罗红霉素对哮喘大鼠NF—κB及气道炎症的影响

目的：观察罗红霉素对哮喘大鼠NF-κB、气道炎症、气道高反应性的影响。方法：30只雄性SD大鼠随机分成正常对照组（C组）、哮喘组（A组）、罗红霉素组（R组）,每组10只。用卵白蛋白（OVA）制备哮喘大鼠模型。各组大鼠在末次激发后24h,检测气道反应性后放血处死：ELISA测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中的IL-4、IL-5、IFN-γ的浓度;免疫组化检测支气管上皮NF-κB p65活化。结果：哮喘组大鼠气道反应性高于对照组（P〈0．01）,罗红霉素组与哮喘组比较气道反应性下降（P〈0．05）;BALF中IL-4、IL-5,哮喘组含量均高于对照组（P〈0．01）,罗红霉素组均低于哮喘组（P〈0．01）,罗红霉素组BALF中IFN-γ低于对照组（P〈0．01）但高于哮喘组;哮喘组大鼠支气管上皮NF-κB蛋白的活化明显高于对照组,罗红霉素组低于哮喘组（P〈0．01）。支气管上皮NF—κB p65活化与BALF中的IL-4、IL-5的含量呈显著正相关（r=0．856,P〈0．01;r=0．912,P〈0．01）;大鼠BALF中的IL-4、IL-5的含量与Raw增加25％时（PC25Raw）呈显著负相关（r=-0．713,P〈0．01;r=-0．772,P〈0．01）,与Cdyn下降15％时（PC15Cdyn）呈显著负相关（r=-0．738,P〈0．01;r=-0．818,P〈0．01）。结论：罗红霉素可能部分通过抑制NF-κB活性而纠正哮喘Th1／Th2细胞因子失衡,罗红霉素降低哮喘大鼠的气道反应性可能和减少IL-4、IL-5的表达有关。     

CpG ODN对小鼠哮喘模型气道炎症及信号转导子和转录激活子6（STAT6）表达的影响

目的：研究寡核甘酸免疫刺激序列（CpG oligonucleotides,CpG ODN）对急性支气管哮喘小鼠气道炎症及信号转导子和转录激活子6（STAT6）表达的调控作用。方法：将32只雄性BALB／c小鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松干预组和CpG ODN干预组,建立急性哮喘气道炎症模型。对支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞总数、嗜酸粒细胞（EOS）分类计数;取左叶肺组织切片做HE染色观察气道和肺组织炎症改变;用免疫组织化学法检测气道上皮组织中STAT6表达。结果：哮喘组小鼠BALF中细胞总数、EOS绝对值显著高于对照组（P〈0．05）,地塞米松组和CpG ODN组上述炎症细胞计数比哮喘组明显减少（P〈0．05）。HE染色示地塞米松组和CpG ODN组小鼠肺组织炎症程度较哮喘组减轻。STAT6在气道上皮细胞表达,哮喘组气道上皮细胞中STAT6表达较对照组增强,地塞米松组和CpG ODN组STAT6表达与哮喘组比较有明显减少（P〈0．05）,较对照组增加。支气管上皮细胞STAT6蛋白表达与BALF中的EOS绝对值呈显著正相关（r=0．748）,而地塞米松组和CpG ODN组之间的作用无统计学差异（P〉0．05）。结论：应用地塞米松和CpG ODN均可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道炎症,CpG ODN可能通过下调肺组织中STAT6蛋白的过度表达,从而抑制依赖于STAT6/IL-4通路的急性气道炎症,减轻哮喘的症状。     

地塞米松对哮喘豚鼠气道白介素-5、白介素-10mRNA表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的：检测地塞米松对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中白介素-5（IL-5）mRNA及IL-10 mRNA表达水平及嗜酸性粒细胞（EOS）凋亡率。方法：健康雄性Hartley系豚鼠随机分为地塞米松组、哮喘组和正常对照组。采用原位细胞凋亡（TUNEL）、RTPCR技术检测BALF中EOS凋亡、IL-5 mRNA及IL-10 mRNA表达水平。结果：地塞米松组BALF中的EOS较哮喘组明显下降，EOS凋亡明显上升（P〈0．01）；IL-5 mRNA水平较哮喘组明显下降，IL-10 mRNA水平较哮喘组明显升高（P〈0.05）。结论：地塞米松可以通过减少IL-5 mRNA的表达，增加IL-10 mRNA的表达有效抑制哮喘豚鼠气道EOS的上升，增加EOS的凋亡。     

地塞米松对哮喘小鼠肺液清除功能障碍的作用

目的：研究支气管哮喘（以下简称哮喘）小鼠肺液清除功能的变化及地塞米松的作用，并探讨其可能机制。方法：雌性C57／BL6小鼠48只，随机分为对照组、哮喘组和地塞米松干预组。以卵蛋白（OVA）联合佐剂腹腔注射（第1、15天）加雾化吸入（第25～29天）方法复制小鼠哮喘模型。分别在末次激发后2h及24h测定各组小鼠肺组织病理变化及湿干重比值（W／D），应用免疫组化法测定各组水通道蛋白5（AQP5）在肺组织中的分布，分别采用实时PCR和蛋白质印迹法测定各组小鼠肺组织中AQP5mRNA和蛋白质的变化。ELISA法测定各组小鼠支气管肺泡灌洗液中细胞数和细胞因子IFN-γ及IL-13的水平。结果：哮喘组小鼠肺组织W／D较对照组明显升高，末次激发后2h和24h分别为4．98±0．46和4．81±0．33，分别升高22．9％和18．7％（P〈0．05），且激发后2h哮喘组小鼠肺组织W／D升高更明显。地塞米松干预组小鼠2h和24h肺组织W／D分别为4．01±0．11和4．21±0．14，与哮喘组小鼠相比显著降低（P〈0．05）；与对照组无显著性差异（P〉0．05）。HE染色可见哮喘组小鼠肺组织支气管周围大量以嗜酸性粒细胞和淋巴细胞为主的炎细胞浸润；地塞米松干预组小鼠气道炎症程度减轻，支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞比哮喘组明显减少，IFN-γ和IL-13分别为（89．25±9．71）和（52．37±8．69）pg／mL，与哮喘组EIFN-γ和IL-13分别为（66．71±7．51）和（85．49±9．23）pg／mL]相比明显改善（P〈0．05）。免疫组化分析表明，AQP5主要表达于Ⅰ型肺泡上皮细胞和气道上皮细胞的腔膜面。哮喘小鼠肺组织中AQP5的表达均较对照组明显减少（mRNA减少约42％，蛋白质减少约64％）。地塞米松上调其表达（与模型组比较，P〈0．05）。结论：哮喘小鼠存在肺液清除功能障碍，肺液含量增?     

卡介苗对哮喘患者血Th1／Th2平衡和IgE的影响

目的：探讨口服卡介苗（BCG）对哮喘患者外周血Th1／Th2平衡、嗜酸性粒细胞（EOS）和IgE水平的影响。方法：对40例急性发作期的哮喘患者（治疗组）在常规治疗的基础上加用BCG口服（50mg／支）,100mg用5％碳酸氢钠溶液250ml稀释后饭前口服,每周1次,共16周。分别在治疗前后采用双抗体夹心ELISA法检测外周血培养上清单个核细胞（PBMC）中白介素4（IL4）和 γ-干扰素（IFN-γ）水平,同时测定外周血IgE和嗜酸性粒细胞（EOS）计数,并进行肺功能的测定。并以同期入选的健康体检者30例作对照（对照组）。结果：治疗组患者治疗前外周血IL4、IgE水平和EOS细胞数明显高于对照组,而IFN-γ水平明显低于对照组（P〈0．05或P〈0．01）,经BCG口服治疗16周后患者外周血IL-4、IgE水平和EOS细胞数均明显降低,而IFN-γ水平明显上升（P均〈0．05）;同时患者肺功能指标FVC、FEV,和PEF均明显改善（均P〈0．05）。结论：哮喘患者存在外周血Th1／Th2平衡失调。口服BCG治疗哮喘的临床疗效确切,作用机制可能通过纠正外周血Th1／Th2细胞因子平衡,抑制EOS聚集,使B细胞分泌IgE减少,从而改善患者肺功能,达到治疗哮喘的目的。     

1型糖尿病大鼠支气管肺泡灌洗液及外周血Th1/Th2细胞因子变化的实验研究

目的观察1型糖尿病大鼠外周血及支气管肺泡灌洗液（BALF）中Th1/Th2细胞因子的变化。方法20只SD大鼠分为实验组（糖尿病组）和对照组（正常组）各10只,采用链脲菌素制作1型糖尿病大鼠模型,用ELISA法检测血清和BALF中IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值。结果与正常组比较,糖尿病组血清和BALF中的IFN-γ显著升高（P＜0．01）,IL-4显著下降（P＜0．05）．IFN-γ/IL-4明显升高（P＜0．01）。结论1型糖尿病大鼠血清及BALF中存在着IFN-γ升高,IL-4降低,IFN-γ/IL-4升高,即Th1/Th2失衡。Th1/Th2失衡可能是1型糖尿病易致细菌感染和结核杆菌感染的原因之一。     

哮喘患儿诱导痰中TGF-β1、IL-5与肺功能相关性的研究

目的探讨哮喘患儿诱导痰中TGF-β1表达、IL-5水平及EOS计数与肺功能的相关性。方法选取30例5—15岁支气管哮喘急性发作患儿（哮喘组）、该组30例经吸入糖皮质激素治疗6个月-1年进入哮喘缓解期的患儿（缓解组）．30例5—15岁健康儿童（对照组）,对3组病人测定诱导痰巾TGF—β1表达、IL-5水平及EOS计数,3组病人均测定肺功能FEV．等值。结果（1）哮喘组TGF～β1阳性细胞表达率与缓解组比较,P〈0．01;哮喘组IL-5、EOS与对照组、缓解组比较,P均〈0．01;（2）哮喘组FEV1％pre、FEF25-75％均低于对照组及缓解组,P〈0．05;缓解组FEV1％pre与对照组比较,差异无统计学意义;缓解组FEF25-75％低于对照组,P〈0．05;（3）哮喘组痰液中TGF-β1阳性细胞表达牢与IL-5水平、EOS％呈正相关：r=0．38P〈0．05,r=0．66,P〈0．01;与肺功能FEV1％pre、FEF25～50呈负相关：r=-0．68,P〈0．01,r=-0．555,P〈0．05。结论TGF—βl、IL-5、EOS在哮喘患儿诱导痰中有过度表达,这些指标与肺功能有很好的相关性．可作为气道慢性炎症的-个标示物用来监测哮喘。     

不同基因型慢性乙型肝炎患者Th1／Th2细胞因子平衡研究

目的探讨不同基因型慢性乙型肝炎（乙肝）患者体内Th1／Th2细胞因子平衡性。方法检测39例不同基因型慢性乙肝患者外周血细胞因子（IL-12、IFN-γ、IL-4）的表达,并作统计学分析。结果慢性乙肝患者与健康对照组比较,外周血IL-12、IFN-γ、IL-4表达明显升高（P〈0．01或P〈0．05）。基因型C型组与B型组比较,ALT、IL-12、Th1／Th2明显升高（P〈0．05）,IL-4明显降低（P〈0．05）。结论慢性乙肝患者体内存在Th分化的不平衡,C基因型慢性乙肝患者体内Th1优势应答。     

血清白介素-4和干扰素-γ及尿白三烯 E4在婴幼儿喘息性疾病中的变化及意义

目的：探讨血清IL-4、IFN-γ及尿LTE4在婴幼儿喘息性疾病中的变化及临床意义。方法选取2014年3月至2015年3月收治的喘息性疾病患儿30例为喘息组;急性非喘息性下呼吸道感染患儿30例为非喘息组,体检健康婴幼儿30例为对照组,采用酶联免疫吸附法（ ELISA）检测血清IL-4、IFN-γ及尿LTE4水平,血清IL-4、IFN-γ与尿LTE4之间的关系采用Pearson相关性分析。结果（1）喘息组急性期患儿血清IL-4水平明显高于非喘息组及对照组,血清IFN-γ水平明显低于非喘息组及对照组,差异有统计学意义（ P ＜0．05或＜0．01）;喘息组急性期患儿血清IL-4／IFN-γ值明显高于非喘息组和对照组（ P ＜0．05或＜0．01）;喘息组急性期患儿尿LTE4水平明显高于对照组（P＜0．05）,与非喘息组比较差异无统计学意义（ P ＞0．05）;（2）喘息组恢复期患儿血清IL-4、尿LTE4水平明显低于急性期（ P ＜0．05）,但仍高于对照组（ P ＜0．05）;血清IFN-γ明显高于急性期（ P ＜0．05）,但仍低于对照组（ P ＜0．05）;喘息组恢复期患儿血清IL-4／IFN-γ值明显低于急性期（ P ＜0．05）,但仍高于对照组（ P ＜0．05）;（3）喘息组急性期患儿尿LTE4水平与血清IL-4水平呈线性正相关（ r ＝0．674, P ＜0．05）;与血清IFN-γ呈线性负相关（ r ＝－0．783, P ＜0．05）。结论 IL-4、IFN-γ及LTE4与婴幼儿喘息性疾病的发生发展具有一定关系,可能与Th1／Th2免疫失衡,气道炎性反应有关。     

支气管哮喘患者外周血单核细胞因子Th1/Th2失衡的检测

目的观察支气管哮喘患者在发病期是否存在Th1／Th2失衡。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测三组（哮喘发作组、哮喘缓解组及健康对照组，每组17例）外周血单核细胞（PBMC）产生的肿瘤坏死因子γ（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）。结果与健康对照组比较哮喘急性发作组患者PBMC产生的IFN-γ[（139．6±13．0）pg／L]明显降低（P〈0．01），而IL-4[（114．7±20．8）pg／L]水平增高（P〈0．01），哮喘缓解组两种细胞因子水平与健康对照组差异无统计学意义。结论支气管哮喘急性发作期存在着Th1／Th2失衡。     

热喘平口服液对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中细胞因子影响的实验研究

目的:探讨热喘平口服液对实验性哮喘豚鼠平喘的作用机制。方法:把体质量为250～300 g的50只清洁级封闭群幼龄雄性豚鼠随机分成模型组、中药小剂量组、中药大剂量组、地塞米松组、正常对照组共5组,每组10只,造模后分别按要求给药,最后检测哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)的含量。结果:模型组与正常对照组相比IFN-γ显著降低(P<0.01),IL-4显著升高(P<0.01),说明造模成功。与模型组相比,中药小剂量组使IFN-γ升高(P<0.05),IL-4降低(P<0.05)。与模型组相比,中药大剂量组、地塞米松组均使IFN-γ显著升高(P<0.01),IL-4显著降低(P<0.01)。结论:热喘平口服液平喘的机制之一可能是影响实验性哮喘豚鼠肺泡灌洗液中细胞因子的含量,使IFN-γ升高,IL-4降低。     

吸入布地奈德对哮喘大鼠IL-4、IL-10、IFN-γ水平的影响

目的探讨哮喘大鼠IL-4、IL-10、IFNγ-水平以及布地奈德的干预作用。方法将30只W istar大鼠随机分组(n=10):模型组(A组)采用卵白蛋白致敏与激发;空白对照组(C组),以生理盐水代替OVA;布地奈德组(B组),第六次诱发哮喘结束后30 m in采用布地奈德混悬液雾化吸入2周。模型组和空白对照组以等量生理盐水代替。检测细胞因子IL-4、IL-10、IFNγ-的水平。结果 A组大鼠单核细胞培养上清中IL-4的水平明显高于C组(P<0.05),IL-10、IFNγ-水平明显低于C组(P<0.05);B组大鼠单个核细胞培养上清中IL-4的水平明显低于A组(P<0.05),IL-10、IFNγ-水平明显高于A组(P<0.05)。结论细胞因子IL-4、IL-10、IFNγ-参与哮喘发病的病理生理过程,吸入布地奈德能够有效改善Th1/Th2动态平衡,减轻哮喘的发作。     

穴位注射黄芪对哮喘大鼠p38MAPK及Th1/Th2因子的影响

目的 观察哮喘大鼠肺组织p38蛋白激酶（p38 MAPK）和Th1/Th2类细胞因子（IFN-γ/IL-4）表达的变化,探讨穴位注射黄芪对其影响及可能机制.方法 SD大鼠随机分成4组（10只/组）,即正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组和黄芪穴位注射组.应用卵蛋白（OVA）致敏激发法制备哮喘大鼠模型,分别采用酶联免疫吸附法（ELlSA）和蛋白质印迹检测血清中IL-4、IFN-γ含量和磷酸化p38 MAPK的变化,并观察肺组织病理学改变.结果 ①与正常对照组相比,哮喘模型组大鼠肺组织磷酸化p38 MAPK表达水平升高,血清IL-4含量升高、IFN-γ含量降低（P＜0.05）;②与哮喘模型组相比,黄芪穴位注射组大鼠血清IL-4含量、磷酸化p38 MAPK表达水平降低,血清IFN-γ含量升高（P＜0.05）;③黄芪穴位注射组与地塞米松组比较血清IL-4含量升高,IFN-γ含量降低,磷酸化p38 MAPK表达水平降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;④在肺组织病理学方面,穴位注射黄芪注射液能明显改变哮喘大鼠病理变化;⑤肺组织磷酸化p38 MAPK的表达与IL-4比较呈显著正相关（r=0.596,P＜0.05）,与IFN-y比较呈显著负相关（r=-0.634,P＜0.05）.结论 p38 MAPK可能调控支气管哮喘的发病机制;穴位注射黄芪与糖皮质激素比较,对哮喘大鼠具有保护作用,偏重不一,其治疗作用与抑制p38 MAPK磷酸化、下调IL-4、上升IFN-γ表达水平有关.     

雾化吸入三氧化二砷及艾叶油对哮喘豚鼠白三烯C4及Th1/Th2失衡的影响

目的 探讨三氧化二砷（As2O3）及艾叶油雾化吸入对哮喘豚鼠白三烯C4及Th1/Th2失衡的影响及平喘的机制.方法 采用卵白蛋白（OVA）致敏激发复制哮喘豚鼠模型,60只豚鼠随机分为As2O3雾化吸入组[B1：2.0 mg/（kg·d）、B2：4.0 mg/（kg·d）]、联合用药组[C1：2.0 mg/（kg·d）＋ 0.05 ml、C2：4.0mg/（kg·d）＋0.1 ml];同时设生理盐水雾化吸入组（A组）及正常对照组（D组）.用药7天后,比较支气管肺泡灌洗液（BALF）中白三烯C4的变化及Th 1/Th2失衡的情况.结果 （1）LTC4：B1、B2、C1、C2与A、D组比较差异均有统计学意义（P＜0.01）;B1与C1组比较差异有统计学意义（P＜ 0.01）; B2与C2组比较差异有统计学意义P（＜0.05）;B1与B2组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.（2） Th1/Th2失衡：①IFN-γ：B1、B2、C1、C2与A、D组比较差异均有统计学意义（P＜0.01）,用药四组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）;②IL-4：B1与B2组比较差异有统计学意义（P＜0.01）,B1与C1组、B2与C2组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;③IFN-γ/IL-4：B1与B2组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,B1与C1组、B2与C2组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 白三烯C4的升高及Th1/Th2的失衡是支气管哮喘的重要发病机制,As2O3平喘的机制与降低LTC4及调节Th 1/Th2的失衡有关;艾叶油平喘的机制与降低LTC4有关,较小剂量的As2O3及艾叶油联合雾化吸入可安全有效地达到平喘的作用,二者联合应用有协同作用.     

川芎嗪对致敏大鼠气道炎症气道重塑的影响和作用机制

目的探讨川芎嗪通过调节GATA-3和白细胞介素(IL)-5,抑制致敏大鼠气道炎症和气道重塑的分子机制。方法32只Wistar大鼠随机分成健康组、哮喘组、川芎嗪组和地塞米松(DXM)组,每组8只。苏木素-伊红(HE)染色行肺组织病理学检查、嗜酸性粒细胞计数及气道平滑肌(ASM)厚度测定;免疫组织化学两步法测定肺组织GATA-3和IL-5的表达;行肺组织GATA-3、IL-5表达与气道炎症反应间的相关性分析。结果川芎嗪和地塞米松可有效减少哮喘肺组织嗜酸性粒细胞数量和减轻平滑肌厚度,与哮喘组比较,差异有统计学意义(P<0.05);两个干预组肺组织中GATA-3和IL-5的表达较哮喘组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);肺组织GATA-3和IL-5表达与肺组织中嗜酸性粒细胞计数及平滑肌厚度呈正相关。结论川芎嗪可降低哮喘大鼠肺组织GATA-3和IL-5的表达,有效抑制哮喘的气道炎症,改善气道壁重塑。     

黄芪多糖对哮喘小鼠气道重构的干预作用

目的：探讨黄芪多糖（astragalus polysaccharide,APS）对哮喘小鼠气道重构的干预作用。方法：60只4～6周龄SPF（Specific PathogenFree）级BALB/c小鼠,随机均分为对照组、哮喘组、APS治疗组和地塞米松（dexamethasone,DXM）阳性对照组;用卵蛋白（ovalbumin,OVA）致敏/激发哮喘;APS治疗组和DXM阳性对照组分别用APS和DXM肌肉注射治疗。采用二步法免疫组化技术对小鼠肺组织α平滑肌肌动蛋白（smooth muscle actin-α,α-SMA）表达进行检测,采用计算机图像分析系统对气道重塑进行分析。结果：与对照组对比,哮喘组小鼠肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fliud,BALF）中白细胞计数显著增加（P〈0.01）,α-SMA强阳性表达,气道壁厚度（d/Pi）、气道壁面积（WA/Pi）、气道平滑肌面积（Wam/Pi）和平滑肌细胞计数（N/Pi）均明显增加（P〈0.05或P〈0.01）;与哮喘组对比,APS治疗组和DXM阳性对照组BALF中细胞计数显著减少（P〈0.001）,α-SMA阳性表达,d/Pi、WA/Pi、Wam/Pi和N/Pi均显著减小（P〈0.05或P〈0.01）。结论：APS可抑制哮喘小鼠的气道重塑,这种抑制作用可能是通过调节α-SMA的表达来实现的。     

PTEN在哮喘大鼠肺部的表达及罗红霉素的干预效果

目的研究哮喘大鼠与张力蛋白同源的10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)的表达和罗红霉素(RXM)对其表达的影响。方法24只体质量(200±10)g的SPF级雄性SD大鼠,随机分为3组:健康对照组(C组)、哮喘组(A组)、罗红霉素组(R组)。对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞分类计数;应用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定BALF中白细胞介素(IL)-4浓度;采用免疫组织化学法和Westernblot法分别检测PTEN的表达及各组大鼠肺组织PTEN量的变化。结果①健康对照组、罗红霉素组支气管PTEN蛋白的表达分别为[(2.50±0.56),(1.69±0.24)]均高于哮喘组[(1.12±0.26)](P<0.05),其主要表达细胞是支气管上皮细胞;②哮喘组大鼠BALF中IL-4表达明显升高,明显高于健康对照组,罗红霉素干预组BALFIL-4量明显下降,与哮喘组比差异有统计学意义。③哮喘组大鼠支气管PTEN蛋白与BALF中的IL-4浓度呈负相关(r=-0.735,P<0.01),与BALF中的嗜酸粒细胞(EOS)%呈显著负相关,(r=-0.761,P<0.01)。结论气道上皮细胞是PTEN主要表达细胞,哮喘大鼠PTEN蛋白表达明显减少,PTEN能减少Th2因子的表达;罗红霉素可以促进PTEN的表达,可能为其抑制哮喘气道炎症形成的重要作用机制。     

喘可治注射液对大鼠抗炎和免疫调节机制的研究

目的:探讨喘可治注射液治疗支气管哮喘(简称哮喘)的作用机制.方法:60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0.5 ml·kg-1 ·d-1,肌内注射),高、中、低剂量(10、5、2.5 ml·kg-1·d-1,腹腔注射)喘可治注射液组.以2％卵蛋白为激发液,雾化吸入致敏,建立哮喘模型.治疗后,大鼠肺叶经HE染色后行病理切片,采用酶联免疫吸附(ELISA)法分别测定大鼠外周血中白介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)浓度,采用流式细胞仪测定大鼠外周血中CD4+ CD25+T调节细胞和CD3- CD161a+自然杀伤(NK)细胞占淋巴细胞的百分比.结果:各剂量喘可治注射液组大鼠肺叶局部炎症反应均较模型组轻,IL-4浓度均明显下降,与模型组相比差异有显著性(P＜0.01),但各治疗组间、治疗组和正常组间IL-4浓度无显著差异.各治疗组IFN-γ的浓度均较模型组有所上升,其中高剂量组上升最为明显,与模型组比较有显著差异(P＜0.01).高、中、低剂量喘可治注射液组CD4+ CD25+T调节细胞百分比均明显上升,与模型组相比有显著差异(P＜0.05).CD3- CD161.+ NK细胞的百分比各组间比较无显著性差异.结论:喘可治注射液可增加血中IL-4、IFN-γ浓度,及CD4+ CD25+T调节细胞含量,纠正免疫失衡,这可能是其治疗哮喘的机制之一.     

血红素加氧酶1对哮喘动物模型抗炎及免疫调节的作用研究

目的：探讨血红素加氧酶1（HO-1）对哮喘动物的抗炎及免疫调节的作用。方法：Balb／C小鼠60只,随机分为空白对照组、模型组、氯化高铁血红素（hemin）组、锡-原卟啉（SnPP）组为4组。空白对照组不进行哮喘模型的建立。模型组、hemin组和SnPP组小鼠均采用卵清蛋白刺激建立哮喘模型。Hemin组和SnPP组分别给予一定量的Hemin和SnPP,在第27天给药次日检测相应的指标。结果：经过卵清蛋白（OVA）致敏激发后,模型组OVA—SIgE的浓度、BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞（EOS）数量与对照组相比显著性升高（P〈0．01）,Hemin组的OVA—SIgE浓度BALF中细胞总数和EOS数量与模型组相比差异具有统计学意义（P〈0．01）;模型组血清中IL-10浓度与空白对照组相比显著下降（P〈0．01）,Hemin组和SnPP组与模型组相比,IL-10浓度均有不同程度的升高;模型组、Hemin组和SnPP组HO-1表达与空白对照组相比明显增加;而Hemin组的HO-1表达与模型组和SnPP组相比,具有更明显增加的趋势。结论：HO-1可能是通过促进IL-10因子来抑制哮喘模型小鼠的气道炎症,并且会大大降低血清中OVA-slgE水平和炎性细胞的数量。但是哮喘炎症反应可能会涉及到多种炎症细胞和细胞因子,是一个非常复杂的过程,其抗炎作用机制还需要进一步研究。