重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素3融合蛋白在大鼠体内的药代动力学研究

研究重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素3融合蛋白(GM-CSF/IL-3,MX)在大鼠体内的药代动力学。方法:实验采用同位素示踪技术结合HPLC分析,建立了MX在大鼠血浆中的测定方法,并测定了MX皮下注射3个剂量水平和静脉注射中剂量水平在大鼠体内的药动学参数。结果:高中低剂量T1/2分别为(1 5.4±2.0),(1 6.1±1.8)h,(1 3.2±2.2)h;AUC分别为(5 8 8±1 2 0),(2 8 6±4 7),(1 4 2±2 0)μg/(L.h),Cmax分别为(3 1.2±8.3),(1 4.8±1.2),(8.3±1.4)μg/L。结论:MX皮下注射给药后,Cmax和AUC与剂量成比例,MX在大鼠体内的代谢和消除是线性的。7 0μg/kg组生物利用度为3 5.6%。     

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子工程菌诱导条件的优化研究

目的：本实验用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)进行培养,探讨目的蛋白最高表达量的诱导条件。方法：通过实验条件的优化确定了适合GM-CSF表达的诱导温度、诱导时间和培养基等。结论：带有GM-CSF的基因工程菌在30℃生长最合适,培养5小时后42℃升温诱导5小时目的蛋白表达量最高。     

比较粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子与粒细胞集落刺激因子对骨髓抑制的疗效

目的：比较粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）与粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）治疗因化学治疗（化疗）致骨髓抑制的疗效。方法：３９例恶性肿瘤病人随机分ＧＭ－ＣＳＦ组１８例（男性１２例，女性６例，中位年龄４２ａ）与Ｇ－ＣＳＦ组２１例（男性１３例，女性８例，中位年龄５３ａ）。因化疗后引起骨髓抑制，分别应用ＧＭ－ＣＳＦ１５０μｇ／ｄ与Ｇ－ＣＳＦ１００μｇ／ｄ，ｓｃ，ｑｄ×（２～６）ｄ。结果：２组外周血白细胞总数及中性粒细胞计数与用药前比较均上升（Ｐ＜０．０１），２组间比较无显著差异（Ｐ＞０．０５）。不良反应均少而轻。结论：ＧＭ－ＣＳＦ与Ｇ－ＣＳＦ治疗化疗所致的骨髓抑制，效果相似。     

基因重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-3融合蛋白在猕猴中的药代动力学

目的　研究重组人粒 /巨噬细胞集落刺激因子 白细胞介素 3融合蛋白 (PIXY32 1)在猕猴中的药动学。方法　12 5I 标记结合反相高效液相和酸沉淀法。结果　 12 5I PIXY32 1纯度为 94 5 % ,标记前后PIXY32 1对TF 1细胞增殖的ED50 分别为 0 12 5和 0 119μg·L-1。12 5I PIXY32 1在体内迅速降解。iv和sc后末端T1/ 2 相近 ,为 6 6～ 8 2h。AUC随sc剂量增大 ,全身清除率ClS 相近 ,sc生物利用度6 3 %± 2 1%。泌尿系统浓度最高 ,胆汁其次 ,骨髓和脾脏高于其它组织略低于血清 ,脑内最低。主要经尿排泄 ,少部分在尿中以原型排出。结论　猕猴sc12 5I PIXY32 12 0～ 80 μg·kg-1后为线性药代动力学。肾脏在12 5I PIXY32 1的降解中起一定作用     

重组人粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子的临床研究进展

本文着重从骨髓发育异常综合症，骨髓移植，外周血造血干细胞移植，恶性肿瘤放疗和化疗引起的白细胞减少症和白血病等方面介绍了重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）近些年的临床研究进展情况。     

重组人粒细胞集落刺激因子融合蛋白对急性放射病小鼠的治疗作用

目的研究重组人血清白蛋白-粒细胞集落刺激因子融合蛋白（GW003）对急性辐射损伤小鼠的治疗作用。方法 80只BALB/c小鼠用60Coγ射线一次全身照射5.0 Gy后随机分为照射对照,GW003 1、3和9 mg/kg 4组,照射后1 h和7 d分别皮下注射生理盐水,GW003 1、3和9 mg/kg。照前1 d和照后30 d内隔日一次检测外周血细胞,照射后30 d处死小鼠取胸骨行组织病理学观察。结果 60Coγ射线5.0 Gy照射后小鼠外周血白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞数急剧下降,其中1和3 mg/kg GW003组白细胞和中性粒细胞减少持续时间较照射对照组显著缩短,开始恢复时间提前,白细胞最低值明显升高。GW003 9 mg/kg组上述指标与照射对照组相比有所改善,但无显著差异。3 mg/kg GW003组小鼠单核细胞数于照射后9～13 d明显高于照射对照组。各组间外周血淋巴细胞、血小板及红细胞数无明显差异。胸骨病理组织切片显示照射后30 d各组活存小鼠骨髓造血均十分活跃。结论 GW003对60Coγ射线5.0 Gy照射所致急性放射病小鼠有明显的治疗作用。     

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子治疗胃溃疡

哈药集团技术中心 1 前言 重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(英文名称:Recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,简称rhGM-CSF)作为九十年代以来高新技术生物工程产品,具有促进骨髓粒系造血的恢复,升高外周血白细胞数的作用,现已广泛应用于白血病及肿瘤病人的大剂量放化疗,严重感染等白细胞减少性疾病的治疗.     

比较粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子与粒细胞集落刺激因子对骨髓抑制的疗效

目的：比较粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）与粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）治疗因化学治疗（化疗）致骨髓抑制的疗效。方法：３９例恶性肿瘤病人随机分ＧＭ－ＣＳＦ组１８例（男性１２例，女性６例，中位年龄４２ａ）与Ｇ－ＣＳＦ组２１例（男性１３例，女性８例，中位年龄５３ａ）。因化疗后引起骨髓抑制，分别应用ＧＭ－ＣＳＦ１５０μｇ／ｄ与Ｇ－ＣＳＦ１００μｇ／ｄ，ｓｃ，ｑｄ×（２￣６）ｄ。结果：２组     

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子治疗早期糖尿病足溃疡疗效观察

目的:观察局部皮下注射重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)治疗糖尿病足溃疡患者的疗效。方法:36例糖尿病足溃疡1～3级患者均用胰岛素强化控制血糖在理想范围内,溃疡面先用强力碘清洁消毒处理,再用生理盐水冲洗,清除坏死组织,第2次用生理盐水冲洗,然后随机分为2组。治疗组:直接将rhGM-CSF注射剂按5μg.kg-1.d-1沿创面周围皮下注射,每日1次;对照组:常规消毒清洁创面后,用无菌凡士林纱布覆盖溃疡面,每天换药1次,2组均治疗30d。结果:治疗组与对照组的总有效率分别为100.0%、83.3%(P<0.05);平均住院时间分别为21、32d(P<0.05)。结论:rhGM-CSF局部皮下注射较常规换药可提高糖尿病足溃疡1～3级患者的总有效率,促进糖尿病足慢性创面的愈合。     

真核表达重组小鼠IL-15/Fc融合蛋白的制备和活性鉴定

目的 制备真核表达小鼠白细胞介素15(IL-15)和IgGγ1 Fc段融合蛋白,并探讨其对抗原特异性CD8+T细胞的作用.方法 运用RT-PCR方法,从B6小鼠脾细胞中分离小鼠IL-15和IgG γ1绞链区-CH2-CH3 Fc cDNA.在IL-15 3'端和Fc 5'端引入BamH I酶切位点,将IL-15和Fc直接连接,构建小鼠IL-15/Fe融合蛋白基因,再连接到真核表达质粒载体pcDNA3.1(a+)上,转化CHO-S细胞表达、纯化后,研究其活性.结果 融合蛋白486 bp的编码由162个氨基酸组成,其中含48个信号肽氨基酸的小鼠IL-15前体蛋白和由681 bp编码227个氨基酸的IgGγ1-CH2-CH3功能区构成;表达蛋白在IL-15信号肽引导下能高效分泌到培养液中,有二聚体和三聚体两种天然结构,单体分子量约50 kDa,能特异性的结合IL-15R并抑制抗原诱导的CD8+T细胞的增殖反应.结论 成功构建了小鼠IL-15/Fc融合蛋白真核表达载体,并在CHO-S细胞中得到高效表达.此融合蛋白具有较高的生物学活性,可有效地抑制抗原特异性CD8+细胞的增殖反应.     

辛伐他汀对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠IL-6和IL-8表达的影响

目的观察辛伐他汀对野百合碱（MCT）诱导的肺动脉高压大鼠炎症细胞因子IL-6和IL-8表达的影响,探讨辛伐他汀作用于肺动脉高压的机制。方法将30只健康雄性SD大鼠随机平均分为正常对照组、MCT诱导的肺动脉高压组（模型对照组）、辛伐他汀干预治疗组（治疗组）。模型对照组和治疗组注射野百合碱造模。治疗21 d后,采用右心导管法检测大鼠平均肺动脉压（mPAP）;称量RV和LV＋S,计算右心肥大指数（RVHI）。采用RT-PCR检测大鼠肺组织中IL-6和IL-8 mRNA的表达,采用ELISA法检测大鼠血清中IL-6和IL-8水平。结果模型对照组mPAP和RVHI值显著高于治疗组和正常对照组,治疗组和正常对照组mPAP和RVHI值比较无显著性差异。模型对照组大鼠肺组织中IL-6和IL-8 mRNA的表达和血清中IL-6和IL-8水平显著高于正常对照组和治疗组,而治疗组大鼠肺组织中IL-6和IL-8 mRNA的表达和血清中IL-6水平与正常对照组比较无显著性差异,但治疗组大鼠血清IL-8水平高于正常对照组（P〈0.05）。结论辛伐他汀可通过抑制MCT诱导大鼠肺动脉高压模型大鼠肺组织中炎性细胞因子的表达、下调大鼠炎性细胞因子的分泌,达到对肺动脉高压的治疗作用。     

姜黄素对戊四氮致癫大鼠海马区IL-2和IL-6表达水平的影响

目的探讨姜黄素抗癫的作用机制。方法取健康成年雄性SD大鼠,连续腹腔注射戊四氮,诱发大鼠点燃致癫模型。空白组和模型组灌予生理盐水5ml,1次/d,连续28d。低剂量和高剂量姜黄素组分别灌予姜黄素100mg/kg和200mg/kg,1次/d,连续28d;丙戊酸钠组灌予丙戊酸钠400mg/kg,1次/d,连续28d。治疗结束后,按照Racine的6级评分标准,观察癫大鼠发作等级变化,用酶联免疫法(ELISA)检测海马区IL-2和IL-6表达水平的变化。结果姜黄素组的癫大鼠惊厥发作等级降低。模型组IL-2和IL-6高表达,比空白组呈显著升高(P<0.05)。与模型组比较,姜黄素组大鼠海马区IL-2和IL-6的表达明显降低(P<0.05);与低剂量姜黄素组相比,高剂量姜黄素组IL-2和IL-6水平降低更为明显(P<0.05)。高剂量姜黄素组与丙戊酸钠组比较,无显著差异(P>0.05)。结论姜黄素能降低癫大鼠惊厥发作级别,具有一定的抗癫作用,并且呈剂量依赖性,其可能机制是通过降低海马区IL-2和IL-6的表达发挥作用。     

六神丸对口腔溃疡小鼠IL-6、IL-8水平及MAPK/ERK通路的影响

目的 研究六神丸对小鼠口腔溃疡的疗效及可能的作用机制。方法 将32只C57BL/6JGpt级小鼠随机分成对照组、模型组、六神丸组、桂林西瓜霜组，每组8只。于小鼠口腔左侧颊部黏膜上使用氢氧化钠片状晶体灼烧构建口腔溃疡模型。对口腔溃疡造模成功的小鼠分别外敷涂抹给予六神丸和桂林西瓜霜粉末0.375 g，连续5 d。观察小鼠口腔溃疡的恢复状态，用ELISA试剂盒检测血清白细胞介素（IL）-6、IL-8水平。取口腔溃疡部位组织，将溃疡组织制备匀浆，用二喹啉酸（BCA）法测定总蛋白浓度，并用Western blotting方法检测细胞外调节蛋白激酶（ERK）磷酸化水平。结果 与模型组比较，六神丸组小鼠口腔溃疡部位组织恢复情况较好，IL-6、IL-8水平显著降低（P＜0.05），局部组织中ERK磷酸化水平降低。结论 六神丸对氢氧化钠灼烧的口腔溃疡小鼠模型具有一定治疗作用，且可能的机制是通过降低血液中IL-6和IL-8水平，进而导致局部组织中ERK磷酸化水平降低改善病理状态。     

IL-10抑制脂多糖诱导的Hela细胞IL-15和IL-6转录

目的研究IL-10对脂多糖(LPS)诱导的Hela细胞IL-15mRNA和IL-6 mRNA表达的影响,分析其激活的信号转导通路。方法培养的Hela细胞,经不同浓度的LPS及IL-10单独或联合处理后,提取细胞总RNA和总蛋白,RT-PCR分析IL-15和IL-6转录水平的变化,Westernblot分析信号转导通路蛋白变化。结果RT-PCR分析得知①1ng～10μgLPS刺激Hela细胞12h后,IL-15 mRNA和IL-6 mRNA水平均明显上调(与对照组比较:P<0.01),且存在剂量依赖关系,100ng/mL时达峰值;100ng/mLLPS刺激Hela细胞0～24h,IL-15 mRNA和IL-6 mRNA水平亦明显上调(与对照组比较:P<0.01),24h内存在时间依赖关系,12h时达峰值。②单独IL-10(10ng/mL)作用于Hela细胞12h后,IL-15 mRNA和IL-6 mRNA没有明显变化(与对照组比较:P>0.05)。不同浓度的IL-10(1,10,100ng/mL)均下调100ng/mLLPS诱导的Hela细胞IL-15 mRNA和IL-6 mRNA的表达,且浓度越高IL-10抑制作用越明显。Western blot分析显示LPS主要通过磷酸化信号蛋白PI3K/AKT和ERK1/2上调IL-15和IL-6转录,IL-10能阻断AKT的磷酸化而对ERK1/2的磷酸化没有影响。结论IL-10可抑制LPS诱导的炎症细胞因子IL-15和IL-6的转录,这可能与其阻断AKT的磷酸化有关,因而,IL-10可能应用于某些临床感染性疾病的预防和治疗。     

灵芪胶囊对H22荷瘤小鼠外周血IL-6含量的影响

目的:观察灵芪胶囊对H_(22)荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用,分析其抗肿瘤作用机制。方法:实验用昆明种小鼠接种H_(22)瘤株,经口灌胃灵芪胶囊和复方环磷酰胺11d后,取瘤体称重,计算抑瘤率,并计算免疫器官指数;采用双抗夹心ELISA法检测H_(22)荷瘤小鼠外周血IL-6含量。结果:灵芪胶囊在明显抑制肿瘤生长的同时不降低体重,在一定剂量下对荷瘤小鼠的免疫器官指数无明显影响,并能够明显抑制荷瘤小鼠外周血IL-6异常增高。结论:灵芪胶囊对H_(22)荷瘤小鼠有明显抑瘤作用,通过改善荷瘤小鼠异常的免疫状态。达到治疗肿瘤的目的。     

阿托伐他汀治疗对急性冠脉综合征患者血浆CRP和IL-6水平的影响

目的探讨阿托伐他汀干预对急性冠脉综合征（ACS）患者血浆C反-应蛋白（CRP）和白介素-6（IL-6）水平的影响。方法采用随机开放法将62例ACS分为阿托伐他汀治疗组和常规对照组进行为期4周的干预,分别测定治疗前及治疗后2周患者血浆CRP和IL-6的浓度变化,比较治疗前后的血浆CRP及IL-6水平变化。结果急性冠脉综合征患者血清CRP及IL-6水平明显升高,治疗4周后,阿托伐他汀治疗组血浆CRP及IL-6水平均明显下降,而常规对照组CRP和IL-6水平无明显变化。结论ACS的发生与机体炎症反应激活有关。阿托伐他汀能够降低血浆CRP和IL-6水平,在ACS的治疗中具有重要作用。     

长期吸入糖皮质激素对支气管哮喘患儿血清中IL-6，IL-8和TNF-α水平的影响

目的观察支气管哮喘患儿血清中IL-6、IL-8和TNF-α水平的变化并探讨支气管哮喘患儿在长期吸入糖皮质激素后对血清中IL-6、IL-8和TNF-α的影响。方法采用酶联免疫吸附（ELISA）的方法，分别检测62例哮喘患儿采用吸入糖皮质激素治疗前，治疗3、6、12个月后及30例正常对照儿童血清中IL-6、IL-8和TNF-α水平。结果哮喘患儿血清中IL-6、IL-8和TNF-α水平显著高于正常对照组。吸入糖皮质激素治疗3个月后哮喘患儿血清中IL-6、IL-8和TNF-α浓度与治疗前比较下降（P值均〈0．05）；治疗6个月和12个月后哮喘患儿血清中IL-6、IL-8和TNF-α浓度显著低于治疗前（P值均〈0．01），且治疗12个月后各个炎症指标与对照组相比无显著性差异（P〉0．05）。结论长期吸入糖皮质激素是治疗儿童支气管哮喘的重要手段，其治疗作用与下调血清中IL-6、IL-8和TNF-α水平有关。     

灵芪胶囊对S180荷瘤小鼠IL-1和IL-6蛋白表达的影响

目的:研究灵芪胶囊对S₁₈₀荷瘤小鼠的抗肿瘤作用,并探讨其可能的作用机制。方法:将S₁₈₀瘤株接种于小鼠右前肢腋部皮下建立动物模型,并采用ELISA法检测小鼠外周血IL-1和IL-6蛋白含量。结果:灵芪胶囊能明显增加S₁₈₀荷瘤小鼠外周血IL-1和IL-6蛋白含量,能改善和增强荷瘤小鼠的免疫功能。结论:灵芪胶囊对S₁₈₀荷瘤小鼠有明显抑瘤作用,其作用机制可能是通过改善小鼠免疫功能而实现的。     

白介素6、肿瘤坏死因子α在脊髓型颈椎病发病中的作用

目的 检测脊髓型颈椎病患者颈椎间盘组织中白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNV-α）的水平,探讨IL-6和TMF-α在脊髓型颈椎病（CSM）发病机制中的作用.方法收集40例手术治疗的CSM患者的退变椎间盘组织,取20例正常椎间盘组织作为对照,匀浆后取上清液,ELISA法检测IL-6和TNF-α的含量.结果 CSM组颈椎间盘组织内IL-6、TNF-α的水平均明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）.结论 CSM患者的颈椎间盘组织内IL-6和TNF-a的含量明显增高,它们可能在脊髓型颈椎病的发病机制中发挥重要作用.