安多霖预防小鼠放射性肺损伤的初步实验研究

目的 观察安多霖(ADL)对小鼠放射性肺损伤的防治作用.方法 成年雄性昆明种小鼠180只,随机数字表法分为正常对照、照射对照和ADL低、中、高剂量及地塞米松治疗6组,每组30只.后5组小鼠用6MVX射线一次胸部照射20 Gy,均于照射前ld开始灌胃给药,连续6周,ADL剂量分别为2、4和8g/kg,地塞米松为0.12 mg·kg-1·d-1.照射后观察各组小鼠一般状况,呼吸频率;在第2、4和6周时取肺组织做肺系数测定,同时测定小鼠肺羟脯氨酸含量及转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量;HE染色观察肺组织病理改变.结果 ADL低剂量组与照射对照组相比,呼吸频率、肺羟脯氨酸及TGF-β1的含量差异无统计学意义.ADL中、高剂量组和地塞米松组与照射对照组相比,呼吸频率减慢、肺羟脯氨酸及TGF-β1的含量降低差异有统计学意义(F =2.668～161.646,P＜0.05).HE染色观察肺组织病理改变显示,ADL中、高剂量组和地塞米松组与照射对照组相比,肺组织充血、水肿及肺泡壁增厚程度减轻.结论 安多霖可以降低胸部照射后小鼠肺羟脯氨酸及TGF-β1的含量,减轻小鼠放射性肺损伤程度,对放射性肺损伤具有一定的防治作用.     

痰热清注射液对大鼠急性放射性肺损伤的防治

目的 观察痰热清对大鼠急性放射性肺损伤的防治作用。方法60只雌性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、痰热清中药治疗组(中药组)和地塞米松联合头孢氨苄西药治疗组(西药组),每组动物均为15只。用6 MV X射线直线加速器对大鼠双肺进行单次照射25 Gy。分别于照射后2、4和6周3个时间点,每组各随机取5只大鼠活体观察和取材。取动脉血检测细胞因子;测定肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞计数;取右中肺组织,以测定羟脯氨酸含量;取右上肺组织切片,行HE染色,光镜观察病理改变。结果模型组大鼠肺组织于照射后2周出现放射性肺炎改变,第6周时肺泡间隔增厚明显,肺泡腔纤维素渗出。除空白组外,中药组大鼠肺组织放射性肺炎反应最轻,BALF中性粒细胞数相对较低,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和肺组织羟脯氨酸含量均较模型组低。结论痰热清可抑制致炎因子和致纤维化因子的表达,减轻急性放射性肺损伤的炎性反应,延缓放射性肺纤维化的进展,对急性放射性肺损伤具有防治作用。     

克唑替尼上调TGF-β1通路对小鼠急性放射性肺损伤的影响

目的研究克唑替尼对小鼠急性放射性肺损伤的影响及其可能机制。方法应用随机数表法将72只小鼠分成4组:健康对照组(NC组)12只、单纯给药组(CRZ组)12只、单纯照射组(RT组)24只、克唑替尼+照射组(RT+CRZ组)24只。采用全肺单次12 Gy X射线照射。分别于照射后1、2、4、8周处死获取肺组织标本及肺泡灌洗液, 光学显微镜下计数有核细胞的总数, 聚氰基丙烯酸正丁酯(BCA)蛋白检测法检测蛋白质浓度, HE染色和MASSON染色观察肺组织病理变化, 实时荧光定量(qPCR)检测转化生长因子β1(TGF-β1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)mRNA水平表达, 免疫组织化学法观察髓过氧化物酶(MPO)和ICAM-1的定位和表达, Western blot法检测TGF-β1、Smad3、p-Smad3及ICAM-1蛋白表达情况。结果在各个时间点上, RT+CRZ组肺组织炎症、渗出表现显著加重, 肺泡灌洗液中的细胞总数及蛋白浓度均较其他3组增多, 与RT组相比, 第4周差异具有统计学意义(t=-5.031、-2.814, P<0.05)。照射后第1、4、8周, 与RT组相比,...     

中肺合剂防治大鼠早期放射性肺炎的初步实验研究

目的应用大鼠放射性肺炎模型观察中肺合剂对早期放射性肺炎的防治效果,探讨其在放射性肺炎中的作用机制,以期为临床应用提供实验依据。方法雌性Wistar大鼠60只,随机分为对照组（0Gy）、照射组（30Gy）、地塞米松（DXM）组（30Gy＋DXM）和中肺合剂组（中肺合剂＋30Gy）。单次6MVX线30Gy照射大鼠双肺,建立复制放射性肺炎模型。分别于2和4周时各处死5只大鼠取肺组织,进行HE染色观察肺组织病理变化,检测肺系数,用生化法测定肺羟脯氨酸含量,用免疫组化法测转化生长因子β1（TGF-β1）的表达。结果照射组大鼠肺损伤明显,肺系数、肺羟脯氨酸含量和TGF-β1的表达较对照组明显增高（P〈0.05）,而中肺合剂组比照射组肺充血、出血、渗出性改变及肺泡壁增厚程度减轻,且肺系数、肺羟脯氨酸含量和TGF-β1的表达有一定程度的下降。结论中肺合剂对大鼠早期放射性肺炎有一定程度的保护作用,其机制可能是通过抑制TGF-β1表达,使放射性肺炎及纤维化病变减轻。     

每周重复照射建立大鼠放射性肺损伤模型的评价

目的评价每周小剂量重复照射大鼠放射性肺损伤模型的可行性、科学性及实用性。方法36只Wistar种雌性大鼠,按5:1比例随机分为照射组(A组)30只、对照组(B组)6只。6-MV直线加速器对A组大鼠右肺进行分次照射(5Gy/次,1次/周,累积剂量最高为30Gy),于照射后第4、6、8、12、26周处死,每时相点处死6只,B组于第4周末处死。观察动物活体外观、肺的大体标本、行HE染色观察大鼠肺组织学变化、ELISA法检测血清和SP法检测肺组织中的TGF-β1蛋白表达。结果A组受照肺组织表现出放射性肺炎及肺纤维化,大鼠血清和肺组织TGF-β1表达第4周表达升高,到第12周达到高峰,26周下降。结论每周小剂量重复照射所制作的大鼠放射性肺损伤模型稳定可靠,动物死亡率低,符合临床放疗实际。     

银翘温胆汤干预大鼠放射性肺纤维化的初步实验研究

目的应用大鼠放射性肺纤维化模型观察银翘温胆汤对早期放射性肺炎和晚期肺纤维化的干预效果。探讨其在治疗放射性肺纤维化中的作用机制,以期为临床应用提供实验依据。方法将雄性大鼠45只随机分为对照组(0Gy+生理盐水)、照射组(20Gy+生理盐水)、银翘温胆汤组(20Gy+中药),单次6MV X线20Gy照射大鼠双肺,建立放射性肺纤维化模型。分别于2、4、6周时各处死5只大鼠取肺组织,进行HE染色观察肺组织病理变化,检测肺系数,用免疫组化法测转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果照射组大鼠肺损伤明显,肺系数、肺纤维化和TGF-β1的表达较对照组明显增高(P<0.05),而银翘温胆汤组大鼠比照射组的肺充血、出血、渗出性改变及肺泡壁增厚、肺纤维化程度减轻,且肺系数和TGF-β1的表达有一定程度的下降。结论银翘温胆汤对大鼠早期放射性肺炎和肺纤维化有一定程度的保护作用,其机制可能是通过抑制TGF-β1表达,使放射性肺炎及肺纤维化病变减轻。     

全氟化碳乳剂对急性肺损伤大鼠IL-1β水平的影响

 目的 探讨全氟化碳乳剂(PFCE)静脉注射对急性肺损伤大鼠血清和肺泡灌洗液白介素-1β(IL-1β)水平的影响.方法 56只雄性健康Wistar大鼠腹腔麻醉后分为对照组(NC组)、内毒素组(Lipopolysaccharide,LPS组)、PFCE预防组(预防组).NC组静脉注射生理盐水10 ml/kg后2 h处死,LPS组和预防组分别静脉注射生理盐水/PFCE 10 ml/kg后10 min静脉注射LPS 8mg/kg,于2h、4h、6h分批处死.比较三组肺脏病理损伤程度、血清和肺泡灌洗液IL-1β浓度.结果 LPS组肺病理主要表现为肺泡隔明显增宽,大量白细胞渗出、聚集,部分肺泡腔中可见渗出液、出血、萎陷不张,预防组较LPS组明显减轻,病理损伤评分显著下降.与LPS组相比,预防组4 h、6 h肺泡灌洗液IL-1β浓度[(0.08±0.01) ng/ml、(0.07±0.02) ng/ml]显著降低(P＜0.05),而血清IL-1β浓度无明显变化.结论 PFCE通过减轻肺脏炎性细胞浸润、降低肺内IL-1β释放可能是其预防急性肺损伤发生的重要机制之一.     

丹参对大鼠急性肺损伤保护作用的实验探讨

目的探讨丹参对创伤性急性肺损伤（ALI）的治疗效应及可能机制。方法SD大鼠60只，随机分为正常组、急性肺损伤模型组及丹参注射液治疗组，每组各20只。分别于1周后电镜HE染色观察各组大鼠肺组织病理改变，肺湿／干重比（W／D）观察肺脏水通透性的变化，并且测定支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞百分比及支气管肺泡灌洗液（BALF）总蛋白和乳酸脱氢酶（LDH）等肺损伤指标。结果丹参注射液治疗组的大鼠肺组织病理改变及肺湿／干重比均优于急性肺损伤模型组，且不同程度降低BALF中中性粒细胞含量及总蛋白和乳酸脱氢酶。结论丹参对急性肺损伤具有保护作用。     

MMP-12异常表达对放射性肺损伤大鼠肺内成纤维细胞转化的影响

目的 观察放射性肺损伤过程中基质金属蛋白酶12(MMP-12)过表达对肺成纤维细胞转化的作用.方法 32只雄性Wistar大鼠,体重250～280g,随机分为正常对照组(n=8)和照射组(n=24).照射组用20Gy60Co γ射线进行全胸照射,分别于照射后1、2、4周行肺组织取材,每时间点8只.应用明胶酶谱法检测MMP-12酶活性变化,组织特殊染色法观察肺泡壁弹力纤维降解情况,透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞与肺间质细胞间的"信号交流"(cross talking)现象,ELISA法检测肺组织中TGF-β1含量,免疫组化检测肺组织a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)表达情况.结果 MMP-12酶活性在照射后1周开始增高,至照射后4周时有所下降;肺泡壁基底膜弹力纤维照射后1周开始出现降解断裂,4周时最为严重;肺组织TGF-β1含量和a-SMA免疫组化阳性信号在1～4周内随照后时间延长而逐渐升高.电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞与肺间质细胞间出现"信号交流"现象.结论 照射后肺组织MMP-12酶活性增高,可能通过降解基底膜弹力纤维促进成纤维细胞转化,启动肺纤维化的发生.     

大鼠放射性肺损伤的高分辨率CT表现和转化生长因子-β、肿瘤坏死因子-α表达的相关性研究

目的 研究大鼠放射性肺损伤的高分辨率CT(HRCT)表现和血清转化生长因子B(TGF-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的相关关系,探讨细胞因子检测与HRCT检查对放射性肺损伤预测和早期诊断的价值.方法 48只Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠采用完全随机方法分为8组,A组作为正常对照组,B～H组全肺单次剂量15 Gy 60 Co照射.于照射前、照射后1、2、4、8、12、16及24周分别依次取A～H组行HRCT扫描及酶联免疫法测定各组大鼠血清中细胞因子TGF-β、TNF-α水平,大鼠安乐死后取肺组织行病理观察.将同期HRCT征象、细胞因子水平及病理变化对照观察分析.组间平均水平比较运用t检验,相关性用Spearman等级相关分析.结果 HRCT扫描显示了7组大鼠放射性肺损伤发展过程中的4种征象:磨玻璃阴影1只、补丁实变影8只、大片实变影7只和纤维索条影3只.照射后1～24周各照射组大鼠血清中TGF-β平均水平[(3.33±0.47)、(3.20±0.65)、(3.12±0.45)、(3.54±0.80)、(3.30±1.13)、(2.49±0.67)、(4.19±0.22)μg/L]均较对照组平均水平[(0.45±o.14)μg/L]明显升高(P值均＜0.05);TGF-β平均水平至照射后24周升至最高值[(4.19±0.22)μg/L],与其他照射组比较差异有统计学意义(P值均＜0.05).照射后1～12周各照射组大鼠血清中TNF-α平均水平[(236.52±29.01)、(214.91±34.53)、(270.97±42.12)、(208.83±86.51)、(208.83±82.23)ng/L]均较对照组[(31.78±0.92)ng/L]明显升高(P值均＜0.05);TNF-α平均水平至第4周达到高峰[(270.97±42.12)ng/L],与其他照射组比较P值均＜0.05,至第16、24周明显降低[(60.63±38.49)、(32.07±1.05)ng/L],与对照组平均水平接近(P值均＞0.05).HRCT表现与TGF-β、TNF-α表达均无等级相关(r.分别为0.5570和0.1013),等级相关假设检验P＞0.05.病理变化与同期影像征象对照,两者相符合.结论 TGF-β、TNF-α变化早,提示血液中TGF-β、TNF-α的监测可以预测放射性肺损伤的发生.HRCT表现与TGF-β、TNF-α表达均无等级相关.     

前列腺素E1注射液对急性放射性肺损伤的保护作用

目的探讨前列腺素E1注射液对放射诱发的早期肺损伤的保护作用。方法健康雌性SD大鼠39只,随机分为3组：正常对照组、单纯照射组、照射加药组。用8MeV电子线单次20Gy照射右全肺,照射当日即给予前列腺素E1注射液（10μg·kg^-1·d^-1）尾静脉注射,另外两组给予等量生理盐水。照后第5、15、30日采血测定血清转化生长因子β1（TGF-β1）浓度,肺组织进行苏木素-伊红染色。结果照射后肺组织炎症和肺水肿进行性加重;照射后5、15、30d,单纯照射组、照射加用药组血清TGF-β1水平较正常对照组进行性升高,尤以照射后15、30d升高明显（P〈0.05）,照射加用药组较单纯照射组的TGF-β1水平低,15、30d比较有统计学意义（P〈0.05）。结论前列腺素E1注射液能降低血清TGF-β1水平,增加肺组织对放射性损伤的耐受。     

巨噬细胞金属蛋白酶-12在放射性肺损伤早期组织重建中的作用

目的 探讨巨噬细胞金属蛋白酶(MMP-12)在放射性肺损伤早期肺组织重建中的作用。方法 用20 Gy ⁶⁰Co γ射线对Wistar大鼠进行全胸照射,分别于照后1、2和4周进行肺组织取材,RT-PCR方法检测MMP-12基因表达,酶谱分析法检测MMP-2、MMP-9和MMP-12酶活性,组织特殊染色法检测弹力纤维降解,电镜观察Ⅱ型细胞与肺泡隔间质细胞间的"信息交流(cross talking)"现象,ELISA检测肺泡灌洗液中TGF-β1和TNF-α含量,免疫组化检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。结果 照射后1、2和4周肺组织MMP-12基因表达增加,2~4周MMP-12酶活性增高;照射后1周肺泡基底膜弹力纤维出现降解断裂,4周时最为严重;电镜观察发现肺泡Ⅱ型细胞与间质细胞间发生Cross talking现象,肺泡灌洗液TGF-β1和TNF-α含量与α-SMA免疫组化阳性信号皆随照射后时间延长而增高。结论 照射后肺组织MMP-12表达增加,可能通过降解基底膜弹力纤维启动肺组织重建,导致肺损伤朝着纤维化方向发展。     

当归调控放射性肺损伤TGF-β1表达水平的研究

目的阐明当归对放射性肺损伤过程中TGF-β1水平的影响,寻求预防或治疗放射性肺损伤的有效途径.方法成年雌性C57BL/6小鼠72只,随机分作4组(1)空白对照组9只,腹腔注射生理盐水20 ml/(kg·d);(2)单纯当归组9只,腹腔注射25%当归注射液20 ml/(kg·d);(3)单纯照射组27只,全肺单次照射12 Gy+腹腔注射生理盐水20 ml/(kg·d);(4)照射+当归组27只,全肺单次照射12 Gy+腹腔注射25%当归注射液20 ml/(kg·d).生理盐水和25%当归注射液于照射前1周开始注射,直至照射后2周结束.于照射后1、24和72 h、1 (潜伏期)、2、4、8、16(肺炎期)和24周(纤维化期)取实验组及相同鼠龄对照组小鼠肺组织,空白对照组与单纯当归组各1只,单纯照射组与照射+当归组各3只.左肺留作组织学与免疫组化分析.右肺作总RNA提取及实时定量RT-PCR分析.结果空白对照组和单纯当归组动物,其免疫组化阳性细胞数相对较低,仅波动在9～31个之间.单纯照射组的阳性细胞数较上述两组明显增高(P<0.01),尤以1周后为甚.照射+当归组的阳性细胞数则介于两者之间,也显著低于单纯照射组(P<0.01).实时定量PCR结果显示,单纯照射组的TGF-β1mRNA相对含量较单纯当归组和空白对照组均有统计学意义(P<0.01).照射+当归组的TGF-β1mRNA相对含量较单纯照射组明显下调.但后两组数值之间并无统计学意义(P=0.054).结论 TGF-β1在放射性肺损伤发生、发展过程中起着重要作用,而当归能明显降低该过程中TGF-β1表达水平,提示当归可能通过调控该细胞因子来起到辐射防护之作用.     

SD大鼠放射性肺纤维化模型的建立及评价

目的 建立SD大鼠放射性肺纤维化模型,探寻实验中纤维化蛋白、细胞因子等作为组织纤维化程度评价指标的可行性,为放射性肺纤维化的研究提供基础。 方法 选取体重为180~200 g的SD雄性大鼠37只,完全随机分为对照组（5只）和照射组（32只）。照射组采用X射线行右肺单次照射,照射剂量分别为13 Gy（10只）、15 Gy（10只）和17 Gy（12只）,分别于照后4个月和6个月,采用苏木精-伊红染色和马松三色染色评价大鼠肺组织纤维化程度;采用Western blot检测纤维黏连蛋白1（FN1）、基质金属蛋白酶2（MMP2）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在肺组织中的表达;测定肺组织中羟脯氨酸含量以评价肺组织中胶原蛋白表达水平。酶联免疫吸附测定法测定支气管肺泡灌洗液中转化生长因子β（TGF-β）、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、γ干扰素（IFN-γ）的变化。组间比较采用独立样本 t 检验。 结果 与对照组相比,照射组4~6个月后均出现肺纤维化,纤维化程度随照射剂量的增大和照射时间的增长而增加;照射组大鼠肺组织中FN1、α-SMA的蛋白表达水平较对照组升高,MMP2的蛋白表达水平较对照组降低;6个月照射组羟脯氨酸含量较对照组升高,分别从（514.19 ±282.20）μg/mg 增加至（886.13 ±145.01）、（1188.70 ±273.84）、（1700.70 ±590.95）μg/mg,且差异均有统计学意义（t=2.621、3.609、4.004,均P<0.05）;支气管肺泡灌洗液中TGF-β、白细胞介素6、TNF-α分泌量较对照组上调,差异有统计学意义（t=4.030~12.780,均P<0.05）,IFN-γ较对照组下调,差异有统计学意义（t=2.498~4.303,均P<0.05）。 结论 SD大鼠放射性肺纤维化模型构建成功。大鼠肺组织纤维蛋白含量未能反映肺组织纤维化程度,肺组织羟脯氨酸含量与支气管肺泡灌洗液中细胞因子在重度纤维化时可作为评价指标。     

肿节风在小型猪放射性肺损伤过程中对TGF-β1/Smads表达水平的影响

目的 研究肿节风在小型猪放射性肺损伤过程中对TGF-β1/Smads信号通路上各信号转导分子表达水平的影响。方法 75头小型猪按随机数字表法均分为健康对照组(不照射,给予生理盐水)、单纯照射组(右肺单次15 Gy γ射线+生理盐水)及药物+照射组(右肺单次15 Gy γ射线+肿节风)。分别于照射后2、4、8、12及24周取出右肺。应用HE染色观察肺组织病理改变,Real-time PCR及Western blot分别检测上述各时间点小型猪肺组织内TGF-β1、Smad2、Smad3和Smad7 mRNA及蛋白表达情况。结果 肿节风能显著减轻小型猪放射性肺损伤的炎症表现及纤维化程度。与健康对照组比较,单纯照射组TGF-β1和Smad3的表达水平从照射后第2周起、Smad2和Smad7的表达水平分别从照射后第8周和第12周起显著升高(P<0.05)。与单纯照射组比较,药物+照射组TGF-β1和Smad2的表达水平分别从照射后第4周和第8周起明显下降(P<0.05),Smad3的表达水平无明显变化,而Smad7的表达水平则从照射后第2周起显著升高(P<0.05)。结论 在放射性肺损伤的发病过程中,肿节风通过调节TGF-β1/Smads信号通路中主要信号转导分子TGF-β1、Smad2和Smad7的表达水平而发挥放射防护作用。     

益气活血中药对大鼠TGF-β1、TNF-α的影响

目的 探讨益气活血中药对小剂量重复照射下不同时相大鼠血清、肺组织中转化生长因子-β₁(TGF-β₁)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白的表达,探讨其对放射性肺损伤的防治作用及作用机制。方法 66只Wistar雌性大鼠随机表法分为照射加中药组(A组)30只、单纯照射组(B组)30只、健康对照组(C组)6只。6MV直线加速器对前2组大鼠右肺进行分次照射(5 Gy/次,1次/周,累积剂量最高为30 Gy),每组各6只大鼠于照射后第4、6、8、12及26周处死,C组于第4周末处死,取血清标本进行酶联免疫吸附法(ELISA)检测,取肺组织标本进行免疫组织化学检测,观察各组大鼠不同时相血清、肺组织中TGF-β₁、TNF-α蛋白表达的动态变化。结果 B组大鼠血清、肺组织中TGF-β₁、TNF-α于照射第4周增高,第12周达高峰,第26周略下降;A组各时相大鼠血清、肺组织中TGF-β₁、TNF-α蛋白表达趋势与B组相同,但低于B组。结论 益气活血中药具有抑制TGF-β₁ 、TNF-α合成分泌的作用及减轻放射性肺损伤的作用,其机制与抑制TGF-β₁、TNF-α表达有关。     

益气活血中药对放射性肺损伤大鼠血清及肺组织ET-1表达影响的实验研究

目的探讨血浆及肺组织中ET-1在放射性肺损伤中的改变及益气活血中药对其治疗作用。方法96只Wistar种雌性大鼠随机分为照射加中药组(A组)30只、照射加氨溴索组(B组)30只、单纯照射组(C组)30只、正常对照组(D组)6只。用直线加速器对前三组大鼠右肺进行分次照射(5Gy/次,1次/周,累积剂量为30Gy),于照射开始后第4、6、8周3个时间点分别处死三组大鼠各6只,采血测定ET-1浓度,肺组织测定ET-1免疫组化。结果照射后肺组织炎症和肺水肿进行性加重;C组照射后5,15,30,60d血清及肺组织ET-1水平进行性升高,A组、B组各时相值表达相似,均明显低于C组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血浆ET-1水平的变化能反映放射性肺损伤的严重程度,益气活血中药能抑制肺组织ET-1的表达,降低血浆ET-1水平,可能是益气活血中药治疗放射性肺损伤的一个作用机制。     

内毒素血症犬部分去除白细胞后肺内凝血纤溶功能的变化

目的观察部分去除外周血白细胞后内毒素血症犬肺内凝血功能的变化,探讨活化白细胞对内毒素血症犬肺损伤的影响及其机制。方法雄性杂种犬30只,采用随机数字表法分为内毒素组(L组)、假白细胞去除组(S组)及白细胞去除处理组(T组),每组10只。L组仅经静脉输注2mg/kg LPS建立内毒素血症犬模型,不行白细胞去除;T组在建模后12~14h使用自动连续血流血细胞分离机进行白细胞去除;S组建模后12~14h行假白细胞去除(将去除的终产物回输入体内)。建模后36h切取肺组织,采用ELISA法检测肺泡灌洗液中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、可溶性血栓调节蛋白(sTM)、活化蛋白C(APC)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平,免疫组化染色观察肺组织血栓调节蛋白(TM)的表达,并行肺湿/干重检测及肺组织病理学观察。结果与L组及S组比较,T组犬肺泡灌洗液中APC水平显著增高,NEs、TM、PAI-1水平及肺湿/干重比值显著降低(P<0.05),肺组织内TM表达量也明显增加,而L组与S组各指标比较无显著差异(P>0.05)。病理学观察显示,T组急性肺损伤发生率(2/10)显著低于L组(7/10)及S组(8/10,P<0.05)。结论部分去除白细胞可降低肺泡灌洗液中的NE水平,阻止肺内TM表达进一步下降,从而改善肺泡灌洗液中凝血纤溶异常,降低内毒素犬急性肺损伤的发生率。     

RH005对小鼠放射性间质性肺炎的治疗作用研究

目的 探讨Ⅰ类重组蛋白RH005对小鼠放射性间质性肺炎的治疗作用。方法 75只雄性C57BL/6N小鼠随机分为对照组、照射组、RH005组,每组25只。采用20 Gy X射线单次全胸照射复制放射性间质性肺炎模型,剂量率为400 mu/min。RH005组小鼠在照射后24 h予以腹腔注射RH005,5μg/kg,1次/d,连续给药30 d;对照组和照射组小鼠予以腹腔注射等体积生理盐水。于照射后1个月,通过小鼠肺功能检测、肺组织病理观察、肺泡腔面积定量分析、肺组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)及转化生长因子β(TGF-β)免疫组化检测等方法,研究RH005对小鼠放射性间质性肺炎的治疗作用。结果 20 Gy X射线全胸照射可致小鼠放射性间质性肺炎,表现为照射后1个月,照射组小鼠吸气峰值、呼气峰值和每分钟通气量较对照组均显著降低;肺组织炎症细胞浸润且肺泡腔面积减小;TNF-α及TGF-β表达增高。RH005组小鼠吸气峰值、呼气峰值和每分钟通气量均较照射组显著增加;小鼠肺组织炎症细胞浸润较照射组减轻,肺泡腔面积较照射组显著增加;TNF-α及TGF-β的表达较照射组显著减少。结论 RH005能够减轻...     

巨噬细胞金属弹力蛋白酶表达在放射性肺损伤形成中的变化特点及意义

目的 观察放射性肺损伤过程中基质金属蛋白酶12(MMP-12,又称巨噬细胞金属弹力蛋白酶)表达的动态变化,探讨MMP-12在放射性肺损伤早期肺组织重建中的作用.方法 雄性Wistar大鼠24只,随机分为正常对照组(不接受照射),照射后1、2、4周组,每组6只.采用60Co γ射线(20Gy)对大鼠进行全肺照射,按照实验分组分别于照射后1、2、4周行肺组织取材.实时荧光定量FCR法检测MMP-12基因表达;Western blotting分析蛋白的表达变化;酶谱分析检测其酶活性;免疫组化观察MMP-12的组织分布;组织特殊染色法观察弹力纤维降解情况.结果 MMP-12 mRNA表达在照射后1周升高,2周下降,4周达高峰;蛋白表达于2周时明显升高,4周略微下降.MMP-12主要表达在肺泡间隔的巨噬细胞和被激活的成纤维细胞中.随着照射后时间的延长,肺组织损伤程度逐渐加重,肺泡壁与间隔增厚,肺泡结构遭到破坏,部分肺泡腔塌陷消失,肺泡基底膜内弹力纤维多发性断裂,呈不规则节段性线条散在分布.结论 60Co γ射线可以刺激MMP-12基因和蛋白的表达,说明MMP-12可能在放射性肺损伤早期起着十分重要的作用,推测可能通过降解弹力纤维,破坏基底膜正常结构,从而启动肺组织重建.