ＣⅡＴＡ研究进展

ＣⅡＴＡ（ＭＨＣclassⅡtransactivator)是近年新发现的转录活化因子,对ＭＨＣⅡ类分子的表达起严格且专一的调控作用。ＣⅡＴＡ通过其细胞和组织专一性的启动子表达不同的转录本,并以此调节ＭＨＣⅡ类分子在不同组织及时段的特异性表达。ＣⅡＴＡ蛋白与基础转录复合物及多种ＭＨＣⅡ类基因转录因子之间存在相互作用,并与之形成复合物以实现转录活化功能,对ＣⅡＴＡ基因结构和功能的研究将极大地促进其在免疫调节和疾病治疗研究中的应用。     

抗原是提呈中的MHCⅡ相关分子和亚细胞结构

ＭＨＣⅡ限制的抗原提呈与ＣＤ４＾＋Ｔ细胞的激活密切相关，在免疫系统中占重要的地位。近年来，有关ＭＨＣⅡ的研究取得了很大的进展，本文就ＭＨＣⅡ限制的抗原提呈过程作一综述，并重点讨论了与此相关的两个重要分子Ｉｉ和ＤＭ以及亚细胞结构ＭＩＩＣ的结构与功能。     

088 MHCⅡ类分子反式激活因子（CⅡTA）的研究进展

ＭＨＣⅡ分子反式激活蛋白（ＣＴＡ，ｃｌａｓｓⅡ 的发现是近年来国际免疫学研究的一项重大突破，ＣⅡＴＡ及其突变体在免疫调节和免疫治疗中具有诱人前景。本文对ＣⅡＴＡ的结构，功能及其反式激活ＭＨＣⅡ类分子的机制作一综述，并对ＣⅡＴＡ及其突一的应用前景作一简要介绍。     

恒定链胞浆尾部在MHCⅡ类分子递呈抗原中的作用研究进展

ＭＨＣⅡ类分子的主要作用是递呈外源性抗原,恒定链是其递呈抗原过程中的重要辅助分子。恒定链的作用包括其胞外部分对ＭＨＣⅡ类分子抗原结合位点的阻断作用,用其胞浆尾部所提供的ＭＨＣⅡ－Ｉｉ复合体的分选／内化信号以及Ｉｉ自身的初步降解释放ＭＨＣⅡ类分子的信号。本文综述了Ｉｉ胞浆尾部ＭＨＣ－Ｉｉ复合体分选／内化信号的定位,结构和功能,以及Ｉｉ自身的初步降解信号的定位和功能。     

CHTA调控MHC-Ⅱ类分子表达分子机制的研究进展

MHC—Ⅱ类分子抗原处理、提呈通路在调控CD4＋T细胞激活及特异性应答的过程中发挥重要的作用，T细胞的功能在很大程度上取决于MHC—Ⅱ类分子的表达水平。因此，精细调节MHC—Ⅱ类分子的表达对于免疫应答的控制是至关重要的。MHC—Ⅱ类分子的组成性表达仅限于特化的抗原提呈细胞，如树突状细胞（dendritic cell，DC）及B淋巴细胞。但是，在不表达MHC-Ⅱ类分子的细胞中，多种刺激特别是干扰素1（IFN-γ）可诱导该分子的表达。     

CD1分子的研究进展

ＣＤ１分子是不同于ＭＨＣ１类和ＭＨＣⅡ类的第三类抗原提呈分子，它能将脂类抗原提呈给某些特殊的Ｔ细胞亚群，对某些微生物的感染保护性免疫作用，并能参与某些特殊Ｔ细胞亚群的分化和发育，在免疫耐受的形成，免疫调节，粘膜免疫以及自身免疫和超敏反应过程中具有重要作用。     

冠脉内皮细胞常规表达MHCⅡ类抗原的种属差异

移植物增加表达ＭＨＣ抗原，尤其是Ⅱ类抗原分子，是移植排斥反应的起点。血管内皮细胞不恰当地表达ＭＨＣⅡ类抗原被认为是许多疾病过程如炎症，血栓形成，血管炎的焦点。研究发现冠脉内皮细胞常规表达ＭＨＣⅡ类抗原存在种属间的差异，而这种差异或许是导致不同动物模型间出现实验结果差异的关键因素。     

树突状细胞摄取加工外源性抗原的路径及机理研究进展

非成熟的树突状细胞可通过巨胞饮，受体介导的内吞及吞噬３种方式摄取外源性抗原。在富含ＭＨＣⅡ的细胞内隔室（ＭＩＩＣ）中抗原被降解，加工并与ＭＨＣＩＩ结合，所形成的抗原肽－ＭＨＣⅡ复合物最终表达在细胞膜表面经巨胞饮及吞噬两种方式摄入的抗原，还可通过胞质的ＴＡＰ依赖途径或内吞体的ＴＡＰ非依赖途径以及ＭＨＣＩ的方式提呈，ＣＤ１主要能与提呈微生物的脂类抗原，细胞内的ＣＤ１ｂ也聚集在ＭＩＩＣ内，在甘露糖受体摄     

与MHC I类相关的抗原加工和抗原提呈的分子基础

细胞内ＭＨＣ Ｉ类抗原提呈途径十分复杂，本文主要综述参与此过程并位于ＭＨＣ基因群中的几个相关分子，胞浆中蛋白酶体的亚单位ＬＭＰ２、ＬＭＰ７水解蛋白抗原产生可优先与ＭＨＣＩ类分子结合的多肽。ＴＡＰ１和ＴＡＰ２负责将多肽转位至内质网中，热休克蛋白家族的一系列分子亦参与多肽在胞浆及内质网中的传递。ＩＦＮ－γ对ＭＨＣ Ｉ类分子及上述分子均有上调作用。另外，Ｃａｌｎｅｘｉｎ和Ｂｉｐ等分子亦参与内质网内ＭＨＣ     

恒定链胞浆尾部在MHCⅡ类分子递呈抗原中的作用研究进展

ＭＨＣⅡ类分子的主要作用是递呈外源性抗原,恒定链（Ｉｉ）是其递呈抗原过程中的重要辅助分子。恒定链的作用包括其胞外部分对ＭＨＣⅡ类分子抗原结合位点的阻断作用,其胞浆尾部所提供的ＭＨＣⅡＩｉ复合体的分选／内化信号以及Ｉｉ自身的初步降解释放ＭＨＣⅡ类分子的信号。本文综述了Ｉｉ胞浆尾部ＭＨＣＩｉ复合体分选／内化信号的定位、结构和功能,以及Ｉｉ自身的初步降解信号的定位和功能     

小鼠pIV启动子调控CⅡTA突变体重组腺病毒表达选择性抑制MHC Ⅱ类分子的表达

目的：观察受CⅡTA-pIV启动子驱动的MHCⅡ类分子反式激活因子突变体（CⅡTAm）重组腺病毒对MHCⅡ类分子表达的选择性抑制作用，并探讨其相关机制。方法：构建了N-端酸性氨基酸区缺失了118aa的CⅡTA突变体及其CⅡTA-pIV启动子驱动的重组腺病毒Ad-pⅣ-CⅡTAm，将Ad-pIV-CⅡTAm或对照腺病毒Ad-GFP感染小鼠内皮细胞株SVEC细胞和转染巨噬细胞株J774细胞，并以IFN-γ刺激。用RT-PCR检测野生型和突变型CⅡTA mRNA的表达，用流式细胞术检测MHCⅡ类分子在细胞表面的表达。结果：成功构建CⅡTA-pIV启动子调控下的CⅡTA突变体基因重组腺病毒表达载体Ad-pIV-CⅡTAm；该腺病毒介导的CⅡTA突变体mRNA在SVEC和J774细胞内的表达受到IFN-7的上调，同时抑制这些细胞上诱导型和组成型MHCⅡ类分子的表达。结论：Ad-pIV-CⅡTAm重组腺病毒是一种WN-γ调控型表达载体，可有效地抑制受感染细胞上MHCⅡ类分子的表达。     

MHCⅠ类分子呈递抗原的途径与肽疫苗研制的进展

主要组织相容性复合体（ＭＨＣ）Ⅰ类分子主要呈递内源合成抗原，供ＣＤ８＋细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）识别，抗原呈递转运子（ＴＡＰ）与肽相互作用是特异性抗原肽转运和呈递的关键。外源性抗原通过树突状细胞和巨噬细胞等专职性抗原呈递细胞（ＡＰＣ）加工处理后也可被ＭＨＣⅠ类分子呈递。此替代途径不直接依赖于蛋白酶体或ＴＡＰ的转运作用，是人体内部免疫防御监视机制的理想补充。ＡＰＣ－ＭＨＣⅠ类分子ＣＴＬ应答的深入认识是肽疫苗研制的基础。     

树突状细胞的抗肿瘤实验研究

树突状细胞 (ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓ ,ＤＣ)ＤＣ是一类具有独特形态的新型细胞群体 ,是目前发现的功能最强的一类专职性抗原提呈细胞 ,也是体内唯一能激活初始型Ｔ细胞的抗原提呈细胞。ＤＣ可以通过ＭＨＣⅡ类分子和ＭＨＣⅠ类分子途径提呈抗原 ,并提供充分的共刺激信号 ,因而在肿瘤免疫中起着举足轻重的作用。90年代以来 ,随着体外大量分离和扩增培养ＤＣ方法的建立和不断改进 ,人们已从分析实体瘤内ＤＣ浸润密度与患者预后的相关性转向应用ＤＣ进行肿瘤免疫治疗的研究 ,尤其是在如何提高肿瘤细胞的免疫原性、促使ＤＣ更有效地提呈…     

Ⅱ类反式激活蛋白与免疫应答

MHCⅡ类分子在向CD4 T细胞提呈经过加工的抗原和诱发免疫反应中起重要作用。MHCⅡ类分子异常表达会引起裸淋巴细胞综合征等严重的免疫缺陷性疾病。目前已知CⅡTA是决定MHCⅡ类分子表达的主要调节因子。此外CⅡTA还影响着自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤排斥、移植耐受等。因此,Ⅱ类反式激活蛋白作为影响诸多基因的单体蛋白,在干预MHCⅡ类分子提呈抗原途径上是理想的药物治疗靶点。     

CⅡTA锤头状核酶的克隆及其体外活性

通过CⅡTA核酶抑制HeLa细胞表面MHC Ⅱ类分子的表达.设计并合成针对人类CⅡTA的核酶Rz464,通过体外转录和切割实验鉴定其活性.将Rz464亚克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP(pRz464),并稳定转染HeLa细胞株,流式细胞术检测MHC Ⅱ类抗原表达,RT-PCR检测CⅡTA mRNA水平.结果表明,Rz464与CⅡTA靶序列体外切割产物电泳见预期切割条带.pRz464+HeLa细胞与对照组比较,HLA-DR、DP、DQ抗原诱导型表达分别降低了79.21%、90.31%及48.30%;同时CⅡTA的诱导型mRNA含量明显减少.Rz464通过切割CⅡTA mRNA,进而阻止了后者调控的MHC Ⅱ类分子的表达.     

抗原加工和提呈的研究进展

抗原加工和提呈是指抗原提呈细胞摄取抗原并加工成肽分子、以ＭＨＣ－肽分子复合体表达于细胞表面，由Ｔ细胞上ＴＣＲ识别，与ＡＰＣ产生共刺激因子，表达共刺激分子与Ｔ细胞上相应受体结构，激活特异的Ｔ细胞反应这一复杂的多步骤过程。     

腺病毒介导CⅡTA突变体基因转移抑制MHCⅡ类分子表达的体外研究

目的:构建携带小鼠MHCⅡ类分子反式激活因子(MHC class Ⅱ molecule transactivator,CⅡTA)突变体基因的腺病毒,并观察腺病毒介导该基因的表达情况以及表达产物的体外功能.方法:采用常规分子生物学方法从IFN-γ诱导后的BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞中获得Ⅳ型CIITAcDNA;利用重叠延伸PCR法构建CIITA突变体基因,并克隆入表达载体pIRES;采用pAdEasy-1系统获得具有感染能力的、携带CIITA突变体基因的缺陷型重组腺病毒(Ad-CIITAm)和空载对照病毒(Ad-GFP),并经大量扩增、纯化及滴度测定;将Ad-CⅡTAm和Ad-GFP分别感染HeLa细胞和Raji细胞,流式细胞术观察对诱导型和组成型HLA-DR分子表达的影响.结果:成功克隆了小鼠CⅡTA突变体基因,并构建了携带小鼠CⅡTA突变体基因的重组腺病毒Ad-CⅡTAm;经流式细胞术证实感染Ad-CⅡTAm的Hela和Raji细胞较感染Ad-GFP的细胞,其表面HLA-DR分子的表达均受到明显的抑制.结论:本实验证实了重组腺病毒介导表达的小鼠CⅡTA突变体在体外能够有效地抑制MHCⅡ类分子的表达.     

内皮细胞免疫功能研究进展

内皮细胞是衬贴地心，血管与淋巴管表面的扁平上皮。受外界刺激活化时，形态呈高立方状，合成表达ＭＨＣＩ类，ＭＨＣⅡ类分子，并以ＭＨＣ限制性方式对Ｔ细胞提呈抗原。表面表达多种粘附分子促进Ｔ细胞定向再循环，并能合成分泌多种细胞因子，调节Ｔ细胞ＩＬ－２的产生，对Ｔ细胞活化提供共刺激信号，具有重要的免疫调节功能。     

MHCⅡ类分子的伴随蛋白—Ii链

Ｉｉ链作为ＭＨＣⅡ类分子的伴随蛋白，在外源性抗原肽递呈和Ｔ、Ｂ细胞的发育与 起了重要作用。Ｉｉ链的缺陷可能导致自身免疫病的发生。     

CIITA调控MHC-Ⅱ类分子表达分子机制的研究进展

MHC-Ⅱ类分子抗原处理、提呈通路在调控CD4 T细胞激活及特异性应答的过程中发挥重要的作用,T细胞的功能在很大程度上取决于MHC-Ⅱ类分子的表达水平.