藏药秦艽醇提物对类风湿关节炎患者外周血单个核细胞体外培养条件下细胞增殖影响的研究

目的:研究藏药秦艽醇提物对人类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)体外培养条件下细胞增殖的影响,以探讨其抗风湿活性。方法:应用醇提法将藏药秦艽提取分离,应用高效液相色谱法(HPLC)测定藏药秦艽醇提物中龙胆苦苷含量,四氮唑蓝(MTT)法检测秦艽醇提物对人RA患者外周血单个核细胞体外培养条件下细胞增殖情况的影响。结果:高效液相色谱法测定藏药秦艽醇提物中龙胆苦苷含量为6.08%,MTT法检测结果显示,秦艽醇提物对RA患者外周血单个核细胞有明显的抑制作用,用浓度为10 mg/mL、50 mg/mL秦艽醇提物处理后细胞生长抑制率(分别为81.46±7.03%、87.6±16.67%),分别与浓度为1 mg/mL、2 mg/mL秦艽醇提物处理后细胞生长抑制率(分别为48.96±8.59%、55.38±32.57%)相比均有升高,差异有统计学意义(P<0.05);结论:藏药秦艽醇提物抑制人RA患者外周血单个核细胞体外培养条件下细胞的增殖,不同浓度的秦艽醇提物对人RA患者外周血单个核细胞体外培养条件下细胞的增殖抑制作用有差异,提示秦艽抗风湿的部分机理可能是由于其有效成分龙胆苦苷抑制了淋巴细胞、单核细胞增殖而起的作用。     

重楼总皂苷提取分离及其对人胃癌细胞BGC823的抑制作用

目的：初步探索重楼总皂苷的提取分离方法,并通过比较重楼总皂苷与重楼醇提物、重楼皂苷Ⅰ对人胃癌细胞BGC823生长抑制作用评价重楼总皂苷提取分离工艺和临床应用价值。方法：采用热回流提取法得到重楼醇提物,再经大孔吸附树脂分离得到重楼总皂苷。采用噻唑蓝染色法（MTT法）和集落形成实验,比较重楼总皂苷与重楼醇提物、重楼皂苷Ⅰ对人胃癌BGC823细胞增殖和集落形成的影响。结果：重楼总皂苷、重楼醇提物、重楼皂苷Ⅰ作用于人胃癌BGC823细胞48h的半数抑制浓度（IC50）分别为（8.63±0.30）、（2.61±0.03）、（1.97±0.01）μg/mL。在3.13、6.25、12.5μg/mL浓度下重楼醇提物组集落形成抑制率为30.84%、53.27%、100%,而重楼总皂苷组在各浓度范围内均无集落形成。结论：重楼总皂苷对人胃癌BGC823细胞生长抑制作用显著优于重楼醇提物,稍弱于重楼皂苷Ⅰ,但二者IC50数值接近且均较低,从而肯定重楼总皂苷提取分离工艺和临床应用潜能。     

灯台叶醇提物体外抗肿瘤作用研究

目的研究灯台叶醇提物对体外肿瘤细胞增殖和凋亡的影响,以及对鸡胚尿囊膜血管生成的抑制作用。方法采用MTT法检测灯台叶醇提物对体外培养肿瘤细胞(人卵巢癌细胞C200、人乳腺癌细胞MNK-7、人肝癌细胞SNU-398)的抗肿瘤作用;以PI/Annexin-V染色检测灯台叶醇提物对人乳腺癌细胞MNK-7凋亡的影响;以鸡胚尿囊膜血管生成(CAM)实验,研究灯台叶醇提物对新生血管生成的抑制作用。结果灯台叶醇提物在0.1～2.0 mg/mL对各肿瘤细胞的增殖有显著抑制作用,2.0 mg/mL灯台叶醇提物对人乳腺癌细胞增殖抑制率达到83.6%;2.0 mg/mL灯台叶醇提物作用后人乳腺癌细胞凋亡率达到62.5%;灯台叶醇提物在1～1000μg/mL对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用,给药鸡胚的新生血管数减少,其中10μg/mL抑制率最高,一级血管抑制率为52.1%,二级血管抑制率为48.3%。结论在实验给药浓度下,灯台叶醇提物对受试肿瘤细胞的增殖具有较强抑制作用,对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用。     

重楼醇提物对三种神经胶质瘤细胞株的细胞毒性研究

目的:通过重楼醇提物对三种人神经胶质瘤细胞株(U251、U87、T98G)进行细胞毒性检测,观察重楼醇提物的抗肿瘤活性。方法:乙醇冷浸法对重楼饮片进行提取,采用聚酰胺柱层析分离划段获得重楼醇提物的不同部位,通过MTT法对所得部位进行细胞毒性检测。结果:重楼醇提物中有3个分离组分作用于人神经胶质瘤细胞IC50值小于10μg/m L,对神经胶质瘤细胞株表现出明显的细胞毒性作用。结论:重楼醇提物中存在抑制神经胶质瘤细胞株增殖的物质,值得进一步开展相关研究。     

藏药普尔那对肝癌HepG2细胞增殖作用的实验研究

观察藏药普尔那提取物对HepG2细胞的增殖作用。采用MTT比色法测定不同质量浓度普尔那根茎乙酸乙酯提取物(GE)、根茎水提物(GW)、叶乙酸乙酯提取物(YE)、叶水提物(YW)对体外培养人肝癌细胞HepG2细胞增殖的影响。125μg/mL的低质量浓度GE、500μg/mL的低质量浓度YE对HepG2细胞增殖具有一定抑制作用。普尔那不同提取部位主要体现细胞增殖的促进作用。应进一步研究藏药普尔那的物质基础、药理活性,进行体外、动物毒性实验,且严格控制其临床使用剂量。     

重楼总皂苷对人鼻咽癌细胞CNE-2Z周期及凋亡的影响

目的:探讨重楼总皂苷对CNE-2Z人鼻咽癌细胞周期和细胞凋亡的影响。方法:采用MTT法检测重楼总皂苷对CNE-2Z人鼻咽癌细胞的增殖抑制作用;Hoechst-PI双染、流式细胞仪观察重楼总皂苷对CNE-2Z细胞周期及凋亡的影响。结果:重楼总皂苷能抑制CNE-2Z细胞的增殖,其作用呈明显的时间和剂量依赖性;Hoechst-PI双染显示细胞凋亡特征;重楼总皂苷使CNE-2Z细胞被阻滞在S期;60、90、120μg/mL重楼总皂苷分别作用CNE-2Z细胞24 h后,其凋亡率分别为5.5%±0.22%、7.7%±0.51%、15.5%±0.62%。结论:重楼总皂苷可抑制CNE-2Z细胞的增殖,阻滞细胞于S期,从而诱导细胞凋亡。     

溪黄草水提物和醇提物体外抗肿瘤活性研究

目的:研究溪黄草(Rabdosia Serra)水提取物和醇提取物对人肝癌细胞(HepG2)、胃癌细胞(MKN-45)和食管癌细胞(TE-1)的增殖抑制作用,分析不同提取方式对肿瘤细胞增殖抑制强弱的差异。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)建立溪黄草不同提取物的色谱图,MTT法检测溪黄草不同提取物对人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞MKN-45和人食管癌细胞TE-1细胞存活率的影响。结果:溪黄草水提物和醇提物的色谱图存在差异。溪黄草水提物在人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞MKN-45和人食管癌细胞TE-1的IC_(50)值分别是(2.05±0.19) mg/m L、(1.98±0.16) mg/m L和(1.65±0.18) mg/m L。溪黄草醇提物在上述三种细胞株的IC_(50)值分别是(0.93±0.07) mg/m L、(0.68±0.22) mg/m L和(0.63±0.06) mg/m L。溪黄草水提物和醇提物的IC_(50)值存在显著差异(P 0.01),且溪黄草醇提物的IC50值显著小于水提物。结论:两种提取物均具有与浓度相关的细胞体外抑制作用,且醇提物对细胞增殖抑制作用显著强于水提物。     

美洲大蠊提取物对3株人及小鼠白血病细胞的细胞毒性研究

目的:通过美洲大蠊提取物对体外白血病细胞的细胞毒性测试,探讨美洲大蠊提取物对白血病细胞的抑制作用.方法:美洲大蠊醇提物,通过聚酰胺柱层析分离划段得不同部位,采用MTT法对所得部位进行人及小鼠白血病细胞的细胞毒性测试.结果:有多个部位样品的IC50值小于10μg/mL.结论:通过样品与对照品细胞毒活性结果比较,表明美洲大蠊提取物中存在具有对人及小鼠白血病细胞生长抑制作用的物质,值得对其进行进一步的研究.     

白芨水提物对人肝癌HepG2细胞增殖的影响

目的:研究白芨水提物对人肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法:使用水提醇沉法提取白芨粗多糖,同时保留有机小分子物质部分;采用CCK8试剂检测不同浓度的两部分提取物对HepG2细胞存活率及生长曲线的影响;倒置显微镜观察提取物对HepG2细胞形态的影响,以及soft agar法检测提取物对HepG2细胞克隆形成的影响。结果:与对照组相比,白芨水提物均能降低HepG2细胞的存活率和增殖能力,并与浓度呈正相关,其中多糖和有机小分子物质的半数抑制浓度(IC_(50))分别为65. 99μg/mL和52. 62μg/mL;此外,白芨水提物作用后改变了细胞形态,并能抑制HepG2细胞的克隆形成能力。结论:白芨水提物中的多糖和有机小分子物质均能抑制HepG2细胞的增殖作用。     

转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性的增效作用研究

目的 研究转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性的增效作用,观察药物作用后细胞凋亡情况.方法 采用MTT法检测青蒿琥酯单用或与转铁蛋白合用对鼻咽癌CNE2细胞的增殖抑制作用,DAPI染色观察CNE2细胞凋亡,流式细胞术分析细胞凋亡率变化.结果 青蒿琥酯对CNE2细胞的IC50值为116 μg/mL,青蒿琥酯合用转铁蛋白后IC50值降为17.4μg/mL,DAPI染色显示青蒿琥酯合用转铁蛋白作用CNE2细胞24h后,细胞出现明显凋亡现象,流式细胞分析结果显示,与对照组相比,青蒿琥酯合用转铁蛋白组作用24h后,细胞出现明显凋亡现象,而平行进行的青蒿琥酯100μg/mL,组相同作用时间没有出现凋亡.结论 转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性有较强增效作用,转铁蛋白与青蒿琥酯合用加速了青蒿酯诱导的细胞凋亡,是转铁蛋白增强青蒿琥酯作用的重要机制之一.     

重楼皂苷I对高转移人卵巢癌细胞体外生长抑制功能的研究

目的:研究重楼提取的活性成分重楼皂苷I对高转移人卵巢癌细胞的体外生长抑制及促凋亡功能,并初步探讨其可能的作用机制。方法:用CCK8法检测不同浓度重楼皂苷I在不同时间点对高转移人卵巢癌细胞(HO-8910PM)体外增殖的影响;光镜下观察细胞形态的变化;用流式细胞术(FCM)检测经不同浓度重楼皂苷I处理后高转移人卵巢癌细胞的细胞周期变化;用AnnexinV/PI双染法、Hoechst33258检测不同浓度重楼皂苷I诱导细胞凋亡的发生。结果:重楼皂苷I在0.5～5μg/mL浓度范围对HO-8910PM细胞的增殖均有明显抑制作用,并呈现明显的剂量-时间依赖性。其半数抑制浓度在24h到120h范围内基本集中在1～3.5μg/mL之间;重楼皂苷I主要影响HO-8910PM细胞的DNA合成前期(G0/G1);重楼皂苷I浓度控制在2μg/mL以内,早期即3h开始就能诱导HO-8910PM细胞的凋亡,作用时间越长,凋亡发生率越高。结论:重楼皂苷I能抑制卵巢癌细胞的增殖并诱导其凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。     

5种桦褐孔菌提取物对人肝癌细胞HePG2及SMMC7721增殖的影响

目的:探讨5种桦褐孔菌提取物对人肝癌细胞HePG2和SMMC7721细胞生长的抑制作用。方法:用桦褐孔菌水提醇沉物(HH1),石油醚萃取物(HH2)、乙酸乙酯萃取物(HH3)、正丁醇萃取物(HH4)及萃取后的水层物(HH5)的不同浓度10、20、40、60、80μg/mL在48h处理HePG2及SMMC7721细胞后,采用MTT法检测细胞生长的抑制率,计算各组IC50。结果:5种桦褐孔菌提取物均能浓度依赖性的抑制人肝癌HePG2及SMMC7721细胞生长。水提醇沉提取物与其他4种提取物作用于HePG2及SMMC7721的抑制率比较均有显著性差异(P<0.05;P<0.01),对于HePG2细胞,正丁醇萃取物的IC50大于80μg/mL,水提醇沉提取物与石油醚提取物的IC50比较无显著性差异,与其他2种提取物比较有显著性差异(P<0.01);对于SMMC7721细胞,正丁醇萃取物、乙酸乙酯萃取物及萃取后的水层物的IC50均大于80μg/mL,水提醇沉提取物与石油醚提取物的IC50比较无显著性差异。结论:水提醇沉提取物对人肝癌HePG2及SMMC7721的增值抑制作用略优于石油醚提取物,而显著优于其他3种提取物。     

荔枝核与龙眼核水提取物的体外抗肿瘤活性的比较与评估

目的:观察比较荔枝核与龙眼核水提取物的抗肿瘤活性.方法:体外培养CNE-2Z、CNE1、Huh7、A549等4种肿瘤细胞,通过MTT法检测了该两种水提取物对以上4种肿瘤细胞的细胞增殖抑制作用.结果:荔枝核与龙眼核水提取物对于4种肿瘤细胞的增殖有不同程度的抑制作用,其中荔枝核水提取物对于鼻咽癌细胞株CNE-2Z与CNE1抑制作用较为突出.龙眼核与荔枝核水提取物作用细胞48h后的抑制作用与作用24h有显著差异(P＜0.05).结论:荔枝核与龙眼核水提取物均具抗肿瘤活性.     

中药天南星醇提物抗肿瘤活性的研究

目的:研究中药天南星醇提物的抗肿瘤活性。方法:采用小鼠腋下接种肿瘤细胞法测定天南星醇提物的抗肿瘤活性;采用MTT法测定了天南星醇提物对小鼠脾细胞的增殖活性。结果:天南星醇提物对移植性肿瘤(肉瘤S180和肝癌H22)具有显著的抑制作用,而对小鼠脾细胞的增殖具有促进作用,并有较好的剂量依赖关系。结论:中药天南星有可能通过增强机体的免疫力来实现其抗肿瘤活性。     

云南松松塔提取物体外抗HIV-1活性初步研究

目的研究云南松松塔提取物(C:醇提水沉后经碱提酸沉法得到的沉淀;D:滤液1倍醇沉得到的沉淀;F:滤液2倍醇沉过滤后再5倍醇沉得到的沉淀;H:醇提水沉后水溶液五倍醇沉得到的沉淀)体外抗HIV-1活性,明确云南松松塔提取物活性组段。方法采用细胞毒性实验、合胞体形成抑制实验、HIV-1感染细胞保护实验筛选云南松松塔提取物体外抗HIV-1活性组段。结果云南松松塔提取物对C8166细胞毒性小,其CC50均大于5000μg·ml-1;云南松松塔提取物C、D、F、H抑制C8166细胞合胞体形成的EC50分别为232.59,56.46,47.44,1687.72μg·ml-1。云南松松塔四个提取物对MT4细胞毒性小,均大于1000μg·ml-1,在1000μg·ml-1时,云南松松塔提取物对HIV-1感染的MT4细胞的保护率分别为(42.39±0.36)%、(15.94±6.15)%、(29.86±3.41)%、(14.98±10.75)%。结论云南松松塔提取物C、D、F均有体外抗HIV-1活性;云南松松塔提取物H无体外抗HIV-1活性;云南松松塔四个提取物对HIV-1感染MT-4细胞保护作用弱。     

泽兰对人冠状动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的研究中药泽兰对人冠状动脉平滑肌细胞（HCASMC）增殖的影响。方法利用体外细胞实验,通过人碱性成纤维生长因子和人表皮生长因子刺激细胞增殖,随机分为空白组、不同浓度泽兰水提物（LLST）组（320μg/mL、640μg/mL、1 280μg/mL、2 560μg/mL、5120μg/mL）和不同浓度泽兰醇洗脱物（LLCX）组（40μg/mL、80μg/mL、160μg/mL、320μg/mL、640μg/mL）。采用MTT法和流式细胞术分别测定细胞OD值、G0/G1期、S期、G2/M期和apoptosis期细胞百分比,观察泽兰不同浓度药液对细胞增殖的影响。结果 MTT结果显示泽兰LLST和LLCX 10个剂量均可抑制细胞增殖（P〈0.05）。细胞周期结果显示：泽兰LLST 320μg/mL、640μg/mL、1 280μg/mL浓度组和泽兰LLCX40μg/mL、80μg/mL、160μg/mL浓度组的G0/G1期细胞百分比较空白组增高（P〈0.05）;S期细胞百分比较空白组降低（P〈0.05）。抑制增殖作用的最佳药物浓度分别为1 240μg/mL和160μg/mL。结论中药泽兰具有抑制HCASMC增殖的活性。     

四种药用真菌体外抗肿瘤活性的初步研究

目的:考察斑褐层孔菌、裂蹄木层孔菌、苦白蹄、木蹄层孔菌四种大型多孔类真菌石油醚提取物的体外抗肿瘤活性。方法:采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)对人肺癌细胞A-549进行细胞增殖实验。结果:斑褐层孔菌、苦白蹄石油醚提取物能够抑制A-549细胞的增殖,且抑制率随提取物浓度的升高而增大,呈剂量效应关系;其IC50分别为55.99μg/mL和67.55μg/mL;木蹄层孔菌石油醚提取物的对A-549抑制作用较弱;裂蹄木层孔菌石油醚提取物对A-549没有抑制作用。结论:斑褐层孔菌、苦白蹄石油醚提取物对肺癌A-549细胞具有比较明显的体外抑制增殖活性,可做进一步研究。     

针层孔菌(Phellinus sp.)P11提取物体外抗肿瘤活性研究

目的:对针层孔菌(Phellinus sp.)P11水提物及醇提物的不同溶剂萃取部位进行体外抗肿瘤活性评价。方法:针层孔菌P11子实体经醇提、水提获得提取物,乙醇提取物经氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分步萃取获得萃取物。采用MTT法测定各样品对肿瘤细胞的抑制率。结果:针层孔菌P11的乙醇提取物抗肿瘤活性明显优于水提取物,对中枢神经系统癌细胞SF-268、肺癌细胞NCI-H460及乳腺癌细胞MCF-7的抑制率分别达到86.90%、86.25%、95.15%。乙醇提取物分步萃取获得的乙酸乙酯部位活性最好,对以上3种肿瘤细胞的IC50分别达到65.3、110.9、56.7μg/mL。     

重楼提取物对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

目的:检测重楼提取物对乳腺癌MCF-7细胞增殖情况的影响。方法:使用醇回流提取方法和半仿生方法提取重楼的提取物,然后将提取物作用于乳腺癌细胞MCF-7细胞,使用MTT方法检测乳腺癌MCF-7细胞的增殖情况。结果:本研究中高浓度的重楼提取物对乳腺癌细胞MCF-7的增殖具有明显的抑制作用,浓度最大的重楼提取物对MCF-7细胞的增殖情况影响最为明显,而且,作用时间为48 h时对MCF-7增殖的抑制效果更为明显。两种提取方法相比较,半仿生方法提取的重楼提取物对乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用要优于醇回流提取方法提取的重楼提取物。结论:重楼提取物对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有一定的抑制作用,而且半仿生方法提取的重楼提取物对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制效果更为明显。     

复方芜荑水和醇提取物抗Ι型单纯疱疹病毒的体外作用的研究

目的:探讨复方芜荑水和醇提取物体外抗Ι型单纯疱疹病毒(Herpes Simplex Virus-,ΙHSV-Ι)的活性。方法:运用细胞病变法(CPE)及MTT染色法观察复方芜荑水和醇提取物体外对HSV-Ι所致细胞病变的抑制作用、感染的预防作用和对HSV-Ι的直接杀伤作用。结果:复方芜荑水和醇提取物体外有抑制HSV-Ι所致CPE的作用,并且可持续抑制。31.25 mg/ml复方芜荑水提物作用24h和72h后对细胞病变的抑制率分别为69.69%和69.79%;15.625 mg/ml醇提物作用24h和72h后对细胞病变的抑制率分别为50.26%和52.73%。其水提物效果优于醇提物,但两者对于HSV-Ι的直接杀伤作用和感染的预防作用均较弱。结论:复方芜荑体水和醇提取物外有抗HSV-Ι的活性。