完整瘤组织块原位移植法建立人成骨肉瘤转移模型

目的：建立人成骨肉瘤裸鼠转移模型。方法：采用完整瘤组织块原位移植法获得裸鼠自发性肺转移模型,并对转移模型进行影像学检查、组织学检查及ＰＣＲ同源性分析。结果：建立裸鼠体内人成骨肉瘤转移模型,其自发性肺转移率达到１００％,肝转移率达３０％。影像学检查及组织学检查均与人成骨肉瘤临床情况相似,ＰＣＲ同源性分析证实裸鼠肺部转移灶为人成骨肉瘤细胞。结论：裸鼠体内人成骨肉瘤自发性转移模型模拟了临床发病过程,对人     

SCI-OS人骨肉瘤裸小鼠皮下移植模型的建立

骨肉瘤是骨原发性恶性肿瘤中最常见的 ,约占骨恶性肿瘤的 1/ 3,该肿瘤恶性程度高 ,预后差。因此 ,建立相应的肿瘤模型对骨肉瘤的基础和应用研究均有较大价值 [1 ]。材料与方法一、实验动物　 BAL B/ c- nu/ nu裸小鼠 ,由本所实验动物室提供 (SPF级 ,医学实验动物合格证 0 2 - 30 - 1) ,鼠龄 5～8周 ,雌雄兼用 ,每代 4～ 6只 ,饲养和实验均严格按照 SPF规范要求。二、肿瘤组织　取自上海第二医科大学口腔医学院外科手术切除标本 ,该病人为 32岁女性 ,左下颌骨长有一 5 .5cm× 4cm× 4cm大小肿块 ,病理诊断为骨肉瘤。三、肿瘤的移植和传代…     

熊果酸对荷人骨肉瘤裸小鼠移植瘤生长的影响

目的:研究熊果酸(ursolic acid,UA)对荷人骨肉瘤裸小鼠移植瘤生长的抑制作用及其机制探讨.方法:采用裸小鼠背部皮下注射接种人骨肉瘤MG-63细胞的方法建立荷人骨肉瘤裸小鼠模型并给予不同剂量熊果酸[5、10、20mg/(kg·d)]和顺铂[2mg/(kg·d)]进行干预治疗,疗程5天.称取瘤重并计算抑瘤率,HE染色观察肿瘤组织形态结构改变.TUNEL染色检测细胞凋亡状况并计算细胞凋亡指数(apoptosis index,AI).免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC)观察肿瘤组织中caspase-3、Bax、bcl-2蛋白表达并进行半定量分析.结果:较模型组,熊果酸干预组荷人骨肉瘤裸小鼠移植瘤呈现细胞皱缩、片状坏死等病理性改变,凋亡细胞数量明显增多、AI显著升高,瘤体重量显著减轻、抑瘤率显著升高,caspase-3和Bax蛋白表达显著上调,bcl-2蛋白表达显著下调,Bax/bcl-2比值显著升高,熊果酸上述作用均具有一定的剂量依赖性.结论:熊果酸可能通过促进肿瘤细胞凋亡而对荷人骨肉瘤裸小鼠移植瘤生长起到一定的抑制作用,其作用机制可能与熊果酸能够调节凋亡相关蛋白(caspase-3、Bax、bcl-2)并提高Bax/bcl-2比值有关.     

人ACHN肾癌裸鼠移植瘤模型的建立及其特性研究

目的　用ACHN肾癌细胞株,建立人肾癌裸小鼠异位移植模型。方法　将ACHN人肾癌细胞株2. 0×10 /0. 2ml接种于裸小鼠背部皮下,观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率、肺转移率及移植瘤病理形态,检测肿瘤细胞的增殖与凋亡。结果　异位移植成功率为 75%,肺转移率 58. 3%,肿瘤细胞增殖指数(PI)为 54. 84±11. 39,凋亡指数(AI)为 1. 75±0. 83,AI/PI与肿瘤体积呈负相关 (r=-0. 8332,P<0. 05)。皮下瘤病理形态与肾腺癌相似。结论　人ACHN肾癌裸鼠异位移植瘤模型可作为肾癌及其转移的研究工具。     

人消化道癌裸鼠移植瘤株及体外细胞系的建立

目的利用裸鼠建立人消化道癌的移植瘤株.利用荷瘤鼠皮下移植瘤组织建立人消化道癌的细胞系.方法将手术切除的新鲜肿瘤组织剪碎后植入BALB/C裸鼠皮下成瘤.将荷瘤鼠皮下的肿瘤组织取出剪碎后移入培养瓶中,用含15～20%胎牛血清的1640培养基进行培养,建立体外细胞系.结果建成消化道移植瘤株6株,其中直肠癌2株,结肠癌1株,直肠癌肝转移灶1株,胃癌1株,肝细胞癌1株.建成二例细胞系,分别为直肠癌细胞系(HRC-00)和肝细胞癌细胞系(HHC98).结论建成的消化道癌移植瘤株和细胞系均具有人原发癌的结构特点及生物学行为,可作为人消化道癌的体内外研究对象.     

人骨肉瘤原位移植模型的建立及生物学特征

目的 用人骨肉瘤细胞系HOS-98建立人骨肉瘤裸鼠胫骨原位移植模型,以探讨宿主器官微环境对人骨肉瘤细胞侵袭及转移等生物学行为的影响。方法 将人骨肉瘤细胞系HOS-98接种于裸鼠皮下,形成移植瘤,用传代移植瘤组织作为移植材料,进行胫骨原位移植及皮下移植。分别于移植后4周和8周处死小鼠,进行病理形态学检查,并对两种方法在成瘤率、生长方式及侵袭、转移等生物学行为比较。结果 两种移植方式在成瘤率及形态学上无明显不同,胫骨原位移植的潜伏期较短,并且生长快于皮下移植方式。皮下移植瘤呈局限性膨胀生长,有不完整的纤维包膜,瘤内类骨基质较少见,未见肺转移,观察8周时无明显消瘦;而胫骨原位移植瘤侵袭周围组织,可见发生肺转移,8周明显消瘦。原位移植的裸鼠血清ALP水平高于皮下移植者。原位移植的X线检查有明显的类似于人的骨性反应。结论 用人骨肿瘤细胞系HOS-98皮下接种的移植瘤作为移植材料是建立肿瘤异位移植的可行途径,裸鼠胫骨微环境较皮下组织更适合于人骨肉瘤的侵袭及转移表达,裸鼠胫骨原位移植模型的恶性生物学行为更接近临床骨肉瘤患者的体内侵袭及转移实际,该原位移植模型为今后的实验研究提供了更加接近患者实际的实验模型。     

克隆化人肝癌裸鼠移植瘤株的建立及其转移性状观察

应用单个细胞克隆化技术，从已建系的人肝癌细胞（ＳＭＭＣ－７７２１）中选育出３个亚系７７２１－ＣＡ，７７２１－ＣＢ，７７２１－ＣＳ（ＣＡ、ＣＢ、ＣＳ），并进行扩大培养，将上述各亚系肝癌细胞接种到裸鼠体内，成瘤率与自发转移率以ＣＳ组最高，ＣＢ组最低。主要的转移器官是肺。原发灶和转移灶肿瘤形态结构一致。ＣＳ细胞形态及其接种的裸鼠移植瘤形态结构和ＳＭＭＣ－７７２１母系细胞基本相似。用ＡＢＣ免疫酶标法检测ＨＢｓＡｇ、ｋｅｒａｔｉｎ、ＡＦＰ、Ｈ－ｒａｓ、Ｃ－ｅｒｂ－２、Ｐ５３癌基因蛋白等肿瘤标记物，ＣＳ组裸鼠移植瘤对Ｈ－ｒａｓ、Ｃ－ｅｒｂ－２癌基因蛋白呈阳性反应，对ＡＦＰ、Ｐ５３呈弱阳性反应，而ＣＢ组裸鼠移植瘤仅对Ｋｅｒａｔｉｎ、Ｃ－ｅｒｂ－２呈弱阳性反应，对其它肿瘤标记物均呈阴性反应。     

人骨肉瘤鸡胚移植瘤模型的建立及其生物学特性研究

Objective  

We established a transplantation tumor model of human osteosarcoma in chick embryo, studied its morphological and biological characteristics, and observed its dynamic process of angiogenesis induction so that a simple and practical model can be provided for studying osteosarcoma.     

人结肠高分化腺癌裸小鼠移植瘤模型的建立及其生物学特性

将人结肠高分化腺癌手术标本，接种于裸小鼠体内建成移植瘤ＴＨＣＮ－８９０１，已传１４代，历时２年多，生长稳定，可移植性成功率高。组织学及超微结构形态观察，均保持了原病人肿瘤的结构，并且有分泌功能，染色体分析证实为人染色体，众数在６３～９４之间，该瘤株具有稳定产生ＣＥＡ的生物学特性，用＾１１１Ｉｎ－ＣＥＡＭｃＡｂ能使裸小鼠移植瘤清晰显像。此瘤株的建立为结肠癌癌变基础及实验性基因治疗研究，提供了较为理想     

人食管鳞状细胞癌裸小鼠移植瘤模型建立及其应用研究

将人食管癌手术标本直接移植于裸小鼠，建立了人食管鳞状细胞癌裸小鼠移植瘤（Eca910709），其光镜和电镜形态与原发瘤相似。移植瘤中检测到人Alu序列，证明其来源于人体。应用Eca910709，用平阳霉素（BLMA5）对其进行治疗，按15mg／kg腹腔注射给药，经重复实验，抑瘤率为58％-70％（P＜0．01），说明BLMA5对Eca910709有明显的抑瘤作用。经三个疗程治疗，Eca910709即对BLMA5产生耐药，表现在抑瘤从70％（P＜0．01）递减为34％（P＜0．05）和6％（P＞0.05）。给药剂量增加至30mg/kg，BLMA5对已耐药的Eca910709再次显示一定的抑瘤作用（抑瘤率为44％，P＜0．01）。     

内皮抑素治疗人骨肉瘤裸鼠模型的实验研究

目的:观察内皮抑素(ES)对裸鼠骨肉瘤皮下移植模型血管生成和肿瘤生长的抑制作用及其机制。方法:Transwell双室模型观察ES对骨肉瘤细胞9901诱导内皮细胞迁徙的影响;随机将30只骨肉瘤荷瘤裸鼠分为对照组、ES低剂量组[0.75mg(kg·d)-1]和高剂量组[1.5mg(kg·d)-1],瘤体及瘤体周围注射ES,1次/d,连续给药14d,观察肿瘤生长情况,计算抑瘤率。肿瘤组织进行病理学观察及免疫组化染色,计数坏死组织百分比,微血管密度以及细胞增殖和凋亡指数;动物处死前3个小时尾静脉注射EF5,激光共聚焦显微镜观察组织缺氧及血管标记。结果:ES低剂量组(350ng·ml-1)和高剂量组(700ng·ml-1)对内皮细胞迁徙有明显抑制作用,且高剂量组明显高于低剂量组(P<0.01);高剂量组和低剂量组平均瘤重明显小于对照组,抑瘤率分别为35.83%和22.92%(P<0.01);正常对照组、低剂量组、高剂量组的坏死百分比分别为2.40%、4.68%和9.52%(P<0.01),细胞增殖指数(PI)分别为66.44%、46.11%和25.11%(P<0.01),细胞凋亡指数(AI)分别为2.69%、7.58%和11.53%(P<0.01)。激光共聚焦观察ES治疗组绿色荧光量减少,血管稀疏;肿瘤细胞缺氧增加,呈弥漫的强红色。结论:ES可显著地抑制骨肉瘤细胞诱导的内皮细胞迁徙,以及人骨肉瘤的生长和发展,且呈剂量依赖效应,其可能机制为抑制血管生成,增加肿瘤细胞缺氧和凋亡。     

裸小鼠人宫颈癌组织模型的建立及其生物学特性初探

目的 建立人宫颈癌HeLa细胞在裸小鼠的体表肿瘤模型,并研究其成瘤性及生物学特性。方法 以不同浓度人宫颈癌HeLa细胞悬液在裸小鼠皮下接种建立人宫颈癌裸小鼠模型,观察荷瘤鼠的成瘤率及肿瘤的一般特性,病理检查其组织学特性,流式细胞术检测其生长、凋亡情况,免疫组织化学法检测肿瘤组织中Survivin,Caspase-3和JAK-STAT3蛋白的表达情况。结果 成瘤率为100%,肿瘤生长以局部浸润为主,未见转移瘤,所有新生肿瘤组织符合人宫颈癌细胞组织特点,绝大多数肿瘤细胞处在增殖分化期,标本宫颈癌组织中有Survivin,Caspase-3和STAT3蛋白的阳性表达。结论 成功建立了裸小鼠人宫颈癌组织模型,该模型较好地模拟了人宫颈癌的生物学特性,为进一步研究针对诱导细胞凋亡治疗的新方法提供了理想的动物模型。初步观察了不同浓度HeLa细胞悬液接种生长的肿瘤组织在生长方面的区别。     

Establishment and Characterization of a New Spontaneous Metastasis Model of Human Gastric Carcinoma in Nude Mice

A poorly differentiated medullary carcinoma of human stomach, designated HY–1, was successfully transplanted to nude mice by either the subcutaneous or intramuscular route for five generations. The transplanted tumor showed spontaneous lung metastases in nearly 100% of KSN and Balb/c female nude mice. There were over 20 visible lung metastatic nodules in KSN and Balb/c nude mice bearing tumors for over SO days. Immunostaining of type IV collagen and electron microscopy revealed that tumor cells were often in direct contact with basement membrane (BM) of tumor blood vessels in the primary tumor tissue. At the site of contact between tumor cells and vascular BM, focal disappearance of the BM, disruption of endothelial cells and entry of tumor cell clusters into vascular lumen were observed. Immunostaining of 72 kDa gelatinase/type IV collagenase demonstrated that tumor cells expressed this enzyme in their cytoplasm. These results suggest that spontaneous metastasis of this tumor may be partly due to a marked tendency to vascular invasion involving the following sequential events: tumor cell contact with vascular BM, BM degradation possibly by 72 kDa gelatinases and endothelial disruption. This model could be a useful tool for understanding the mechanism of hematogenous metastasis of human gastric cancer.     

人卵巢癌裸鼠移植模型的建立和形态学观察

作者利用人体卵巢癌的转移瘤建立了裸鼠移植瘤模型,现已传至第8代。移植成功率为100％。发现传代后仍具有原人卵巢癌转移的生物学行为。经光学显微镜检查传至8代的瘤组织结构与原发瘤相同。电镜检查证明具有卵巢癌特有的特征,癌细胞间组成徽腔——原始腺腔,表面可见微绒毛,核中常染色质占绝对优势,胞浆中有丰富的多聚核糖体。该模型为研究人卵巢癌生物学特性、实验治疗等提供了有用工具。     

中国人肺腺癌细胞系CPA-Yang2的建立及其生物学特性

背景与目的 肺癌的复发、转移和耐药足肺癌治疗的难题.本研究旨在建立国人肺腺癌转移细胞株,为肺癌的发生、发展和耐药的研究提供新的实验模型.方法 本细胞取自化疗10次、放疗1次临床认定均无效的56岁女性肺腺癌患者的腹水且放射免疫法肿瘤标志物检测CA125、CYFRA21-1、CEA和NSE均超标,细胞原代培养即获成功.免疫缺陷小鼠致瘤率实验,绘制细胞生长曲线,细胞染色体核型分析,荧光定量PCR检测部分基因表达.结果 传自第8代细胞经裸小鼠皮下种植致瘤率仪30%,传自第11代且以后各代均表现稳定的敛瘤率(100%),体外培养细胞在显微镜下显示为贴壁生长,该细胞的染色体核型分析为亚三倍体;经裸鼠左心室或尾静脉分别接种1×106个细胞(0.1 mL)、1.5×106个细胞(0.15 mL),2周后陆续出现小鼠体重下降,第3周经核素骨显像检测和病理确定为骨转移达100%,同时伴有各脏器转移:脑(30%)、肺(50%)、肝(6096)和肾上腺(8096).荧光定量PcR榆测ESM1、VEGF-C、IL-6、IL-8、AR等基因过表达.结论 新建的CPA-Yang2足取自化疗10次、放疗1次均NR的肺腺癌病人腹水培养成功并经裸鼠血道种植后具有除多发骨转移外同时伴有脑、肝、肾上腺和肺转移特性的凹人肺腺癌细胞株.细胞代谢旺盛,性状稳定.该细胞将成为国人肺癌研究的又一个良好细胞实验模型.     

裸小鼠人大肠癌淋巴道转移模型的建立

 目的建立一种人大肠癌简便、可行、稳定的淋巴道转移研究动物模型。方法裸鼠爪垫皮下注射人结肠癌HCT-116细胞,接种后在1~6周及8周不同时间段取材;收集腹股沟、腘窝,髂血管旁,肾门淋巴结以及肝肺脏器;进行HE染色及CEA免疫组化检测。观察种植瘤的成瘤率、生长情况以及淋巴结转移规律。结果爪垫种植1周后成瘤率100%。3周后淋巴结开始转移,到6周时第一级腹股沟腘窝淋巴结完全转移,转移率100%,其中腹股沟淋巴结转移阳性率76.9%(10/13);第二级髂血管旁淋巴结部分转移,转移率40%(2/5);未见第三级肾门淋巴结转移。到8周时见髂血管旁淋巴结转移率60%(3/5),肾门淋巴结开始转移(1/5),但均未见肝肺远处转移。HE染色及CEA免疫组化染色发现淋巴结有弥漫性癌细胞浸润。结论裸鼠爪垫皮下注射可成功建立人大肠癌淋巴道转移模型。此模型快速简便、转移集中、转移率高,可为研究结直肠癌淋巴道转移机制,药物干预等抗转移治疗提供理想的动物模型。     

多药耐药细胞系K562/A02裸小鼠皮下移植瘤模型的建立与鉴定

目的:建立一种耐药特性稳定的裸小鼠移植瘤动物模型,为进行体内肿瘤耐药机制研究和逆转药物的筛选提供实验模型和实验基础。方法:将具有典型MDR表型的K562/A02耐药细胞接种于裸小鼠右侧背侧皮下,而亲本K562细胞接种裸小鼠左侧背侧皮下,接种细胞数为1×10⁷细胞/只,观察肿瘤成瘤情况及生长特性,并比较裸小鼠移植瘤细胞和体外培养细胞对化疗药物的敏感性,同时利用RT-PCR和免疫组织化学染色对裸小鼠K562/A02移植瘤基因表型进行鉴定。结果:1)K562/A02裸小鼠移植瘤的成瘤率为100%,大约于第6～9天成瘤(体积>100mm³),敏感肿瘤生长速度与耐药肿瘤无明显差别;2)裸小鼠K562/A02移植瘤肿瘤细胞和体外培养原代细胞对阿霉素的IC₅₀分别为185.24μg/ml和235.25μg/ml,而K562/A02移植瘤肿瘤的IC₅₀分别为3.07μg/ml和3.26μg/ml;阿霉素治疗组能够明显减慢K562敏感移植瘤的生长,而对K562/A02耐药移植瘤的生长几乎无作用;3)K562/A02裸小鼠移植瘤肿瘤细胞具有mdr1/Pgp表达,而K562裸小鼠移植瘤肿瘤细胞则无mdr1/Pgp表达。结论:以K562/A02细胞建立的裸小鼠耐药移植瘤模型,仍保持近似体外的耐药活性和基因表型,为耐药机制和逆转研究提供了良好的体内模型。     

人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立及生物学性状的鉴定

目的　建立人卵巢上皮性癌裸鼠皮下移植瘤模型 ,为人卵巢癌的诊断及治疗诸方面提供理想的在体研究工具。方法体外培养人卵巢上皮癌细胞株SKOV 3 ,采用皮下注射方式接种至裸小鼠 ,待肿瘤直径达 0 .8cm～ 1.0cm时 ,将其切下剪成直径为1mm～ 2mm小块 ,再接种至另一裸鼠皮下进行传代。病理组织学检查或透射电镜观察肿瘤 ,并观察染色体特征 ,检测裸鼠血清和肿瘤组织中肿瘤标志物CA12 5、CEA、AFP的浓度。结果　成功地建立了人卵巢上皮性癌细胞株SKOV 3裸小鼠皮下移植瘤模型 ,并传至第二代 ,原代接种成功率为 69.2 % (2 7/ 3 9) ,鼠间传代移植成功率为 10 0 .0 % ,具备人肿瘤生物学特点 ,但未观察到转移行为。裸鼠血清CA 12 5浓度低 ,但在肿瘤冻融产物中较高。结论　建立的人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型具有人卵巢癌特征 ,可用于研究卵巢癌的生物学特性 ,为卵巢癌临床诊断及治疗研究提供有用工具。     

人卵巢癌裸鼠移植瘤模型的建立及其生物学特性的实验应用研究

研究用1例人卵巢癌淋巴转移的癌组织直接移植于裸鼠皮下,建成一株人卵巢癌移植瘤动物模型,已传至第26代.移植成功率达100%,平均裸鼠带瘤存活中位数为102天.肿瘤倍增时间为7.17(SD=±1.02天).组织学和超微结构形态证实保持了原人肿瘤的特征,有淋巴结转移行为.人类肿瘤染色体特征.保留了分泌癌胚抗原的能力.具有P53癌基因蛋白的异常表达.移植瘤细胞可在体外培养并传至5代.流式细胞仪及显微分光光度计检测移植瘤,提示肿瘤为多倍体,各代移植瘤的DNA指数与第一代肿瘤基本一致(DI1.05~1.40).经初步应用研究,用传代移植瘤组织提取抗原免疫BALB/C小鼠,将免疫小鼠的脾细胞与小鼠缺欠型骨髓瘤系进行融合,制备了一株抗卵巢癌单克隆抗体,经免疫组化染色(ABC法)可显示有与人卵巢癌阳性反应.说明裸鼠人体卵巢癌模型的建立,为深入进行该类肿瘤诊断及治疗研究提供了有效途径.     

荷人前列腺癌裸鼠移植瘤模型的建立及其应用研究

目的 应用人前列腺癌细胞株LNCaP接种裸鼠,鼠间移植传代,建立人前列腺癌裸鼠移植瘤模型.方法 观察移植瘤大体形态和组织病理学检查,并应用免疫组织化学方法观察肿瘤组织细胞中前列腺特异膜抗原（PSMA）的表达以及125I标记抗PSMA单抗的荷瘤裸鼠体内放射免疫显像.结果 移植瘤的形态和功能特性与原发肿瘤基本相似,移植瘤的移植成功率为100%;放免显像显示标记抗体能浓聚于肿瘤部位,经尾静脉注射标记抗体后96 h,肿瘤显像清晰,肿瘤组织/非肿瘤组织放射性比值（T/NT）均大于2.8.结论 本动物模型的建立为今后前列腺癌放射免疫治疗的实验研究提供1个理想的模型.