下调CD44基因表达对人胃癌SGC7901细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制

目的探讨靶向CD44的短发夹RNA(shRNA)对人胃癌裸鼠移植瘤生长抑制作用及其机制。方法利用CD44 shRNA细胞及对照细胞株建立裸鼠原位移植瘤及皮下种植瘤模型,监测肿瘤生长变化,采用RT-PCR及免疫组织化学方法检测瘤体内CD44表达的变化,并进一步检测上皮-间质转化(EMT)相关因子表达的变化。结果成功构建了CD44 shRNA转染荷瘤皮下及原位裸鼠模型。与对照shRNA组、空白对照组分别比较,CD44 shRNA组荷瘤裸鼠肿瘤生长速度减慢,皮下种植瘤及原位移植瘤质量减轻,差异均有统计学意义(P均0.01)。RT-PCR结果发现,CD44 shRNA组CD44mRNA表达在皮下种植瘤及原位移植瘤均显著下调,差异均有统计学意义(P均0.01)。CD44 shRNA组细胞EMT相关基因E-cadherin表达增加,N-cadherin、Vimentin表达降低。结论 CD44 shRNA可以有效抑制人胃癌SGC7901细胞裸鼠移植瘤生长,并下调CD44的表达水平,这可能与CD44基因参与EMT相关。     

胃癌成纤维细胞中HAS2对胃癌细胞转移的影响

目的探讨胃癌成纤维细胞中透明质酸合成酶(HAS2)对胃癌细胞转移的影响。方法从手术切除的胃癌组织及癌旁正常组织中分别分离及培养胃成纤维细胞(CAFs)及正常成纤维细胞(NFs)。蛋白质免疫印迹(Western blot)及免疫荧光染色检测CAFs与NFs中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及HAS2的表达。利用siRNA下调CAFs中HAS2的表达,Western blot及免疫荧光染色检测CAFs中HAS2的表达,细胞迁移(Transwell)及划痕闭合实验检测胃癌细胞SGC7901的侵袭及迁移能力,Western blot检测SGC7901细胞上皮-间质转化相关蛋白E-cadherin、vimentin及N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达。结果α-SMA与HAS2在CAFs中高表达,vimentin在CAFs与NFs中均表达,而E-cadherin在CAFs与NFs中不表达。与si-NC组相比,si-HAS2组CAFs中HAS2表达降低,SGC7901细胞的侵袭及迁移能力降低,SGC7901细胞中上皮-间质转化相关蛋白E-cadherin表达升高,而Vimentin及N-cadherin表达降低。结论下调胃癌CAFs中HAS2的表达,可抑制胃癌细胞的侵袭、迁移及上皮-间质转化。     

ER-α36对胃癌SGC7901细胞在裸鼠体内生长的影响

目的:观察ER-α36分子对人胃癌细胞SGC7901在裸鼠体内生长的影响.方法:利用慢病毒转染技术构建稳定高表达和低表达ERα-36分子的重组人胃癌SGC7901细胞株.实验分为空白对照组(SGC7901-Control)、ER-α36低表达组(SGC7901-Low36)和ER-α36高表达组(SGC7901-High36),每组各3只雄性裸鼠.将上述细胞(5×106个/mL)接种裸鼠皮下,建立裸鼠荷瘤模型,连续观测30d.采用瘤结节体积测量和称质量、瘤组织HE染色及免疫组织化学法检测Ki67指数和E-cadherin蛋白表达等方法,鉴定各组细胞生长的情况.结果:全组实验动物均出现移植瘤.第16天开始,SGC7901-High36组裸鼠肿瘤的体积>SGC7901-Control组裸鼠肿瘤的体积>SGC7901-Low36组裸鼠肿瘤的体积,两两之间有显著性差异(P<0.05).第30天,SGC7901-High36组肿瘤的质量(2.58g±0.014g),明显大于SGC7901-Control组(1.32g±0.0245g)和SGC7901-Low36组(0.471g±0.021g),两两之间有显著性差异(P...     

乳香通过PTEN/Akt/COX-2通路诱导胃癌细胞SGC7901凋亡

目的研究乳香对人胃癌细胞SGC7901增殖、凋亡和迁移的影响及其可能的作用机制。方法不同浓度乳香处理SGC7901细胞不同时间,噻唑兰比色法检测乳香对SGC7901细胞增殖的影响,流式细胞术分析乳香对SGC7901细胞凋亡的影响,蛋白质印迹法(Western blotting)分析乳香对SGC7901细胞中同源性磷酸张力蛋白(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(PKB,亦称Akt)和环氧化酶2(COX-2)蛋白表达影响,划痕实验检测细胞迁移能力,裸鼠移植瘤实验验证乳香在裸鼠体内抑制肿瘤的效果。采用Graphpad Prism 6.0统计软件对数据进行分析。结果乳香能够抑制SGC7901细胞的增殖和迁移能力,呈现剂量依赖和时间依赖性。乳香诱导SGC7901细胞的凋亡,呈现剂量依赖性。乳香能够诱导SGC7901细胞中PTEN的表达,抑制p-Akt和COX-2的蛋白表达。此外,乳香能够抑制裸鼠体内胃癌移植瘤的生长。结论乳香可以抑制胃癌细胞SGC7901的增殖和迁移,诱导细胞凋亡,这可能与PTEN/Akt/COX-2信号通路相关。     

miR-302a靶向E2F1抑制胃癌BGC-823细胞EMT并降低细胞侵袭和迁移能力的实验研究

目的探讨miR-302a对胃癌BGC-823细胞上皮间质转化(EMT)、侵袭和迁移能力的影响和机制。方法在胃癌BGC-823细胞中转染miR-302a mimics,CCK-8测定细胞增殖变化,Transwell小室测定迁移和侵袭,Western blotting检测E-cadherin、Vimentin、N-cadherin蛋白表达。靶基因预测软件预测E2F1可能为miR-302a的靶基因,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。在胃癌BGC-823细胞中共转染pcDNA 3.1-E2F1和miR-302a mimics,按照上述方法测定细胞增殖、侵袭、迁移和E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、E2F1蛋白表达水平。结果miR-302a mimics降低胃癌BGC-823细胞增殖、侵袭和迁移能力,下调细胞中Vimentin、N-cadherin蛋白表达水平,促进细胞中E-cadherin蛋白表达。miR-302a靶向负调控E2F1表达。pcDNA 3.1-E2F1能够提高miR-302a mimics条件下胃癌BGC-823细胞中E2F1蛋白表达水平,促进细胞增殖、侵袭和迁移,促进细胞中Vimentin、N-cadherin蛋白表达,减少细胞中E-cadherin蛋白表达。结论miR-302a靶向E2F1抑制胃癌BGC-823细胞EMT并降低细胞侵袭和迁移能力。     

Kruppel样因子8通过转化生长因子-β1介导的上皮间质转化促进胃癌细胞的侵袭转移

目的探讨在人胃癌细胞中Kruppel样因子(KLF)8是否参与了转化生长因子(TGF)-β1介导的上皮间质转化(EMT)作用促进胃癌细胞侵袭转移。方法 TGF-β1处理胃癌细胞SGC7901和MKN45后,采用Western印迹和实时定量荧光PCR(qRT-PCR)检测细胞中KLF8、上皮标志蛋白——钙黏附蛋白E(E-cadherin)和间质标志蛋白——波形蛋白(Vimentin)表达水平;采用小干扰RNA(siRNA)技术降低胃癌细胞MKN45中KLF8的表达水平,细胞侵袭试验和划痕试验检测细胞的体外侵袭和迁移能力,并且采用高内涵细胞分析试验检测细胞的运动速度。结果在胃癌细胞株中,TGF-β1刺激后,能够下调E-cadherin和上调Vimentin的表达,进而促进细胞发生EMT;进一步研究发现,在胃癌细胞MKN45中,TGF-β1能够增加KLF8 mRNA和蛋白表达水平(P0.05);Western印迹和qRT-PCR实验发现,siRNA干扰KLF8表达后,能够阻断TGF-β1诱导的EMT,进而部分逆转了E-cadherin的降低和Vimentin的升高;同时,抑制KLF8后,能够降低TGF-β1促进的细胞侵袭、迁移和运动能力。结论在胃癌细胞中,KLF8参与了TGF-β1诱导EMT过程,并且有可能成为胃癌治疗中的新治疗靶标。     

复方蜥蜴散基于HIF-1α介导PI3K/AKT通路干预裸鼠胃癌浸润转移

目的 研究复方蜥蜴散基于缺氧诱导因子(HIF)-1α介导磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路干预裸鼠胃癌移植瘤模型上皮间质转化(EMT)的作用，探讨其干预胃癌浸润转移机制。方法 选取120只雄性SPF级4周龄BALB/c裸鼠，采用人胃癌SGC-7901细胞株右腋下皮下注射制备裸鼠胃原位癌种植转移模型，随机分为模型对照组、华蟾素对照组、5-FU对照组、复方蜥蜴散低、中、高剂量组。各组用灌胃或尾静脉注射等方法做相应药物干预治疗6 w后取胃癌组织，TUNEL检测胃癌细胞凋亡，免疫组化法及Western印迹检测胃癌细胞HIF-1α、PI3K、p-AKT、AKT及EMT相关蛋白表达。结果 与模型对照组比较，各药物干预组细胞凋亡率、E-cadherin表达水平显著升高，HIF-1α、PI3K、p-AKT、Integrin-β3相关蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与华蟾素、5-Fu阳性对照组比较，复方蜥蜴散不同剂量组细胞凋亡率、E-cadherin表达水平显著升高，HIF-1α、PI3K、p-AKT、Integrin-β3相关蛋白表达水平显著降低(P<0.05)...     

衣霉素诱导胃癌细胞内质网应激介导上皮间质转化的发生

目的 观察衣霉素诱导的内质网应激介导胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化(EMT)的发生.方法 以浓度为10 μg/ml的衣霉素(TM)处理胃癌SGC-7901细胞0、6、12、24 h,RT-PCR、Western blotting法检测葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)表达;取GRP78高表达时间点,以10 μg/ml TM处理SGC-7901细胞,RT-PCR、Western blotting法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)及N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达;镜下观察细胞形态学变化.细胞划痕试验观察TM诱导SGC-7901细胞的侵袭能力.结果 10 μg/ml的TM处理胃癌SGC-7901细胞12h后,细胞形态逐渐类似于长梭形并生出伪足.E-cadherin mRNA及蛋白表达下降(P＜0.05),GRP78、N-cad-herin mRNA及蛋白表达同时升高(P＜0.05).胃癌SGC-7901细胞侵袭、转移能力增强.结论 TM诱导的内质网应激(ERS)可介导胃癌SGC-7901细胞发生EMT.     

沉默HIF-1α调控MAPK/ERK信号通路抑制NSCLC转移的分析

目的探讨HIF-1α在体内及体外对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞转移的影响及其作用机制。 方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测HIF-1α在癌旁正常组织、肺鳞癌组织(LUSC)、肺腺癌组织(LUAD)、A549细胞和HEB细胞中的表达量。上调HIF-1α表达后,通过MTT、细胞侵袭和Western blot实验检测过表达HIF-1α对A549细胞增殖、侵袭和EMT的影响。下调HIF-1α表达后,Western blot检测A549细胞ERK和p-ERK蛋白的表达量。THBQ激活MAPK/ERK通路后,分析A549细胞增殖、侵袭和EMT能力。将细胞株植入裸鼠体内,构建移植瘤模型,最后测量裸鼠移植瘤的体积和重量。 结果HIF-1α在NSCLC组织的表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。A549细胞中HIF-1α表达水平明显高于HEB细胞(P<0.01),过能够促进A549细胞的增殖和侵袭,N-cadherin蛋白表达量明显上升,E-cadherin蛋白表达量明显下降。下调HIF-1α能够抑制A549细胞内MAPK/ERK通路,且抑制了A549细胞的增殖、侵袭和EMT。下调HIF-1α使裸鼠移植瘤的重量和体积明显减小。 结论沉默HIF-1α通过MAPK/ERK信号通路在体内及体外抑制NSCLC转移。     

胃癌干细胞制备方法及在胃癌侵袭转移中的机制

目的探讨胃癌干细胞制备方法及其在胃癌侵袭转移中的机制。方法建立胃癌细胞成球培养方法,采用球形克隆实验、平板克隆实验及裸鼠成瘤实验测定培养胃癌干细胞(GCSCs)及SGC7901细胞的致瘤性和侵袭性。通过Transwell迁移试验测定人胃癌SGC7901细胞株和GCSCs细胞在胃癌转移性中的作用。用基因芯片筛选出该细胞中高表达分子ANTXR2,分析其在干细胞侵袭转移中的作用。结果 (1)人胃癌SGC7901细胞株培养后开始贴壁生长,培养条件为RPMI-1640(10.0%FBS);GCSCs细胞为悬浮生长,培养条件为无血清培养基,细胞贴壁生长后呈梭形的间质形态;(2)球形克隆:GCSCs细胞瘤球数量为(63.92±4.51)个,显著多于人胃癌SGC7901细胞株的(6.49±0.70)个(P0.05);(3)平克隆实验:GCSCs细胞瘤球数量为(9.61±1.59)个,显著多于人胃癌SGC7901细胞株的(1.78±0.82)个(P0.05);(4)成瘤实验:裸鼠体内移植1×10~4个球细胞即可发生肿瘤,GCSCs细胞移植瘤直径,显著大于人胃癌SGC7901细胞株(P0.05);(5)Transwell迁移:GCSCs细胞穿过基底膜细胞数为(171.92±12.31)个,显著高于人胃癌SGC7901细胞株的(85.39±4.91)个(P0.05);结晶紫染色可以看出,GCSCs细胞穿过基底膜细胞数多于人胃癌SGC7901细胞株;(6)流式细胞术检测人胃癌SGC7901细胞株中ANTXR2阳性细胞比例占4.98%,GCSCs细胞中ANTXR2阳性细胞比例占85.48%。对ANTXR2阳性的胃癌组织切片采用实时定量PCR方法测定显示:ANTXR2与干细胞标志CD44有共定位现象。结论采用成球培养法能成功分离/富集胃癌干细胞,具有多向分化、克隆及成瘤能力,ANTXR2在胃癌干细胞侵袭转移中发挥了重要作用,可以作为胃癌预后指标。     

EGFR单抗联合CIK细胞治疗胃癌的实验研究

背景:单克隆抗体靶向药物和细胞免疫治疗在恶性肿瘤的治疗中越来越显现出巨大的潜力,但二者联合应用在胃癌治疗中的作用尚未明确。目的:通过体外和体内实验初步探讨表皮生长因子受体(EGFR)单抗(西妥昔单抗)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)对胃癌的治疗作用。方法:经免疫细胞化学方法证实人胃腺癌细胞株SGC7901高表达EGFR后,观察EGFR单抗对CIK细胞与SGC7901细胞结合率的影响。设置EGFR单抗联合CIK细胞组、单纯CIK细胞组和单纯EGFR单抗组,以MTT法检测各组对SGC7901细胞的杀伤率,应用裸鼠移植瘤模型观察各组抑瘤率。结果:EGFR单抗未能显著提高CIK细胞与SGC7901细胞的结合率。EGFR单抗联合CIK细胞对SGC7901细胞的杀伤率和裸鼠移植瘤抑制率显著高于两者单用(P0.05)。结论:EGFR单抗与CIK细胞联合对胃癌的疗效较两者单用显著提高。     

胃泌素对胃癌细胞EMT和Wnt/β-catenin信号通路相关基因表达的影响

目的探讨高表达胃泌素(gastrin)对胃癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响及可能机制。方法用gastrin过表达质粒pcDNA3-gastrin及空载体pcDNA3.1转染胃癌细胞SGC-7901、MKN45,48 h后收集细胞蛋白,Western印迹检测鉴定gastrin表达,检测EMT相关标志物E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin、Snail及wnt/β-连环蛋白(catenin)信号通路相关基因wnt3α、β-catenin、c-myc的蛋白表达变化。结果在SGC-7901、MKN45细胞中成功过表达gastrin。与pcDNA3.1空载体转染组相比,pcDNA3.1-gastrin转染SGC-7901、MKN45细胞中上皮标志蛋白E-cadherin表达下调,间质标志蛋白N-cadherin、Snail表达上调,差异有统计学意义(P<0.05);同时Wnt/β-catenin通路蛋白相关蛋白wnt3α、β-catenin及其下游基因c-myc的表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论过表达gastrin能够激活Wnt/β-catenin信号通路和促进胃癌细胞SGC-7901和MKN45发生EMT。     

奥曲肽抑制胃癌生长的实验研究

目的:研究生长抑素类似物奥曲肽在体内和体外对胃癌生长的影响及初步作用环节。方法:采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法及TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测奥曲肽对体外培养的SGC-7901胃癌细胞生长的影响及凋亡的诱导作用。建立裸鼠人胃癌原位移植瘤模型,给予奥曲肽治疗8周,观察其对裸鼠体内胃癌生长的影响。用免疫组化法检测奥曲肽对胃癌细胞及组织中增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测胃癌细胞及组织中生长抑素受体(SSTR)-2和SSTR-3基因的表达。结果:奥曲肽可明显降低胃癌细胞的3H-TdR掺入,其效应与药物剂量呈明显正相关。奥曲肽可诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡,其发生率为18.3%±2.7%。奥曲肽可抑制裸鼠人胃癌原位移植瘤的生长,其抑瘤率为62.3%。胃癌细胞及组织中PCNA的表达因奥曲肽的干预而明显下调。无论是胃癌细胞还是胃癌组织,均有SSTR-2和SSTR-3基因表达。结论:在体内及体外,奥曲肽通过SSTR-2和SSTR-3的介导可有效抑制胃癌生长。     

肝细胞癌组织中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达变化及意义

目的观察肝细胞癌（HCC）中上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）、神经型钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化EnVision法检测45例HCC患者肿瘤组织及6例癌旁正常肝脏组织中的E-cadherin、N-cadherin和Vimentin。结果与对照组相比,观察组E-cadherin阳性表达率升高,N-cadherin、Vimentin阳性表达率降低（P均〈0.05）;观察组中高分化者与中分化者及中分化者与低分化者相比,E-cadherin阳性表达率升高,N-cadherin、Vimentin阳性表达率降低（P均〈0.05）。HCC组织中E-cadherin、Vim-entin表达呈负相关（r=-0.107,P〈0.05）;N-cadherin与Vimentin表达呈正相关（r=0.578,P〈0.05）。淋巴结转移与E-cadherin表达呈负相关（r=-0.08,P〈0.05）;与N-cadherin、Vimentin表达呈正相关（r=0.222、0.282,P均〈0.05）。结论 HCC组织N-cadherin、Vimentin表达增高,而E-cadherin表达降低。HCC细胞存在上皮—间叶转化,且与肿瘤的分化程度和淋巴结转移有关。     

小干扰RNA沉默bcl-2基因抑制胃癌细胞生长的研究

目的利用RNA干扰技术,研究靶向bcl-2的小干扰RNA(siRNA)在体内外对胃癌细胞生长的影响,探讨其对胃癌治疗的可行性。方法化学合成bcl-2基因的siRNA,脂质体法将bcl-2 siRNA转染胃癌SGC 7901细胞,采用实时定量PCR和Western印迹观察bcl-2 siRNA转染前后胃癌细胞bcl-2基因的表达变化,四甲基偶氮唑盐(MTT)实验、流式细胞检测技术和端粒重复序列扩增法(TRAP)分别检测胃癌细胞增殖、凋亡和端粒酶活性变化。并将转染bcl-2 siRNA的胃癌SGC 7901细胞接种于裸鼠皮下,观察其在裸鼠体内成瘤及生长情况。结果数据经方差分析,bcl-2 siRNA转染胃癌SGC 7901细胞后,明显抑制bcl-2基因表达,并与其浓度和作用时间相关,以100 nmol/L bcl-2 siRNA对bcl-2基因表达抑制效果最佳。以该浓度的bcl-2 siRNA转染胃癌SGC 7901细胞后,bcl-2 mRNA和蛋白表达抑制分别为79．9%和85．3%；经bcl-2 siRNA作用的SGC 7901细胞生长明显缓于对照组(P＜0．05),细胞凋亡率高于对照组(P＜0．05),端粒酶活性明显低于对照组(P＜0．05)。转染100 nmol/L bcl-2 siRNA的胃癌SGC 7901细胞接种裸鼠皮下后,肿瘤出现时间晚,体积小．生长受到明显抑制(P＜0．05)。结论靶向bcl-2的siRNA可明显下调靶基因bcl-2的表达,在体内外抑制胃癌SGC 7901细胞的生长,为探索胃癌基因治疗提供新的策略。     

EGFR单抗联合GIK细胞治疗胃癌的实验研究

单克隆抗体靶向药物和细胞免疫治疗在恶性肿瘤的治疗中越来越显现出巨大的潜力,但二者联合应用在胃癌治疗中的作用尚未明确。目的：通过体外和体内实验初步探讨表皮生长因子受体（EGFR）单抗（西妥昔单抗）联合细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）对胃癌的治疗作用。方法：经免疫细胞化学方法证实人胃腺癌细胞株SGC7901高表达EGFR后．观察EGFR单抗对CIK细胞与SGC7901细胞结合率的影响。设置EGFR单抗联合CIK细胞组、单纯CIK细胞组和单纯EGFR单抗组,以MTT法检测各组对SGC7901细胞的杀伤率．应用裸鼠移植瘤模型观察各组抑瘤率。结果：EGFR单抗未能显著提高CIK细胞与SGC7901细胞的结合率。EGFR单抗联合CIK细胞对SGC7901细胞的杀伤率和裸鼠移植瘤抑制率显著高于两者单用（P〈0．05）。结论：EGFR单抗与CIK细胞联合对胃癌的疗效较两者单用显著提高．     

amiRNA-Snail逆转人胃癌细胞株SGC7901／DDP对顺铂的耐药性及其机制研究

多药耐药是恶性肿瘤化疗失败的主要原因。研究显示锌指转录因子Snail介导肿瘤细胞发生上皮间质转化（EMT）可促成肿瘤对化疗耐药。目的：探讨人工合成microRNA．Snail（amiRNA．Snail）逆转人胃癌细胞株SGC7901／DDP对顺铂（DDP）耐药性的作用及其可能机制。方法：构建稳定转染amiRNA-Snail质粒或阴性对照质粒的SGC7901／DDP细胞株（SGC7901／DDP-amiRNA组和SGC7901／DDP-Mock组）,以蛋白质印迹法、免疫荧光法检测各组细胞中的Snail、耐药基因ERCCl、Snail下游靶基因E-cadherin蛋白表达,以CCK-8法检测各组细胞经不同浓度DDP（O．01、0．1、1．0、10．0mg／L）作用后的存活率,计算DDP对细胞的半数抑制浓度（IC。）。结果：DDP耐药SGC7901／DDP细胞中的Snail蛋白相对表达量显著高于DDP敏感亲本SGC7901细胞（尸〈0．05）。SGC7901／DDP-amiRNA组细胞Snail、ERCCl蛋白相对表达量显著低于SGC7901／DDP．Mock组细胞（P〈0．05）,荧光强度明显减弱：E-cadhehn蛋白相对表达量显著高于SGC7901／DDP-Mock组细胞（P〈0．05）．荧光强度明显增强。DDP对SGC7901／DDP．amiRNA组细胞的IC。值显著低于SGC7901／DDP．Mock组细胞（P〈0．05）。结论：以amiRNA-Snail沉默Snail基因表达可能通过下调ERCCl表达、上调E-cadherin表达而逆转人胃癌细胞株SGC7901／DDP对DDP的耐药性。     

骨髓间充质干细胞对人胃癌细胞系SGC7901体内成瘤能力及化疗耐药性的影响

目的研究骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对胃癌细胞体内成瘤能力及化疗耐药性的影响.方法体外培养人胃癌细胞系SGC7901及原代培养MSC,裸鼠先分为两组予以SGC7901、SGC7901+MSC皮下注射成瘤;待移植瘤体积达250-400 mm3时,每组再分为化疗组[腹腔内注射5-氟尿嘧啶(5-fluorouridine,5-Fu)]及对照组(生理盐水,NS).4组具体分为:A组(SGC7901+NS),5只;B组(SGC7901+MSC+NS),5只;C组(SGC7901+Fu),5只;D组(SGC7901+MSC+Fu),5只.18 d(腹腔注射治疗9次)后处死,检测各组移植瘤的体积、瘤体质量及裸鼠的净质量,光学倒置显微镜下观察病理学变化.结果SGC7901、SGC7901+MSC、SGC7901+5-Fu、SGC7901+MSC+5-Fu各组之间的移植瘤体积、瘤质量、裸鼠净质量具有统计学差异,MSC增加了SGC7901的成瘤能力及5-Fu耐药性,但是在同等条件下SGC7901+MSC组裸鼠净质量明显高于SGC7901组.结论MSC提高SGC7901移植瘤细胞的增殖活性及对5-Fu的耐药性,但同时也部分改善了移植瘤小鼠的营养状况.     

阿司匹林对人胃癌细胞株的作用及机制探讨

目的 观察阿司匹林对人胃癌细胞株SGC7901生长及人胃癌裸鼠移植瘤生长的作用,并初步探讨其作用机制。方法 采用MTT法及流式细胞术检测不同浓度阿司匹林对胃癌细胞增殖及细胞周期的影响;Westem blot法检测阿司匹林对胃癌细胞COX-2、VEGF表达的影响;建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,给予阿司匹林20天,观察肿瘤大小,免疫组化检测阿司匹林对肿瘤组织中COX-2、VEGF表达及MVD的影响。结果 阿司匹林对胃癌细胞的增殖具有抑制作用,且呈一定的时间、剂量依赖性;细胞周期分析表明阿司匹枳主要使细胞阻滞在G0/G1期;western blot检测表明阿司匹林能降低胃癌细胞COX-2、VEGF蛋白的表达;阿司匹林对裸鼠移植瘤的生长有抑制作用,免疫组化显示阿司匹林能降低移植瘤组织中(COX-2、VEGF的表达及MVD。结论 阿司匹林对胃癌细胞及裸鼠移植瘤均具有一定的抑制作用,其机制可能是通过对COX-2和VEGF等血管生成相关因子的抑制起作用。     

桂皮醛通过TGF-beta信号通路调控结直肠癌细胞侵袭和转移研究

目的研究桂皮醛通过转化生长因子-β(TGF-β)信号通路调控结直肠癌细胞侵袭和转移的机制。方法用不同浓度桂皮醛处理人结肠癌SW480细胞,观察SW480细胞增殖活性、细胞凋亡、侵袭、转移能力及凋亡、上皮间质转化(EMT)、TGF-β/Smad3信号途径关键蛋白表达情况;用10 ng/m L的TGF-β1处理诱导SW480细胞EMT,并用80 mg/L的桂皮醇进行干预,观察SW480细胞中EMT、TGF-β/Smad3信号途径关键蛋白表达。结果桂皮醛处理后SW480细胞Bcl-2/Bax比率、细胞侵袭率、划痕愈合率、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、TGF-β、Smad3、Snail蛋白表达降低,细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、E-cadherin蛋白表达升高,差异有统计学意义(P 0. 05);桂皮醛干预后能够缓解TGF-β1处理后诱导的Vimentin、N-cadherin、MMP-9、Smad3、Snail蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论桂皮醛可能通过抑制人结肠癌细胞系SW480中TGF-beta/Smad3信号途径来抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,并抑制EMT,降低其侵袭转移能力。