槲皮素对糖尿病大鼠肾脏足细胞nephrin和podocin表达的影响

目的探讨槲皮素对糖尿病大鼠肾脏足细胞nephrin和podocin表达的影响。方法采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)方法构建糖尿病大鼠模型,分为正常对照组、糖尿病模型组、槲皮素给药组。12周后测定肾脏指数、血肌酐、尿素水平及24h尿中总蛋白、白蛋白、肌酐、尿素水平;Western blot方法检测肾皮质nephrin和podocin的蛋白表达。结果槲皮素给药组肾脏指数、血肌酐和尿素水平低于糖尿病模型组;槲皮素给药组尿中总蛋白、白蛋白水平明显低于糖尿病组,尿中肌酐、尿素水平高于糖尿病组。槲皮素给药组肾皮质nephrin和podocin的蛋白表达水平明显高于糖尿病模型组。结论槲皮素对糖尿病大鼠肾脏功能具有保护作用,槲皮素可能是通过增强足细胞nephrin和podocin表达发挥肾脏保护作用。     

温肾健脾方对糖尿病肾病大鼠肾小球足细胞nephrin和podocin表达的影响

目的观察温肾健脾方对糖尿病肾病大鼠肾小球足细胞nephrin和podocin表达的影响。方法将链脲佐菌素诱导的30只糖尿病肾病模型大鼠分为五组,每组各6只,即模型对照组(等渗NaCl溶液10 mL·kg~(-1)·d~(-1))、阳性对照组(缬沙坦25 mg·kg~(-1)·d~(-1))及低剂量组(温肾健脾方7.5 g·kg~(-1)·d~(-1))、中剂量组(温肾健脾方15 g·kg~(-1)·d~(-1))和高剂量组(温肾健脾方30 g·kg~(-1)·d~(-1)),并以6只正常大鼠作正常对照组(等渗NaCl溶液10 mL·kg~(-1)·d~(-1))。各组大鼠连续灌胃8周后,分别采用免疫组织化学法和荧光定量PCR检测各组大鼠肾小球足细胞nephrin和podocin蛋白及mRNA的表达。结果免疫组织化学结果显示,六组大鼠肾脏组织足细胞nephrin和podocin蛋白表达比较,差异均有统计学意义(F=6.656、8.667,P=0.016、0.007)。进一步两两比较发现,模型对照组足细胞nephrin和podocin蛋白表达量均较正常对照组降低(P均0.05);与模型对照组比较,中、高剂量组nephrin和podocin蛋白表达量均升高(P均0.05),而低剂量组仅podocin蛋白表达量较模型对照组有所升高(P0.05);与阳性对照组相比,低、中、高剂量组仅podocin蛋白表达量均较阳性对照组升高(P均0.05)。荧光定量PCR结果显示,六组大鼠肾脏组织足细胞nephrin和podocin mRNA相对表达量比较,差异均有统计学意义(F=5.412、3.308,P=0.034、0.015);进一步两两比较发现,模型对照组足细胞nephrin和podocin mRNA相对表达量较正常对照组均显著降低(P均0.05);与模型对照组比较,中、高剂量组及阳性对照组nephrin和podocin mRNA的相对表达量均显著升高(P均0.05),而低剂量组仅podocin mRNA相对表达量有所升高(P0.05);与阳性对照组相比,仅低剂量组nephrin mRNA相对表达量有所降低(P0.05)。结论温肾健脾方对肾小球足细胞nephrin和podocin有不同程度的保护作用,从而维持肾小球的正常滤过功能,减轻尿蛋白排泄率,以达到防治糖尿病肾病的目的。     

泼尼松、苯那普利对阿霉素肾病大鼠podocin mRNA和蛋白表达的影响

目的:观察阿霉素肾病大鼠肾小球上皮细胞足突蛋白podocinmRNA和蛋白的表达及泼尼松、苯那普利对此表达的影响,探讨podocin分子在蛋白尿发生中的可能作用。方法:SD雄性大鼠,随机分4组进行观察:正常对照组、肾病对照组、肾病泼尼松治疗组、肾病苯那普利治疗组。肾病泼尼松治疗组与肾病苯那普利治疗组每日分别予泼尼松10mg/kg、苯那普利3mg/kg灌胃,共4周;实验4周时留24h尿蛋白定量及血生化,取肾脏皮质抽提总RNA和总蛋白,分别应用半定量RT-PCR和Westernblot测定podocinmRNA和蛋白质的表达。结果:正常对照组大鼠podocin蛋白表达的相对量是5.26±1.19,而肾病对照组大鼠podocin蛋白基本不表达,泼尼松、苯那普利可增加podocin蛋白的表达;正常对照组、肾病对照组、肾病泼尼松治疗组、肾病苯那普利治疗组podocin分子mRNA的相对值分别为0.99±0.21、1.96±0.98、1.31±0.24、2.46±1.49,肾病对照组大鼠podocinmRNA的表达与正常对照组相比显著上调(P<0.05)。结论:podocin蛋白表达的减少可能是阿霉素肾病大鼠蛋白尿产生的...     

VEGF mRNA和bFGF mRNA在胃癌组织中的表达及其意义

目的探讨VEGFmRNA和bFGFmRNA在胃癌组织中的表达及意义。方法应用原位杂交染色检测5 7例胃癌手术切除标本中VEGFmRNA和bFGFmR NA表达情况。结果VEGFmRNA和bFGFmRNA表达与胃癌浸润及转移有关。癌细胞浸润深度≥ 2 /3肌层病例VEGFmRNA和bFGFmRNA阳性率分别为70 .6 %和 73.5 % ,明显高于浸润深度 <2 /3肌层病例(P <0 .0 5 ) ;伴区域淋巴结转移病例VEGFmRNA和bFGFmRNA阳性率分别为 73.0 %和 70 .3% ,明显高于无淋巴结转移病例 (P <0 .0 5 )。结论VEGFmRNA和bFGFmRNA可作为胃癌的预后指标 ,可望为胃癌抑血管生成治疗提供实验依据和新线索     

PRAME mRNA和SOX9 mRNA在肺腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨黑色素瘤特异性抗原(PRAME)mRNA和性别决定基因盒9(SOX9)mRNA在肺腺癌中的表达及临床意义.方法 选取2015年2月至2018年4月于该院接受手术治疗的73例肺腺癌患者为研究对象,术中收集肺腺癌癌组织及癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR检测不同组织中PRAME mRNA、SOX9 mRNA的相...     

尿液分析在尿液潜血诊断中的价值分析

目的 探讨尿液分析诊断尿液潜血的价值。方法 选取2022年10月—2023年5月巨野县人民医院的118例疑似尿液潜血患者为研究对象,所有患者均进行尿液潜血检验。检查方式分为尿液分析检验和显微镜红细胞计数,金标准为显微镜红细胞计数检验,分析尿液分析检查的诊断效能。结果 尿液分析的检验敏感度、特异度、准确度为76.47%、95.24%、89.83%,Kappa值为0.743。结论 尿液分析可以为尿液潜血提供一定的参考数据,方便临床对尿液潜血的诊断。     

α-SMA、CK-MB、LDH在上呼吸道感染患儿中的表达及相关性分析

目的 分析人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）在上呼吸道感染患儿中的表达及相关性。方法 选取2020年1月至2022年12月我院收治的80例上呼吸道感染患儿。按照WURSS-K评分将患儿分为轻度组、中度组及重度组。所有患儿均检测人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）,分析三者在小儿上呼吸道感染中的表达及相关性。结果 中度组、重度组患儿α-SMA、CK-MB、LDH表达显著高于轻度组（P<0.05）;重度患儿α-SMA、CK-MB、LDH表达显著高于中度组（P<0.05）;α-SMA、CK-MB在上呼吸道感染之中呈现出正相关存在（r=6.676,P=0.018）;α-SMA、LDH在上呼吸道感染之中呈现出正相关存在（r=6.487,P=0.017）;CK-MB、LDH在上呼吸道感染之中呈现出正相关存在（r=9.344,P=0.005）。结论 上呼吸道感染患儿的α-SMA、CK-MB、LDH水平可作为上呼吸道感染诊断指标,可对早期诊断患儿病情严重程度及后期治疗提供一定的参考价值...     

Bcl-2 mRNA和Bax mRNA在增生性瘢痕中的表达及意义

【目的】观察Bcl-2 mRNA和Bax mRNA在增生性疲痕和正常皮肤组织内的表达特征及其对增生性瘢痕形成的影响。【方法】收集20例增生性疲痕和20例正常皮肤组织，常规制作石蜡包埋切片，Bcl-2 mRNA和Bax mRNA染色方法为分子原位杂交染色法。【结果】Bcl-2 mRNA和Bax mRNA杂交信号阳性产物定位于胞浆。增生性疲痕Bcl-2 mRNA表达阳性率及其评分明显高于正常皮肤（P〈0．01）；增生性瘢痕Bax mRNA表达阳性率及其评分与正常皮肤无明显差异（P〉0．05）。【结论】Bcl-2基因表达增强可能是瘢痕中细胞凋亡减少，形成增生性瘢痕的机制之一。     

尿液DD3mRNA定量检测在前列腺癌诊断中的价值

目的探讨前列腺按摩后尿沉渣中DD3mRNA含量在前列腺癌诊断中应用价值。方法收集前列腺癌(Pca)患者18例、良性前列腺增生(BPH)33例,在前列腺穿刺活检前收集前列腺按摩后的尿液,离心取细胞沉淀物,用荧光实时定量RT- PCR方法检测DD3 mRNA和PSAmRNA含量,以PSAmRNA作为管家基因校正尿沉渣中的前列腺细胞,以DD3mRNA/PSAmR- NA比值表示尿DD3mRNA含量。用ROC曲线对DD3mRNA诊断PCa的性能进行分析,并与血清tPSA进行了比较,同时探讨了尿DD3mRNA阳性率与临床分期和病理分级的关系。结果Pca患者尿DD3mRNA表达量明显高于BPH患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,ROC-AUC=0.716(95%CI:0.572～0.861)。当截断值为0.118时,DD3mRNA的灵敏性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比、阴性似然比分别为67.0%、78.8%、77.4%、63. 2%、83.9%、3.41和0.35。若血清tPSA分别以4ng/ml和10ng/ml为截断值时,灵敏度分别为100%和94.4%,特异度分别为15.25和57.6%。DD3mRNA的阳性率与临床分期和病理分级无关。结论DD3mRNA的特异性明显高于血清PSA,尿液DD3mRNA的检测可减少不必要的前列腺穿刺,作为PCa的一种非损伤性诊断方法具有良好的应用前景。     

TfR1mRNA和IRP1mRNA在不同铁状态孕妇胎盘中的表达

目的 测定转铁蛋白受体1(TfR1)和铁调节蛋白1(IRP1)在不同铁状态足月孕妇胎盘中的mRNA表达水平,探讨胎盘铁转运及调控机制.方法 采用RT-PCR方法测定正常组、铁缺乏(ID)组及缺铁性贫血(IDA)组足月孕妇胎盘中TfR1和IRP1的mRNA相对表达水平.结果 ①正常组TfR1 mRNA为0.4813±0.1891,ID组为0.6647±0.2788,IDA组为0.9767±0.2858,IDA组与正常组和ID组相比差异均有统计学意义(分别t=0.002,P＜0.01;t=0.028,P＜0.05),而ID组与正常组之间差异无统计学意义(t=0.117,P＞0.05).②正常组IRP1 mRNA为0.2616±0.0785,ID组为0.3696±0.1801,IDA组为0.3971±0.0902,各组间差异无统计学意义(F=1.845,P=0.179).结论 ①胎盘TfR1 mRNA随孕妇缺铁程度加重而增加,表明IRP1参与胎盘TfR1 mRNA的调节.②不同铁状态孕妇胎盘组织中IRP1 mRNA无量的显著变化,明确了IRP1发挥调节作用不是通过自身量的变化,但TfR1 mRNA表达水平的变化说明IRP1在胎盘铁代谢中发挥调节作用.     

KISS-1 mRNA和GPR54 mRNA在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因(KISS-1)和G蛋白偶联受体54(GPR54)mRNA在子宫内膜异位症(EMT)中的表达及意义。方法利用实时定量逆转录PCR方法检测EMT患者的异位/在位内膜组织及正常子宫内膜组织中KISS-1及GPR54 mRNA的表达情况。结果 KISS-1 mRNA在EMT患者异位及在位内膜中的表达水平均明显低于正常子宫内膜(P<0.01),GPR54 mRNA在EMT患者异位内膜中的表达水平略高于EMT患者在位内膜及正常子宫内膜,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 KISS-1下调在EMT的发生中起重要作用。     

CBS mRNA在自发性高血压大鼠脑组织中的表达和分布

目的探讨自发性高血压大鼠（SHR）脑组织胱硫醚β合酶（CBS）的表达及分布情况。方法选择SD（Sprague Dawley）大鼠和SHR各8只,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和real time-PCR技术检测其大脑皮层、小脑、延髓、下丘脑、海马组织CBS mRNA的表达。结果 RT-PCR检测,SHR下丘脑、海马、小脑、大脑皮层及延髓组织的CBS mRNA表达水平分别为0.93±0.01、0.09±0.03、0.36±0.06、0.07±0.01及0.39±0.02,显著低于SD大鼠（P〈0.05）。real-time PCR检测,SD大鼠脑组织CBS mRNA的表达水平从高到低依次为大脑皮层、海马、延髓、下丘脑、小脑。SHR脑组织CBS mRNA的表达从高到低依次为下丘脑、延髓、大脑皮层、海马及小脑。SHR脑组织CBS mRNA的表达水平低于SD大鼠（P〈0.05）。结论 SHR脑组织中CBS mRNA的表达下调,可能通过中枢机制参与高血压的发病。     

VEGF和受体mRNA在子宫肌瘤组织中的表达及意义

目的通过检测VEGF（血管内皮生长因子）和受体mRNA在肌瘤组织中的表达，探讨其在疾病发生、发展中的作用。方法选择40例需要手术的子宫肌瘤患者，手术时留取肌瘤组织及正常组织（作为对照），采用实时荧光定量PCR方法，检测VEGF、VEGFR1和VEGFR2 mRNA的相对表达水平，分析VEGF、VEGFR2 mRNA在肌瘤组织中的表达和肌瘤直径的相关性。结果 VEGF、VEGFR2 mRNA在肌瘤组织的表达明显高于肌层组织，差异有统计学意义（P〈0.05），VEGFR1 mRNA在肌瘤组织的表达高于肌层组织，但差异无统计学意义；VEGF、VEGFR2 mRNA在肌瘤组织的表达与肌瘤直径呈正相关（P〈0.05）。结论 VEGF和受体VEGFR2在子宫肌瘤的发生、发展中起重要作用     

miR-155在肾结石患者血清和尿液中的表达及其临床意义

目的:血液和尿液中的mi RNAs可能存在一种潜在的无创的能够预测慢性肾脏疾病的生物学标志物,在本研究中,我们将会研究肾结石患者血清和尿液中miR-155的表达水平。方法:选取2011年8月~2 0 1 2年8月间同济大学上海市第十人民医院泌尿外科收治的6 0例肾结石患者,以同期5 0例健康体检者作为对照,应用实时荧光定量PCR技术检测并比较肾结石患者和健康体检者血清和尿液mi R-155的表达水平。同时计算出肾小球滤过率估算值(estimated glomer ular filtration,e GFR),通过简单的回归分析,分析mi R-155/e GFR及mi R-155/CRP表达水平之间的相关关系。结果:肾结石患者血清和尿液miR-155的表达水平均显著高于对照组。eGFR与尿液中mi R-155的表达水平呈负相关;CRP与尿液中mi R-155的表达水平呈正相关。尿液中mi R-155的表达水平同白细胞介素(IL)-1β、I L-6和肿瘤坏死因子(T N F)-α的表达水平呈负相关,但同正常T细胞表达分泌的活性调节因子(regulated upon activation normal T-cell expression and secreted,RANTES)的表达水平呈正相关。结论: 肾结石患者血清和尿液中mi R-155的表达水平明显升高,mi R-155表达水平的上调与e GFR下降和CRP升高有关。我们的研究结果表明mi R-155通过调节炎症因子表达在肾结石的病理生理学中扮演重要的角色,有可能成为预测肾结石发病的生物学标志物。     

IGF-ⅡmRNA在肾母细胞瘤中的表达

目的：研究ＩＧＦ－ⅡｍＲＮＡ在肾母细胞瘤中的表达。方法：用原位杂交方法检测４２例肾母细胞瘤在不同病理组织类型中的表达。结果：４２例肾母细胞瘤中有２８例呈高表达,１０例正常组织呈低表达,两组比较有显著差异（Ｐ〈０．０１）,其中以胚基细胞为主型肾母细胞瘤的ＩＧＦ－Ⅱ ｍＲＮＡ的表达高于上皮细胞优势型和间质细胞优势型的肾母细胞瘤（Ｐ〈０．０１;在低分化间变型肾母细胞瘤中ＩＧＦ－ⅡｍＲＮＡ表达水平显著高于     

TGF-β1 mRNA和CTGF mRNA在大鼠原代培养肺成纤维细胞中的表达

目的检测原代培养大鼠肺纤维化的成纤维细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)m RNA和结缔组织生长因子(CTGF)m RNA的表达。方法 12只Wistar大鼠,随机分为28 d正常组(生理盐水组)和28 d模型组(博莱霉素A2组),于实验第28天将大鼠处死,行HE和VG染色。分离大鼠肺组织用于体外原代培养成纤维细胞,传代后的成纤维细胞通过细胞爬片核酸原位杂交检测TGF-β1 m RNA和CTGF m RNA的表达情况。结果 HE染色显示28 d模型组肺泡结构破坏并伴有成纤维细胞灶形成,VG染色示28 d模型组肺间质可见大量红色的胶原纤维沉积。波形蛋白(vimentin)免疫组化鉴定所培养细胞为成纤维细胞。TGF-β1 m RNA和CTGF m RNA细胞爬片原位杂交结果显示,28 d模型组大鼠肺成纤维细胞胞质中可见棕黄色颗粒,两种因子均呈阳性表达,28 d正常组胞质内几乎未见黄色颗粒,两种因子均呈阴性表达。结论原代培养大鼠肺成纤维细胞中TGF-β1 m RNA和CTGF m RNA均在28 d模型组呈阳性表达,提示TGF-β1和CTGF参与了肺纤维化的发病过程。     

uPA和V-ATP酶mRNA在肝癌组织中的表达及意义

目的探讨uPA、V-ATP酶mRNA在肝细胞癌中的表达及其意义。方法用RT-PCR方法检测45例肝细胞癌及其癌旁组织uPA和V-ATP酶mRNA表达,以7例肝血管瘤作为对照组。结果uPA mRNA在癌组、癌旁组及对照组的阳性率分别为100%、84.4%和28.6%,3组比较差异显著（P〈0.05）;V-ATP酶mRNA在癌组、癌旁组及对照组的阳性率分别为100%、86.7%、57.1%,3组比较均差异显著（P〈0.05）;以有/无肝内静脉癌栓形成和肝外转移将癌组分为转移和无转移两组,uPA、V-ATP酶mRNA在两组的表达均有差异显著（P〈0.01）;而它们的表达与乙型肝炎、病理分级、血清AFP水平以及肿瘤直径无明显关系（P〉0.05）。结论肝细胞癌中uPA、V-ATP酶mRNA高表达与肝癌的侵袭转移有关,有可能成为临床治疗的靶点。     

OPN和uPA mRNA在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨骨桥蛋白(OPN)mRNA及尿激酶犁纤溶酶原激活物(uPA)mRNA在肝细胞癌(HCC)组织巾的表达及与临床病理特征的关系.方法 应用RT-PCR方法检测60例HCC癌组织、20例正常对照肝组织中OPN和uPAmRNA的相对表达量.结果 HCC癌组织中OPN和uPA mRNA的阳性表达率均分别高于对照正常肝组织(P均<0.05):痛组织中OPN mRNA的表达量在有门静脉癌栓形成组及在有早期复发转移组均高于无门静脉癌栓形成组和无早期复发转移组(分别P<0.05和P<0.01),uPA mRNA的表达水平在有包膜浸润和有门静脉痛栓形成组中均高于无包膜浸润和无门静脉癌栓形成组(分别P<0.05和P<0.01):OPN mRNA的高表达和uPA mRNA的高表达呈正相关(P<0.05).结论 HCC癌组织中OPN的表达水平可以作为判断肝癌细胞转移能力和预示肝癌早期复发的重要指标.阻断OPN的表达可能可以降低uPA的分泌,从而减少肿瘤的浸润和转移.     

CD44和EPCR mRNA在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨肿瘤干细胞标记物CD44和EPCR在乳腺癌组织中的相关性及其与乳腺癌临床病理特征的关系。 方法选取2015年1月至4月在北京大学深圳医院行乳腺癌切除术的46例女性患者,用实时荧光定量RT-PCR（qRT-PCR）检测非特殊型浸润性乳腺癌及其配对癌旁正常乳腺组织中CD44及EPCR的mRNA表达水平,分析其与临床病理特征的关系,并探讨两者的相关性。 结果（1）荧光定量RT-PCR结果显示CD44 mRNA在乳腺癌组织中的表达明显高于癌旁正常乳腺组织,差异具有统计学意义（t=2.486,P=0.017）,在ER阳性乳腺癌明显低于ER阴性组、在正常乳腺样型的三阴型乳腺癌明显高于非正常乳腺样型的三阴型组,差异具有统计学意义（t=-2.332,P=0.024;t=-4.209,P<0.01）,但与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移及临床分期无关（P>0.05）;（2）EPCR mRNA在乳腺癌组织中的表达明显高于癌旁正常乳腺组织,差异具有统计学意义（t=4.028,P<0.01）,与乳腺癌的肿瘤大小（t=2.998,P<0.01）、组织学分级（t=4.082,P<0.01）、淋巴结转移（t=2.152,P=0.037）、临床分期（t=-2.378,P=0.022）、ER（t=-5.585,P<0.01）,PR（t=-3.896,P<0.01）及增殖指数Ki67（t=2.197,P=0.033）相关,差异具有统计学意义。但与患者的年龄及HER2无关（P>0.05）,在三阴型（尤其是基底样型）乳腺癌及Luminal B型乳腺癌中的相对表达水平也明显高于非三阴型组及非Luminal B型组,差异具有统计学意义（t=9.163,P<0.01;t=3.653,P=0.003）;（3）在乳腺癌中,CD44及EPCR mRNA的表达呈显著正相关（r_s=0.540,P<0.01）。 结论乳腺癌干细胞标志物CD44及EPCR在乳腺癌组织中均明显表达上调,2者具有正相关,但EPCR与更多的临床病理特征相关,提示EPCR可更好地预测乳腺癌的淋巴结转移及较高临床分期等不良预后,并推测CD44及EPCR可能所标记为2种不同表型的乳腺癌干细胞。     

白细胞介素10和神经生长因子在斑秃患儿毛囊中的表达

神经生长因子和白细胞介素10是机体生长发育过程中重要的细胞因子，与毛发的生长调控密切相关。实验拟观察白细胞介素10和神经生长因子在斑秃患儿斑秃周围毛囊中的表达。选取2006-03，2007-02于本科首次就诊的60例原发性斑秃患儿，取斑秃周围1cm范围内松动毛发约30根；另取20名无毛发疾患儿童的欲脱落头发作为对照。采用荧光定量聚合酶链反应法检测所有受试者毛囊中自细胞介素10mRNA和神经生长因子mRNA的表达。显微镜下见所取毛发毛囊均处于退行期样改变。斑秃组神经生长因子mRNA的表达为阴性，而对照组的表达为阳性；白细胞介素10mRNA的表达对照组亦高于斑秃组（P〈0．05）。白细胞介素10mRNA和神经生长因子mRNA表达异常与斑秃有关，其表达的减弱可能参与斑秃的发病。