硫化氢在脂多糖所致老年大鼠急性肺损伤中的作用

目的 探讨硫化氢(H2S)在脂多糖(LPS)所致老年大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用机制.方法 64只SD老年大鼠随机分为对照组、LPS组、NaHS+LPS组、炔丙基甘氨酸(PPG)+LPS组,每组16只.LPS组、NaHS+LPS组、PPG+LPS组经气管内滴注LPS 200 μg/只,制备大鼠ALI模型;对照组经气管内滴注无菌生理盐水200 μl/只.NaHS+LPS组制模前10 min腹腔注射NaHS 28 μmol/kg,PPG+LPS组制模前10 min腹腔注射PPG 45 mg/kg.给药后4 h或8 h处死动物,测定肺系数;光镜观察肺组织形态学改变;化学法检测血浆H2S、NO和CO含量、肺组织丙二醛(MDA)含量、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和血红素加氧酶-1(HO-1)活性;采用免疫组织化学法检测肺组织iNOS、HO-1蛋白表达及吸光度值.结果 气管内滴注LPS可引起肺组织明显的形态学改变;肺系数和肺组织MDA含量增加;血浆H2S含量和肺组织CSE活性下降;肺组织iNOS活性和iNOS蛋白表达增强,血浆NO含量增加;肺组织HO活性和HO-1蛋白表达增强,血浆CO含量增加.预先给予NaHS可显著减轻LPS所致肺组织损伤,肺系数和肺组织MDA含量下降;血浆H2S含量和肺组织CSE活性升高;肺组织iNOS活性和iNOS蛋白表达减弱,血浆NO含量减少;肺组织HO活性和HO-1蛋白表达增强,血浆CO含量增加(均P＜0.05).而预先给予PPG可加重LPS所致肺损伤,使血浆NO含量、肺组织iNOS活性和iNOS蛋白表达进一步增加(均P＜0.05),但对血浆CO含量、HO活性和HO-1蛋白表达无明显影响.结论 H2S/CSE体系的下调在LPS所致老年大鼠ALI的发病学中有一定作用,而外源性给予一定量的NaHS对肺组织具有保护作用,其可能与抗氧化效应和下调NO/iNOS体系、上调CO/HO-1体系有一定关系.     

气体信号分子硫化氢对大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 观察急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时,内源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)生成的变化以及应用外源性H2S后对ALI的影响.方法 Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组、硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)+LPS组以及NaHS+生理盐水(normal saline,NS)组(n均=12).LPS组大鼠每只气管内滴注LPS(100 μg/200 μl),对照组滴注等量NS.NaHS+LPS组大鼠滴注LPS前10 min腹腔注射NaHS(28 μmol/kg).各组均于滴注后4 h和8 h测定大鼠肺系数变化,光镜下观察肺组织形态学改变,检测肺组织中氧化性损伤产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中蛋白含量及中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)计数的改变,并测定血浆中的H2S含量.结果 与对照组相比,LPS滴注4 h和8 h后,大鼠肺系数、肺组织中MDA含量、BALF中PMN数目及蛋白含量均明显升高(P值均＜0.01);而血浆中H2S含量则明显降低(P值均＜0.01);光镜下见肺泡萎陷、甚至结构消失,肺泡腔及间质弥漫性炎细胞浸润,部分肺泡代偿性气肿,且其病理改变随LPS滴注时间的延长而逐渐加重.与相应时间点的LPS组比较.NaHS+LPS组大鼠肺系数、肺组织中MDA含量、BALF中PMN数目及蛋白含量明显降低,血浆中H2S含量则明显升高(P值均＜0.01);光镜下肺间质和肺泡中炎细胞浸润程度明显减轻.结论 内源性H2S生成不足参与了ALI的形成过程,外源性H2S可以部分拮抗ALI,对肺组织起到细胞保护作用.     

大黄素对脓毒症急性肺损伤大鼠的保护作用及其分子作用机制研究

目的探讨大黄素对脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠的保护作用及其分子作用机制。方法将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、脓毒症ALI组、大黄素干预组,各8只。脓毒症ALI组及大黄素干预组腹腔内注射内毒素(LPS)10 mg/kg建立脓毒症ALI模型,正常对照组腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液,大黄素干预组于造模前30 min腹腔注射大黄素25 mg/kg。造模后12 h取血,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清白介素6(IL-6)、白介素17(IL-17)水平,处死大鼠,测定肺组织湿/干重比值(W/D),行HE染色计算肺病理组织评分,测定肺组织匀浆液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果脓毒症ALI组大鼠肺W/D、肺病理组织评分、肺组织MDA活性及血清IL-6、IL-17水平均高于正常对照组和大黄素干预组,而肺组织SOD、GSH-Px和CAT活性均低于正常对照组和大黄素干预组(P0.05)。结论大黄素对脓毒症ALI大鼠具有良好的保护作用,其分子作用机制可能与增强抗氧化能力及抑制炎性反应有关。     

银杏叶提取物对脂多糖诱导D-半乳糖致衰老大鼠急性肺损伤的保护作用

目的　观察脂多糖 (LPS)诱导D 半乳糖 (D gal)致衰老大鼠急性肺损伤 (ALI)及银杏叶提取物 (GBE)对其是否有保护作用。方法　大鼠 2 4只随机分成两部分 ,6只为正常对照组 ;18只经腹腔注D gal复制衰老动物模型。后者再随机分成三组 :衰老对照组 (6只 ) ;LPS组 (6只 ,静脉注射LPS诱导形成ALI) ;GBE +LPS组 (6只 ,注LPS前 7天开始每天灌胃给GBE一次 ,按所含黄酮甙计算 ,8mg/kg体重 ,实验当日在给LPS前 2h再给一次GBE)。注LPS后 2h收集标本待测。结果　D gal致衰老大鼠较正常大鼠血中超氧化物歧化酶 (SOD)及肺组织Na+ K+ ATPase活性均显著降低 (P均 <0 0 5 ) ,而血中乳酸脱氢酶 (LDH)活性升高 (P <0 0 5 )。衰老大鼠注LPS后 2h已形成ALI。肺间质及肺泡中有较多炎性细胞 ;肺泡灌洗液中蛋白含量及肺通透指数增加 ;血中乳酸 (LD) ,丙二醛 (MDA) ,一氧化氮 (NO) ,内皮素 1(ET 1) ,肿瘤坏死因子 α(TNF α)含量和LDH活性以及肺组织中髓过氧化物酶 (MPO)活性 ,均显著升高 ;而血中超氧化物歧化酶活性及肺组织Na+ K+ ATPase活性均下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。预先给予GBE可显著地缓解除SOD活性外的上述其它指标的变化 (P <0 0 5 )。结论　D gal致衰老大鼠体内抗氧化能力降低。静注LPS可引起衰老大鼠明显的A     

虎杖对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的治疗作用

目的 探讨虎杖(polygonum cuspidatum,PC)煎剂对脂多糖(LPS)诱导Wistar大鼠急性肺损伤(ALI)的治疗作用,并探讨其可能机制和临床意义.方法 给大鼠静注LPS复制Au动物模型.首先动态观察ALI的形成过程,给予LPS后2 h已形成明显的ALI(病理切片证实).随机将72只Wistar大鼠分成4组,每组18只.对照组(静注生理盐水1 ml/kg体重),LPS组(静注LPS,5 mg/kg体重),PC组(正常大鼠每天PC煎剂灌胃,5 ml·次-1·只-1,1次/d,共7 d);PC治疗组(给予LPS 2 h后开始灌胃,灌注Pc煎剂5 ml·次-1·只-1,1次/d,共7 d).每组大鼠分别于2、48 h和7 d三个时间点各处死6只,按时相观察和收集样本,进行测定和病理切片检查.测定肺系数、肺湿重/肺干重(W/D)、肺含水率,光镜观测肺组织病理变化,检测在实验性ALI大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、血栓素B2(TXB2)、髓过氧化物酶(MPO)等细胞因子、炎性介质的表达.各组大鼠动脉血气分析比较.结果 给予LPS后肺W/D和血清TNF-α、IL-6、TXB2含量及肺组织MPO活性显著高于对照组(P<0.05,P<0.01).而给予PC煎剂可显著缓解上述变化(P<0.01).LPS组氧分压(PaO2)较对照组显著降低,二氧化碳分压(PaCO2)显著升高(均P<0.01);PC治疗组PaO2显著高于LPS组(P<0.05),PaCO2显著低于LPS组(P<0.05).PC组与对照组差异不显著.结论 静注LPS(5 mg/kg)可成功复制ALI动物模型.ALI的发生和发展与血清TNF-α、IL-6、TXB2等炎性因子有密切关系.PC通过降低上述炎症因子释放减轻病理损伤在治疗ALI中有一定应用前景.     

气体信号分子硫化氢在油酸致大鼠急性肺损伤中的作用

目的:探讨胱硫脒-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)/硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)系统在急性肺损伤(acute lunginjury,ALI)中的作用。方法:尾静脉注射油酸(oleic acid,OA)制备大鼠ALI模型为OA组,对照组注射等量生理盐水,注射OA前给予硫氢化钠(NaHS)(14μmol/kg)作为NaHS+OA组,单纯给予NaHS(14μmol/kg)作为NaHS组,分别测定血浆及肺组织H2S生成量、CSE活性、3-巯基丙酮酸转硫酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)活性、肺组织及血浆中丙二醛(MDA)、共轭二烯(Diene)键含量;并对肺部病变进行评定。结果:与对照组比较,OA组肺组织CSE、MPST活性及H2S浓度呈现下降趋势(P<0.01),血浆H2S浓度升高(P<0.01),血浆及肺组织MDA及Diene键含量升高(P<0.01);与OA组比较,NaHS+OA组血浆及肺组织MDA和Diene键含量明显下降(P<0.01)。结论:内源性CSE/H2S系统参与了OA致大鼠ALI的病理生理过程;给予外源性H2S可以减轻ALI时肺脏脂质过氧化损害。     

硫化氢在急性肺损伤发病机制中的作用

<正>急性肺损伤(ALI)是重症监护病房最常见的死亡原因之一〔1〕。硫化氢(H2S)由胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和胱硫醚-β-合成酶(CBS)以L-半胱氨酸为底物合成〔2〕,具有扩张血管的活性,对于维持机体的生理功能具有重要意义。H2S在炎症反应、信号转导、能量代谢、细胞增殖与凋亡、氧化还原状态等方面具有多种生物学活性〔3〕。同时,由于炎症反应加剧、细胞凋亡增多、自由基损伤是ALI发生的重要机制〔4,5〕,故H2S在ALI     

GLP-1受体在脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤中的作用及其机制

目的研究glucagon like peptide-1(GLP-1)受体在急性肺损伤(ALI)中的作用及相关机制。方法通过气管内注射脂多糖(LPS)法建立ALI模型。采用随机数表法将30只大鼠随机分为5组,每组6只。对照组大鼠建立假模型后接受生理盐水(NS)处理;空白药物组大鼠建立假模型后接受GLP-1受体激动剂利拉鲁肽(2 mg/kg)处理;模型组大鼠建立ALI模型后接受NS处理;治疗组大鼠建立ALI模型后接受利拉鲁肽(2 mg/kg)处理;抑制剂组大鼠建立ALI模型后接受利拉鲁肽(2 mg/kg)及自噬抑制剂3-methyladenine (3MA,10 mg/kg)处理。蛋白免疫印迹实验法检测各组大鼠肺中LC3II、Beclin-1、P62、Bax、Bcl-2蛋白的表达。采用TUNEL染色法检测细胞凋亡。应用SPSS 20.0软件进行数据处理。组间比较采用单因素方差分析和LSD多重比较。结果模型组LC3II、Beclin-1及P62表达分别为100.0%±5.3%、100.0%±5.6%、100.0%±6.1%,治疗组中LC3II及Beclin-1表达分别显著增加至214.0%±12.3%及329.0%±33.8%,P62表达显著下降至50.0%±7.0%(均P0.01)。对照组肺损伤分数、湿/干重比(W/D)、Bax、Bcl-2及凋亡细胞分别为0.3±0.5、4.08±0.14、100.0%±7.0%、100.0%±3.6%、1.0±0.9,模型组肺损伤分数、湿/干重比(W/D)、Bax及凋亡细胞分别显著增加为4.6±0.8、4.83±0.23、284.0%±25.6%及42.5±8.2,Bcl-2显著下降至63.0%±6.2%(均P0.001);与模型组比较,治疗组肺损伤分数、W/D、Bax、及凋亡细胞分别显著下降至2.5±1.0、4.42±0.15、198.0%±24.8%及17.0±3.4,Bcl-2显著增加至83.0%±5.3%(均P0.01);与治疗组比较,抑制剂组肺损伤分数、W/D、Bax及凋亡细胞分别显著增加至4.3±0.8、4.77±0.25、277.0%±25.5%及39.5±6.2,Bcl-2下降至54.0%±5.0%(均P0.01)。结论激活GLP-1受体可以显著改善脂多糖介导的急性肺损伤,其机制与其通过上调细胞自噬、进而减轻细胞凋亡有关。     

硫化氢对大鼠机体重要脏器的损伤观察

目的分析硫化氢(H2S)对正常大鼠机体重要脏器组织结构的损伤性作用及意义。方法 32只Wistar大鼠随机分为4组,即对照组、硫氢化钠(NaHS)2.8μmol/kg组、NaHS 8.4μmol/kg组和NaHS 14.0μmol/kg组。生物机能试验系统监测大鼠左室血流动力学性能,用亚甲蓝分光光度法测定血浆硫磺化氢(H2S)浓度,用ELISA法测定血浆肿瘤坏死因子(TNF-α)、髓过氧化物酶(MPO)浓度;HE染色观察大鼠心、肺、肝、肾和脑等脏器的组织结构改变。结果超生理浓度的H2S对健康大鼠左室血流动力学性能无明显影响(P0.05),但静脉注射不同剂量NaHS后,大鼠血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和髓过氧化物酶(MPO)浓度随血浆H2S浓度的增加而增加,尤其是NaHS14.0μmol/kg组血浆TNF-α和MPO浓度的增加较明显(P0.05)。结论超生理剂量H2S对健康大鼠左室流体动力学性能无影响,但可导致重要脏器的炎症反应。     

硫化氢对糖尿病心肌病的保护作用

糖尿病心肌病是指发生于糖尿病患者,不能用高血压性心脏病、冠状动脉粥样硬化性心脏病及其他心脏病变来解释的一种特异性心肌病.研究表明,硫化氢作为内源性气体信号分子,对糖尿病心肌病心脏具有保护作用,其机制主要与减轻炎症反应,减轻氧化应激损伤,抑制心肌细胞凋亡,促进自噬有关.     

硫化氢对氧应激所致心肌细胞损伤的影响及机制

目的 探讨硫化氢供体硫氢化钠对过氧化氢诱导心肌细胞氧化应激损伤的保护机制.方法 采用胶原酶消化分离培养SD大鼠乳鼠心肌细胞.过氧化氢诱导建立氧化应激模型.经硫氢化钠和LY294002预处理探讨硫化氢对过氧化氢诱导心肌细胞损伤的保护作用,观察心肌细胞形态学变化,检测乳酸脱氢酶、丙二醛的含量和超氧化物歧化酶的活性,Western blot检测凋亡相关蛋白表达,流式细胞术检测心肌细胞的凋亡.结果 过氧化氢可引起乳鼠心肌细胞乳酸脱氢酶、丙二醛含量升高,Akt磷酸化水平下降,Bcl-2/Bad比值降低,细胞凋亡率升高(P＜0.05);硫氢化钠预处理能减轻过氧化氢引起的心肌细胞损伤,乳酸脱氢酶、丙二醛含量下降,Akt磷酸化水平升高,Bcl-2/Bad比值升高,细胞凋亡率下降(P＜0.05);PDK/Akt特异性阻断剂LY294002能部分减轻硫氢化钠的保护作用(P＜0.05).结论 硫氢化钠预处理能使Akt的磷酸化水平升高,Bcl-2/Bad比值升高,在一定程度上减轻过氧化氢诱导的心肌细胞损伤及凋亡,硫化氢可能通过激活PI3K/Akt信号转导通路发挥保护作用.     

黄芪多糖对血管保护作用的研究进展

近几年的相关研究显示,黄芪多糖(Astraglus Polysaccharides,APS)对血管有较好的保护作用,其作用主要表现在:(1)降低血糖:全身微血管病变是糖尿病(DM)最为严重的并发症之一,血管内皮细胞(VEC)损伤是DM血管并发症的发生前提。黄芪多糖可通过改善肝脏的内质网应激来减轻内质网损伤,增加糖原合成酶活性,增加胰岛索信号蛋白合成量和活性,降低血糖,从而发挥保护血管作用。(2)调节血压:近年来,对黄芪多糖的降低血压作用进行了深入的研究,结果表明,黄芪多糖具     

硫化氢对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用

目的:研究不同浓度的硫化氢(H_2S)对缺氧不同时间的乳鼠心肌细胞损伤的直接影响及其对复氧损伤的间接影响,分析其对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用.方法:原代培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组、缺氧硫氢化钠(NaHS)0组、缺氧硫氢化钠 100 μmol/L组、缺氧硫氢化钠 200 μmol/L组、缺氧硫氢化钠400 μmol/L组以及缺氧-复氧硫氢化钠0组、缺氧-复氧硫氢化钠100 μmol/L组、缺氧-复氧硫氢化钠 200 μmol/L组、缺氧-复氧硫氢化钠 400 μmol/L组.在缺氧24 h、48 h、72 h后及复氧2 h后均检测细胞存活数量、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果:缺氧硫氢化钠100 μmol/L组、缺氧硫氢化钠200 μmol/L组和缺氧硫氢化钠 400 μmol/L组缺氧培养24 h、48 h和72 h后与各自时间点缺氧硫氢化钠0组比心肌细胞存活数量升高(P<0.01)、培养液中乳酸脱氢酶活性降低(P<0.01),差异均有统计学意义;缺氧硫氢化钠 200 μmol/L组和缺氧硫氢化钠 400 μmol/L组在缺氧培养24 h后较缺氧硫氢化钠100 μmol/L组心肌细胞存活数量升高(P<0.01)、培养液中乳酸脱氢酶活性降低(P<0.05～0.01),差异均有统计学意义.缺氧-复氧硫氢化钠100 μmol/L组、缺氧-复氧硫氢化钠200 μmol/L组和缺氧缺氧-复氧硫氢化钠400 μmol/L组缺氧培养24 h、48 h、72 h并复氧2 h后较各自时间点缺氧-复氧硫氢化钠0组比心肌细胞存活数量升高(P<0.01)、复氧后心肌细胞乳酸脱氢酶漏出量降低(P<0.01),差异均有统计学意义.结论:100~400 μmol/L 硫氢化钠对缺氧-复氧心肌细胞具有保护效果.200~400 μmol/L 硫氢化钠对缺氧24 h的心肌细胞保护作用较好.     

血必净注射液对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用

目的：探讨血必净注射液对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用及机制。方法：采用盲肠结扎穿孔法（CLP）建立脓毒症模型,雄性Wistar大鼠80只,随机分成4组：正常对照组（N组,8只）;假手术组（S组,8只）;脓毒症组（CLP）（C组,32只）和血必净治疗组（X组,32只）,C组和X组分别于CLP后经大鼠颈静脉注射生理盐水或血必净注射液2ml/kg,分别于CLP后3、6、12和24h各处死8只动物,取肺组织,比色法检测丙二醛（MDA）和髓过氧化物酶（MPO）,酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。结果：脓毒症时各时间点肺组织MDA、MPO和血清TNF-α浓度较对照组显著升高,而血必净治疗后则有明显下降（P〈0.01）。结论：血必净注射液可减轻脓毒症时的肺损伤,其机制可能与减少肺组织MDA、MPO和血清TNF-α表达有关。     

雷米普利对大鼠急性肺损伤时肺组织核因子-κB表达的影响

目的观察雷米普利对急性肺损伤(ALI)时肺组织核因子-κB(NF-κB)活性的影响.方法SD大鼠随机分为正常对照组(NS组)、内毒素损伤组(LPS组)和雷米普利预防组(RAM组),用免疫组织化学法检测肺组织NF-κB的表达,并进行肺系数测定以及肺组织炎症细胞计数;光镜下观察大鼠肺组织的病理形态学变化.结果LPS组肺组织NF-κB表达比NS组增强(P＜0.05),肺系数和炎症细胞数比NS组增加(P＜0.05),肺组织损伤改变严重;RAM组NF-κB表达比LPS组降低(P＜0.05),肺系数和炎症细胞数较LPS组减少(P＜0.05),肺组织损伤程度也减轻.结论NF-κB活化在LPS诱导的ALI中起重要作用,雷米普利可降低NF-κB的活性,减轻LPS导致的ALI.     

Protective Effects of Hydrogen Sulfide Against Chronic Alcohol Intake-Induced Left Ventricular Remodeling in Rats

Purpose

To investigate the protective effects of hydrogen sulfide (H₂S) against chronic alcohol intake-induced left ventricular remodeling and explore the potential mechanisms involved.

Methods

Rats were randomly divided into 4 groups: alcohol group, NaHS group, alcohol + NaHS group, and control group. The echocardiographic and morphometric studies were performed to assess left ventricular remodeling. Oxidative stress was evaluated by detecting MDA, GSH-Px, Tot-SOD, CuZn-SOD and Mn-SOD in the supernatant. Cardiomyocyte apoptotic rate was determined by flow cytometry with Annexin V/PI staining. Western blotting was conducted to detect the expression of Bcl-2 family of apoptosis regulator proteins.

Results

The echocardiographic and morphometric data indicated that H₂S has protective effects against chronic alcohol intake-induced left ventricular remodeling. Our findings showed a significant increase in MDA level and decreases in GSH-Px, Tot-SOD, CuZn-SOD and Mn-SOD activities in the alcohol group compared to the control group, while in the alcohol + NaHS group, a significant decrease in MDA level and increases in GSH-Px, Tot-SOD, CuZn-SOD and Mn-SOD activities were found compared to the alcohol group. The apoptotic rate in the alcohol group was significantly higher than in the control group, whereas apoptotic rate in the alcohol + NaHS group was significantly lower than in the alcohol group. In addition, Bcl-2 and Bcl-xL expression was upregulated and Bax expression was downregulated in the alcohol + NaHS group compared to the alcohol group.

Conclusions

Our study demonstrates that H₂S protects against chronic alcohol intake-induced left ventricular remodeling via attenuating oxidative stress and apoptosis.