大黄对体外系膜细胞增殖的抑制作用

中药大黄用于慢性肾功能不全治疗,可明显地改善肾功能,延缓肾脏病恶化的进程。鉴于系膜细胞在维持正常肾脏生理以及肾脏病发生发展中起重要作用,本实验以~3H-TdR摻入率作为指标,研究了大黄对体外培养的系膜细胞增殖的影响。大鼠灌服大黄后的血清和大黄素纯品直接加入培养基中,均能抑制系膜细胞的体外增殖。大黄的这种抑制作用,在一定浓度范围内具有剂量依赖性。灌服大黄后6小时收集的血清抑制最为明显,灌服100mg大黄后血清和50μg/ml大黄素纯品,对系膜细胞增殖的抑制率分别为43％、70％;大黄的这种抑制作用与培养的细胞密度无关。在一定浓度范围内,这种作用具有可逆性。这一研究可能有助于解释大黄治疗某些肾脏疾病的机理,以及指导大黄的临床应用。     

大黄素体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型的药效学研究

[目的]探讨大黄素在体外对单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)和Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的抑制作用.[方法]采用细胞病变抑制法,观察大黄蒽醌类衍生物(大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、芦荟大黄、大黄酚)对HSV-Ⅰ型和HSV-Ⅱ型病毒感染兔肾细胞的抑制作用.[结果]大黄素在无毒浓度3.75μg/mL时能抑制HSV-Ⅰ致细胞病变;在无毒浓度15.0μg/mL时能抑制HSV-Ⅱ致细胞病变.[结论]大黄素在体外能抑制HSV-Ⅰ、HSV-Ⅱ病毒,而其他大黄蒽醌类衍生物则无抑制作用.     

虎杖蒽醌类成分抗前列腺增生活性的效果比较

目的:比较虎杖不同蒽醌类成分抑制前列腺增生的效果,初步探索虎杖蒽醌类成分的结构与抑制前列腺增生作用的关系。方法:利用溶剂法分离虎杖提取液中的游离蒽醌和结合蒽醌,比较结合蒽醌与游离蒽醌以及5种游离蒽醌对前列腺增生模型小鼠前列腺系数的影响。结果:虎杖游离蒽醌可显著降低前列腺增生模型小鼠的前列腺系数,而结合蒽醌无此作用;5种游离蒽醌中,大黄素、芦荟大黄素、大黄酚降低前列腺系数的效果明显(P<0.05),尤以大黄素、芦荟大黄素效果最为显著(P<0.01),大黄酸和大黄素甲醚无此作用(P> 0.05)。结论:虎杖中的游离蒽醌大黄素、芦荟大黄素、大黄酚有抗前列腺增生作用,机制可能与此3种成分的3,6位引入了供电基团如-CH3、-OH、-CH2OH有关。     

基于SREBP1的制何首乌抗肝癌脂代谢蒽醌类活性成分的筛选

目的:通过筛选制何首乌抗肝癌蒽醌类活性成分,为其降脂抗癌作用及其机制研究提供实验依据。方法:MTT法检测制何首乌主要蒽醌类成分对肝癌细胞Bel-7402活力的影响;RT-qPCR及Western blot检测对肝癌细胞脂代谢关键因子SREBP1(Sterol regulatory element binding protein 1)mRNA和蛋白的影响。结果:制何首乌蒽醌类成分对肝癌细胞抑制作用排序为:大黄素>大黄酸>芦荟大黄素>大黄素甲醚>大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷>大黄酚,其中大黄素甲醚、大黄素和大黄酸抑制SREBP1 mRNA和蛋白水平的表达。结论:制何首乌中蒽醌类成分对肝癌细胞作用各异,鉴于大黄素在制首乌中含量最高,大黄素可能在制何首乌抑制肝癌脂代谢中发挥主要作用。     

大黄的生化学研究ⅩⅩⅩ.蒽醌衍生物对免疫功能的抑制作用

大黄蒽醌衍生物大黄酸(rhein),大黄素(emodin)和芦荟大黄素(aloe-emodin)ip70mg/kg×7d对正常小鼠免疫系统有不同程度的抑制作用,如减轻免疫器官的重量,减少抗体的产生,抑制碳粒廓清功能和腹腔巨噬细胞吞噬功能,降低白细胞数,抑制2,4-二硝基氯苯(DNCB)所致的迟发型超敏反应。大黄酸和大黄素浓度为100μg/ml时对体外[~3H]-TdR、[~H]-Urd参人淋巴细胞也有明显抑制作用。     

炎症因子对人肾小球系膜细胞生长的影响及大黄素的抑制作用

本实验在体外观察了 IL-6,TNF 及细菌脂多糖(LPS)对人肾小球系膜细胞(hMC)生长及 IL-6产生的影响,同时观察了大黄素血清及大黄素的作用.发现 IL-6,TNF,LPS 均可刺激 hMC~3H-TdR 掺入(掺入率分别为对照的188%,140%,133%),以 IL-6的刺激作用最强。LPS,TNF 可以刺激 hMC IL-6的产生,提示炎症因子对系膜细胞生长的促进作用具有双重性。同时我们发现含大黄素代谢物的大鼠血清,可以明显拮抗 IL-6,TNF 及 LPS 对 MC 的刺激作用,大黄素在体外还能抑制 hMC IL-6的产生。大黄对炎症因子作用的抑制效应以及抑制 hMC IL-6的产生,为大黄治疗增殖性肾小球肾炎及延缓慢性肾衰进展的作用机理提供了新的资料。     

中药大黄的生化学研究 ⅪⅩ 蒽醌衍生物对线粒体呼吸链的抑制部位

本实验观察了大黄中活性较强的三种蒽醌衍生物如大黄素、大黄酸和芦荟大黄素对大鼠肝线粒体呼吸链四个电子传递复合体的影响。实验结果表明:上述三种蒽醌衍生物是线粒体呼吸链电子传递的抑制。1.大黄酸、大黄素和芦荟大黄素对NADH脱氢酶(复合体Ⅰ)有不同程度的抑制作用。浓度为60μg/ml时,抑制率分别为83.5%、66.0%和45.1%。50%抑制的药物浓度分别为22μg/ml、38μg/ml和72μg/ml。2.大黄素对琥珀酸脱氢酶(复合体Ⅱ)有较强的抑制作用。50%抑制的药物浓度为55μg/ml。而大黄酸和芦荟大黄素对此酶     

蒽醌衍生物对某些以NAD为辅酶的脱氢酶的抑制作用

以前报道,大黄蒽醌衍生物,尤其是大黄素、大黄酸和芦荟大黄素有显著的抗菌和抗癌等作用。其作用机制之一,是抑制细菌和癌细胞的呼吸以及氨基酸和糖代谢中间产物的氧化和脱氢过程。本课题进一步探讨大黄蒽醌衍生物对一些以NAD为辅酶的脱氢酶的影响,为     

大黄蒽醌衍生物与环核苷酸磷酸二酯酶、钙调素相互作用的研究

大黄蒽醌衍生物与钙调素(CaM)依赖的磷酸二酯酶(PDE)的相互作用表明它们可作用于钙调素。其中大黄酸结合CaM并抑制CaM依赖的磷酸二酯酶(CaM-PDE);而大黄素、大黄酚和芦荟大黄素     

转化生长因子及大黄酸对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白功能的影响

目的对人肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白-1（GLUT1）进行鉴定。研究GLUT1的作用特点,TGF-β1对其影响以及大黄酸的干预作用。方法分别用RT-PCR,免疫荧光染色,流式细胞仪和［3H］-2脱氧葡萄糖摄入率,对系膜细胞GLUT1mRNA表达,蛋白质分布和功能进行鉴定。观察不同浓度TGF-β1在加或不加大黄酸的情况下对系膜细胞葡萄糖摄人以及GLUT1mRNA表达的影响。结果人类肾小球系膜细胞上存在功能性的GLUT1。TGF-β1能刺激系膜细胞GLUT1mRNA的表达,并增加系膜细胞葡萄糖的摄入率[TGF-β1（836±35）％,对照（154±12）％、P＜0.01]。大黄酸对正常糖浓度培养条件下系膜细胞糖摄入无影响,但能明显抑制TGF-β1增加系膜细胞糖摄入的作用［TGF-β1为（198±28）％、大黄酸为（576±12）％,P＜0.01]。结论首次报道人系膜细胞上存在GLUT1,TGF-β1能从转录水平上调控GLUT1的功能,使系膜细胞葡萄糖摄入增加,但该作用能够明显地被大黄酸所抑制。     

大黄对消化系统的药理作用研究及临床应用概况

大黄为科多年生草本植物掌叶大黄、唐古特大黄、药用大黄的干燥根及根茎。主要成分有蒽醌类：大黄素、大黄酸、芦荟大黄等;大黄多糖;大黄鞣质：水解型和缩合型。目前,研究较广泛的是RG-鞣质。近年来,大黄的药理研究进展很快,在临床上的用途也越来越广泛,本文仅就大黄对消化系统药理作用研究及临床应用作一综述。     

表面活性剂对大黄总蒽醌提取率的影响

大黄具有清热解毒、抗菌消炎、泻热通肠等功效。其主要化学成分为结合和游离的大黄酸、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚和芦荟大黄素等蒽醌类化合物。游离蒽醌难溶于水,溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。结合蒽醌易溶于水和乙醇,难溶于氯仿和乙醚等有机溶剂。大黄总蒽醌的提取多采用70%~80%乙醇回流提取[1,2],但所使用的乙醇体积分数高,回收耗能高。利用表面活性剂能够提高姜黄中姜黄素提取率[3],因此本实验研究了不同表面活性剂对大黄中总蒽醌提取率的影响,结果表明十二烷基硫酸钠(SDS)可大幅度提高大黄中总蒽醌的提取率。1仪器与试药AE—240…     

大黄素对结肠癌细胞凋亡相关分子Caspase-3的作用

大黄素(Emodin,EM)是中药大黄的主要有效成分之一,为蒽醌类衍生物。有研究表明大黄素不仅具有抗炎、免疫调节等药理作用,而且近期的研究还发现大黄素可以通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制和杀伤肿瘤细胞[1,2]。Caspases是一组存在于胞质溶胶中的半胱氨酸蛋白酶,目前确认的有11种,它们被认为参与了细胞凋亡的途径,Caspase-3是凋亡过程中最主要的终末剪切酶,参与了细胞凋亡的内凋亡途径和外凋亡途径。结肠癌的发病率目前呈逐年上升趋势,对于晚期结肠癌的治疗多采用化疗,但疗效欠佳,因此有必要寻找一些对结肠癌可能有效地药物单体。本研究采用大黄素处理HT-29细胞,探讨大黄素对HT-29细胞Caspase-3表达的影响,从而进一步探讨大黄素诱导HT-29细胞凋亡的机制,为大黄素今后可能运用于结肠癌的治疗提供实验依据。     

大黄中蒽醌类化合物对大鼠肠平滑肌条收缩作用影响的研究

目的:比较大黄中五种主要的蒽醌类化合物对大鼠游离空肠平滑肌条(JSMF)和结肠平滑肌条(CSMF)收缩作用的影响。方法:取正常SD大鼠制备游离JSMF及CSMF,观察大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚和芦荟大黄素对其收缩作用及其结构对药效的影响。结果:大黄素对JSMF及CSMF的收缩有双向调节作用;大黄素甲醚和大黄酸可抑制JSMF收缩,并呈剂量依赖性;5种蒽醌化合物在浓度超过20μmol/L时,均可抑制CSMF收缩。结论:5种蒽醌化合物对肠道平滑肌条收缩的影响可能与其7位羟基和3位羧基及取代基的极性、立体结构、受体的分布有关。     

大黄对增生性肾小球肾炎大鼠肾小球细胞外基质的影响

研究大黄对增生性肾小球肾炎大鼠肾小球细胞外基质主要成分－纤维连接素的影响,方法：运用大鼠肾毒血清性肾为作为增生性肾小球肾炎的模型,观察大黄治疗后纤维连接率的变化及其对系膜区面积的影响。结果：大黄可显著抑制纤维连接素的产生,抑制肾小球系膜区的扩张,结论：大黄通过抑制细胞外基质增生延缓了增生性肾小球肾炎的进行性发展,保护了肾功能。     

泻心汤不同配伍中蒽醌类成分的变化研究

目的建立测定泻心汤中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚游离与结合型的方法,并探索配伍对各成分的影响。方法采用AgilentHypersilODS色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸(75∶25);体积流量:1.0mL/min;柱温:30℃;检测波长:440nm,进样量:50μL。不同配伍中蒽醌类成分的差异采用SPSS软件进行方差分析。结果建立了同时测定5种蒽醌类成分的方法,这5个成分线性关系良好,加样回收率稳定。与单味大黄相比,大黄-黄芩中5种蒽醌类成分增加;黄连-大黄中芦荟大黄素、大黄素、大黄酚的总量增加,而大黄酸和大黄素甲醚总量减少;泻心汤中大黄酸总量减少,大黄素、大黄酚和大黄素甲醚总量增加,5种蒽醌类成分总和增加。结论本法准确可靠,重现性好,结果稳定,适合于泻心汤中蒽醌类成分的分析。并且不同配伍对泻心汤中蒽醌类成分有影响。     

大黄的生化学研究ⅩⅩⅩⅨ.蒽醌衍生物抗厌氧菌的实验研究

大黄蒽醌衍生物大黄酸、大黄素和芦荟大黄素对临床常见的100株厌氧菌有很强的抑菌作用。8 μg/ml能使76～91%的厌氧菌生长被抑制,其中对最常见的脆弱类杆菌,能抑制90～100%菌株的生长。与常用抗厌氧菌药物比较,大黄蒽醌衍生物对厌氧菌的MIC虽然略高于甲硝唑,但与其他抗厌氧菌药物比较,如头孢甲氧噻吩等,其MIC大致相近或优于它们。实验还表明大黄蒽醌衍生物抗厌氧菌主要是抑菌而非杀菌。其作用部位可能是干扰厌氧菌细胞壁的形成和细胞膜的通透性。     

大黄的生化学研究ⅩⅩⅩⅨ.蒽醌衍生物抗厌氧菌的实验研究

大黄蒽醌衍生物大黄酸、大黄素和芦荟大黄素对临床常见的100株厌氧菌有很强的抑菌作用。8 μg/ml能使76～91%的厌氧菌生长被抑制,其中对最常见的脆弱类杆菌,能抑制90～100%菌株的生长。与常用抗厌氧菌药物比较,大黄蒽醌衍生物对厌氧菌的MIC虽然略高于甲硝唑,但与其他抗厌氧菌药物比较,如头孢甲氧噻吩等,其MIC大致相近或优于它们。实验还表明大黄蒽醌衍生物抗厌氧菌主要是抑菌而非杀菌。其作用部位可能是干扰厌氧菌细胞壁的形成和细胞膜的通透性。     

大黄及低密度脂蛋白对系膜细胞生长的影响

高脂血症可以导致肾脏损伤,促进肾小球硬化的发生.本文观察了低密度脂蛋白(LDL)对系膜细胞(MC)生长的影响,发现 LDL 对 MC 具有双向性作用。低浓度(25mg/L)促进系膜细胞~3H-TdR 掺入,浓度>1250mg/L 时则抑制 MC 生长,其抑制作用与浓度成正比.当 LDL 浓度达500mg/L 时对系膜细胞有直接损伤作用.LDL 对MC 的这两种作用均可能导致系膜的病变,大黄素可以抑制细胞~3H-TdR 掺入,并且抑制 LDL 对 MC 的刺激作用。可见大黄除了具有改善高脂血症的作用外,还能直接影响 LDL 对系膜细胞的损伤,从而有防治肾小球硬化作用.     

大黄游离蒽醌的制备与纯化

从中药大黄中提取总蒽醌（结合和游离２类）,经水解后用水化学试剂或大孔树脂制备总游离蒽醌（含大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄酚和大黄素甲醚）,进一步纯化得大黄酸和大黄素。