云南地区汉族2型糖尿病患者二甲基精氨酸二甲胺水解酶1、二甲基精氨酸二甲胺水解酶2基因单核苷酸多态性与动脉粥样硬化关系的研究

目的探讨云南地区汉族T2DM患者发生动脉粥样硬化(AS)与二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)基因rs233113、二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(DDAH2)基因rs805304单核苷酸多态性(SNP)的相关性。方法选取2016年10月至2018年12月于昆明医科大学第一附属医院内分泌二科住院的T2DM患者464例,根据有无AS分为单纯T2DM组(n=208)和合并AS组(AS,n=256)。另选取同期我院体检健康人群294名为正常对照(NC)组。ELISA法检测各组血浆非对称性二甲基精氨酸(ADMA)的浓度,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)对DDAH1、DDAH2基因SNP进行基因分型。结果 T2DM、AS组CC基因型频率高于NC组(P0.05),AS组CC基因型频率高于T2DM组(P0.05)。AS组DDAH1基因rs233113 AA基因型ADMA水平低于TT+AT基因型(P0.05),DDAH2基因rs805304 CC基因型LDL-C水平高于AA、AC基因型(P0.05)。Logistic回归分析显示,SBP、FPG、LDL-C、ADMA、DDAH2基因rs805304位点CC基因型是T2DM患者发生AS的影响因素。结论云南地区汉族T2DM患者DDAH2基因rs805304CC基因型可能与AS易感性相关,携带该基因型患者LDL-C水平升高。DDAH1基因rs233113位点SNP可能与T2DM发生AS无相关性,携带该位点AA基因型患者ADMA水平降低。     

DDAH2基因－449G/C多态性及ADMA水平与2型糖尿病合并动脉粥样硬化的相关性

目的探讨二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(DDAH2)基因-449G/C多态性及非对称性二甲基精氨酸(ADMA)水平与2型糖尿病合并动脉粥样硬化的相关性。方法运用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术对146例健康对照者和238例2型糖尿病患者[其中未合并动脉粥样硬化组(D0组)80例,合并早期动脉粥样硬化组(D1组)71例,合并中晚期动脉粥样硬化组(D2组)87例]的DDAH2基因-449G/C多态性进行检测,应用酶联免疫吸附法检测血浆ADMA浓度,并比较分析各组间基因型、等位基因频率及相关临床指标。结果 2型糖尿病合并动脉粥样硬化组(D1+D2组)DDAH2基因-449G/G基因型频率及G等位基因频率高于D0组(P0.05)。2型糖尿病组中,DDAH2基因-449G/G基因型携带者具有较高的ADMA水平(P0.05);ADMA水平在D1+D2组D0组,且D2D1D0组(P0.01)。Logistic回归显示,血浆ADMA是2型糖尿病合并动脉粥样硬化发生与发展的危险因素,DDAH2基因-449G/G基因型是2型糖尿病合并动脉粥样硬化发生的危险因素。结论在云南地区汉族人群中,DDAH2基因-449G/G基因型可能是2型糖尿病合并动脉粥样硬化发生的遗传易感因子,该基因型携带者具有较高的ADMA水平,血浆ADMA水平可作为2型糖尿病动脉粥样硬化发生及发展的预测因子。     

二甲基精氨酸二甲胺水解酶表达调控及与疾病的关系

非对称性二甲基精氨酸是一种内源性的一氧化氮合酶抑制剂,可竞争性地抑制一氧化氮合酶活性,减少一氧化氮的生成,并可通过直接诱导氧化应激,参与多种疾病如冠心病、高血压、慢性肾脏疾病、糖尿病和恶性肿瘤的发生发展,是心血管疾病新的风险因子.二甲基精氨酸二甲胺水解酶是代谢灭活非对称性二甲基精氨酸的主要酶.二甲基精氨酸二甲胺水解酶表达下调或活性降低可引起体内非对称性二甲基精氨酸聚集,从而促进非对称性二甲基精氨酸相关疾病的发生发展.本文就二甲基精氨酸二甲胺水解酶的组织分布、功能及调控,以及与疾病关系的研究进展进行综述.     

冠心病病人DDAH2基因-449G/C多态性对血浆ADMA水平的影响

目的分析冠心病病人二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(DDAH2)基因-449G/C多态性及对血浆非对称性二甲基精氨酸(ADMA)水平的相关性。方法选取2016年12月—2018年12月在我院心内科住院行冠状动脉造影术病人412例,根据造影结果分为冠心病组(212例)及对照组(200例)。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测两组DDAH2基因-449G/C多态性;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组血浆ADMA水平,并将冠心病组病人按年龄分为5组,检测各组血浆ADMA水平。结果冠心病组血浆ADMA水平高于对照组(P<0.05);冠心病组血浆ADMA水平与年龄呈正相关(r=0.479,P<0.05)。结论DDAH2基因遗传多态性(-449G/C,rs805305)与冠心病病人血浆ADMA水平相关,且ADMA水平与年龄呈正相关。     

抵抗素基因299G/A多态性与2 型糖尿病的相关性研究

2001年Steppan等研究罗格列酮药理作用时发现并提出抵抗素可能是连接肥胖和糖尿病(DM)之间的桥梁。迄今已发现30多个抵抗素基因多态性位点，Osawa等认为其中的内含子2区299G／A多态性可能与2型糖尿病(T2DM)某种表型相关。本研究拟探讨抵抗素基因299G／A多态性与中国汉族人T2DM的相关性。     

ACE2基因A9570G多态性与2型糖尿病及糖尿病心肌病的相关性研究

目的 探讨血管紧张素转化酶2(angiotensin l converting enzyme 2,ACE2) 基因A9570G多态性与2型糖尿病(Type 2 diabetes,T2DM)及糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)的相关性.方法选择广东地区无血缘关系的T2DM患者共358例,其中84例并发DMC,所有病人按是否并发DMC分为DMC组和DM组,应用聚合酶链反应和限制性内切酶片段长度多态性的方法检测ACE2基因A9570G多态性,并结合临床、生化指标及超声心动图参数进行分析.结果在男性,对照组和T2DM组等位基因频率及基因型构成差异无统计学意义(χ2=0.002,P=0.964),但DCM组G等位基因频率/G基因型分布高于对照组及T2DM组,差异有统计学意义(χ2=4.409,P=0.036,χ2=6.105,P=0.013).在女性,三组间等位基因频率及基因型构成差异无统计学意义(χ2=0.037,P=0.981及χ2=0.890,P=0.926).根据不同基因型对DMC组患者进行亚组分析发现,男性G基因型患者反映心脏早期舒张功能的室间隔舒张末期厚度(IVSTd)值明显高于A等位基因,差异有统计学意义(t=2.243,P=0.029);女性则未观察到这种差异(F=1.156,P=0.324).结论 ACE2基因A9750G多态性可能与男性T2DM并发DCM的遗传易感性相关,并且与其早期舒张功能不全严重程度有一定关系.     

血管紧张素原基因-20A/C多态性与2型糖尿病肾病相关性研究

目的 探讨血管紧张素原(AGT)基因-20A/C多态性与DN关系. 方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)对292例T2DM患者(正常白蛋白尿组148例,微量白蛋白尿组105例,大量白蛋白尿组39例)及157名正常对照(NC)者进行AGT基因-20A/C多态性检测.结果 男性大量白蛋白尿组等位基因C频率高于正常白蛋白尿组(P=0.046).Logistic回归分析显示,携带等位基因C(OR:4.268,P=0.043,95％CI:1.044～17.447)与男性大量白蛋白尿相关. 结论 AGT基因-20A/C多态性可能与浙江地区汉族人群男性T2DM患者出现大量白蛋白尿相关.     

IL-1β基因启动子-511C/T多态性与2型糖尿病相关性研究

目的　探讨白细胞介素 - 1β(IL- 1β)基因启动子 - 5 11C/ T多态性与 2型糖尿病 (T2 DM)的相关性。方法　应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR- RFL P)技术检测 135例 T2 DM患者和 14 0例正常对照者(对照组 ) IL - 1β基因型及血糖、血脂水平。结果　 IL - 1β基因型 CC、CT和 TT频率在 T2 DM组和对照组分别为12 .6 %、5 1.9%、35 .5 %和 2 5 .7%、4 5 .7%、2 8.6 % ;等位基因 C、T频率在 T2 DM组和对照组分别为 38.5 %、6 1.5 %和 4 8.6 %、5 1.4 %。其基因型频率和等位基因频率在 T2 DM组和对照组比较均有显著性差异 (P<0 .0 5 )。等位基因频率的相对风险分析发现 ,T等位基因携带者患 T2 DM的风险是 C等位基因的 1.5 0 7倍。结论　IL- 1β基因启动子 - 5 11C/ T多态性与 T2 DM的发病有相关性 ,T等位基因可能是 T2 DM的易感基因     

二甲酸精氨酸二甲胺水解酶-非对称性二甲基精氨酸系统对老年冠心病患者血管内皮细胞的影响

目的探讨二甲酸精氨酸二甲胺水解酶-非对称性二甲基精氨酸(DDHA-ADMA)系统对老年冠心病患者组织因子(TF)表达的影响。方法选取45例老年冠心病患者为冠心病组,同时选取40例老年健康体检者为对照组,分别采用RT-PCR测定两组内皮祖细胞DDAH mRNA表达,酶联免疫法测定两组ADMA表达,采用流式细胞仪测定两组细胞内一氧化氮酶(NOS)、TF、溶血性磷脂酰胆碱(LPC)水平。结果冠心病组DDAH mRNA为(1.14±0.21),对照组为(0.07±0.04),随着患者Gensini积分升高,DDAH mRNA相对表达量显著下降,与对照组相比,冠心病组ADMA含量显著上升,且随着患者Gensini积分升高ADMA含量显著升高,不同积分间相比差异有统计学意义。冠心病组NOS、TF、LPC水平显著高于对照组,且随着Gensini积分升高,NOS、TF、LPC水平显著增加(P0.05)。经相关性分析可知,DDAH与NOS、TF、LPC呈负相关,而ADMA与NOS、TF、LPC呈正相关。结论老年冠心病病情的发生及进展与DDAH-ADMA通路参与NOS、TF、LPC表达有密切关系。     

脂联素基因启动子区-11377 C/G多态性与2型糖尿病及糖尿病肾病的关系

目的探讨桂北地区汉族人群脂联素基因启动子区-11377 C/G单核苷酸多态性各基因型及等位基因频率分布,分析其与2型糖尿病（T2DM）及糖尿病肾病（DN）的关系。方法采用PCR-RFLP技术检测100例健康对照者及232例T2DM患者（其中DN 105例）的脂联素基因-11377 C/G位点基因型及等位基因频率分布。结果 T2DM患者脂联素基因启动子区-11377的GG基因型频率和G等位基因频率高于健康对照者（P〈0.05,Or=1.625,95%CI 1.05～2.51）;脂联素基因启动子区-11377基因型及等位基因频率分布在T2DM、DN患者间无统计学意义;T2DM患者CG＋GG基因型BMI高于CC基因型（P〈0.05）。结论脂联素基因启动子区-11377 C/G与桂北地区汉族人群T2DM发病有相关性,G等位基因可能是T2DM发病的遗传易感基因。     

C2CD4A/C2CD4B基因多态性与2型糖尿病相关性的研究

T2DM是以IR和糖脂代谢异常为特征的一种内分泌及代谢疾病。C2CD4A/C2CD4B主要存在于内皮细胞。C2CD4A/C2CD4B属于同一个基因家族,可编码核因子、调节可控制细胞结构基因的功能。多项研究提示,C2CD4A和C2CD4B基因多态性与T2DM发生、发展有关,但其影响血糖稳态的分子生物学机制尚不明确。     

IL-6基因启动子区-634C/G多态性与糖尿病肾病的相关性

目的 探讨白细胞介素6（IL-6）基因启动子区-634C／G多态性与糖尿病肾病（DN）的关系。方法 在昆明地区汉族人中，应用PCR—RFLP方法和等位特异PCR（ASPCR）方法，对246例2型糖尿病（T2DM）患者（正常白蛋白尿组88例，微量白蛋白尿组93例，大量白蛋白尿组65例）和101例健康对照者（NC组）的IL-6基因启动子区-634C／G多态性进行检测。结果 （1）微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组、微量、大量白蛋白尿组的G／G基因型频率均高于正常白蛋白尿组（P=0．001），大量白蛋白尿组亦高于微量白蛋白尿组（P=0．045）。（2）大量白蛋白尿组和大量、微量白蛋白尿组的G等位基因频率均高于正常白蛋白尿组（P=0．031），大量白蛋白尿组亦高于微量白蛋白尿组（P=0．005）。（3）T2DM组中，GG基因型组UAER明显高于CG、CC基因型组（P〈0．01）。（4）Logistic回归分析表明：IL-6基因启动子区-634G／G基因型、病程是DN发生的危险因素。结论在昆明地区汉族人中，IL-6基因启动子区-634G／G基因型可能是DN发生的危险因素，此基因型携带者UAER明显增高；G等位基因可能是DN发展的危险因素之-。     

抵抗素基因外显子4第1308G/A多态性与2型糖尿病相关性研究

目的研究抵抗素基因外显子4第1308的位点核苷酸G／A变异与武汉地区2型糖尿病和肥胖者发病风险的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测武汉地区汉族160例抵抗素基因外显子4第1308位点的G／A变异。结果2型糖尿病组和肥胖组的GG、从基因型及G／A等位基因频率与正常组比较,均有显著性差异（P〈0．05）。GG基因型携带者使个体患肥胖和糖尿病的危险性分别增加1．33倍和2．22倍,将G等位基因视为暴露因素,其使个体患肥胖以及糖尿病的危险性分别增加1．12倍和1．80倍。结论抵抗素基因外显子4第1308位点核苷酸多态性与2型糖尿病和肥胖的易感性相关,等位基因G可能是由肥胖致2型糖尿病的一个重要的相关因素。     

血浆非对称性二甲基精氨酸水平与2型糖尿病患者脑微出血的相关性研究

目的探讨血浆非对称性二甲基精氨酸(ADMA)与2型糖尿病患者脑微出血(CMB)的相关性。方法 122例2型糖尿病患者采用3.0T MRI确定是否存在CMB,并分为CMB组27例,非CMB组95例。应用ELISA法检测患者血浆ADMA水平。结果 CMB组较非CMB组年龄偏大[(62.25±8.01)岁vs(57.68±11.15)岁,P=0.020)],高血压比例高[(77.8%vs 44.2%,P=0.002)],血浆ADMA升高[(1.6(1.2,2.0)μmol/L vs 1.3(1.1,1.5)μmol/L,P=0.004)],估算肾小球滤过率[81(70,94)ml/(min·1.73m2)vs 99(82,112)ml/(min·1.73m2),P=0.000]降低。血浆高ADMA水平是CMB存在及部位(深部/幕下型)独立危险因素(OR=3.564,95%CI:1.038~12.235,P=0.043;OR=8.657,95%CI:1.896~39.517,P=0.005)。结论 2型糖尿病患者血浆ADMA水平与CMB的存在及CMB发生位置密切相关。     

胰岛素受体底物-2基因多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的 研究北京地区汉族人群中胰岛素受体底物-2（IRS-2）基因密码子1057g/a多态性与2型糖尿病及其中间表型的相关性。方法 选取北京地区的中国汉族患者110例，对照组80例。用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCR-RFLP）的方法检测IRS-2基因密码了1057g/a多态性。结果 （1）IRS-2基因密码子1057g/a多态性的a等位基因频率在糖尿病组和对照组中分别为26.4%和36.3%。（2）糖尿病组aa基因型频率明显低于对照组，分别为5.5%和18.7%(P=0.016),Logistic相关分析表明：aa基因型为2型糖尿病的保护性因素，OR值为0.28(95%CI=0.09-0.91,P=0.03)。（3）不同基因型组间血压、血脂，胰岛素抵抗指数及胰岛β细胞功能指数等均差异无显著性。结论 中国北方地区汉族人群中IRS-2基因密码子1057g/a多态性的aa基因型在2型糖尿病中明显减少。但2型糖尿病各种中间表型自欺欺人持征在不同基因型间均无明显差异。上述结果有待于进一步扩大样本量来加以确认。     

沙格列汀对过氧化氢诱导损伤的血管内皮细胞二甲基精氨酸二甲胺水解酶/非对称性二甲基精氨酸/内源性一氧化氮合酶通路影响的研究

目的观察二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制剂沙格列汀对过氧化氢(H2O2)诱导损伤的血管内皮细胞二甲基精氨酸二甲胺水解酶/非对称性二甲基精氨酸/内源性一氧化氮合酶(DDAH/ADMA/eNOS)通路的影响。方法以培养人脐静脉内皮细胞株(HUVEC)作为靶细胞,在内皮细胞培养基中加入100μmol/L的H2O2制备细胞损伤模型,以20μmol/L沙格列汀进行干预,观察24~72h,检测细胞上清一氧化氮(NO)含量、ADMA浓度,检测细胞中NOS活性、DDAH活性及DDAH蛋白表达量。结果H2O2作用HUVEC后,细胞上清中NO含量降低,而ADMA浓度增加(P0.05)。细胞中NOS活性、DDAH活性、DDAH-Ⅱ蛋白表达量降低(P0.05);而加入沙格列汀,细胞上清中NO含量升高,ADMA浓度降低(P0.05)。细胞中NOS活性、DDAH活性、DDAH-Ⅱ蛋白表达量升高(P0.05)。结论沙格列汀通过对DDAH/ADMA/eNOS通路的调节作用改善H2O2诱导的内皮细胞NO生成减少。     

PPARγ2基因多态性与2型糖尿病相关性研究

目的 旨在研究过氧化物酶增殖物活化受体γ2（PPARγ2）基因Pro12Ala多态性与2型糖尿病相关性。方法 选取北京地区汉族101对病例一对照配偶对，应用聚合酶链反应一长度多态性方法进行基因型测定。结果 对照组中携带Ala12等位基因组，血清载脂蛋白B明显低于Pro12Pro基因型组（P＝0.006)；但Pro12Ala多态性与2型糖尿病不相关（OR＝1．48，95％CI=0．52－4．18，P＝0．461）。结论 在北京汉族人群中，PPARγ2基因Pro12Ala多态性与脂肪代谢异常有关，PPARγ2基因多态性可能不是2型糖尿病主要的致病因素。     

白细胞介素-6基因启动子-174G/C、-572C/G多态性与冠心病的相关性

目的研究白细胞介素-6(IL-6)基因启动子-174G/C和-572C/G多态性在冠心病患者及正常人中的分布。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测90例冠心病患者与95名健康成年体检者的IL-6基因启动子-174和-572的多态性,比较两组IL-6启动子基因型和等位基因的分布频率。结果IL-6基因启动子-174位点的GG、CG和CC基因型在冠心病患者中分别为100、0%、0;在健康成年者中分别为98.95%、1.05%、0。冠心病组与对照组基因的分布频率差异无统计学意义;-572位点的CC、CG和GG基因型在冠心病组中分别为54.44%、43.33%、2.22%;在健康成年者中分别为71.58%、27.37%、1.05%。两组的基因分布频率差异有统计学意义。结论IL-6基因启动子的-174位点变异率极低,其变异与冠心病的发病无明显相关性;而启动子-572位点的多态性分布与冠心病的发病具有一定程度的相关性。     

冠心病与白细胞介素6基因-572C/G多态性的相关性

为了解冠心病与白细胞介素6基因-572C/G多态的相关关系,应用聚合酶链反应-限制性片长多态性分析方法测定了139例冠心病患者和168例正常对照者的白细胞介素6基因-572C/G多态性,并结合疾病临床谱、冠状动脉造影结果探讨了其与冠心病的相关关系.结果发现,-572C/G基因型和等位基因频率在两组间存在明显差异,冠心病组GG基因型和G等位基因频率均显著高于对照组(P<0.01);相对于CC基因型,暴露于CG基因型、GG基因型的相对危险度分别为1.37(95%CI 0.86～2.20,P>0.05)和2.85(95%CI1.32～6.13,P<0.01),校正了血压、血糖和血脂等传统危险因素的影响后,GG基因型的相对危险度(95%CI 1.22～6.65, P<0.05)仍然具有统计学意义;但-572C/G多态性在稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、心肌梗死患者间以及在单支病变组、双支病变组、三支病变组间的分布均无明显差异(P>0.05).结果提示,白细胞介素6基因-572GG基因型可能是中国汉族人群冠心病发病的易感基因之一.