黄芪注射液对高通透性腹膜透析大鼠透析效能及腹膜结构的影响

目的?探讨不同浓度黄芪注射液对高通透性腹膜透析大鼠透析效能及腹膜结构的影响。方法?40只SD雄性大鼠,分空白对照组（A组）、单纯腹透组（B组）、黄芪注射液低浓度组（C组）与黄芪注射液高浓度组（D组）。除A组外,余3组分别腹腔注射4.25%葡萄糖腹透液、低浓度黄芪腹透液、高浓度黄芪腹透液25mL/d,连续10d。于第11天进行腹膜功能试验,观察各组大鼠透析液留腹0、30、60 、90、120 min尿素氮D/P值（D/P urea）、肌酐D/P值（D/P Cr）、葡萄糖D/D₀值（D/D₀Glu）的变化,以及透析液留腹120min时尿素清除率（Curea）、肌酐清除率（CCr）、透析超滤量（UF）、净超滤量（NetUF）,并采集腹膜组织观察腹膜形态结构的改变。结果?①各透析组（B、C、D组）各时点D/P Cr高于A组、D/D₀Glu低于A组（P<0.05）,B组UF、NetUF 低于A组（P<0.05）;②C、D组D/P urea留腹60min后各时点均高于B组（P<0.05）,D组D/P Cr 留腹60、90min较B组高（P<0.05）、D/D₀ Glu留腹60min较B组低（P<0.05）;③D组与C组比较,D/P urea、D/P Cr（30、60、90min）与D/D₀Glu（30、60min）的变化更明显（P<0.05）;④D组Curea、CCr、UF、NetUF均高于 B组（P<0.05）;⑤C、D组腹膜增厚及间皮细胞脱落情况较B组改善。结论?4.25%葡萄糖腹透液可造成腹膜间皮层损伤,腹膜的通透性增高,超滤量减少,腹透液中加入黄芪可以保护腹膜间皮层,提高腹膜对尿素、肌酐的清除,提高透析效能,但不增加腹膜对葡萄糖的吸收,高浓度含黄芪腹透液尚能提高腹膜对水的清除,增加透析超滤量。      

高糖对体外培养人脐静脉内皮细胞通透性及肌球蛋白轻链磷酸化的影响

目的：探讨高糖对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）通透性及肌球蛋白轻链（MLC）磷酸化的影响。方法：分别以不含、含dnRhoA或Y27632的常规M199培养基（对照组、dnRhoA组、Y27632组）,以及不含、含dnRhoA或Y27632的高糖M199培养基（高糖组、高糖＋dnRhoA组、高糖＋Y27632组）培养HUVECs,在transwell系统中使其生长为单层内皮结构,观察该结构葡聚糖跨内皮转移率和THP-1跨内皮迁移细胞数,测定细胞MLC磷酸化水平。结果：高糖组葡聚糖跨内皮转移率和THP-1跨内皮迁移细胞数较对照组增加（ P＜0．05）。 dnRhoA组、Y27632组和高糖＋dnRhoA组、高糖＋Y27632组葡聚糖跨内皮转移率、THP-1跨内皮迁移细胞数及MLC磷酸化水平均较高糖组降低（ P均＜0．05）。结论：高糖刺激可能通过激活RhoA-ROCK信号转导通路,上调MLC磷酸化水平,增加内皮通透性。     

内毒素脂多糖对体外血脑屏障模型通透性的影响及其机制研究

感染性脑损伤时血脑屏障（blood-brain barrier，BBB）通透性增加在血管源性脑水肿发生发展中起重要作用，因此，阐明感染性脑损伤时BBB通透性改变及其调控机制具有十分重要的临床意义。本研究利用同种属的星型胶质细胞（astrocytes，AS）与脑微血管内皮细胞（bain microvascular endothelial cell，BMEC）共同培养，建立体外BBB模型，探讨BBB紧密连接蛋白和细胞骨架肌动蛋白（actin）在内毒素脂多糖（1ipopolysaccharide，LPS）诱导的BBB通透性增高中的变化及其与Rho／Rho激酶细胞信号转导通路的关系。对这一问题的深入探讨，有助于进一步阐明感染性脑损伤的发病机制，为其临床防治提供新的思路。     

VILI大鼠血清对内皮细胞通透性的影响及其作用机制的研究

目的 研究大潮气量机械通气后大鼠血清炎性介质对内皮细胞骨架及单层细胞通透性的影响及乌司他丁的治疗作用,探讨机械通气生物伤引起肺水肿的细胞和分子机制.方法 将30只SD大鼠分成3组:正常潮气量机械通气组;大潮气量机械通气组;大潮气量机械通气 乌司他丁组.收集机械通气后的3组大鼠的血清,并将这3组血清分别作用于ECV-304细胞,观察聚合型肌动蛋白的变化,并测定血清刺激后的单层内皮细胞通透性的变化.结果 和正常潮气量机械通气相比,大潮气量机械通气大鼠血清中的炎性介质可以导致内皮细胞周边肌动蛋白带消失,细胞中央出现明显应力纤维,细胞骨架重排,而大潮气量机械通气开始时注射乌司他丁的大鼠血清对内皮细胞骨架重排影响减轻,3组机械通气后的大鼠血清作用于单层内皮细胞后,内皮细胞通透系数变化百分比(Pa%)分别为(6.95±1.66)%,(27.50±7.77)%,(17.71±4.66)%.结论 大潮气量机械通气大鼠血清中的炎性介质可诱导内皮细胞骨架中重组,应力纤维形成,增加其通透性,而乌司他丁可减轻大潮气量大鼠血清中炎性介质对内皮细胞骨架的影响,应力纤维生成减少,改善了内皮细胞的通透性.     

透析器复用对补体及单个核细胞激活的影响

目的：了解透析器复用对补体和单个核细胞激活的影响。方法：比较透析器第四次复用与首次使用时,血浆补体终末复合物（SC5b-9）浓度及分离的单个核细胞（PBMC）在体外培养产生IL－1β、TNF-α和IL－6量的差异。结果：血仿膜透析器用过氧乙酸和福尔马林消毒后第四次复用时,血浆SC5b-9浓度变化幅度较首次使用明显降低;PBMC在LPS刺激下体培养产生IL－1β、TNF-α和IL－6的量与首次使用相比差异无显著性。结论：血仿膜透析器用过氧乙酸和福民林消毒复用,可在一定程度上降低其补体激活能力,但不影响PBMC产生细胞因子。     

银杏叶提取物EGB761对高胆固醇血症家兔血脑屏障通透性的影响

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对高胆陶醇血症家兔血脑屏障是否具有保护作用。【方法】以2％高胆阎醇饲料喂养雄性新西兰大白兔，建立高胆固醇血症家兔模型。模型建立后，用50mg／（kg·d）EGB761灌胃3周作为EGB761组，以5mg／（kg·d）辛伐他汀灌胃3周作为阳性药辛伐他汀组。干预结束后，耳缘静脉给予25g／L伊文思蓝（EB），3h后麻醉，生理盐水心脏灌流后取材，通过比色法测定皮质、海马和嗅球EB含量。[结果]银杏叶提取物EGB761可以降低海马和嗅球EB含量，与模型组相比分别为P〈0．01、P〈0．05；与阳性药辛伐他汀疗效相比差异无显著性，P〉0．05。【结论】银杏叶提取物EGB761能够降低由高胆同醇血症导致的血脑屏障通透性。     

烟曲霉对肺微血管内皮细胞通透性的影响及可能机制

目的 探讨烟曲霉对肺微血管内皮细胞通透性的影响及其机制。方法 利用激光共聚焦扫描显微镜检测人肺微血管内皮细胞肌动蛋白（F-actin）和细胞跨膜电阻仪测定细胞跨膜电位,以观察细胞通透性的改变,并利用p38 MAPK抑制剂、ROCK抑制剂和蛋白激酶C抑制剂探讨其机制。结果 烟曲霉处理后肺微血管内皮细胞F-actin染色的荧光强度显著下降（P<0.01）,烟曲霉处理组也出现细胞跨膜电阻值的显著下降（P<0.01）。与单独烟曲霉处理组比较,SB203580（20μmol/L, p38 MAPK抑制剂）干预组、Y27632（20μmol/L, ROCK抑制剂）干预组以及LY317615（10μmol/L,蛋白激酶C抑制剂）干预组的跨膜电阻值均显著上升（P<0.05）。结论 烟曲霉处理致肺微血管内皮细胞通透性增加,其机制可能涉及p38 MAPK、ROCK激酶以及蛋白激酶C通路。     

MEG8对阿尔茨海默病微环境下血脑屏障通透性的影响及其作用机制

目的 探讨长链非编码RNA—MEG8对阿尔茨海默病（AD）微环境下血脑屏障通透性的影响及作用机制。方法 应用β淀粉样蛋白（Aβ）处理人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3 (AD-ECs),模拟体外AD微环境下血脑屏障。实时荧光定量PCR检测正常人脑微血管内皮细胞（ECs）和AD-ECs中MEG8的表达。稳定转染沉默MEG8质粒后,应用微孔电阻系统检测跨内皮阻抗（TEER）,TMB显色法测量辣根过氧化物酶（HRP）渗出量。免疫荧光法比较对照组、转染MEG8阴性对照组（sh-NC组）、转染MEG8沉默质粒组（sh-MEG8组）紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的分布变化,Western blotting检测ZO-1和occludin的表达。结果 MEG8在ADECs中的表达显著高于ECs (P <0.01)。与sh-NC组比较,sh-MEG8组TEER值显著升高,HRP渗出量显著降低（均P <0.01）。紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin在AD-ECs边界呈现相对连续的分布。与sh-NC组比较,sh-MEG8组紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达显著增...     

高通量透析器复用的研究

目的 :研究采用过氧乙酸 (PAA)消毒后复用高通量透析器对几种不同分子量溶质清除能力的影响。　方法 :复用第 1、4、8、9及 1 1次时测定聚砜膜 BL S6 2 7对患者血清小分子物质尿素、肌酐、尿酸和中分子物质及 β2 -微球蛋白的清除率。　结果 :透析器复用至 1 1次时对小分子物质清除能力无变化 ,复用至 8次以上时 ,对中、大分子物质清除能力开始下降 ,且有显著性差异。　结论 :高通量透析器采用 PAA消毒后复用在一定程度是可行的 ,复用中除监测小分子物质清除能力外 ,还必需监测对中、大分子物质的清除率变化     

呼吸道合胞病毒对人支气管上皮细胞通透性的影响

目的 探讨呼吸道合胞病毒对支气管上皮细胞通透性的影响.方法 通过ELISA、荧光定量PCR检测呼吸道合胞病毒感染人支气管上皮细胞后对其血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,同时,通过检测细胞的跨膜电阻了解呼吸道合胞病毒对人支气管上皮细胞通透性的影响.结果 呼吸道合胞病毒增加了人支气管上皮细胞VEGF的表达,增加了支气管上皮细胞的通透性,VEGF的单克隆抗体可以明显阻断这一效应.结论 呼吸道合胞病毒通过上调VEGF的表达增加对支气管上皮细胞的通透性.     

内毒素对鼠肺／肠微血管及体外培养内皮细胞通透性的影响及凋亡在其中的作用

目的观察内毒素（LPS）对鼠肺和肠微血管及体外培养内皮细胞通透性的影响及凋亡在其中的可能作用。方法（1）观察内毒素血症时大鼠肺、肠组织微血管通透性的改变。（2）观察LPS对体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）通透性的影响。（3）观察LPS对体外培养HUVEC凋亡的影响，从而探讨凋亡在内皮细胞通透性改变中的作用。结果（1）在大鼠内毒素血症模型中，5ms／ks和10mg／kg LPS均可造成肺、回肠组织伊文氏兰含量增加（P〈0．01或0．05）。（2）100μg／ml LPS可显著增加体外单层HUVEC对牛血清白蛋白的通透性（P〈0．05或0．01）。（3）LPS可引起的体外培养内皮细胞的凋亡。结论（1）LPS能迅速提高体内肺微血管内皮细胞通透性，而LPS作用后6h肠微血管通透性开始增加。（2）LPS可剂量依赖性的引起体外培养脐静脉内皮细胞通透性升高。（3）细胞凋亡可能是引起内毒索血症时内皮细胞通透性的原因之一。     

慢性肾衰竭高通量血液透析的疗效观察

目的观察慢性肾衰竭患者长期连续高通量血液透析的临床疗效。方法选择已行血液透析治疗6个月-6年,透析方案为血液透析（HD）＋血液透析滤过（HDF）的慢性肾衰竭患者26例为研究对象。全部由HD＋HDF改为高通量血液透析（HFHD）,用G1．4s高通量血滤器。观察HFHD治疗1、3个月时患者的血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、血磷（P）、血钙（Ca）、血红蛋白（Hgb）、血浆白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、甲状旁腺素（iPTH）、β2微球蛋白含量（β2-MG）,并与治疗前比较;同时观察体重、主观感觉（透后乏力、睡眠、食欲、骨痛、尿毒症性瘙痒、精神神经异常等症状）的变化。结果经过HFHD治疗1、3个月后患者BUN、Scr、P、Ca与治疗开始相比均无明显变化（P〉0．05）,而TG、iPTH和β2-MG均明显下降（P〈0．05,P〈0．001）;Hb和ALB在治疗3个月后高于治疗开始时（P〈0．05）。患者主观感觉在治疗1个月后大部分明显好转,干体重明显增加：持续治疗3个月后效果更明显。结论长期连续HFHD能有效地清除中小分子毒素,改善血液透析患者营养不良状况,减少长期血液透析的并发症,效价比高于HD＋HDF。     

模拟失重对大鼠肺微血管通透性的影响

目的：研究模拟失重条件下肺微血管通透性的变化。方法：采用尾悬为模拟失重，分为悬吊7d和21d及对照4组，每组10只健康雄性SD大鼠，共40只大鼠。用肺泡毛细血管对异硫氰酸荧光素钠标记的右旋糖苷通透性指数表示肺泡毛细血管通透性并对其进行了测定，并采用免疫组织化学技术检测肺组织的血管通透因子的改变情况。结果：7d悬吊组模拟失重大鼠肺微血管通透性指数显著增大（P＜0．01），且21d悬吊组模拟失重大鼠肺微血通透性指数仍较大（P＜0．05），但同7d悬吊组相比增大程度已明显降低；7d尾悬吊模拟失重大鼠肺组织血管通透因子的表达水平明显高于正常对照组（P＜0．05），且21d悬吊组模拟失重大鼠肺组织血管通透因子的表达水平仍较高（P＜0．05），但增高程度已明显低于7d悬吊组。结论：在模拟失重条件下肺组织微血管通透性增高，并且随着时间延长增高程度会有所降低。     

超声致微泡声孔效应增强兔VX2肿瘤细胞通透性的适宜声学参数

目的探讨超声治疗仪不同声强、脉冲宽度、辐照时间和不同微泡剂量下声孔效应增大肿瘤细胞膜通透性的适宜声学参数。方法将90个接种于新西兰白兔的VX2移植瘤按声强、脉冲宽度、辐照时间和微泡剂量分为4个部分,各部分设有不同水平。治疗超声直接辐照肿瘤体表处,同时经静脉通道连续、缓慢注入微泡。治疗结束后立即取材制作组织切片,利用硝酸镧示踪电镜观察肿瘤细胞通透性变化,依次得出4个因素的适宜声学参数。结果超声联合微泡辐照致声孔效应能不同程度增大毛细血管壁通透性,其适宜的声强、脉冲宽度、辐照时间及微泡剂量分别为0.43 W/cm2、2.42 ms、10 min、0.50 ml/kg。结论超声联合微泡辐照致声孔效应能透过毛细血管壁将肿瘤细胞膜"打孔",有望增强肿瘤化疗效果。     

穴贴定喘膏体外透皮试验用皮肤的比较研究

目的对穴贴定喘膏体外透皮试验用皮肤做比较研究,选择适宜亲脂性成分的实验皮肤。方法应用TP-5型智能透皮扩散仪,以穴贴定喘膏中木兰脂素为考察指标,采用HPLC法测定,比较了不同种皮肤对穴贴定喘膏经皮渗透参数的影响。结果累积渗透量:硝酸纤维素>裸鼠>小鼠>壳聚糖>大鼠>兔>乳猪>蛇蜕;时滞:蛇蜕>壳聚糖>硝酸纤维素>乳猪>兔>大鼠>小鼠>裸鼠。结论硝酸纤维素膜可作为适宜亲脂性成分木兰脂素体外经皮渗透实验的理想皮肤模型。     

层流状态下高、低剪切应力对兔动脉内皮通透性的影响

目的研究层流状态下高、低剪切应力对动脉内皮通透性的影响。方法在兔(饲以普通和高脂食)甲状腺动脉分支处的头侧结扎左颈总动脉,测量两侧颈总动脉血流量,明胶灌注,测量其直径,计算剪切应力,依万斯蓝和苏丹Ⅳ动脉染色,辣根过氧化物酶法电镜观察。结果术后14d左侧颈总动脉剪切应力低于假手术组左侧的70.4%和实验组右侧的89.0%(P<0.01),实验组右侧高于假手术组右侧的156.2%(P<0.01)。实验组左侧颈总动脉蓝染区内皮连接间的完全开放型的百分率(69.4%和78.5%)明显高于右侧(36.3%和53.9%),而闭合型(6.1%和3.9%)明显小于右侧(20.5%和17.9%)(P<0.01)。左侧颈总动脉蓝染区标记HRP小胞的密度(2.09±0.77)/μm2和(2.11±0.63)/μm2明显高于右侧(1.67±0.12)/μm2和(1.89±0.33)/μm2(P<0.01)。结论层流状态下高、低剪切应力变化,尤其低剪切力更易导致内皮细胞对大分子物质通透性增高和动脉硬化形成。     

内毒素致豚鼠血迷路屏障通透性及其超微结构观察

目的研究内毒素(ETX)致豚鼠血迷路屏障的动态变化情况.方法采用听泡内注入内毒素,以伊文思蓝(Evans Blue,EB)为示踪剂,测量EB通过耳蜗血迷路屏障的渗出量,应用透射电镜观察耳蜗外侧壁形态学的变化.结果内毒素使耳蜗血迷路屏障EB渗出量随时间的变化而变化,12 h开始有EB渗出,24 h达高峰,与12、72 h比较,有显著性差异.生理盐水组超微结构无变化,内毒素组血管纹血管内皮细胞呈不同程度的损伤,细胞间的间隙增宽,有炎性细胞浸润.结论内毒素能使血迷路屏障通透性增加,其原因主要是由血管纹微血管内皮细胞连续性中断及细胞间的紧密连接开放所致.     

甲苯二异氰酸盐对人支气管上皮细胞通透性的影响

目的探讨甲苯二异氰酸盐(TDI)对正常人支气管上皮细胞(16HBE)活性氧(ROS)生成及通透性的影响。方法应用改良的Son氏等方法制备TDI-人血清白蛋白(TDI-HSA)。四唑盐(MTT)比色法检测不同浓度的TDI-HSA对正常人支气管上皮细胞株16HBE活力的影响。实验分4组:以未加任何处理因素的16HBE为对照组,20、60、100μg/ml的TDI-HSA处理16HBE 24 h,通过2’,7’-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)细胞内ROS荧光染色,收集细胞后以流式细胞仪检测荧光强度。选择对ROS水平影响较大的100μg/ml的TDI-HSA处理16HBE 24 h。流式细胞仪定量检测抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对TDI-HSA诱导ROS生成的影响,荧光显微镜观察照相。采用跨上皮电阻(TEER)法检测上皮单层细胞的通透性。结果 120μg/ml以下浓度的TDI-HSA对细胞活力无显著影响。ROS水平在对照组、20、60和100μg/ml组分别为:65.04±4.56,91.76±4.84,119.96±10.40,203.11±8.21。100μg/ml TDI-HSA组与对照组及20、60μg/ml组相比,16HBE的ROS水平显著升高(P<0.05)。对照组、100μg/ml TDI-HSA处理组、50 mmol/L NAC预处理组的细胞内ROS水平分别为:69.02±2.14,246.47±18.55,102.50±4.60;而TEER分别为:280.75±11.93,92.25±11.44,207.25±7.41。NAC可显著降低TDI-HSA诱导的ROS生成(P<0.05),改善氧化应激对单层细胞通透性的影响(P<0.05)。结论 TDI显著增加HBEROS的产生,其诱导的氧化应激部分参与支气管上皮细胞通透性的增加。这可能是TDI诱发哮喘的发病机制之一。