外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒感染与细胞表面HLA—I类抗原表达的关系探讨

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)属嗜肝ＤＮＡ病毒 ,主要侵犯肝脏 ,但目前在肝外组织和细胞中也发现ＨＢＶ的存在 ,特别在外周血单个核细胞 (ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌ,ＰＢＭＣ)中阳性率更高。ＰＢＭＣ为免疫活性细胞群体 ,ＨＢＶ感染ＰＢＭＣ对机体免疫功能的影响尚未阐明。我们就ＰＢＭＣ中ＨＢＶ感染与其表面ＨＬＡ Ｉ类抗原表达的关系进行了研究 ,探讨ＰＢＭＣ中ＨＢＶ感染在乙型肝炎慢性化及向肝癌恶性转化中的作用。一、对象与方法1 .对象 :自 2 0 0 1年 1 1月至 2 0 0 2年 4月在山东大学齐鲁医院消化内…     

乙型肝炎病毒感染与宿主淋巴细胞HLA-Ⅰ类分子关系的研究

目的：检测慢性乙型肝炎、肝硬化及肝癌患者外周血淋巴细胞HLA Ⅰ、HLA Ⅱ类分子表达,并探讨其在宿主细胞免疫状态中的作用。方法：采用流式细胞术(FCM)检测51例正常人、58例慢性乙型肝炎、31例肝硬化、13例肝癌患者外周血淋巴细胞表面HLA Ⅰ、HLA Ⅱ类抗原的表达。结果：慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者外周血淋巴细胞HLA Ⅰ类分子平均荧光强度分别为335.80、309.78、114.04,均较正常对照组 (565.08) 降低（P<0.01）,且随病情加重逐步降低。正常对照、慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者HLA Ⅱ类分子表达率分别为32.50%、38.28%、42.21%、52.75%,其中肝硬化组和肝癌组与正常对照组差异有统计学意义（P<0.01）,慢性乙型肝炎组和正常对照组差异无统计学意义（P>0.05）。结论：慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞HLA Ⅰ类分子表达降低,肝硬化和肝癌患者降低更为显著,这与患者细胞免疫功能紊乱密切相关。     

乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞中HBV DNA意义的探讨

作者对52例慢性乙型肝炎(乙肝)患者及10例无症状HBsAg携带者的外周血单个核细胞检测乙肝病毒(HBV)DNA,仅4例出现微弱阳性。10例乙肝患者同时检测肝内、血浆内及外周血单个核细胞内HBV     

核酶抑制表皮细胞HLA-Ⅰ类抗原表达的实验研究

目的:表皮细胞可表达HLA-类抗原,抑制其表达可望延迟其排斥反应.方法:我们将pLXRZ(Ribozyme-H的表达载体)用脂质体结合甘油休克法转染培养的表皮细胞,观察其对排斥反应的影响.结果:通过转染细胞的PCR产物证实pLXRZ已整合入细胞基因组DNA中,免疫组化染色显示转染细胞HLA-Ⅰ类抗原表达较弱,流式细胞术检测显示细胞表达HLA-Ⅰ类抗原总数减少.结论:Ribozyme-H的表达载体能够稳定存在于转染细胞中,Ribozyme-H能抑制表皮细胞HLA-Ⅰ类抗原的表达.     

原发性肝细胞癌的HLA-Ⅰ类抗原表达

目的　确定体内原发性肝细胞癌细胞的 HL A - 类抗原表达情况。方法　采用免疫组织化学L SAB法对 6例原发性肝细胞癌冰冻组织进行研究。结果　 6例标本的肝癌细胞都有较强的 HL A- 类抗原表达。结论　从 HL A- 类抗原表达角度看 ,研制肝癌 CTL疫苗是可行的     

人肝癌细胞的HLA-Ⅰ类抗原表达

为了为肝癌细胞毒性T细胞疫苗设计、构建及免疫治疗策略的决策提供体外实验研究依据,采用免疫细胞化学LSAB法及流式细胞术观察了体外培养人肝癌细胞的HLA-Ⅰ类抗原表达情况.结果显示,人肝癌细胞株Alexander、HepG2、SMMC-7721、QGY-7703都有较强的HLA-Ⅰ类抗原表达,这使细胞毒性T细胞杀伤肝癌细胞成为可能.     

丙型肝炎病毒感染外周血单个核细胞的进一步研究

为进一步研究外周血单个核细胞 (PBMC)感染丙型肝炎病毒 (HCV)的状况。用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)、地高辛标记 HCV探针作原位杂交和链酶亲和素 -生物素 (SABC)作免疫组化三项技术 ,检测血清和 PBMC中的 HCV RNA和 HCV NS5 抗原。结果显示 RT- PCR检测的 2 0例慢性丙型肝炎患者 ,除去 4例接受干扰素治疗者 ,余16例中有 14例 (87.5 % )血清 HCV RNA阳性 ,2例血清 HCV RNA阴性者的 PBMC- HCV RNA阳性。对 RT- PCR检测的 9例 PBMC- HCV RNA阳性患者 ,进一步用原位杂交和免疫组化技术 ,分别检测 PBMC中的 HCV RNA和HCV NS5 抗原。显示这几种方法的检测结果是基本一致的 ,呈正相关关系。患者的 PBMC中的 HCV RNA和 HCV NS5抗原呈散在颗粒状或弥漫分布 ,主要位于胞浆中 ,HCV NS5 抗原还分布于胞膜上。证实 HCV可以感染 PBMC,并在其中复制 ,复制部位在胞浆。     

外周血单个核细胞穿孔素活性与慢性乙肝关系的探讨

目的 探讨外周血单个核细胞(PBMC)穿孔素活性与不同程度慢性乙肝肝损害、HBV复制程度之间的关系。方法 将5l例慢性乙肝按肝损害程度分为轻度组(22例)和中重度组(29例)；按HBVDNA测定分为HBVDNA( )组(32例)和HBVDNA(-)组(19例)，另以15例健康者为对照组，采用溶血法测定各组PBMC穿孔素活性并进行比较。结果 轻度组PBMC穿孔素活性低于对照组，中重度组PBMC穿孔素活性高于对照组，均有显著性差异(P＜0．05)。HBV-DNA( )组PBMC穿孔素活性高于对照组，有显著性差异(P＜0．05)；HBV-DNA(-)组与对照组相比无显著性差异(P＞0．05)。结论 PBMC穿孔素活性与慢性乙肝肝损害有一定关系；与乙肝病毒复制有一定关系。     

乙型肝炎患者外周血单个核细胞中HBV-DNA检测的临床意义

目的 研究HBV感染者血清及外周血单个核细胞(PBMC)中HBV-DNA的感染情况.方法 采用荧光定量PCR技术对112例乙肝患者PBMC及血清中HBV-DNA的感染情况进行检测.结果 PBMC内HBVDNA阳性60例,阴性52例;PBMC内HBV-DNA阳性患者HBeAg阳性率68.3%,较PBMC内HBV-DNA阴性患者显著增高(P＜0.05);血清和PBMC检测结果一致的患者占总检出率的79.5%.肝硬化组PBMC内HBV-DNA阳性率高于急性乙型肝炎组和慢性肝炎组(P＜0.05).结论 血清与PBMC内HBV-DNA阳性率以及HBeAg阳性率存在明显的相关性.PBMC中HBV-DNA的持续存在可能与乙肝易慢性化有关.     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞mIL—2R表达

探讨慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中膜白介素－２受体在静息状态和诱导状态的表达水平及其与ＨＢｅＡｇ的关系。方法用生物素－链霉亲和素系统检测１０８例慢性乙肝患者ＰＢＭＣ的ｍＩＬ－２Ｒ,并平行测定患者血清中ＨＢｅＡｇ。结论慢性乙肝患者ｍＩＬ－２Ｒ表达水平低下,且与ＨＢｅＡｇ存在有关。     

丙型肝炎病毒感染外周血单个核细胞对丙型肝炎的影响

为了研究丙型肝炎病毒(HCV)感染外周血单个核细胞(PBMC)对丙型肝炎的影响,运用非同位素原位杂交法(NISH)和链酶亲和素-生物素(SABC)法分别检测20例慢性丙型肝炎患者PBMC中的HCV-RNA及其T淋巴细胞亚群,同时检测这些患者的肝功能指标。结果显示8例(40．0％)HCV患者的PBMC中的HCV-RNA呈阳性结果。HCV-RNA呈散在颗粒状或弥漫分布,主要位于胞浆中。HCV-RNA阳性组和阴性组的CD+4T细胞比例低于正常对照组,CD+8T细胞比例高于正常对照组,CD+4／CD+8比值下降;而HCV-RNA阳性组的CD+4T细胞比例则又低于阴性组,CD+8T细胞比例高于阴性组,CD+4／CD+8比值出现倒置(P<0．01)。两组的肝功能检查结果之间无显著差异(P>0．05)。提示HCV感染PBMC后引起T淋巴细胞亚群发生变化,使CD+4和CD+8T细胞功能下降或不能很好地协调作用,从而成为HCV持续感染的重要原因之一。HCV感染PBMC对肝脏炎症程度的影响可能不大。     

慢性乙型肝炎病毒携带者外周血单个核细胞体外抗原诱导的抗体反应

目的 了解慢性乙型肝为病毒（ＨＢＶ）携带者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）在体外对抗原诱导的抗体应答反应。方法 选择１８例无症状ＨＶ携带者（ＡＳＣ）和１８例慢性乙型肝炎患者（ＳＣ）,同时选择１５例自愿者作正常对照,分离ＰＢＭＣ,在体外应用血源乙肝表达抗原（ＨＢｓＡｇ）和重组乙肝核心抗原（ｒＨＢｃＡｇ）刺激,检测相应特异性抗体的产生。结果 ①无症状ＨＢＶ携带者和慢性乙型肝炎患者均有不同程度的抗体应答,分     

各型乙型肝炎HLA-Ⅰ、Ⅱ类抗原免疫组织化学研究

用免疫组织化学桥联酶标APAAP法和PAP法对各型乙型肝炎113例检测了肝内的HLA-Ⅰ、Ⅱ类抗原、T细胞亚群、HBsAg和HBcAg,同时测定血清HBV DNA(斑点杂交)和β_2微球蛋白(RIA)。结果表明;急性肝炎、慢性活动性肝炎、重症肝炎患者的肝细胞HLA-Ⅰ、Ⅱ类抗原表达增强,尤以Ⅰ类抗原明显,慢性迁延性肝炎则几乎无表达。肝细胞HLA-Ⅰ类抗原表达与肝内炎症反应、肝细胞膜型HBSAg和浆膜型HBcAg关系密切,肝内活动性病变主要浸润细胞为CD_2~ 细胞,CD_0~ 细胞构成主要的细胞亚群。认为抗原依赖的、HLA限制的细胞毒性T细胞效应是构成乙型肝炎免疫损害的主要机制。     

丙型肝炎病毒感染外周血单个核细胞对丙型肝炎的影响

为了研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）对丙型肝炎的影响,运用非同位素原位杂交法（ＮＩＳＨ）和链酶亲和素－生物素（ＳＡＢＣ）法分别检测２０例慢性丙型肝炎患者ＰＢＭＣ中的ＨＣＶ－ＲＮＡ及其Ｔ淋巴细胞亚群,同时检测这些患者的肝功能指标。结果显示８例（４０．０％）ＨＣＶ患者的ＰＢＭＣ中的ＨＣＶ－ＲＮＡ呈阳性结果。ＨＣＶ－ＲＮＡ呈散在颗粒状或弥漫分布,主要位于胞浆中。ＨＣＶ－ＲＮＡ阳     

外周血单个核细胞糖皮质激素受体表达与Graves眼病的疗效关系

目的　研究 Graves眼病患者外周血单核细胞糖皮质激素受体 (GR)表达类型与糖皮质激素治疗效果的关系。方法　用定量 RT- PCR方法检测患者外周血单个核细胞 h GRα/ GRβ m RNA比值 ,然后使用糖皮质激素治疗 ,据治疗效果分显效、有效、无效三组。结果　显效、有效、无效的 h GRα/ GRβ m RNA比值分别为 7.4 9±2 .5 2 ,9.87± 6 .82 ,12 .0 5± 9.39,有逐渐增加趋势 ,但无统计学意义 (P>0 .0 5 )。结论　外周血单个核细胞糖皮质激素受体表达 h GRα/ h GRβ m RNA与糖皮质激素治疗 Graves眼病的疗效无明显关系     

食管癌患者外周血单个核细胞中miR-21的表达

目的 检测食管癌患者外周血单个核细胞中miR-21,分析和探讨其在食管癌发生发展中的作用及其意义.方法 采用xMAP液态芯片方法,检测45名食管癌患者和相对应45名正常对照组外周血单个核细胞中miR-21,进行统计学分析.结果 食管癌患者外周血单个核细胞中miR-21的表达显著高于正常对照组(P＜0.05),而其在鳞癌和腺癌中表达差异无显著性(P＞0.05).结论 miR-21可能参与了食管癌发生发展的过程,有望成为食管癌早期诊断的标志物.     

急性肾炎患儿外周血单个核细胞NF-KB的表达

目的:探讨NF-KB在肾炎发生和发展中的作用。方法:采用MMLV-步法RT-PCR法,检测急性肾炎患儿疾病期外周血单个核细胞NF-KB的表达。结果:急性肾炎患儿外周血单个核细胞NF-KB表达高于正常对照组。结论:外周血单个核细胞NF-KB可作为肾炎发生时炎症反应指标。     

无症状乙型肝炎病毒携带者外周血单个核细胞穿孔素基因表达

目的:检测无症状乙型肝炎病毒携带者(ASCs)与正常对照组消减文库中的差异基因穿孔素(perforin)在相应人群中的表达。方法:分离43例ASCs和41例正常对照者的外周静脉血单个核细胞(PBMC)并提取RNA,做定量RT-PCR检测。结果:穿孔素在HBV携带者中表达水平是正常对照的3.58倍。结论:穿孔素基因在ASCs高表达,对于阐明ASCs的发病机制有重要意义。