Par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸对PC12细胞中ERK1/2的下调作用及其抗凋亡作用

目的研究par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸对PC12细胞中ERK1/2活性的下调作用及其抗凋亡作用.方法利用脂质体将par-4反义寡核苷酸转染入PC12细胞.谷氨酸诱导PC12细胞凋亡.利用吖啶橙/溴化乙锭荧光染色观察PC12细胞形态,流式细胞分析评价凋亡百分率.Western印迹测定par-4的蛋白质表达量和磷酸化的ERK1/2的蛋白表达量. 结果 (1)谷氨酸诱导PC12细胞中par-4蛋白表达上调,Par-4反义寡核苷酸呈剂量依赖性地拮抗其上调(组间比较,P<0.01).(2)谷氨酸诱导PC12细胞中磷酸化(Thr202/Tyr204)的ERK1/2蛋白水平下调,par-4反义寡核苷酸拮抗其上调(组间比较,P<0.01).(3)Par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,如予ERK1/2阻断PD98059预处理,则其拮抗作用被下调(组间比较,P<0.05).结论 Par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与ERK1/2的活化有关.     

NF-κB沉默联合苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2凋亡和相关分子的表达

目的 探讨NF-kB沉默联合苦参碱(matrine,MT)诱导人肝癌细胞HepG2凋亡及相关分子的表达.方法 构建NF-kB/P65 siRNA真核表达载体转染人肝癌细胞HepG2,RT-PCR检测NF-kB/P65基因沉默效果,并筛选出NF-kB/P65基因沉默稳定转染细胞株.将实验分为对照组、苦参碱组(1.5 g/L)、稳转细胞组和联合组(稳转细胞十苦参碱),流式细胞仪检测细胞凋亡率;分别用RT-PCR法和蛋白质印迹法检测细胞NF-kB/P65、CD95(Fas)、Smac、Survivin的mRNA和蛋白水平表达.结果 苦参碱组NF-kB/P65、CD95、Smac和Survivin的表达上调,与对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);稳转细胞组CD95和Smac的表达上调,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),NF-kB/P65和Survivin的表达下调,与对照组、苦参碱组比较差异有统计学意义(P＜0.05);联合组CD95和Smac的表达上调,与对照组、苦参碱组、稳转细胞组比较差异有统计学意义(P＜0.05),NF-kB/P65和Survivin的表达下调,与苦参碱组比较差异有统计学意义(P＜0.05).各组细胞凋亡率分别为3.21％、6.25％、11.82％、21.06％,组间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 NF-kB沉默联合苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2凋亡可能与CD95和Smac的表达上调及NF-kB/P65和Survivin的表达下调有关.     

Survivin反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞株中survivin和SMAC/DIABLO基因表达的影响

目的 观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人卵巢癌细胞株SKOV3中survivin、Smac/DIABLO表达的影响,探讨survivin、Smac/DIABLO在ASODN诱导卵巢癌细胞凋亡和细胞周期改变中的作用和分子机制.方法 用脂质体(LipofectamineTM 2000)介导survivin ASODN转染人卵巢癌细胞株SKOV3,用MTT比色法检测细胞生长活性,流式细胞学技术检测细胞凋亡指数、细胞周期分布及survivin、Smac蛋白表达改变,逆转录酶链反应检测survivin、Smac/DIABLO基因表达改变.结果 同对照组比较,不同浓度ASODN作用后细胞生长明显减慢,转染后48 h IC50在600 nmol/1左右.用600 nmol/LASODN转染48h后,细胞凋亡指数(AI)明显增加,(t=6.3671,P＜0.05);更多的细胞停留在G0/G1期(t=10.3832,P＜0.01).Survivin mRNA和蛋白表达明显下调(t=3.5031,P＜0.05,t=7.8146,P＜0.01),SmacmRNA和蛋白表达上调(t=2.8011,P＜0.05,t=11.3917,P＜0.01).结论 ASODN诱导细胞凋亡,使更多的细胞停留在G0/G1期,减少进入有丝分裂细胞数的作用,是通过下调survivin基因,上调Smac基因表达来共同完成的,survivin、Smac/DIABLO基因在调节SKOV3细胞周期、凋亡的功能上密切相关,二者的相互作用是卵巢癌发生、发展的重要分子机制之一.     

Effect of Depression on Cardiac Myocyte Apoptosis and the Expression of Bcl-2, Bax and Caspase-3 in Rats with Myocardial Infarction

目的:探讨抑郁对心肌梗死大鼠缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响.方法:大鼠随机分为四组,各组8只,A组为假手术组,B组为抑郁大鼠假手术组,C组为心肌梗死组,D组为抑郁大鼠心肌梗死组.用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,用免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应方法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3的基因表达.结果:各组大鼠心肌细胞凋亡指数以及心肌细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达和心肌细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达的差异有统计学意义(P＜0.01),C、D组大鼠心肌细胞凋亡指数以及心肌细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达和心肌细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达均高于A组和B组,差异有统计学意义(P＜0.01),D组大鼠心肌细胞凋亡指数以及心肌细胞Bax、Caspase-3蛋白表达和心肌细胞Bax、Caspase-3mRNA表达高于C组,而心肌细胞Bcl-2蛋白及mRNA表达低于C组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:抑郁可以加重心肌梗死大鼠缺血心肌细胞凋亡,其机制可能与上调促凋亡基因Bax及Caspase3表达、下调抗凋亡基因Bcl-2的表达有关.     

CacyBP/SIP基因沉默对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响

目的 观察干扰小RNA(siRNA)介导的Cacy BP/SIP基因沉默对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响。方法 化学合成Cacy BP/SIP基因序列特异性siRNA(Cacy BP/SIP siRNA),采用脂质体法转染siRNA至MDA-MB-231细胞(Cacy BP/SIP siRNA组),MTT比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率。Realtime PCR和Western blotting检测MDA-MB-231细胞内Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白的表达。另设阴性对照组和空白对照组。结果 与阴性对照组和空白对照组比较,Cacy BP/SIP siRNA组MDA-MB-231细胞增殖能力显著下降(P<0.05),细胞凋亡率显著增高(P<0.05)。Caspase-3和Bax mRNA及蛋白表达上调(P<0.05),Bcl-2 mRNA及蛋白表达下调(P<0.05)。结论 靶向沉默乳腺癌MDA-MB-231细胞中Cacy BP/SIP基因表达后,可以抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡,其作用可能通过下调Bcl-2表达,上调Caspase-3和Bax表达发挥诱导细胞凋亡的作用。     

大鼠骨髓间充质干细胞谷氨酸诱导后Smac基因的表达及其意义

目的探讨骨髓干细胞（BMSCs）经谷氨酸培养后Smac基因表达情况及其是否参与了谷氨酸诱导的BMSCs凋亡调控。方法将原代培养的大鼠骨髓间充质干细胞，用流式细胞术鉴定细胞表型；加入30mmol／L谷氨酸培养后，采用DAPI荧光染色法，观察凋亡细胞的形态；用PL／Annexin—V双染法流式细胞仪计数各组（0、10、30、50mmol／L谷氨酸组）凋亡细胞的比例，通过逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）观察经30mmol／L、50mmol／L谷氨酸作用24h后Smac基因mRNA的表达变化。结果培养的BMSCs经流式细胞术鉴定发现：CD29，CIM4和CD105表达阳性，CIM5，CD14和CD34表达阴性，具备BMSCs的特征；经谷氨酸培养后，可见BMSCs细胞核皱缩，边聚，双核状；谷氨酸诱导组较多细胞呈凋亡改变，且随着谷氨酸浓度的增加，凋亡细胞的百分率也相应地增加（分别为14．24％、30．72％、93．31％）；RT—PCR法发现经30和50mmol／L谷氨酸作用后，BMSCs Smac基因表达较对照组升高（P〈0．05），且随着谷氨酸浓度的增加，Smac基因表达也相应增加。结论BMSCs经谷氨酸培养后Smac基因存在高表达，它可能参与了谷氨酸诱导的BMSCs凋亡调控。     

Effects of Environmental Factors on Ischemic Cardiac Myocyte Apoptosis and Expression of Bcl-2, Bax and Caspase-3 in Rats

目的:探讨光照、黑暗、行为限制对心肌梗死大鼠缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响.方法:Wistar大鼠随机分为假手术组(A组)、心肌梗死组(B组)、黑暗组(C组)、光照组(D组)及行为限制组(E组),用TUNEL法检测心肌凋亡细胞,免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别检测Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白及基因表达.结果:(1)与A组比较,B、C、D、E组的凋亡指数增加(P＜0.01);与B组比较,D、E组的凋亡指数增加(P＜0.05);与C组比较,D、E组的凋亡指数增加(P＜0.05).(2)与A组比较,B、C、D、E组的Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达增加(P＜0.01);与B组比较,D、E组的Bax、Caspase-3蛋白表达增加(P＜0.05);与C组比较,D、E组的Bax、Caspase-3蛋白表达增加(P＜0.05).(3)与A组比较,B、C、D、E组的Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达增加(P＜0.01);与B组比较,D、E组的Bax、Caspase-3 mRNA表达增加(P＜0.01);与C组比较,D、E组的Bax、Caspase-3 mRNA表达增加(P＜0.01).结论:光照环境、行为限制可增加大鼠缺血心肌细胞凋亡,其机制可能与上调Bax、Caspase-3的表达有关.     

姜黄素对胃癌细胞株凋亡抑制蛋白家族及Smac基因表达的影响

目的　观察姜黄素(curcumin) 对人胃癌细胞株凋亡抑制蛋白(IAP) 家族和Smac基因表达的影响, 探讨姜黄素诱导胃癌细胞凋亡的分子机制。方法　10~40μmol/L 姜黄素分别处理胃癌细胞株MKN -45 6~24 h后, MTT比色法检测癌细胞生长活性, 末端TdT酶标记技术和DNA Ladder检测细胞凋亡; 逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和Western blot法检测IAP家族(Survivin、XIAP) 和Smac基因表达; 比色法检测癌细胞Caspase 3活性改变。结果　同对照组比较, 不同浓度姜黄素作用后癌细胞生长明显减慢, 抑制率为12. 18%~68. 15% (P<0. 01), 部分细胞呈现典型凋亡形态学改变, 凝胶电泳可见“梯形”条带, 凋亡率为9 .24%~28. 12% (P<0. 01); Survivin、XIAP基因mRNA和蛋白水平显著下调(均P<0. 01), 而Smac基因表达增强(P<0. 01), 癌细胞Caspase- 3 活性增强2 27~6 67倍(P<0 .01)。结论　姜黄素可显著诱导胃癌MKN- 45 细胞凋亡, 通过上调Smac、下调Survivin和XIAP基因表达, 进而活化Caspase- 3是其作用机制之一。     

阿霉素诱导兔眼后囊晶状体上皮细胞凋亡及其凋亡基因的表达

目的:探讨阿霉素对兔晶状体摘除术后诱导后囊晶状体上皮细胞凋亡并观察凋亡相关基因(P53、Bcl-2)的表达.方法:在12只兔眼晶状体囊外摘除术中分别注入0.2ml阿霉素(0.4mg./L),在术后3周、8周分别行TUNEL法和免疫组化SABC法染色,计算P53、Bcl-2基因表达阳性百分率.结果:术后3、8周TUNEL法标记的阳性凋亡细胞比对照组明显增多(P＜0.05).P53蛋白表达阳性率在3、8周比对照组显著增多(P＜0.01).Bcl-2蛋白表达阳性率在3周时显著减少(P＜0.01),在8周时仍比对照组减少(P＜0.05).结论:阿霉素诱导兔后囊晶状体上皮细胞凋亡,用药组P53基因表达而Bcl-2基因低表达,提示P53、Bcl-2基因可能参与晶状体上皮细胞凋亡的调控.     

精子相关抗原6基因以非P53依赖方式促进TRAIL诱导的骨髓增生异常综合征细胞凋亡

目的 研究精子相关抗原6(sperm-associated antigen 6,SPAG6)基因是否以P53依赖方式促进TRAIL诱导的骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)细胞凋亡.方法 通过P53kdRNA慢病毒转染人结肠癌细胞株HCT116筛选P53基因沉默的最佳靶点,利用筛选出来的最佳靶点序列转染SKM-1细胞;加入嘌呤霉素提高转染效率,RT-PCR及Western blot检验P53基因的干扰效果,构建SKM-1 P53kd细胞模型.用SPAG6kd RNA慢病毒载体转染SKM-1和SKM-1 P53kd细胞,RT-PCR及Western blot验证.用CCK-8法检测重组人可溶性TRAIL蛋白(rTRAIL)对SKM-1细胞的适宜作用浓度.Western blot检测rTRAIL处理后SKM-1和SKM-1 P53kd细胞株中Caspase-8、cleaved-PARP、PARP的表达水平.结果 构建了SKM-1 P53kd细胞模型,转染率在90％以上,P53基因在mRNA和蛋白表达水平较对照组均显著降低(P＜0.01).SPAG6kd RNA慢病毒载体成功感染SKM-1细胞和SKM-1 P53kd细胞,转染率均在80％以上,SPAG6基因表达较对照组明显降低(P＜0.01).随着rTRAIL浓度的增加,细胞生长逐渐被抑制,30 ng/mL TRAIL诱导的细胞凋亡与对照组差异没有统计学意义,100 ng/mL和300 ng/mL TRAIL显著诱导SPAG6kd细胞凋亡(P＜0.05),而P53基因沉默与否并没有影响该结果,rTRAIL处理后细胞凋亡标志分子明显激活或水平升高,细胞中Caspase-8、cleaved-PARP、PARP的表达水平在SKM-1和SKM-1 P53kd细胞中差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SPAG6基因以非P53依赖方式促进TRAIL诱导的MDS细胞凋亡.     

表皮生长因子受体2靶向小分子干扰RNA对卵巢癌细胞化疗敏感性的影响

目的 探讨表皮生长因子受体2(HER-2)靶向小分子干扰RNA(siRNA)对卵巢癌细胞顺铀敏感性的影响.方法 采用蛋白质印迹法筛选出特异性的HER-2 siRNA,将其转染人卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞.将实验分为对照组(不转染HER-2 siRNA),非特异性siRNA组(转染非特异性siRNA),HER-2 siRNA组(转染特异性siRNA),3组分别加入0、0.05、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0、10、20 μg/ml不同浓度的顺铂,采用噻哗蓝法检测3组SKOV3细胞增殖情况;在给予1 μg/ml顺铂后,采用膜联蛋白V法检测顺铂组、HER-2 siRNA组与HER-2 siRNA联合顺铂组在不同时间(2～4 d)凋亡率变化的情况;应用蛋白印迹法检测顺铂组及HER-2 siRNA+顺铂组抗凋亡蛋白Bcl-2、存活素、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和促凋亡蛋白第二线粒体衍生蛋白酶活化子(Smac)的表达.结果 暴露于顺钠24 h后,3组细胞增殖率均随顺铂浓度的增加而降低,但降低的幅度不同,其中,转染HER-2siRNA组细胞降低最为显著;在给予1 μg/ml顺铂后,转染HER-2 siRNA组细胞增殖率[(58.1±4.7)%]与转染非特异性siRNA组[(65.3±2.7)%]、空白对照组[(68.5±2.8)%]相比,差异均有统计学意义(P＜0.01),而非特异性组与空白对照组之问差异无统计学意义(P＞0.05);HER-2 siRNA联合顺铂组细胞凋亡率明显增加,与单独使用顺铂及单独使用HER-2 siRNA组相比,差异有统计学意义(P＜0.01).HER-2 siRNA联合顺铂组抗凋亡蛋白Bcl-2、存活素、XIAP明显低于顺铂组;促凋亡蛋白Smac明显高于顺铂组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 HER-2 siRNA能增加卵巢癌SKOV-3细胞对顺铂的敏感性,显著诱导凋亡.HER-2 sIRNA联合顺铂对卵巢癌治疗具有协同作用.HER-2 siRNA和顺铂协同诱导细胞凋亡的机制可能与Bcl-2、存活素、XIAP蛋白质的下调、Smac蛋白质的上调有关.     

Her-2/neu小分子干扰RNA对肺腺癌细胞周期和凋亡机制的影响

目的研究人类表皮生长因子受体2(Her2/neu)小分子干扰RNA(siRNA)对Her2/neu过表达的肺腺癌细胞的细胞周期和凋亡机制的影响。方法用化学合成的靶向Her2/neusiRNA转染肺腺癌calu3细胞,转染前后通过逆转录聚合酶链反应(RTPCR)测定细胞中Her2/neu、细胞周期蛋白(Cyclin)D1mRNA水平;流式细胞术检测Her2/neu蛋白水平和细胞周期的变化;AnnexinⅤ异硫氢酸荧光素(FITC)试剂盒检测肺癌细胞的凋亡情况;荧光分光光度法测定Caspase3活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测培养液上清中血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果Her2/neusiRNA能在mRNA和蛋白水平下调肺癌细胞株calu3中Her2/neu基因的表达。calu3细胞转染Her2/neusiRNA48h后处于G0/G1期的细胞增多,同时S期的细胞比例减少,与未转染对照组、空载体组和非特异性siRNA组比较差异有统计学意义(F=6.1,P<0.01)。转染Her2/neusiRNA后CyclinD1mRNA水平下降,同时培养上清液中的VEGF含量为176pg/ml±6pg/ml(F=24.7,P<0.01),Caspase3活性为135%±4%(F=8.9,P<0.01),细胞凋亡率为25.1%±1.2%(F=10.3,P<0.01)。结论化学合成的靶向Her2/neusiRNA能够下调Her2/neu基因表达,继而降低CyclinD1和VEGF水平,激活Caspase3途径,从而阻滞细胞周期于G0/G1期和诱导凋亡。     

siRNA 抑制 HM GA1基因表达对 LX-2细胞生物学功能的影响

目的：探讨高迁移率蛋白 A1（HMGA1）siRNA 对人肝星状细胞 HMGA1、α-SMA 、E-钙黏素（E-cadherin）基因的表达调控作用及增殖活性的影响,并探讨其可能的机制。方法将有效的人工合成的 HMGA1 siRNA 转染人肝星状细胞 LX-2（LX-2）后沉默 HMGA1基因的表达。通过实时荧光定量 PCR（RT-PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测 LX-2细胞中HMGA1、α-SMA 和 E-cadherin 的 mRNA 及蛋白表达水平。采用四甲基偶氮唑盐（M TT ）法检测 LX-2细胞增殖水平。结果以HMGA1-siRNA 序列1组沉默效果最好。 TGF-β1刺激组与 TGF-β1＋ NC-siRNA 组之间细胞增殖水平、HMGA1、α-SMA 、E-cad-herin 的基因及蛋白表达水平差异无统计学意义（P ＞0．05）,细胞增殖水平、HMGA1、α-SMA 表达均明显高于正常对照组（P ＜0．05）,E-cadherin 表达显著低于正常对照组（P＜0．05）;TGF-β1＋ HMGA1 siRNA 组细胞增殖水平及 HMGA1、α-SMA 的 mR-NA 及蛋白表达水平较另外3组均显著下降（P＜0．05）,E-cadherin 表达水平显著增高（P＜0．05）。结论靶向 HMGA1的 siRNA能够沉默 LX-2中 HMGA1的表达;抑制 TGF-β1诱导的 LX-2增殖水平,提示 HMGA1参与了 TGF-β1诱导的肝星状细胞活化。     

Lipoxin A4 induces apoptosis of renal interstitial fibroblasts via calciumdependent up-regulation of calpain 10 and Smac expressions

INTRODUCTIONR enal interstitial fibrosis is a common pathway ofchronic renal disease and is characterized by in creased numbers of fibroblasts resulting from the prolifer ation of fibroblasts, transformation of tubular epithelialcells into fibroblasts and insufficient rate of apoptosis offibroblasts[1,2]. Apoptosis is one of the important mech anisms of cell clearance under pathophysiological condi tions and a failure in the clearance of renal fibroblastsmay result in fibrob…     

Effect of Smac on TRAIL-induced apoptosis of prostate cancer cell line PC-3 and the molecular mechanism

The effect of Smac gene on the TRAIL-induced apoptosis of the prostate cancer cell line PC-3 and the molecular mechanism were investigated. The Smac gene was transfected into PC-3 cells under the induction of liposome. The intrinsic Smac gene expression was detected by Western blotting. After treatment with TRAIL as an apoptosis inducer, in vitro cell growth activity was as-sayed by MTT colorimetry. The apoptosis rate of PC-3 cells was determined by annexin Ⅴ-FITC and propidium iodide staining flow cytometry. The expression of cellular XIAP and caspase-3 genes was examined by Western blotting. Smac-transfected cells (PC-3/Smac group) had significantly in-creased Smac protein level as compared with PC-3 controls (P<0.01). After induction with 100-200 ng/mL TRAIL for 12-36 h, cellular proliferation rate in PC-3/Smac group was significantly lower than in PC-3 controls (P<0.05). After induction with 100 ng/mL TRAIL for 24 h, the apoptosis rate in PC-3/Smac group was significantly enhanced as compared with that of PC-3 controls (P<0.05). Ac-cordingly, the XIAP expression level was down-regulated significantly (P<0.05) and caspase-3 sub-unit P20 was up-regulated significantly (P<0.05). It is suggested that the over-expression of cellular Smac can inhibit inhibitor of apoptosis proteins (IAPs), enhance caspases activity and the apoptosis rate of PC-3 cells induced by TRAIL, which may provide a useful experimental basis for prostate cancer therapy.     

靶向HPV16-E5的siRNA对TRAIL诱导宫颈癌Caski细胞凋亡的影响

目的 探讨靶向人乳头瘤病毒16早期蛋白5（HPV16-E5）的siRNA对TRAIL蛋白诱导子宫颈癌Caski细胞株凋亡的调节作用。方法 HPV16-E5 特异性 siRNA转染48h后,RT-PCR检测HPV16-E5 mRNA的表达;流式细胞术及caspase-8活性检测试剂盒分别检测空白对照组、siRNA-E5单独作用组、TRAIL单独作用组、siRNA-E5+TRAIL作用组、无关序列RNA+TRAIL作用组细胞的凋亡率及caspase-8的活性水平;RT-PCR及Western blotting检测siRNA干扰后Caski细胞表面TRAIL死亡受体DR4、DR5的表达。结果 RT-PCR检测结果显示,转染48h后,siRNA-E5组HPV16-E5 mRNA的表达较空白对照组和无关序列对照组下调(P<0.05); siRNA-E5+TRAIL作用组较TRAIL单独作用组相比细胞凋亡率明显增加(P<0.05),而无关序列RNA+TRAIL作用组较TRAIL单独作用组细胞凋亡率无明显变化(P>0.05);siRNA-E5组TRAIL受体DR4、DR5的表达较无关序列对照组、空白对照组无明显差异(P>0.05);caspase-8活性水平在siRNA-E5+TRAIL作用组明显较TRAIL单独作用组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 靶向HPV16-E5的siRNA可增强TRAIL诱导宫颈癌Caski细胞的凋亡作用,其机制与增强caspase-8的活化有关。     

干扰组蛋白去甲基化酶基因表达对Ishikawa细胞增殖凋亡的影响

目的研究SiRNA干扰组蛋白去甲基化酶（JARID1A）基因表达对人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖凋亡的影响。方法 Ishi-kawa细胞转染JARID1A特异性的SiRNA;将Ishikawa细胞分成sicon组、sicon＋e2组、siJARID1A组和siJARID1A＋e2组,RT-PCR检测四组细胞孕激素受体（progesterone receptor,PR）mRNA表达,Western Blot检测四组细胞PR蛋白,MTT法观察细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期。结果干扰JARID1A能显著上调PR表达,E2可进一步上调PR表达（P〈0.01）;E2能促进Ishikawa细胞增殖,转染SiRNA 48 h后细胞增殖受到抑制;转染SiRNA抑制细胞G1、G2/M期（P〈0.05）。结论 JARID1ASiRNA能有效抑制Ishikawa细胞增殖。