鬼臼乙叉苷对人鼻咽癌细胞CNE_2的细胞毒作用和对DNA的断裂作用

作者用噻唑蓝还原(MTT)法测定了鬼臼乙叉苷(鬼臼乙叉甙,VP-16)对人体鼻咽癌细胞CNE2的毒性作用,在药物浓度为2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0和160.0 ug/ml的条件下,连续4次实验,VP-16对CNE2细胞的生长抑制率分别为3.3±3.7％,15.2±3％,36.l±l0％,54±17％,68.4％士13％,76.7士9％和84.2±8％,其半数抑制浓度(IC_(50))为17.0 ug/ml。CNE2细胞分别在含有20.0,100.0和200.0ug/ml VP-16的培养液中孵育24h,细胞的DNA发生了断裂。DNA断裂量随药物浓度的增加而增加。将CNE2细胞放入含200.0ug/ml VP-16的培养液中孵育6h,12h和24 h,发现各时间点的DNA均发生了断裂。断裂程度随时间的增长而增加,未经药物处理的对照细胞的DNA未见断裂现象。经用50.0,100.0,200.0和400.Oug/VP-16处理的CNE_2细胞的拓扑异构酶Ⅱ能诱导超螺旋pBR322质粒DNA断裂成线状DNA,断裂程度与药物的浓度相平行。     

吉西他滨诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的 研究吉西他滨诱导人乳腺癌细胞系MCF-7细胞产生凋亡。方法 应用MTT法、DNA电泳技术及流式细胞术观察吉西他滨诱导人MCF-7细胞凋亡。结果 吉西他滨作用后，MTT结果显示细胞生长抑制率随药物浓度的增加而逐渐增大；DNA断裂电泳可见典型的梯形DNA条带，大小约180～200bp的整倍数递增，随吉西他滨作用时间延长和浓度的增加而逐渐增强；流式细胞术分析，吉西他滨1．0μg／ml和10．0μg／ml作用24h后，凋亡细胞比例分别为8％和14％；作用48h后分别增加到15％和29％。结论 吉西他滨可以诱导乳腺癌细胞产生凋亡，呈时间和剂量依赖性。     

葡萄糖和胰岛素对SW480肿瘤细胞分泌IGF-1的影响

目的本实验模拟2型糖尿病病程中葡萄糖、胰岛素的浓度改变,研究不同浓度的葡萄糖、胰岛素对SW480肿瘤细胞分泌IGF-1的影响。方法体外培养SW480肿瘤细胞。依据培养液中加入葡萄糖、胰岛素浓度的不同,将实验细胞分为六组：0组（对照组）：RPMI1640细胞培养液;第1组：RPMI1640细胞培养液＋5mmol／L葡萄糖和5uIU／ml胰岛素;第2组：RPMI1640细胞培养液＋5mmol／L葡萄糖和125gIU／ml胰岛素;第3组：RPMI1640细胞培养液＋25mmol／L葡萄糖和125uIU／ml胰岛素;第4组：RPMI1640细胞培养液＋25mmol／L葡萄糖和5uIU／ml胰岛素;第5组：RPMI1640细胞培养液＋25mmol／L葡萄糖和1．25uIU／ml胰岛素。每个组设3个复孔,于37℃、5％CO2饱和湿度的培养箱中培养48h,培养结束后,收集细胞培养上清,用ELISA方法检测IGF-1的浓度。结果在高浓度的胰岛素组（第2组、第3组,培养液中均含有125uIU／ml的胰岛素）IGF-1的浓度[（286．85±23．51）ug／L、（293．43±30．57）ug／L]高于对照组0组[（197．99±22．50）ug／L],差异有统计学意义（F=9．726,P〈0．01）;而第1、4、5组（培养液中分别含有5uIU／ml、5uIU／ml、1．25uIU／ml的胰岛素）IGF-1的浓度[（203．22±28．89）ug／L、（209．47±25．77）ug/L、（195．33±20．88ug/L）]与对照组0组相比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论高浓度的胰岛素能够上调SW480肿瘤细胞IGF-1的表达。     

参丹酮ⅡA诱导人鼻咽癌细胞凋亡及其作用机制的体外实验研究

目的：探讨丹参酮ⅡA诱导人鼻咽癌细胞（CNE－1）凋亡的作用及其机制。方法：在体外细胞培养的基础上用0．5ug/ml丹参酮ⅡA处理CNE－1细胞4天，而后应用光镜，电镜，集落形成试验，DNA凝胶电泳及流式细胞仪分析CNE－1细胞增殖及凋亡的改变。结果：经丹参酮ⅡA处理后，CNE－1细胞增殖明显被抑制，镜下可见典型典型的凋亡细胞的特征性改变，细胞DNA呈现“梯状”断裂现象，流式细胞仪分析细胞凋亡的指数为16．9％，而对照组为6．4％，细胞凋亡相关基因fas,bax,p53及细胞周期负调基因p21表达明显增加，bcl-2表达明显降低。结果：丹参酮ⅡA具有诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用。其机制可能与其诱导某些凋亡及周期调控相关基因的表达有关。     

神经生长因子在肝纤维化大鼠肝星状细胞凋亡中的作用

目的探讨神经生长因子(NGF)在肝纤维化大鼠肝星状细胞(HSC)增殖、凋亡中的作用。方法HSC株分别在实验组(分别以NGF 50、100和150ng／ml干预HSC)和对照组(单纯HSC培养)中体外培养24、48和72 h。应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖率;原位杂交凋亡检测(TUNEL)法观察HSC凋亡状况;流式细胞术检测细胞凋亡率;显微镜观察细胞形态学变化。结果①MTT法显示,不同浓度的NGF作用HSC 24 h,实验组HSC增殖率均低于对照组,差异有统计学意义(均P<0．05)。NGF浓度为100 ng／ml时,HSC增殖率低于对照组最显著(0．63±0．02 vs 0．77±0．03,P<0．05);②最适浓度的NGF(100 ng／ml)作用HSC 24、48和72 h,第72小时的HSC增殖率低于对照组最显著(0．48±0．03 vs 0．89±0．01,P<0．05),增殖率的降低呈时间依赖性;③最适浓度的NGF(100 ng／ml)作用HSC 24 h,TUNEL法显示HSC凋亡率显著高于对照组(10．2％±1．2％vs 1．6％±0．1％,P<0．05);同时,流式细胞术显示HSC凋亡率为6．2％±0．2％,而对照组无凋亡;④NGF对HSC形态没有明显影响。结论NGF可诱导体外活化的HSC凋亡。     

乙型肝炎病毒对肾小管上皮细胞直接作用的实验研究

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）在体外对人肾小管上皮细胞（HKC）的直接致病作用。方法：①HBV体外感染HKC：培养的HKC传至6孔板中，接种密度为1×10^6个／ml，孵育24h后分受感染和阴性对照两组。受感染组加入0．5ml HepG2．2．15细胞上清液（含有HBV）；阴性对照组加入0．5ml 10％FCS—DMEM／F—12培养液。两组HKC继续孵育72h，消化，离心沉淀，PBS清洗，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）检测两组HKC中的HBV DNA含量。②HBV对体外培养的HKC细胞直接作用：HKC细胞传至24孔板中，接种密度为1×10^5个／ml，受感染组分三个亚组，分别加入100μl、200μl和300μl的感染用HepG2．2．15细胞上清液；阴性对照组为接种HKC后加入培养液常规培养；阳性对照组为HepG2．2．15细胞上清液。各组的每孔终体积均为2ml，每组设3复孔。孵育72h后收集各孔上清液，ELISA法检测转化生长因子β1（TGF-β1）的表达。结果：①受感染组HKC的基因组中检测到HBV DNA。②受感染组的三个亚组细胞培养上清的TGF-β1与阴性对照组比较差异均有显著性。结论：HBV可感染HKC并促进其分泌TGF-β1。     

羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞增殖影响的实验研究

目的观察羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞增殖能力的影响。方法（1）取第四代兔视网膜Müller细胞以3×10^4个／ml接种于96孔板,200μl／孔,24h后加入不同浓度羊膜匀浆条件培养基（800、400、200、100μg／ml）,培养24、48、96h后,用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测Müller细胞增殖率。（2）第四代兔视网膜Müller细胞以4×10^4个／ml密度接种于预置有盖玻片的6孔板中,24h后加入不同浓度的羊膜条件培养基,继续培养48h后,免疫组化细胞核增殖抗原（PCNA）检测。（3）4代兔视网膜Müller细胞以4×10^4个／ml接种于6孔板中,24h后加入不同浓度的羊膜条件培养基,继续培养48h,流式细胞仪观察细胞周期变化。结果随着条件培养基中羊膜匀浆浓度的增加,对兔视网膜Müller细胞的增殖效应逐渐增强,800μg／ml时获得最大增殖效应,细胞增殖率为62．5％;细胞周期分析显示：进入S期的细胞数明显增加（56．49％）。在羊膜匀浆浓度恒定条件下,随着时间延长,其对视网膜Müller细胞的增殖效应逐渐加强,在48h即达到较高的增殖效应,96与48h相比差异无统计学意义（F=0．233、0．007,P=0．492、0．729）。800μg／ml组和400μg／ml组PCNA阳性表达率（0．84±0．07;0．79±0．06）与对照组（0．54±0．12）相比差异具有统计学意义（x^2=-0．182、-0．151,P=0．002、0．015）。结论羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞具有促进增殖作用,且呈浓度和时间依赖性。     

硫芥对大鼠淋巴细胞DNA及白细胞介素的影响

目的　探讨硫芥中毒动物淋巴细胞的损伤特点及中毒早期白细胞介素的浓度变化作为硫芥毒性损伤诊断的可能性 .方法　分离大鼠脾淋巴细胞培养 ,经 10～ 10 0 0 μmol·L- 1 芥子气染毒 30 min,以单细胞凝胶电泳法 (SCG )检测DNA损伤 ;同时测定硫芥中毒大鼠血液 IL- 2和 IL- 6浓度 .结果　中毒后淋巴细胞 DNA迁移率和受损细胞百分率呈时间和剂量依赖关系 (r=0 .6 3,P<0 .0 1) ;培养液中 IL- 2和IL- 6浓度明显降低 ,IL- 6含量为 (46 8± 16 ) μg· L- 1 ,4 h开始下降 ,72 h降至 (177± 16 )μg· L- 1 (P<0 .0 1) ,12 0 h有所回升 ,但仍然明显低与对照 (P<0 .0 1) .其中 IL- 2几乎难以检出 .结论　硫芥中毒早期机体免疫系统受到明显抑制 ,SCG检测 DNA损伤用作评价硫芥细胞毒性指标在诊断方面具有一定价值     

内毒素损伤的肺动脉内皮细胞对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及骨形态发生蛋白-2的干扰作用

目的探讨内毒素休克损伤的肺动脉内皮细胞对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及骨形态发生蛋白-2（BMP-2）的干扰作用。方法（1）内皮细胞条件培养液（EC—CM）制作：EC—CM1：用不含血清的DMEM培养基孵育融合成单层的肺动脉内皮细胞（PAEC）24h,收集上清培养液制成;EC—CM2：以终浓度为1μg／ml的内毒素孵育融合成单层的PAEC1h后用不含血清的DMEM培养基孵育24h收集上清培养液制成。（2）分组及指标观测：将贴块法培养的肺动脉平滑肌细胞（PASMC）分成5组,分别用EC-CM1、EC—CM2、EC—CM2＋BMP-2 1ng／ml、EC—CM2＋BMP—2 10ng／ml和EC-CM2＋BMP-2 100ng／ml孵育PASMC。使用BrdU法测定PASMC增殖率;流式细胞仪分析PASMC细胞周期的变化;3^H—TdR掺入实验检测DNA合成情况;RT—PCR检测细胞周期素D1（cyclinD1）mRNA的表达量;免疫印迹检测pSmad蛋白量及细胞周期素（CyclinD1）蛋白表达。结果与Ⅰ组比较,Ⅱ组引起PASMC增殖率升高,S期细胞百分比增加,DNA合成增加（P〈0．01）,同时,cyclinD1mRNA及蛋白表达增加（P〈0．01）,pSmad蛋白量两组差异无统计学意义（P〉0．05）;与Ⅱ组比较,Ⅲ组中上述各指标无明显变化（P〉0．05）,而Ⅳ组、Ⅴ组中PASMC增殖率显著下降,S期细胞百分比下降,DNA合成减少（P〈0．01）,同时cyclinD1mRNA及蛋白表达显著下降（P〈0．01）,pSmad蛋白量显著增加（P〈0．01）。结论EC—CM2诱导PASMC cyclinD1的高表达,促进PASMC增殖;BMP-2可以通过激活Smad1信号转导途径抑制EC—CM2培养的PASMC表达cyclinD1,进而抑制EC—CM2刺激引起的PASMC增殖．BMP2作用在1～100ng／ml浓度范围内呈剂量依赖性。     

端粒酶正义寡核苷酸对鼻咽癌细胞生长的作用

目的：探讨端粒酶正义寡核苷酸对鼻咽癌细胞生长的作用。方法：脂质体介导端粒酶正义，反义及无义寡核苷酸转染鼻咽癌CNE1和CNE2Z细胞，MTT法检测细胞增殖能力，流式细胞仪检测细胞周期。结果：端粒酶正义寡核苷酸与反义寡核苷酸一样中抑制鼻咽癌CNE1和CNE2Z细胞的生长，且呈剂量和时间依赖性。1.5μmol.L^-1正义寡核苷酸与CNE1细胞共培养6，12，24和48h时抑制率分别为16．3％，15．6％，20．2％和26．3％，浓度为4．5μmol.L^-1时抑制率分别为22．5％，21．5％，32．4％和39．9％；在CNE2Z细胞，浓度为1．5μmol.L^-1时抑制率分别为7．7％，25．2％，27．0％和28．8％，浓度为4．5μmol.L^-1时抑制率分别为18．1％，30．1％，32．8％和32．9％；同时流式细胞仪检测到凋亡峰，含量分别为25．3％和19．3％，无义寡核苷酸无此作用。结论：端粒酶正义寡核苷酸可抑制鼻咽癌细胞的生长。     

三羟异黄酮上调肝癌HepG2细胞PTEN基因的表达及其诱导凋亡作用

 【目的】探讨三磷酸肌醇（IB）和PTEN蛋白变化在三羟异黄酮（genistein）诱导肝癌细胞凋亡中的作用。【方法】以肝癌HepG2细胞培养72h为对照组，实验各组以60Ixmol／L三羟异黄酮作用于HepG2细胞不同时间后，应用同位素试剂盒检测细胞嵋含量，Western blot分析细胞PTEN蛋白表达，流式细胞仪检测细胞凋亡率。【结果】对照组Ib含量为（29．2±0．6）pmol／10^6 cells，PTEN蛋白与内参actin蛋白灰度和面积之积的比值V-PTEN／V-actin为0．12±0．00；细胞凋亡率为（2．6±0．1）％。三羟异黄酮作用于肝癌HepG2细胞12、24、48、72h后珉分别为（12．0±1．4）pmol／10^6cells，（7．5±0．8）pmol／10^4 cells，（5．6±0．5）pmol／10^6cells，（3．3±0．6）pmol／10^6 cells；V-PTEN，V-actin分别为13．13±0．20，19．17±1．09，28．51±2．18，41．12±3．80；细胞凋亡率分别为（2.7±0．2）％。（7．4±0．5）％，（20．5±2．0）％，（30．7±1．6）％。与对照组比，三羟异黄酮作用于肝癌HepG2细12h后各时相珉显著降低（P〈0．01），PTEN蛋白表达显著增高（P〈0．01），24h后各时相细胞凋亡率显著增高（P〈0．01）。【结论】三羟异黄酮能减少瑕生成，上调PTEN基因表达，诱导肝癌细胞凋亡。     

黄连及其主要成分小檗碱对人鼻咽癌细胞CNE-2Z生长的抑制作用

[摘要] 目的 观察黄连及其主要成分小檗碱对人鼻咽癌细胞CNE-2Z的增殖和细胞周期的作用。方法 MTT法、凋亡检测试剂盒检测不同浓度黄连以及小檗碱对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z生长抑制作用以及凋亡;流式细胞仪检测细胞周期的改变;裸鼠实验进行进一步的体内实验。结果 黄连及其小檗碱能够抑制CNE-2Z细胞增殖,且随药物浓度增加抑制效应增强,呈现浓度依赖性,不同浓度的黄连和小檗碱分别处理细胞24,48,72 h 时,抑制率随浓度的增加和时间的延长而增加,其IC50黄连分别为(13.70±2.46) ug/ml、(10.02±3.41) ug/ml、(8.94±2.45) ug/ml,小檗碱分别为(3.59±1.24) ug/ml、(2.84±1.02) ug/ml、(1.47±0.45) ug/ml,各IC50间的差异有非常显著性(p<0.01)。不同浓度黄连和小檗碱作用细胞24 h 后,G0/G1期细胞明显下降,S期细胞明显升高(p<0.05,p<0.01)。两者对CNE-2Z 细胞周期具有阻滞作用,可以阻滞在S期。动物实验显示肿瘤体积减小,具有统计学意义。结论 黄连及其主要成分小檗碱对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z具有增殖抑制作用,该抑制作用具有剂量和时间依赖性;一定剂量的黄连和小檗碱可能通过阻滞CNE-2Z于S期而抑制其增殖;对鼻烟癌细胞接种的裸鼠肿瘤体积有抑制作用。 [关键词] 黄连 小檗碱 鼻咽肿瘤 细胞增殖     

同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞增殖与细胞凋亡的影响

目的观察同型半胱氨酸(Hcy)对人血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及凋亡的影响。方法采用组织贴块法体外培养人VSMCs,将不同浓度Hcy与VSMCs孵育不同时间,应用MTT法检测VSMCs细胞增殖、流式细胞术(FCM)检测VSMCs细胞凋亡。结果体外培养的人VSMCs在终浓度为500μmol/L Hcy的培养液中孵育0h、6h、12h、24h、48h后的A值分别为0．504±0．053、0．586±0．043、0．625±0．031、0．683±0．087、0．812±0．147,细胞凋亡率分别为2．39％±0．47％、2．45％±0．96％、7．58％±2．02％、13．37％±4．71％、17．69％±3．13％,表明Hcy呈时间依赖性诱导人VSMCs细胞增殖和细胞凋亡；在终浓度分别为0、100、200、500、1000μmol/L Hcy的培养液中孵育24h后的A值分别为0．549±0．067、0．616±0．121、0．644±0．095、0．685±0．139、0．846±0．142,细胞凋亡率分别为2．68％±0．23％、2．79％±0．89％、8．45％±2．41％、13．41％±4．98％、17．75％±5．56％,表明Hcy呈浓度依赖性诱导人VSMCs细胞增殖和细胞凋亡。结论Hcy可以诱导VSMCs增殖和细胞凋亡,这一双重作用可能是Hcy致动脉粥样硬化作用的机制之     

软脂酸对体外原代培养大鼠胰岛细胞凋亡作用的实验研究

目的 观察软脂酸诱导体外原代培养胰岛细胞的凋亡，初步探讨软脂酸在2型糖尿病发病中的机制。方法 应用分离的体外单层培养SD大鼠胰岛细胞，与不同浓度软脂酸(分别为0、0．125、0．250、0．500mmol／L)共同孵育48h，用放免法测定培养液中胰岛素含量，PI／Hoechst33342双染法荧光显微镜观察胰岛细胞凋亡的形态变化。结果 0．250、0．5mmol／L软脂酸可抑制高糖刺激下的胰岛素分泌，促进胰岛细胞的凋亡。结论 软脂酸可诱导胰岛细胞凋亡，凋亡程度与游离软脂酸浓度有关。     

头孢氨苄缓释片在健康人体内的生物利用度和药物动力学

目的:比较头孢氨苄缓释片和普通胶囊的生物利用度和药物动力学。方法：10例健康志愿者分别单剂量口服500mg头孢氨苄缓释片和普通胶囊，血药浓度测定方法为HPLC法。结果：两种剂型体内过程均符合一室开放模型，缓释片的达峰时间（Tmax）为（2．58±0．59）h，峰浓度（Cmax）为（10．08±1．68）μg／ml．吸收速率常数（Ka）为（0．90±0．53）／h，消除速率常数（Ke）为（0.26±0.02）／g，半衰期（T1／2）为（2.67±0.23）h，清除率（Cl）为（6.93±1.71）L／h，分布容积（Vd）为（26.66±6.72）L，药一时曲线下面积（AUC）为（48.31±9.32）μg·h／ml。两种剂型T一C一Ka、Ke、T1／2和Cl均存在显著性差异（P＜0．01），Vd、AUC无显著性差异（P＞0．05）；缓释片的相对生物利用度为（104．90±8．35）％。结论：缓释片的吸收减慢，Tmax推迟，T1／2延长，可减少服药次数，提高药物治疗的顺应性。     

粗壮女贞的降压作用

粗壮女贞叶提取物静脉注射0．098、0．140和0．200g／kg可使麻醉大鼠的血压显著下降，峰值下降37．7％、38．6％和50．2％：灌胃给药（ig）1．36g／kgqd×3d，不影响清醒大鼠的血压。清醒自发性高血压大鼠ig1．08和2．16g／kgqd×5d，血压由24．3±0．5和24．3±0．6降至18．1±0．9和16．6±0．7kPa，降压作用显著（P＜0．001，＜0．001）；对清醒二肾-夹型高血压大鼠，ig粗壮女贞0．5g／kgqd×7d，血压由20．3±3．9降至16．2±3．9kPa，血压下降20％。以上结果提示具有降压作用。昆明小鼠急性毒性试验，ig49g／kg10d内动物生长良好，未出现死亡；腹腔注射5个剂量组（每组10只）按简化机率单位法测得LD502．64±0．21g／kg（P＝0．95）。     

羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞增殖影响的实验研究

目的观察羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞增殖能力的影响。方法（1）取第四代兔视网膜Müller细胞以3×10^4个／ml接种于96孔板，200μl／孔，24h后加入不同浓度羊膜匀浆条件培养基（800、400、200、100μg／ml），培养24、48、96h后，用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测Müller细胞增殖率。（2）第四代兔视网膜Müller细胞以4×10^4个／ml密度接种于预置有盖玻片的6孔板中，24h后加入不同浓度的羊膜条件培养基，继续培养48h后，免疫组化细胞核增殖抗原（PCNA）检测。（3）4代兔视网膜Müller细胞以4×10^4个／ml接种于6孔板中，24h后加入不同浓度的羊膜条件培养基，继续培养48h，流式细胞仪观察细胞周期变化。结果随着条件培养基中羊膜匀浆浓度的增加，对兔视网膜Müller细胞的增殖效应逐渐增强，800μg／ml时获得最大增殖效应，细胞增殖率为62．5％；细胞周期分析显示：进入S期的细胞数明显增加（56．49％）。在羊膜匀浆浓度恒定条件下，随着时间延长，其对视网膜Müller细胞的增殖效应逐渐加强，在48h即达到较高的增殖效应，96与48h相比差异无统计学意义（F=0．233、0．007，P=0．492、0．729）。800μg／ml组和400μg／ml组PCNA阳性表达率（0．84±0．07；0．79±0．06）与对照组（0．54±0．12）相比差异具有统计学意义（x^2=-0．182、-0．151，P=0．002、0．015）。结论羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞具有促进增殖作用，且呈浓度和时间依赖性。     

骨髓间充质干细胞对氧诱导心肌细胞凋亡的保护作用

目的 探讨骨髓间充质干细胞（MSC）对缺氧诱导心肌细胞凋亡的保护作用及可能机制。方法 分离培养成年大鼠MSC和乳鼠心肌细胞,将培养的乳鼠心肌细胞进行缺氧处理后,加入MSC或其条件培养液继续在无氧（95％N2＋5％CO2,持续缺氧组）或正常氧（缺氧／复氧组）条件下共培养72h,采用Hoechst细胞核染色,计算凋亡细胞百分率;采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化。结果持续缺氧可以诱导心肌细胞凋亡,凋亡率为51．6％±2．4％,与MSC或其条件培养液共培养,心肌细胞凋亡率显著减低,分别为15．1％±5．4％和24．0％±4．2％（均P〈0．01）;缺氧／复氧损伤可以引起心肌细胞凋亡,凋亡率为20．9％±2．7％,心肌细胞与MSC共培养,凋亡率显著减低（11．5％±3．7％,P〈0．05）;心肌细胞与MSC条件培养液共培养,凋亡率略有减低（20．1％±4．2％,P〉0．05）。蛋白质免疫印迹显示凋亡时心肌表达Bax水平较高,与MSC或其条件培养液共培养时,Bax表达水平呈不同程度降低,与心肌细胞凋亡发生率减低一致,Bcl-2无明显变化。结论 MSC对体外缺氧诱导的心肌细胞的凋亡有保护作用,其作用机制可能是通过细胞间直接接触和旁分泌细胞因子,影响了Bcl-2家族部分蛋白分子在心肌细胞的表达。     

内毒素预处理对单个核细胞分泌肿瘤坏死因子α和诱生型一氧化氮合酶及NO的影响

目的：探讨内毒素预处理对单个核细胞分泌肿瘤坏死因子α（TNF-α）、诱生型一氧化氮合酶（iNOS）和NO的影响。方法：体外培养大鼠单个核细胞，内毒素预处理采用脂多糖（LPS）0．1μg／ml孵育24h，然后用2μg／ml的LPS刺激24h，设空白对照组（DMEM）和内毒素对照组（LPS2μg／ml）.酶联免疫法测定培养液上清TNF-α浓度，分光光度法测定iNOS活性和NO含量。结果：内毒素预处理组单个核细胞培养液上清iNOS活性、TNF-α和NO含量显著低于内毒素刺激组（P〈0．01）。结论：内毒素预处理可明显降低单个核细胞分泌炎性递质水平，减轻内毒素对机体的损伤。     

胶质瘤对亲细胞非均质分子脂质和几种药物敏感性的比较

目的 应用药物敏感试验(MTT比色法)比较亲细胞非均质分子脂质(CHML)和几种常用化疗药对脑胶质瘤细胞的抑制作用。方法 取90例手术切除的脑胶质瘤新鲜标本，处理后接种于96孔培养板中，加入不同浓度的CHML、VM-26、VP-16、CBP、DDP和福莫司汀(fotemustine)，孵育后进行MTT反应，于波长570nm处测定A值。结果 胶质瘤细胞对CHML 500μg／mL组的敏感率(63／90)、200μg／mL组的敏感率(58／90)，显著高于10PPC(血浆峰浓度)VP-16、CBP、福莫司汀组，与1PPC VM-26、10 PPC DDP敏感率相似。100μg／mL浓度组CHML的敏感率要高于0.1 PPC组的所有5种药物。在耐药率方面，500、200μg／mL浓度组的CHML耐药率只高于10 PPC VM-26，低于或相近于其余任何实验浓度药物。100μg／mL，组的CHML耐药率低于0．1PPC组的所有5种药物。500与200μg／mL组CHML的敏感率和耐药率差异无显著意义。两者与100μg／mL组差异有显著意义。结论 CHML对体外原代培养的胶质瘤细胞有较强的抑制作用。