氟致人胎肝细胞DNA损伤及其对细胞凋亡和p53蛋白表达的影响

目的　研究氟对L 0 2细胞DNA的损伤作用及其对细胞凋亡和p5 3表达的影响 ,并探讨p5 3表达与细胞凋亡之间的关系。方法　体外培养的L 0 2细胞分别接触 0、4 0、80、1 6 0 μg ml氟化钠 (对照组、A、B、C组 ) 2 4h后 ,检测L 0 2细胞DNA损伤率、细胞凋亡百分率和p5 3蛋白表达水平。结果　染氟各组细胞DNA损伤率均明显高于对照组 (P <0 0 5 )。与对照组相比 ,B组和C组细胞凋亡百分率明显升高 (P <0 0 5 )。B组和C组细胞p5 3蛋白表达量均显著高于对照组 (P <0 0 1 )。结论　氟可导致L 0 2细胞DNA损伤率上升 ,诱导细胞凋亡和p5 3表达 ,并且随着氟浓度的升高 ,细胞凋亡率和p5 3蛋白的表达量均随之升高     

硒对氟所致细胞凋亡及p53基因的影响

目的 研究硒对慢性氟中毒大鼠肝肾细胞凋亡及相关基因的影响。方法 对饮高氟水(100mg／L)及高氟加不同浓度硒饲料(2．3mg／kg)大鼠饲喂4个月后，取其肝肾组织进行透射电镜形态学观察、DNA凝胶电泳及流式细胞术观察各组细胞凋亡情况，同时检测肝肾细胞凋亡的相关基因p53。结果 与对照组相比，高氟及氟加硒组．肝肾细胞凋亡率及p53显著增加，氟加硒组肝肾细胞凋亡率明显低于单纯加氟组。结论 高氟可诱导细胞凋亡，硒可拮抗氟引起的细胞凋亡，且p53参与了细胞凋亡的调控。     

奥沙利铂对人结肠癌细胞NF-B、STAT3表达影响

目的 探讨奥沙利铂对人结肠癌细胞(SW620)核转录因子κB(NF-κB)、信号传导与转录激活因子3(STAT3)表达影响。方法 体外培养SW620细胞至对数生长期后, 设不同浓度奥沙利铂(40、80、160 μg/mL)干预组, 同时设对照组, 72 h后, 应用四甲基偶氮唑盐法检测奥沙利铂对SW620细胞的增殖抑制率;应用 Hoechst 33258细胞核染色法观察细胞形态改变;同时应用蛋白印迹法(Western blot)检测细胞内源性NF-κB、STAT3蛋白表达。结果 与对照组比较, 奥沙利铂低、中、高剂量组SW620细胞增殖抑制率[分别为(66.19±5.93)%、(86.92±7.85)%、(96.85±8.86)%]升高(P<0.05), 细胞凋亡数[分别为(9.46±1.05), (18.57±2.16), (27.29±3.48)个/视野]上升(P<0.01);与对照组比较, 奥沙利铂低、中、高剂量组SW620细胞内源性NF-κB及STAT3蛋白表达量[分别为(0.674±0.016)、(0.435±0.012)、(0.212±0.009)和(0.485±0.015)、(0.264±0.008)、(0.113±0.004)]明显下降(P<0.01)。结论 奥沙利铂能够抑制SW620细胞增殖, 其机制可能与抑制SW620细胞内源性NF-κB、STAT3表达有关。     

p53信号通路与卵巢癌、结肠癌、胃癌分子机制研究

<正>p53抑癌基因自20世纪80年代早期被发现以来,其在细胞凋亡中发挥的作用一直受到广泛关注。人类p53基因位于17p13.1,含有11个外显子,编码含有393个氨基酸,分子质量为53kD的p53蛋白。正常情况下,p53蛋白以四聚体的形式存在,其半衰期较短,在细胞中含量比较低,但在DNA损伤、缺氧、原癌基因激活等应激状态下,其半衰期延长,p53基因表达水平显著增高。p53蛋白增多,经过不同的修饰调节作用不同的细胞通路,发挥其作用。p53基因的突变缺失,丧失了p53对细胞生长的负性调节作用,并在其他原癌基因的作用下被损伤的DNA通过有丝分裂进入子代细胞,随着损伤的不断累积,细胞的生长信号严重失衡,逐步形成肿瘤^[1]。     

子宫颈癌组织细胞凋亡,增殖细胞核抗原及P^53蛋白表达的 …

目的：探讨细胞凋亡及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）与子宫颈癌的关系。方法：采用原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测细胞凋亡，采用免疫组化技术检测ＰＣＮＡ和Ｐ＾５３蛋白。结果：３２例子宫颈鳞癌组织中，细胞凋亡，Ｐ＾５３蛋白和ＰＣＮＡ阳性率分别为６２．６０％，５３．１３％和６５．６３％。表达Ｐ＾５３蛋白 细胞与表达ＰＣＮＡ细胞分布区域基本一致，与细胞凋亡无明显相关性正常子宫颈组织只有上皮组织内有少数凋亡细胞和     

特异性沉默hTERT基因表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡及p53、p21的表达的影响

目的探索特异性沉默hTERT基因表达对卵巢癌细胞增殖凋亡及p53和p21表达的影响,为临床诊治提供参考依据。方法采用分子克隆技术构建表达hTERTshRNA的载体,特异性沉默hTERT基因表达;WestenBlot法、MTT比色法、流式细胞仪检测抑制hTERT基因表达对卵巢癌细胞p53表达及其增殖和凋亡的影响。结果pSIREN-hTERTshRNA转染有效阻抑A2780细胞中hTERT蛋白表达,抑制率为77%;随着A2780细胞中hTERT蛋白表达降低,p53和p21表达均明显增加;与空白对照及转染pSIREN-Con对照质粒相比,pSIREN-hTERT转染的A2780细胞生长速度明显降低;pSIREN-hTERT转染48hA2780细胞凋亡率为(26.76±7.42)%,明显高于对照质粒pSIREN-Con转染组(3.73±0.78)%及空白对照组(1.33±0.15)%。结论hTERTshRNA重组质粒可特异性抑制卵巢癌细胞hTERT的表达,诱导细胞增殖抑制和凋亡,且可能与上调p53和p21的表达有关。     

酒精性股骨细胞凋亡及其p53等基因的表达

目的　探讨细胞凋亡抑癌基因 (p5 3)和细胞凋亡抑制基因 (Bcl 2 )基因在酒精性股骨头缺血性坏死骨细胞凋亡中的作用。方法　家兔 6 0只 ,随机分为 2组。灌胃法建模 ,实验组给予含乙醇 5 0 %的烈性白酒 8ml/ (kg·d) ,对照组给予等量生理盐水 ,1～ 6个月分批处死。原位末端标记法 (TUNEL法 )检测骨细胞凋亡 ,免疫组化检测 p5 3和Bcl 2基因表达。结果　第 2 ,3,6个月 ,实验组出现大量骨细胞凋亡 ,以软骨下区最为明显 ,骨细胞凋亡数明显高于对照组 (P <0 0 1) ;两组间骨细胞Bcl 2基因阳性细胞数、p5 3基因阳性细胞数均有显著性差异 (P <0 0 1) ,实验组骨细胞Bcl 2基因阳性细胞数与细胞凋亡数成明显负相关性 (r=- 0 75 ,P <0 0 1) ,实验组骨细胞 p5 3基因阳性细胞数与细胞凋亡指数呈明显正相关性 (r=0 6 8,P <0 0 1)。结论　酒精性ANFH中骨细胞存在明显凋亡现象 ,且受 p5 3基因上调与Bcl 2基因下调影响 ,p5 3与Bcl 2共同调节骨细胞凋亡。     

肺癌化疗前后p53表达和细胞凋亡的变化

目的　探讨化疗对肺癌细胞凋亡、p5 3蛋白表达的影响。方法　收集实验组 14例肺癌病人化疗前后标本和对照组术前未作化疗肺癌标本 2 8例 ,采用免疫组化法检测p5 3蛋白表达 ,采用TUNEL法检测细胞凋亡 ,并作化疗前后的比较。结果　对照组和实验组在化疗前后p5 3阳性表达无显著差异 (P >0 0 5 ) ,而化疗后凋亡指数明显升高 (P <0 0 1)。结论　化疗可诱发肺癌细胞凋亡 ,但对p5 3蛋白表达没有影响     

奥沙利铂联合氟尿嘧啶治疗结肠癌的效果研究

目的探讨采用奥沙利铂联合氟尿嘧啶治疗结肠癌的效果。方法选取鞍山市某医院普通外科收治的241例结肠癌患者为研究对象,将其随机分为对照组(n=120)和观察组(n=121),对照组患者采用氟尿嘧啶进行治疗,观察组患者采用奥沙利铂联合氟尿嘧啶进行治疗,比较2组患者治疗总有效率、治疗后不良反应发生率以及治疗前后肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)水平。结果观察组患者的治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P0.01);治疗后2组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后2组患者血清TNF-α水平低于治疗前,IL-2水平高于治疗前,治疗后观察组患者TNF-α水平低于对照组,IL-2水平高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论与单用氟尿嘧啶相比,采用奥沙利铂联合氟尿嘧啶治疗结肠癌,可提高治疗总有效率,改善患者血清TNF-α及IL-2水平,值得临床推广应用。     

阿魏酸钠对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及p53蛋白表达的影响

[目的]探讨阿魏酸钠(SF)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞株(HUVECCRL1730)凋亡的抑制作用及可能机制.[方法]体外ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞损伤,用阿魏酸钠进行干预.采用四甲基偶氮唑盐法检测细胞存活率;Hoechst33258细胞核荧光染色法观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术检测细胞凋亡率:Western-blot检测内皮细胞p53蛋白表达.[结果]ox-LDL可明显抑制人脐静脉内皮细胞生长和增殖,诱导细胞发生凋亡,上调p53蛋白表达水平;阿魏酸钠干预后细胞存活率明显上升(P<0.05),细胞凋亡率明显下降(P<0.05),p53蛋白表达水平明显下调(P<0.05).[结论]ox-LDL可通过上调p53蛋白表达诱导人脐静脉内皮细胞凋亡,阿魏酸钠可通过下调p53蛋白表达抑制内皮细胞凋亡.     

硒对镉诱导的雄性SD大鼠肝细胞c-myc和p53蛋白表达及细胞凋亡的影响

目的 探讨不同剂量亚硒酸钠对氯化镉诱导的雄性SD大鼠肝细胞的凋亡率、c-Myc和P53蛋白表达的影响.方法 将65只健康SPF级SD雄性大鼠随机分为13组,分别设对照(生理盐水)组、氯化镉(5.0、10.0、20.0 μmol/kg)组及亚硒酸钠(2.5、5.0、10.0 μmol/kg)+氯化镉(5.0、10.0、20.0 μmol/kg)联合作用组,每组5只.氯化镉采用一次性腹腔注射染毒,亚硒酸钠采用一次性灌胃染毒.染毒后48 h,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组化法测定c-Myc和P53蛋白的表达量.结果 与相同剂量氯化镉组相比,亚硒酸钠剂量为2.5 μmol/kg时,全部联合作用组的大鼠肝细胞凋亡率、c-Myc和P53蛋白表达均降低(P＜0.05或P＜0.01);而亚硒酸钠剂量为5.0、10.0 μmol/kg时,部分联合作用组的大鼠肝细胞凋亡率、c-Myc和P53蛋白表达降低(P＜0.05或P＜0.01).大鼠细胞凋亡率与c-Myc、P53蛋白表达量均呈正相关(P＜0.01).结论 2.5 μmol/kg的亚硒酸钠对氯化镉所诱导的大鼠肝细胞的凋亡及c-Myc和P53蛋白表达的升高具有一定的拮抗作用.     

紫杉醇对p53基因不同表达型人肺腺癌细胞株的生长抑制作用

目的评价紫杉醇对p53基因不同表达型肺癌细胞株的生长抑制作用。方法分别以体外药物敏感试验（MTT法）、流式细胞术观察紫杉醇相同作用浓度处理肺癌细胞株（H1299为p53缺失型,H322为p53变异型,A549为p53野生型）后,其生长抑制情况以及细胞周期、细胞凋亡等指标的变化。结果紫杉醇对H1299、H322及A549细胞毒性呈时间依赖性（P〈0．05）;紫杉醇对H322和A549的IC50（48．07&#177;26．12nmol／L,9．8&#177;2．45nmol／L）明显低于对H1299的IC50（110．6&#177;38．7nmol／L,P〈0．05）。紧杉醇相同作用时间及相同浓度（作用时间48h、浓度10nmol／L）下．H322和A549G2／M期的阻滞明显多于H1299（P〈0．05）,H1299多阻滞于G0／G1期。H322的细胞凋亡也明显多于H1299（P〈0．05）。结论紫杉醇对D53基因不同表达型人肺腺癌细胞株均有生长抑制作用,但对变异型及野生型p53表达型细胞株的抑制作用明显高于p53缺失型的细胞株.     

2,2’,4,4’-四溴联苯醚对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞周期、凋亡及p53蛋白表达的影响

目的研究PBDE-47对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞周期、凋亡和p53蛋白表达的影响。方法用低、中、高剂量(0、0.5、2.5、5μg/ml)的PBDE-47对体外培养的SH-SY5Y细胞进行染毒,24h后采用流式细胞术检测细胞周期构成比和细胞凋亡率,用Westernblot检测p53蛋白的表达水平。结果与对照组相比,低、中、高剂量染毒组G0/G1期细胞数均明显增加,S期细胞数均明显减少(P0.001)。与对照组相比,高剂量染毒组细胞凋亡率明显升高(P0.001),中、高剂量染毒组p53蛋白表达水平均明显升高(P0.01)。结论 PBDE-47可导致SH-SY5Y细胞在G0/G1期发生阻滞及细胞凋亡,并诱导p53蛋白表达增加,PBDE-47导致的细胞周期阻滞与凋亡可能与p53蛋白表达水平增加有关。     

δ-生育三烯酚诱导人结肠癌细胞SW620副凋亡作用研究

目的探讨δ-生育三烯酚诱导人结肠癌细胞SW620副凋亡作用及其机制。方法以MTT试验观察0~30μmol/Lδ-生育三烯酚对人结肠癌细胞SW620及人胃黏膜上皮细胞GES-1细胞增殖作用的影响,观察1.0μmol/L放线菌酮(CHX)对15μmol/Lδ-生育三烯酚诱导人结肠癌细胞SW620副凋亡的抑制作用。以Western blot检测0~20μmol/Lδ-生育三烯酚对人结肠癌细胞SW620中增殖与凋亡关键信号通路Notch1及Jagged1蛋白表达的影响。以透射电镜检测15μmol/Lδ-生育三烯酚对人结肠癌细胞SW620副凋亡的形态学特征的影响。结果与溶剂对照组相比,用不同剂量的δ-生育三烯酚(终浓度为5、10、15、20、25、30μmol/L)分别作用于SW620及GES-1细胞24 h,SW620细胞存活率下降(P0.05),而GES-1细胞存活率未见明显下降(P0.05)。提前给予1.0μmol/L CHX处理的细胞,经15μmol/L生育三烯酚诱导SW620凋亡作用24 h后,SW620存活率较单独加入生育三烯酚作用的细胞存活率增高(P0.05)。1.0μmol/L CHX和15μmol/Lδ-生育三烯酚共同作用于SW620细胞24 h后,Notch1、Jagged1蛋白表达量与对照组相比分别上升41.8%、41.9%。透射电镜下15μmol/Lδ-生育三烯酚作用24 h后,SW620细胞在形态学上呈现副凋亡特征,1.0μmol/L CHX能抑制生育三烯酚诱导SW620的副凋亡作用。结论δ-生育三烯酚能诱导SW620细胞paraptosis样副凋亡,并且这一过程可以被CHX抑制。     

奥沙利铂联合5-FU、CF治疗老年Ⅲ期结肠癌的临床分析

目的评价奥沙利铂联合氟尿嘧啶5-FU、亚叶酸钙CF治疗老年Ⅲ期结肠癌(术后)的临床疗效及不良反应。方法 10例老年Ⅲ期结肠癌均为术后采用奥沙利铂联合氟尿嘧啶5-FU、亚叶酸钙CF(FOLFOX4方案)化疗,至少6个周期评价疗效。结果所有患者均可评价疗效和不良反应,其中CR2例、PR5例、SD3例、PD0例,总有效率达70.0%。主要的不良反应为骨髓抑制、消化道反应、神经毒性(主要是感觉神经毒性),毒副反应均可耐受。结论奥沙利铂联合氟尿嘧啶5-FU、亚叶酸钙CF(FOLFOX4方案)治疗老年Ⅲ期结肠癌(术后)有效率较高,不良反应可耐受。     

奥沙利铂联合5-FU、CF治疗老年Ⅲ期结肠癌的临床分析

目的评价奥沙利铂联合氟尿嘧啶5-Fu、亚叶酸钙CF治疗老年Ⅲ期结肠癌（术后）的临床疗效及不良反应。方法10例老年Ⅲ期结肠癌均为术后采用奥沙利铂联合氟尿嘧啶5-FU、亚叶酸钙CF（FOLFOX4方案）化疗,至少6个周期评价疗效？结果所有患者均可评价疗效和不良反应,其中CR2例、PR5例、SD3例、PD0例,总有效率达70．0％。主要的不良反应为骨髓抑制、消化道反应、神经毒性（主要是感觉神经毒性）,毒副反应均可耐受。结论奥沙利铂联合氟尿嘧啶5-FU、亚叶酸钙（FOFOLFOX4方案）治疗老年Ⅲ期结肠癌（术后）有效率较高,不良反应可耐受。     

子宫颈癌组织细胞凋亡、增殖细胞核抗原及P53蛋白表达的实验研究

目的：探讨细胞凋亡及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）与子宫颈癌的关系。方法：采用原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测细胞凋亡,采用免疫组化技术检测ＰＣＮＡ和Ｐ５３蛋白。结果：３２例子宫颈鳞癌组织中,细胞凋亡、Ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ阳性率分别为６２．５０％,５３．１３％和６５．６３％。表达Ｐ５３蛋白的细胞与表达ＰＣＮＡ细胞分布区域基本一致,与细胞凋亡无明显相关性。正常子宫颈组织只有上皮组织内有少数凋亡细胞和表达ＰＣＮＡ的细胞,显微镜下每视野阳性细胞数均不超过１０％。结论：Ｐ５３蛋白可能通过促进细胞增殖,抑制细胞凋亡而参与子宫颈癌发生与发展。     

低剂量辐射诱导小鼠生精细胞凋亡及p53基因表达的适应性反应

目的研究低剂量X射线照射诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡及p53基因表达的适应性反应。方法通过不连续泛影葡胺密度梯度离心法分离睾丸组织不同种类生精细胞，采用碘化丙啶荧光探针标记细胞，流式细胞术检测各类生精细胞凋亡，免疫组化法观察生精细胞p53蛋白表达。结果当1．0、2．0或3．0Gy（攻击剂量，D2）照射前6h给予75mGy（诱导剂量，D1）预照射时明显减轻D2对精原细胞和精母细胞的凋亡损伤作用，而对精子细胞和精子影响不明显。当D2照射前6h给予D1预照射时明最减少精原细胞和精母细胞p53基因表达阳性率，而对精子细胞和精子影响不明显。结论低剂量X射线照射可选择性诱导小鼠睾丸精原细胞和精母细胞凋亡的适应性反应，并与D1和D2间隔时间及D2剂量有关。同时，可诱导精原细胞和精母细胞p53基因表达的适应性反应，推测其在低剂量辐射诱导生精细胞凋亡适应性反应分子机制中起重要的调控作用。     

氟对人胚肝细胞DNA损伤及p53蛋白表达影响

过量氟不仅可引起大鼠肝、脑细胞DNA损伤^[1-2],而且可以诱导细胞凋亡^[3]。为探讨过量氟可导致人胚肝细胞(L-02细胞)DNA损伤及影响p53表达,本研究采用不同浓度的氟化钠对L-02细胞进行体外染毒,观察过量氟对L-02细胞DNA的损伤作用及其对p53表达的影响,并探讨DNA损伤与p53表达之间的关系。