 探讨miR-152-5p对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响及其相关机制。方法 采用RT-PCR检测正常肝细胞HL-7702和人肝癌细胞HepG2中miR-152-5p差异表达。将HepG2细胞系进行脂质体转染并分为：NC mimics组、miR-152-5p mimics、NC inhibitor组和miR-152-5p inhibitor组,采用RT-PCR检测细胞中miR-152-5p的表达水平,采用CCK-8法和EdU法检测各组细胞的活力及增殖能力,利用流式细胞术及Western blotting检测各组细胞凋亡率以及细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3的表达水平。HepG2细胞系进行脂质体转染并分为：NC inhibitor组、miR-152-5p inhibitor组、miR-152-5p inhibitor+LY294002(PI3K/AKT通路抑制剂)组,应用Western blotting、EdU法和流式细胞术检测细胞PI3K/AKT通路相关蛋白PI3K(p-PI3K/PI3K)、AKT(p-AKT/AKT)的磷酸化水平、增殖...     

miR-223-3P对肺鳞癌细胞顺铂敏感性的影响

目的研究miR-223-3p对肺鳞癌细胞顺铂(CDDP)敏感性的影响。方法通过分别升高或降低(miR-223-3p mimics、NC-mimics、miR-223-3p inhibitor、NC-inhibitor)肺鳞癌NCI-H520和SK-MES-1细胞内miR-223-3p的含量后,qRT-PCR检测细胞内miR-223-3p基因表达水平;CCK-8法检测细胞半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测细胞加入CDDP药物刺激后凋亡率的改变(分别设计四组不同的处理:miR-223-3p mimics+CDDP、NC-mimics、miR-223-3p inhibitor+CDDP、NC-inhibitor);Transwell实验检测SK-MES-1细胞迁移能力的变化;Western blot法检测SK-MES-1细胞中Bax、ZEB1和E-cadherin的变化。结果 CCK-8实验结果表明,miR-223-3p mimics组的IC50低于对照组的IC50,miR-223-3p inhibitor组的IC50高于对照组的IC50;流式细胞术凋亡检测结果显示,miR-223-3...     

miR-1-3p靶向TNKS2抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的探讨miR-1-3p靶向端锚聚合酶2(TNKS2)基因对宫颈癌Ca-Ski细胞增殖、迁移及侵袭的调控作用。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测正常宫颈鳞状细胞及不同宫颈癌细胞中miR-1-3p的表达情况,选取宫颈癌Ca-Ski细胞进行转染实验,利用脂质体转染法将miR-1-3p模拟物(miR-1-3p mimics)及模拟物对照(NC mimics)分别转染至Ca-Ski细胞,分别记为miR-1-3p mimics组和miR-NC组,将未经转染处理的Ca-Ski细胞记为Blank组(空白对照)。qRT-PCR检测各组Ca-Ski细胞中miR-1-3p的表达,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,通过生物信息学软件分析和双荧光素酶报告基因实验验证miR-1-3p和TNKS2靶向关系,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中TNKS2蛋白表达。结果 miR-1-3p在宫颈癌细胞中的表达显著低于正常宫颈鳞状细胞(P0.05)。转染miR-1-3p mimics 48 h后,Ca-Ski细胞中miR-1-3p的表达显著升高(P0.05)。过表达miR-1-3p能够明显抑制Ca-Ski细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P0.05)。生物信息学软件分析显示miR-1-3p和TNKS2 3’UTR存在结合位点,双荧光素酶报告基因实验显示TNKS2是miR-1-3p的靶基因,Western blot检测结果显示miR-1-3p可抑制TNKS2的表达。结论 miR-1-3p可靶向TNKS2基因抑制宫颈癌Ca-Ski细胞增殖、迁移及侵袭。     

MicroRNA-124对喉鳞状细胞癌细胞自噬、侵袭和迁移的影响

目的探讨microRNA-124(miR-124)在人喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中的表达及其对LSCC细胞自噬、侵袭和迁移的影响。方法选取2016年1月至2018年9月新乡医学院第一附属医院手术切除的LSCC组织及癌旁组织(距离肿瘤边缘1～2 cm)标本各12例,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LSCC组织和癌旁组织中miR-124表达;体外培养人Hep-2细胞,将其分为miR-124类似物(miR-124 mimics)组、miR-124抑制剂(miR-124inhibitor)组、类似物阴性对照(mimics NC)组、抑制剂阴性对照(inhibitor NC)组、mimics+西罗莫司组和inhibitor+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,进行细胞转染;采用qRT-PCR检测miR-124 mimics组、miR-124 inhibitor组、mimics NC组、inhibitor NC组细胞中miR-124的表达水平,Western blot法检测LSCC组织、癌旁组织和mimics NC组、miR-124 mimics组、inhibitor NC组、miR-124 inhibitor组细胞中自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ的表达,Transwell小室法检测miR-124 mimics组、miR-124 inhibitor组、mimics NC组、inhibitor NC组、mimics+西罗莫司组和inhibitor+3-MA组细胞的侵袭能力,细胞划痕实验检测miR-124 mimics组、miR-124 inhibitor组、mimics NC组、inhibitor NC组、mimics+西罗莫司组和inhibitor+3-MA组细胞的迁移能力。结果 LSCC组织中miR-124相对表达量显著低于癌旁组织(P <0. 05)。LSCC组织中LC3B-Ⅱ蛋白表达显著高于癌旁组织(P <0. 05)。miR-124 mimics组细胞中miR-124相对表达量显著高于mimics NC组(P <0. 05),miR-124 inhibitor组细胞中miR-124相对表达量显著低于inhibitor NC组(P <0. 05)。miR-124 mimics组细胞LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著低于mimics NC组(P <0. 05),miR-124 inhibitor组细胞LC3B-Ⅱ蛋白相对表达量显著高于inhibitor NC组(P <0. 05)。miR-124 mimics组侵袭细胞数显著少于mimics NC组和mimics+西罗莫司组(P <0. 05),miR-124 inhibitor组侵袭细胞数显著多于inhibitor NC组和inhibitor+3-MA组(P <0. 05)。划痕培养72 h后,inhibitor NC组和inhibitor+3-MA组细胞的划痕愈合率低于miR-124 inhibitor组(P <0. 05);培养96 h后,mimics NC组和mimics+西罗莫司组细胞的划痕愈合率高于miR-124 mimics组(P <0. 05)。结论人LSCC组织中miR-124表达显著下调,人LSCC组织和miR-124过表达细胞中自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ表达显著上调,miR-124可能通过抑制自噬而抑制LSCC细胞的侵袭和迁移能力。     

miR-221-3p靶向TIMP-2对腹主动脉瘤血管平滑肌细胞增殖、凋亡影响

目的分析miR-221-3p靶向基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)对腹主动脉瘤(AAA)血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡的影响。方法对人VSMC细胞进行培养,10μmol/L血管紧张素(Ang Ⅱ)对VSMC进行处理,将VSMC细胞分为miR-221-3p inhibitor组(转染miR-221-3p inhibitor)、阴性对照组(转染miR-221-3p inhibitor NC)、空白组(未经转染的VSMC细胞),对照组(未进行Ang Ⅱ处理及转染的VSMC细胞),实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-221-3p、TIMP-2 mRNA的表达水平;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测各组细胞活力;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;蛋白印迹(WB)法检测增殖蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、凋亡蛋白B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)及蛋白TIMP-2、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-12的表达;双荧光素酶报告实验证明miR-221-3p与TIMP-2的靶向关系。结果与对照组比较,空白组、阴性对照组miR-221-3p表达、细胞凋亡率、蛋白Bax、MMP-2、MMP-12表达显著升高,TIMP-2 mRNA表达水平、细胞活力、蛋白β-catenin、CyclinD1、Bcl-2、TIMP-2表达显著降低,差异均有统计学意义(P0.05);与空白组、阴性对照组比较,miR-221-3p inhibitor组miR-221-3p表达、细胞凋亡率、蛋白Bax、MMP-2、MMP-12表达显著降低,TIMP-2mRNA表达水平、细胞活力、蛋白β-catenin、CyclinD1、Bcl-2、TIMP-2表达显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。miR-221-3p靶向调控TIMP-2。结论 Mi R-221-3p可能靶向抑制TIMP-2的表达,抑制VSMC的增殖,促进其凋亡,进而参与AAA的发病。     

miR-143-3p在甲状腺乳头状癌发展进程中的临床意义

目的 关于miR-143-3p在甲状腺乳头状癌(PTC)中的临床意义和作用机制尚不完全清楚,文中旨在探讨miRNA-143-3p在PTC组织的表达及临床意义,并探讨其对PTC细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法 收集2019年1月至2020年8月在河北北方学院附属第一医院耳鼻咽喉-头颈外科手术切除的52例患者的PTC组织及距肿瘤边缘2cm以上的癌旁组织。RT-PCR检测PTC及癌旁组织、人PTC细胞系TPC-1、BCPAP、K1及滤泡上皮Nthy-ori 3-1细胞中miR-143-3p的表达情况;脂质体转染法分别将miR-143-3p mimics、mimics-NC转染至TPC-1细胞,实验分为：空白对照组(无转染TPC-1)、阴性对照组(mimics-NC转染TPC-1)、mimics-143-3p组(miR-143-3p mimics转染TPC-1细胞)。以生长曲线、划痕实验及transwell实验检测3组细胞增殖、迁移和侵袭能力;双荧光素酶报告基因实验验证miR-143-3p与TFF3的靶向关系;Western blot检测miR-143-3p对EMT相关蛋白的影响。结果 ...