2.155 应激大鼠结肠平滑肌收缩性变化及其机制的研究

目的 1.探讨应激刺激后大鼠离体结肠环形平滑肌收缩性变化及平滑肌收缩时细胞内外钙离子(Ca2+)利用有无异常,进一步阐明结肠平滑肌收缩运动与Ca2+ 利用之间的可能联系.2.探讨胃肠道选择性Ca2+拮抗剂匹维溴胺(Pinaverium Bro mide PINA)在应激相关性结肠平滑肌动力紊乱中的调节作用及其对结肠平滑肌细胞内游离Ca 2+浓度([Ca2+]i)的影响.方法 1.制备寒冷-束缚应激大鼠排便异常的实验动物模型; 2.生理灌流液中乙酰胆碱(ACh)、氯化钾(KCl)、氯化钙(CaCl2)、氟化钠(NaF)及无钙灌流液中ACh、K Cl分别作用于应激大鼠远端结肠环形平滑肌,观察其收缩活性的离体效应,并与未受应激大鼠比较; 3. PINA孵育应激组及对照组结肠平滑肌后,再用ACh及KCl刺激,观察PINA对结肠平滑肌收缩活性的调节作用; 4.体外培养大鼠结肠平滑肌细胞,观察PINA对静息状态下 [Ca2+]i的影响及ACh、KCl、CaCl2作用于细胞后[Ca2+]i的变化. 结果 1.寒冷-束缚应激大鼠2h内排便量较对照组明显增加(P＜0.05) ,且粪便含水量增加; 2.应激后大鼠离体结肠环平滑肌受ACh、KCl刺激后收缩活性明显增强,并呈药物浓度依赖性;而在无Ca2+灌流液中,受KCl刺激后,应激组与对照组收缩性无显著性差异(P＞0.05),受ACh刺激后,应激组收缩性低于对照组(P＜0.05 );以高浓度CaCl2及平滑肌细胞G-蛋白直接兴奋剂NaF刺激结肠平滑肌,应激组收缩性均显著高于对照组(P＜0.01); 3.可明显抑制由ACh引起收缩的PINA浓度应激组≥3×10 -7mol/L,对照组≥3×10-6mol/L,应激组低于对照组;可明显抑制由KCl引起收缩的PINA浓度应激组≥10-6mol/L;对照组≥3×10-7mol/L,应激组高于对照组;4. PINA不影响静息状态下[Ca2+]i(P＞0.05),不能抑制由高浓度细胞外Ca2+引起的[[Ca2+]i增加;PINA可明显抑制由KCl、ACh引起的[Ca 2+]i增加,呈药物浓度依赖性.结论寒冷-束缚应激大鼠离体结肠环形平滑肌收缩性显著增强,可能是由于平滑肌收缩时对细胞内外Ca2+利用异常所致.     

重症休克大鼠细动脉平滑肌膜电位变化在血管反应性降低中的作用

目的：研究查明重症失血性休克血管反应性降低的机制。方法：测定大鼠脊斜肌细动脉对去甲肾上腺素（ＮＥ）的反应性，在反应性下降时用微电极记录离体主动脉及细动脉条平滑肌静息膜电位；用激光共聚焦显微镜动态测定单个细动脉平滑肌细胞膜电位变化；观察ＡＴＰ敏感钾通道（ＫＡＴＰ）阻滞剂优降糖对细动脉平滑肌细胞膜电位和血管反应性的作用。结果：在失血性休克代偿期，细动脉平滑肌膜电位负值减小，血管对ＮＥ反应性增高；失血性休克失代偿期，细动脉对ＮＥ反应性显著下降，细动脉平滑肌细胞静息膜电位负值增大，呈超极化改变，优降糖能部分逆转休克时平滑肌细胞的超极化状态，同时带来血管反应性的恢复。结论：休克时细动脉平滑肌反应性与膜电位密切相关，ＫＡＴＰ通道开放引起血管平滑肌细胞膜超极化是重症失血性休克后期血管反应性低下的原因之一。     

乙酰胆碱抑制去甲肾上腺素诱导的心肌H9c2细胞凋亡

目的:探讨乙酰胆碱(ACh)对去甲肾上腺素(NE)诱导心肌H9c2细胞凋亡的作用及机制。方法:用不同浓度(0、5、10和20μmol/L)NE诱导心肌H9c2细胞凋亡,用ACh预处理细胞观察其作用,用MTT法检测细胞存活率,选出最适NE和ACh剂量。其次,分别加入与凋亡密切相关的4种信号分子阻断剂与ACh共同干预,用激光共聚焦成像JC-1法检测线粒体膜电位水平,DCFH-DA染色及流式细胞术检测胞内活性氧簇的水平,Annexin V-FITC/PI染色及流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:10μmol/L NE可明显诱导H9c2细胞凋亡(P0.05);经10μmol/L ACh预处理后,可减弱NE诱导的H9c2细胞凋亡(P0.05);在ACh预处理前分别预先加入4种分子阻断剂,发现加入PDTC后可减弱ACh的抑制作用。结论:ACh具有抑制NE诱导的心肌H9c2细胞凋亡的作用,其机制可能与NF-κB信号分子有关。     

克山病病区粮饲养豚鼠的冠状动脉平滑肌细胞膜电位的研究

本文应用细胞内微电极方法,研究了克山病病区粮喂饲豚鼠的冠脉平滑肌细胞膜电位变化,取得如下结果:(1)实验动物冠脉平滑肌细胞静息膜电位为-49.80±5.3mV,对照组动物为-49.98±6.2mV(P>0.05)。(2)硒可使实验组动物冠脉平滑肌细胞膜电位去极化,其程度明显小于对照动物。(3)氯化钾和乙酰胆碱可分别引起实验动物冠脉平滑肌细胞膜电位去极化和超极化,且较对照动物的变化明显增大。这些结果提示:在低硒状态下,冠脉平滑肌的功能状态发生明显变化,使之对刺激的敏感性增加,因而认为血管因素在克山病病区粮饲养动物的心肌坏死灶产生过程中起着重要作用。     

黄皮酰胺促钾通道开放

一种新发现的具有促智作用的药物——黄皮酰胺能抑制去甲肾上腺素(NE)或KCl引起的血管平滑肌收缩。本研究旨在应用膜片钳(patch clamp)技术探讨黄皮酰胺对Wistar大鼠尾动脉平滑肌细胞膜钾离子通道的作用。单个平滑肌细胞用酶法分离,以细胞封接方式记录离子通道活动。在细胞池内注入2μM黄皮酰胺后,钾离子通道活动明显增强。用本实验室开发的计算机软件(patch clamp analysis system,Version 1.0)计算分析通道活动的特征参数。     

微元素粉末对大鼠血管内皮和平滑肌细胞膜电位的影响

目的:探讨微元素粉末(由铝、钛、硅等元素组成的超细粉末,粉末直径在0.5μm以下,microelementpowder,MP)对大鼠血管内皮和平滑肌膜电位的影响,探讨其改善微循环的机理。方法:培养大鼠肺血管内皮细胞和主动脉平滑肌细胞,用电位敏感的荧光探针和激光共聚焦显微镜测定细胞膜电位动态变化。结果:MP使平滑肌细胞显著超极化。ATP敏感钾通道(ATPsensitiveK⁺channel,K_ATP)阻滞剂优降糖(2μmol/L)对平滑肌膜电位无明显影响,但能完全逆转MP对平滑肌的超极化作用;MP使血管内皮细胞轻度超极化,其作用不受优降糖影响。结论:MP激活血管平滑肌K_ATP通道,使细胞膜超极化,从而扩张微血管和改善微循环。     

去甲肾上腺素对大鼠血管平滑肌细胞表型转化和骨架蛋白表达的影响

目的研究去甲肾上腺素(NE)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化与骨架蛋白表达之间的关系,探讨神经因素对VSMC调控作用。方法体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,分为血清对照组(control)、NE+血清培养组、血清饥饿组、NE+血清饥饿组。RT-PCR检测表型基因SM22 α mRNA的表达,免疫荧光方法检测细胞骨架蛋白F-actin的表达。结果与血清培养相比,血清饥饿上调SM22 α表达水平,使F-actin的荧光强度明显增强;NE可降低SM22 α表达水平和使F-actin的荧光强度明显减低,细胞由长梭形转变为多角形或短梭形,细胞板状突起增多,可见细胞分裂。结论 NE对VSMCs表型转化和骨架蛋白形态和数量表达改变有重要作用,为研究神经因素在心血管疾病发生发展中的作用提供理论依据。     

重症休克大鼠细动平滑肌膜电位变化在血管反应性降低中的作用

目的；研究查明重症失血性休克血管反应性降低的机制。方法：测定大鼠脊斜肌细动脉对去甲肾上腺素（ＮＥ）的反应性，在反应性下降时用微电极记录离体主动脉及细动脉条平滑肌静息膜电位；用激光共聚集显微镜动态测定单个细动脉平滑肌细胞膜电位变化，观察ＡＴＰ毓四通道（ＫＡＴＰ）阻滞剂优降糖对细动脉平滑肌细胞膜电位和血管反应性的作用。结果：在失血性休克代偿期，细动脉平滑肌膜电位负值减小，血管对ＮＥ反应性增高；失血性休     

胃电图基础研究的某些进展

本文介绍胃平滑肌生物电活动研究的一些进展 ,并联系胃电图临床应用研究的实际 ,讨论胃平滑肌生物电活动在不同水平上的表现及其与胃运动之间的关系。1　胃平滑肌生物电活动的特征1 1　静息电位 :胃平滑肌的静息电位随动物的种类和胃的部位不同有很大的差异。人胃底部平滑肌的静息电位约为 - 4 8ｍＶ ,没有位相性波动。胃底平滑肌细胞紧张性收缩的兴奋 -收缩耦联机制尚不清楚。胃体和胃窦部平滑肌细胞的膜电位不稳定 ,有缓慢周期性去极化和复极化特征。因此 ,在胃体和胃窦部平滑肌细胞无法测定真正意义上的静息电位 ,通常把慢波的峰 -峰值作…     

克山病病区糖饲养豚鼠的冠状动脉平滑肌细胞膜电位的研究

本文应用细胞内微电极方法，研究了克山病病区粮喂饲料喂饲豚鼠的冠脉平滑肌细胞膜电位变化，取得如下结果：（１）实验动物冠脉平滑肌细胞静息膜电位为－４９．８±５．３ｍＶ，对照组动物为－４９．９８±６．２ｍＶ（Ｐ＞０．０５）。（２）硒可使实验组动物冠脉平滑肌细胞膜电位去极化。其程度明显小于对照动物。（３）氯化钾和乙酰胆碱可分别引起实验动物冠脉平滑肌细胞膜电去极化和超极化，且较对照动物的变化明显增大。这些结     

手的掌侧投影面积测定

应用图像分析仪测定了52名青年手的掌侧投影面积,各指掌侧面积的平均值,以中指最大(13.40cm~2),拇指其次(12.47cm~2),食指(12.03cm~2)与环指(12.00cm~2)近似,小指的掌侧面积最小(8.63cm~2)。全手掌侧总面积平均145.20cm~2。指掌侧总面积平均58.52cm~2,占手掌侧总面积的40.30％。手掌面积平均86.69cm~2,占手掌侧总面积的59.70％。按stevenson公式,根据身长和体重,计算出体表面积的估计值,进而求得全手掌侧投影面积占身体表面积的0.93％。经计算机处理,求得手长、手宽、身长、体重、体表面积估计值与手面积的相关系数,说明上述5个变量与手面积的相关均非常显著。本文还建立了由手长、手宽推算手掌侧投影面积的回归方程。     

脊髓动脉的显微解剖

在手术显微镜下观察了37例婴幼儿脊髓前(正中)动脉和脊髓后(外侧)动脉的分支,其主要结果如下:婴幼儿脊髓平均长度为14.08±1.49cm,脊髓前(正中)动脉外侧分支平均为76.17±18.64支,中央动脉平均为169.78±25.51支.中央动脉分布到灰质前角、侧角和后角底部及邻近灰质的深层白质,而白质浅层和后角大部,则由软膜动脉网发出的穿支供应.此外.还讨论了与临床应用有关的问题.     

肾脏的交感神经支配

采用大体解剖学方法和肾内注射HRP逆行标记神经元的方法,研究了猫肾脏的交感神经支配。发现了下述的待点。1.猫左、右侧腹腔神经节相互融合,呈半环状包绕在肠系膜上(前)动脉的起始处,于其融合部,各发出左、右肾支。肠系膜上神经节与右侧腹腔神经节融合。2.肾交感神经节后神经元,分别位于腹腔神轻节,同侧主动脉肾神经节和T_(12)～L~4节段的交感干神经节内,並具有局部定位分布的关系。3.肾交感神经节后纤维主要来自腹腔神经节(82.08％),其次是主动脉肾神经节(12.76％),交感干神经节最少(5.16％)。4.肾交感神经节后神经元,多呈圆形或椭圆形,交感干神经节中有少量呈梭形。5.支配肾周腹膜的交感神经节后神经元与肾交感神经节后神经元存在部位、数量和在各种神经节内分布形式均不相同。     

猫直肠上部的交感神经支配

向猫直肠上部肠壁内注入HRP,通过逆行追踪证明:1.长轴突型交感节前神经元直接分布到直肠壁内,其位于双侧脊髓的L_(1-6)髓节,多数集中于L_3髓节(占69.79%),两侧标记细胞的数量无明显差别。主要位于中间带外侧核(IL占90.74%)并由此向网状核,侧索(LF)、中介核(IC)、中间带内侧核和前角腹后外侧核(DLM)内扩散。不同核团标记细胞的节段性分布有一定差别、IL、IC标记区偏向颅侧,LF、DLM标记区则偏向尾侧。2.支配直肠的交感节后神经元主要位于肠系膜前、后节(占标记细胞总数的68.4%,其余者位于双侧腰骶交感于神经节内。     

国人女性乳房内侧部的动脉

本文观察了50例女性乳房内侧部的动脉,标本血管内注入有色乳胶液,在肉眼及手术显微镜下解剖观察。胸廓内动脉的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ穿支为动脉主要来源。动脉分5型,2支型最多(54%)。分布到乳腺的穿支为肌皮腺型血管,其基本形具有4个方向的分支:主支向乳头;另1支向腋下;第3支向胸骨;第4支向锁骨。血管径以第Ⅱ穿支最大(0.92 mm),其次是第Ⅰ和第Ⅲ穿支。分布面积以第Ⅱ穿支最广(6,265.50 mm~2),其次是第Ⅲ和第Ⅰ穿支。第Ⅰ穿支跨4肋者占52%;第Ⅱ穿支跨4肋者占43%;以下各支逐渐减少。乳房内侧部的动脉与乳房外侧部的动脉分支吻合数最多(48%)。     

癫痫大鼠血脑屏障超微结构改变及妥泰的保护作用

目的观察马桑内酯致痫及妥泰干扰大鼠中央前回血脑屏障的超微结构改变,探讨癫痫发作及妥泰治疗机制中血脑屏障的意义。方法成年健康雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、癫痫组、治疗组;癫痫组、治疗组用马桑内酯注入到大鼠侧脑室,制作癫痫动物模型;实验组用妥泰在癫痫发作后1h灌胃,持续7d,1次/d;7d后取大鼠大脑中央前回,做超薄切片,电镜观察中央前回血脑屏障的超微结构改变。结果癫痫组内皮细胞、基膜、周细胞出现明显水肿,电子密度降低;治疗组水肿缓解。血脑屏障内皮细胞胞质厚度、基膜厚度、周细胞胞质厚度的比较表明,癫痫组与对照组也有显著性差异(P<0.05);治疗组与癫痫组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论1.马桑内酯致痫大鼠血脑屏障内皮、基膜、周细胞出现明显水肿,妥泰使水肿缓解;2.血脑屏障超微结构改变可能是癫痫发作及恢复的重要机制。     

大白鼠伏隔核乙酰胆碱酯酶阳性纤维的脑干起源

本文报道应用荧光逆行标记和乙酰胆碱酯酶组织化学相结合技术,研究了大白鼠伏隔核乙酰胆碱酯酶阳性纤维的脑干起源。向一侧伏隔核注入荧光示踪剂二盐酸4′,6-双脒基-2-苯吲哚(DAPI)或樱草黄(Pr)。处死前6～8小时肌注二异丙基氟磷酸(DFP)。用含10％福尔马林的磷缓液灌流,连续冠状冰冻切片,Karnovsky-Roots法孵育,荧光显微镜和普通光学显微镜观察同一切片。结果发现,下列核(区)内可见到胞体既受DAPI或Pr逆行标记,同时又呈AChE阳性反应的细胞(简称荧酶双阳性细胞):中脑被盖腹侧区、黑质、中脑尾侧中缝核、脚桥被盖核;脑桥中缝背核、中央上核、被盖网状核、蓝斑;延髓孤束核区、中缝苍白核、延髓网状结构包括旁正中网状核、中央网状核腹侧亚核和外侧网状核。