用双单克隆抗体ELISA定量测定人血清载脂蛋白B100

Kane等发现,载脂蛋白B100由肝脏合成,是血浆低密度脂蛋白(LDL)及极低密度脂蛋白(VLDL)的主要组成成份,占LDL蛋白质98%以上,在转运脂质及识     

ApoB100基因第26号外显子6694bp处MspⅠ位点突变与高血脂相关性

目的:载脂蛋白B100(ApoB100)是血浆中低密度脂蛋白(LDL)的组成成分,可与组织中LDL受体结合并介导LDL的降解和清除,此功能对于维持血清中LDL和胆固醇水平的稳定起重要作用.ApoB100的一些基因突变将明显影响ApoB100的结构和功能,导致血浆中LDL降解受阻,血浆中LDL和胆固醇含量升高从而增加其它心血管疾病的风险.本文将探讨ApoB100基因第26号外显子6694bp处的基因突变所致的MspⅠ位点多态性与高血脂之间的关系.方法:本文采用KI法提取50例高血脂症患者、60例对照组人群外周血细胞基因组DNA,设计并合成PCR引物,利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)分析其ApoB100基因第26号外显子6694bp处MspⅠ位点的基因型.结果:高血脂组基因型分布为M(+)M(+)∶42例,M(+)M(-)∶7例,M(-)M(-)∶1例;对照组基因型分布为M(+)M(+)∶59例,M(+)M(-)∶1例,M(-)M(-)∶0例.统计分析表明高血脂组与对照组之间基因型分布有明显差异(P＜0.05).结论:ApoB100基因第26号外显子6694bp处MspⅠ位点突变与高血脂相关.     

Ⅰ型高雪氏症患者血浆总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇浓度下降

Ⅰ型高雪氏症是遗传性鞘糖脂蓄积的疾病,以溶酶体水解酶、葡糖脑苷脂酶的活性低下和巨噬细胞内糖基神经酰胺(GL-1)的堆集为特征。作者对29例Ⅰ型高雪氏症患者进行了检查,测定其血浆总胆固醇、甘油三酯、脂蛋白胆固醇和血清载脂蛋白的浓度。Ⅰ型高雪氏症患者的血浆总胆固醇、低密度脂蛋白(LDL)胆固醇和高密度脂蛋白(HDL)胆固醇浓度均明显下降。血清载脂蛋白A和B的水平也下降,而血清载脂蛋白B和A分别是LDL和HDL的主要载脂蛋白,这提示LDL胆固醇和HDL胆固醇浓度下降     

桃仁红花煎治疗无症状性高脂血症的作用研究

目的:探讨活血化淤理气通络经典方剂“桃仁红花煎”对无症状性高脂血症的治疗作用。方法:使用ShimadiuCL-7200型自动生化分析仪检测各组治疗前后患者血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、载脂蛋白A(APoA)、载脂蛋白B(APoB)水平,使用Griess法检测治疗前后患者血浆一氧化氮(NO)水平,使用邻苯三酚法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,使用巴比妥法检测血清丙二醛(MDA)含量。结果:治疗后,治疗组患者血浆TC、TG、LDL、MDA水平明显降低(P<0.05),而ApoA、HDL、NO水平,及SOD活性明显升高(P<0.05或P<0.01),APoB治疗前后无明显变化(P>0.05);对照组给予洛伐它丁治疗后,TC、TG、LDL水平明显降低(P<0.05),ApoA、HDL水平明显升高(P<0.05),而MDA、NO、ApoB含量及SOD活性无明显变化。结论:活血化淤理气通络中药可以降低血脂,并有可能防治高脂血症对血管造成损害.     

AD患者血浆Leptin和血清Hcy、S100B、NSE联合检测的临床意义

探讨阿尔茨海默病(AD)患者血浆Leptin和血清Hcy、S100B、NSE水平的变化及临床意义.应用RIA和CLIA法测定32例AD患者血浆Leptin和血清Hcy、S100B、NSE水平,并与30名正常组作比较.结果表明AD患者血浆Leptin和血清Hcy、S100B、NSE水平与正常组比较,均有非常显著地升高(P...     

血浆脂蛋白研究的某些进展

1929年,Macheboeuf首先从马血清中分离出一种含有脂类和蛋白质的物质,命名为“酸沉淀性Coenapse。其后,这种物质被称为脂蛋白。但直到1948年,脂蛋白的分类未超出α与β两类。进入50年代后,将超速离心法和电泳法用于脂蛋白的分离获得成功,脂蛋白被分为CM(原点)、VLDL(前β脂蛋白)、LDL(β脂蛋白)及HDL(α脂蛋白)等四类。尤其在发现冠心病(CHD)人血浆LDL升高、HDL降低后,血浆脂蛋白的研究引起人们极大的关注和兴趣。开始,人们的注意力集中在LDL与CHD的关系,对     

载脂蛋白B_(100)单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立和应用

载脂蛋白参与血中脂质的转运和重分配,对血中各种脂质的代谢起着重要的调控作用。目前,已知有多种载脂蛋白(apo-AⅠ、AⅡ、AIv.B_(100)、B_(48)、C.E等)。人体低密度脂蛋白(LDL)几乎是唯一的蛋白决定簇-apoB_(100),为组织细胞特异LDL受体所识别,使细胞摄取LDL颗粒,降低血浆LDL浓度,因而与高脂血症及动脉硬化的发病机制有着明显的关系。但a poB_(100)的结构尚不清     

ApoB100基因第26号外显子6694bp处MspⅠ位点突变与高血脂相关性g

目的：载脂蛋白B100（ApoB100）是血浆中低密度脂蛋白（LDL）的组成成分,可与组织中LDL受体结合并介导LDL的降解和清除,此功能对于维持血清中LDL和胆固醇水平的稳定起重要作用。ApoB100的一些基因突变将明显影响ApoB100的结构和功能,导致血浆中LDL降解受阻,血浆中LDL和胆固醇含量升高从而增加其它心血管疾病的风险。本文将探讨ApoB100基因第26号外显子6694bp处的基因突变所致的MspⅠ位点多态性与高血脂之间的关系。方法：本文采用KI法提取50例高血脂症患者、60例对照组人群外周血细胞基因组DNA,设计并合成PCR引物,利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）分析其ApoB100基因第26号外显子6694bp处MspⅠ位点的基因型。结果：高血脂组基因型分布为M（＋）M（＋）：42例,M（＋）M（-）：7例,M（-）M（-）：1例;对照组基因型分布为M（＋）M（＋）：59例,M（＋）M（-）：1例,M（-）M（-）：0例。统计分析表明高血脂组与对照组之间基因型分布有明显差异（P〈0.05）。结论：ApoB100基因第26号外显子6694bp处MspⅠ位点突变与高血脂相关。     

内源性高甘油三酯血症患者血浆VLDL、LDL及HDL对血凝的影响

目的：研究内源性高甘油三酯血症(HTG)患血浆极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)是否发生了氧化修饰及其对血凝的影响。方法：对2l例内源性高甘油三酯血症患与2l例年龄性别相近的正常人的血脂、脂质过氧化物进行了分析。用一次性密度梯度超速离心法分离血浆VLDL、LDL及HDL，测定这三种脂蛋白的234nm光吸收、相对电泳迁移率(REM)和硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)，分别将这三种脂蛋白加入由正常人新鲜混合血浆构成的反应系统中，按试剂盒分别测定凝血酶原时间(PT)及活化部分凝血酶原时间(APIT)。结果：内源性HTG患血浆TG含量平均升高2．73倍，HDLC下降l.7l倍，同时LPO升高1．22倍;HTG组VLDL、LDL及HDL的REM、234nm光吸收值、TBARS含量均较对照组显增加(P＜0．01)，表明内源性HTG患血浆VLDL、LDL及LDL均发生了氧化修饰生成Ox—VLDL、Ox-LDL.PT及APTT在分别加入HTG组的VLDL、LDL及HDL后均比加入相应正常组脂蛋白明显缩短(P均＜0．05)。相关分析表明，HTG组血浆VLDL及HDL相对电泳迁移率(REM)与PT呈负相关(P＜0．01)。结论：HTG患血浆VLDL、LDL及HDL发生了氧化修饰，并使PT及APTT明显缩短。     

mmLDL通过p38 MAPK通路上调小鼠肠系膜动脉ET受体

目的:探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白(mm LDL)是否通过激活p38 MAPK炎症通路上调小鼠肠系膜动脉内皮素(ET)A型(ETA)和B型(ETB)受体。方法:将昆明小鼠分为正常对照组(尾静脉注射生理盐水)、mm LDL组(尾静脉注射mm LDL)、LDL组(尾静脉注射LDL)、mm LDL+SB 203580组(尾静脉注射mm LDL及腹腔注射p38 MAPK抑制剂SB 203580)和mm LDL+DMSO组(尾静脉注射mm LDL及腹腔注射DMSO)。微血管张力描记仪记录ETB受体激动剂角蝰毒素6c和ET-1引起肠系膜动脉收缩的量效曲线;RT-q PCR检测ETB受体、ETA受体和白细胞介素(IL-6)的m RNA表达;ELISA检测血清IL-6的水平;Western blot检测ETB受体、ETA受体、IL-6、p38 MAPK、p-p38MAPK、NF-κB和p-NF-κB的蛋白水平。结果:mm LDL引起ETB受体和ETA受体介导的血管收缩反应显著增强(P<0.01),ETB受体、ETA受体和IL-6的m RNA和蛋白表达显著增加(P<0.01),p-p38 MAPK和p-NF-κB蛋白水平显著升高(P<0.01),血清中IL-6水平显著升高(P<0.01);腹腔注射SB 203580抑制了mm LDL的作用。mm LDL引起的IL-6血清浓度升高分别与ETB受体和ETA受体介导的最大收缩率呈正相关。结论:mm LDL通过激活p38 MAPK通路及下游NF-κB转录因子,提高炎症因子IL-6血清水平,增加小鼠肠系膜动脉IL-6、ETA受体和ETB受体表达,增强ETA受体和ETB受体介导的血管收缩功能。     

载脂蛋白B100单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立和应用

利用顺序超速离心法从正常人血浆中分离低密度脂蛋白,密度为1.030～1.05g/ml,免疫BALB/c小鼠,进行细胞融合试验,成功地建立了3株持续稳定地分泌载脂蛋白B100单克隆抗体(Apo B100)的杂交瘤细胞系,并进行了鉴定分析。用纯化的ApoB100抗原进行ELISA实验,显示具有特异性;特异性阻断试验表明该抗体只能被Apo B100吸收及阻断;聚丙烯酰胺盘状电泳分析,杂交瘤腹水有一特异的明显区带;此外,进行了免疫球蛋白类型鉴定及柒色体检查。经临床应用,84例正常人血清Apo B100含量为78.64±34.75mg％;50例高胸血症患者为197.8±42.8mg％,两组平均值比较,差异非常显著(P<0.01)。Apo B100McAb可作为检测血清ApoB100的诊断试剂。     

急性脑出血患者血浆S100B浓度和CT表现的相关性分析

目的:探讨急性脑出血患者血浆S100B浓度与CT表现的关系。方法:收集急性基底节区脑出血患者和体检健康者各110例,采用ELISA测定血浆S100B浓度,分析急性脑出血患者血浆S100B浓度的变化及与CT表现的关系。结果:脑出血患者血浆S100B浓度(242.6±112.7)pg/ml较体检健康者(54.2±15.3)pg/ml显著升高(P<0.001)。血浆S100B浓度与血肿体积呈显著相关性(P<0.001)。脑室出血患者血浆S100B浓度显著高于非脑室出血患者(P<0.05)。结论:急性脑出血患者血浆S100B浓度与血肿体积和脑室出血呈显著相关,可以作为一个标志物并可用于反映脑出血的严重程度。     

血清胱抑素C、D-二聚体与低密度脂蛋白联合检测在卵巢癌患者诊断中的价值研究

目的探究血清胱抑素C(Cys C)、D-二聚体与低密度脂蛋白(LDL)联合检测在卵巢癌患者诊断中的临床价值。方法回顾性分析2017年1月至2018年1月我院收治的240例卵巢肿瘤患者的临床资料,经术后病理组织学检查确诊为80例卵巢癌(卵巢癌组)和160例卵巢良性肿瘤(良性肿瘤组);另选取同期来我院行健康体检的100例妇女,作为对照组。采用乳胶增强免疫透射比浊法检测血清Cys C水平,采用免疫比浊法检测血清D-二聚体水平,采用化学发光法检测血清LDL水平。比较三组血清Cys C、D-二聚体及LDL水平,并评价这三种指标联合检测对卵巢癌的诊断价值。结果各组血清Cys C、D-二聚体及LDL水平比较:卵巢癌组上述指标均高于对照组和良性肿瘤组,比较差异具有统计学意义(P <0.05);良性肿瘤组血清Cys C、D-二聚体及LDL水平与对照组比较无统计学意义(P>0.05)。卵巢癌组血清Cys C、D-二聚体与LDL单独检测及联合检测的阳性率分别为65.00%、71.25%、68.75%、93.75%,均高于良性肿瘤组和对照组(P <0.05);卵巢癌组内比较,Cys C、D-二聚体与LDL三者联合检测的阳性率均高于三者的单独检测(P<0.05)。Cys C、D-二聚体与LDL三者联合检测诊断卵巢癌的灵敏度及准确率分别为93.75%、88.75%,均较单独检测高(P <0.05);而三者单独检测诊断的灵敏度、特异性及准确率比较无统计学意义(P>0.05)。结论血清Cys C、D-二聚体与LDL联合检测对卵巢癌的早期诊断具有重要的临床价值,可提高诊断的灵敏度及准确率。     

心、脑血管疾病老年患者血清载脂蛋白B放免测定及其意义

正常生理情况下，载脂蛋白B(Apolipoprotein B，Apo B)占低密度脂蛋白(LDL)中蛋白质的95～99％，约占极低密度脂蛋白(VLDL)中蛋白质的37％。所以血清Apo B含量主要反映LDL水平，但VLDL时其含量也会增高。Apo B增高提示动脉硬化发生的危险性增加，     

血浆同型半胱氨酸水平与血管性痴呆的关系

目的:探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)、血清叶酸和维生素B12水平与血管性痴呆(VD)的关系.方法:应用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定30例VD患者的血浆Hcy水平,用放射免疫法(RIA)测定其血清叶酸及维生素B12水平,并与58例非痴呆脑梗死患者和30例同龄对照比较.结果:VD组血浆Hcy水平显著高于非痴呆脑梗死组:非痴呆脑梗死组血浆Hcy水平显著高于同龄对照组;VD组血清叶酸水平明显低于非痴呆脑梗死组;非痴呆脑梗死组血清叶酸水平明显低于同龄对照组.结论:Hcy可能是VD发病的一个危险因素.     

冠心病患者血清TBIL与OX-LDL水平的变化及其临床意义

目的:探讨冠心病(CHD)患者血清总胆红素(TBIL)与氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)水平的变化及其临床意义。方法:采用日立7600-20型全自动生化分析仪氧化酶法检测血清TBIL含量;采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测OX-LDL水平。结果:冠心病组血清TBIL明显低于健康对照组(7.93±2.68μmol/L vs 15.51±3.92μmol/L,P<0.01),而血浆OX-LDL明显高于健康对照组(97.25±37.44mmol/L vs29.21±11.36mmol/L,P<0.01);冠心病患者血清TBIL与血浆OX-LDL的变化呈显著负相关(r=-0.64,P<0.01),而健康对照组中血清TBIL与血浆OX-LDL间的相关性则不明显(r=-0.15,P>0.05)。结论:冠心病时血清TBIL显著降低而OX-LDL显著升高;冠心病患者血清TBIL抗LDL氧化能力的减弱可能是导致OX-LDL升高的重要原因之一。     

食管癌、胃癌组织低密度脂蛋白受体分析

低密度脂蛋白(LDL)与动脉粥样硬化的关系已熟为人知,但它与癌瘤的关系却研究较少,30年代就有人发现某些癌瘤患者伴有低胆固醇血症。现知血浆中的胆固醇主要存在于LDL中,而LDL主要是通过受体介导进入细胞降解的。采用密度梯度离心法分离LDL,用Iodogen法~(125)I二标记LDL,测定食管癌、胃癌的癌组织及相应的同体正常组织LDL受体水平。结果如下:(1)癌瘤组织蛋白质、DNA含量均明显高于正常组织;(2)     

急性脑梗死患者治疗前后临床血清学变化

目的探讨急性脑梗死患者治疗前后血清高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、血浆血栓素B2(TXB2),6-酮-前列腺素F1α(6-K-PGF1α)、甘油三脂(TG)、β脂蛋白(β-LP)的变化。方法对94例急性脑梗死患者(男58例,女36例),用放射免疫和生化方法检测血样本中HDL、LDL、TXB2、6-K-PGF1α、TG、β-LP的含量。结果急性脑梗死患者治疗后HDL、6-K-PGF1α浓度明显升高(P0.05),LDL、TG、β-LP、TXB2浓度显著降低(P0.01)。结论急性脑梗死患者治疗后血液的高凝状态明显改变,血脂降低。     

颅脑损伤患者血清S100B的检测

目的探讨颅脑损伤患者血清S100B的变化及其临床意义.方法用双抗体夹心ELISA法检测30例健康人和108例颅脑损伤患者血清S100B水平.结果 108例颅脑损伤患者在伤后12h血清S100B水平(1.24±0.32ug/L)较对照组(0.38±0.12ug/L)升高,重型、中型和轻型S100B均明显高于对照组(p<0.01);3组S100B水平比较(p<0.05).结论血清S100B检测可作为诊断早期脑损伤的指标.     

抗人血清载脂蛋白B100单克隆抗体的制备及鉴定

低致度脂蛋LDL中98%以上为载脂蛋白B100(ApoB100)。许多研究表明LDL含量与动脉硬化、冠心病呈正相关。高水平ApoB是致动脉硬化的主要原因。