新颖的抗体介导心肌细胞毒性损害

应用免疫转印技术研究扩张型心肌病患者抗心肌自身抗体,发现靶抗原是心肌细胞线粒体30Kd和细胞膜52Kd 多肽.抗心肌抗体与心肌细胞膜抗原作用,无需补体参与,直接引起细胞毒性损害,具有钙浓度依赖性,钙通道阻滞剂具有预防作用.而正常人血清无此反应.本文揭示了一种新颖的心肌细胞毒性反应。     

国人扩张型心肌病患者血清中抗心肌线粒体肽类抗体的研究

应用免疫转印技术,研究扩张型心肌病患者的抗心肌抗体,发现患者血清中存在抗心肌线粒体30kD多肽抗体,阳性率为52.38％;而对照组中的冠心病患者和正常人均为阴性。提示ADP/ATP载体可能是扩张型心肌病自身免疫应答的靶抗原分子。     

不依赖补体的抗体介导心肌细胞毒试验及其原理

应用心肌细胞毒试验和全细胞膜片钳技术探讨扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者血清中抗心肌线粒体ＡＤＡ／ＡＴＰ载体自身抗体对心肌细胞的影响。发现该抗体与心肌细胞膜抗原决定簇发生交叉反应，增加细胞膜的钙通透性，引起钙超负荷和细胞死亡；１８例ＤＣＭ患者ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体介导细胞毒性损害不需补体参与，在相同反应时间内，心肌细胞死亡率随着反应体系中钙浓度增加而上升，具有钙依赖性的异搏停可抑制该效应，抗体介导心肌细胞钙电流增加和钙超负荷是细胞毒性反应的主要因素，而不是通过激活补体产生的细胞毒性作用。     

扩张型心肌病抗心肌线粒体ADP/ATP载体自身抗体与Th细胞亚群分析

目的 :探讨扩张型心肌病 (DCM)的体液免疫学发病机制。方法 :借助免疫转印技术及流式细胞仪技术同步分析了 33例 DCM患者和 2 8例正常人的血清中抗心肌线粒体 ADP/ATP载体自身抗体和 Th细胞亚群。结果 :DCM组 Th2 细胞在外周血淋巴细胞中占 (0 .5 3± 0 .2 3) % ,对照组 Th2 细胞占 (0 .2 2± 0 .18) % ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;DCM组抗心肌线粒体 ADP/ATP载体抗体的检出率 (6 0 .6 1% )明显高于对照组(2 1.43% ) (P <0 .0 1) ;DCM抗心肌线粒体 ADP/ATP载体自身抗体 ,阳性组中 Th2 细胞在外周血淋巴细胞中占 (0 .6 7± 0 .31) % ,阴性组 Th2 细胞占 (0 .2 8± 0 .14) % ,两组比较差异有显著性 (P<0 .0 1)。结论 :DCM中 Th2细胞与抗心肌线粒体 ADP/ATP载体自身抗体的产生有关 ,而且 Th2 细胞和抗心肌线粒体 ADP/ATP载体自身抗体参与了 DCM的病理过程。体液免疫反应的异常在 DCM的发病机制中起着十分重要的作用。     

β受体阻滞剂治疗扩张型心肌病药理机制的探讨

采用心肌细胞毒试验，对１１例扩张型心肌病患者血清中抗β受体抗体进行研究，发现该抗体引起心肌细胞毒性损害，具有钙依赖性；倍他乐克能够抑制细胞毒性反应，使细胞死亡率均值从７０．８２±８．０４％降到３８．５５±１０．５２％（Ｐ＜０．０１）；正常人血清无此反应．提示抗β受体抗体通过受体门控机制介导心肌细胞毒性损害；β受体阻滞剂可以预防免疫性心肌损害，是治疗扩张型心肌病的新型药理机制．     

扩张型心肌病抗心肌抗体的临床观察及其针对性治疗

目的:探讨扩张型心肌病(DCM)的发病机制,观察针对抗心肌抗体进行免疫学治疗的临床疗效和预后.方法:对2001年1月-2007年12月入院治疗的DCM患者(747例)的病史、诊治过程、随访情况进行回顾性分析.结果:747例中抗心肌抗体阳性者527例(70.55%),随访时间为0.9-7.2年,抗心肌线粒体ADP/ATP载体抗体阳性患者(A组)治疗后平均左室舒张末期内径(LVEDd)为(62.53±9.17)mm,左室射血分数(LVEF)为(37.65±11.15)%;抗β1-肾上腺素能受体抗体(抗β1-受体抗体)阳性患者(B组)治疗后LVEDd (61.35±5.68)mm, LVEF (40.65±12.78)%;抗ADP/ATP载体抗体和抗β1-受体抗体均阳性患者(C组)治疗后LVEDd(61.28±7.72)mm, LVEF(38.35±7.05)%.3组与治疗前比较LVEDd差异均有统计学意义(P<0.05)、NYHA心功能分级均改善Ⅰ～Ⅱ级.结论:自身免疫是DCM的常见致病因素,针对抗ADP/ATP载体抗体使用地尔硫和针对抗β1-受体抗体使用美托洛尔治疗DCM均可明显改善患者心脏功能及心室重构,改善预后.     

扩张型心肌病抗心肌线粒体ADP／ATP载体自身抗体的研究

应用免疫转印技术和细胞毒试验检测２１例扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者血清中抗猪心肌线粒体ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体。结果发现，ＤＣＭ患者血清中可检测出抗心肌线粒体３０千道尔顿（ｋＤ）多肽（ＡＤＰ／ＡＴＰ载体）自身抗体，检出率为５２．４％，而１９例对照组血清均为阴性（Ｐ＜０．００１）；该抗体与猪心肌细胞膜５２ｋＤ多肽发生交叉反应，直接引起的心肌细胞毒损害具有钙依赖性，可通过钙拮抗剂预防。本研究提示，抗心肌线粒体ＡＤＰ／ＡＴＰ载体自身抗体可能是引起ＤＣＭ心肌功能损害的原因之一，检出该抗体可作为ＤＣＭ的重要诊断指标。     

扩张型心肌病的早期干预

扩张型心肌病 ( DCM)的主要病因是病毒持续感染和自身免疫反应。在 DCM早期可以检测出抗心肌自身抗体 ,抗体介导心肌细胞损伤机制已基本阐明 ,阻止抗心肌抗体介导心肌损伤已成为早期治疗 DCM的有效方法之一。根据分子模仿理论 ,发现 ADP/ ATP载体蛋白与柯萨奇 B3 -病毒外壳蛋白存在同源性 ,酶联免疫吸附试验证实抗 ADP/ ATP载体 2 7- 36肽抗体可以与来源于柯萨奇 B3 病毒 1 2 1 8- 1 2 2 8肽发生免疫反应 ;鼠肝炎病毒、人类巨细胞病毒与 β1-肾上腺素能受体之间具有相同的抗原决定簇 ,还发现抗ADP/ ATP载体抗体可以与钙通道蛋白…     

肠病毒感染及抗ADP/ATP载体抗体在病毒性心脏病发病中的意义

目的 :探讨肠病毒感染与抗二磷酸腺苷 /三磷酸腺苷 (ADP/ ATP)载体抗体在病毒性心脏病发病中的意义。方法 :应用逆转录聚合酶链式反应 (RT- PCR)和免疫转印法对临床诊断为病毒性心肌炎 (VMC)和扩张型心肌病 (DCM)患者进行肠病毒核糖核酸 (RNA)及抗 ADP/ ATP载体抗体的检测。结果 :RT- PCR方法检测肠病毒 RNA,VMC组 (n =74) 4 2例 (56.8% )阳性 ,DCM组 (n=2 6) 1 1例 (42 .3% )阳性。与健康组 (n =30 )比较具有显著性差异 (分别 P <0 .0 1 ,P <0 .0 5) ;肠病毒感染与 DCM患者心脏功能降低有明显相关性。免疫转印法检测 VMC(n =34)和 DCM(n =2 6)患者血清抗 ADP/ ATP载体抗体 ,VMC组 2 3例 (67.6% )阳性 ,DCM组 1 2例 (46.2 % )阳性 ,而健康组均为阴性 ;抗 ADP/ ATP载体抗体和肠病毒 RNA的检出相关 (r=0 .442 )。结论 :肠病毒RNA和抗 ADP/ ATP载体抗体在病毒性心脏病患者中检出具有相关性 ,对临床上出现前驱感染和心脏症状的患者 ,及时进行肠病毒 RNA、CVB- Ig M、抗 ADP/ ATP载体抗体的检测 ,有助于 VMC和 DCM的早期诊断。     

病毒性心脏病与抗腺苷酸转位酶自身抗体的研究进展

抗心肌线粒体腺苷酸转位酶自身抗体是一种仅存在于病毒性心肌炎和扩张型心肌病的特异性抗体。该抗体可能通过两种途径即干扰心肌细胞能量代谢和介导细胞病毒性作用引起心肌损伤,从而在病毒性心肌炎和扩张型心肌病的发病中起着重要的作用。     

钙通道作为心脏自身抗原

一般认为Ca~(2+)代谢异常与心肌疾病发生有关,Ca~(2+)超负荷可能影响心肌的能量代谢及心室功能,但其机制不清。因为心肌炎与心肌病病人体内存在抗 ADP/ATP载体的自身抗体,作者研究了抗 ADP/ATP载体抗体及心肌炎病人自身抗体对离体培养心肌细胞 Ca~(2+)电流的影响。临床怀疑为心肌炎的18例病人,据心肌活检组织病理学检查,9例为急性恢复期病人,另9例为已恢复病人。5例冠心病病人和20例健康献血员作     

保心合剂对CVB3病毒致小鼠慢性心肌损伤的保护作用

目的探讨中药保心合荆对扩张型心肌痛免疫作用的机制。方法采用柯萨奇B病毒（CVB3）致慢性自身免疫损伤心肌病模型。用保心合剂进行治疗。采用免疫转印技术检测小鼠外周血清中抗ADP／ATP载体抗体、抗岛受体抗体，采用ELISA技术检测小鼠外周血清中肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白介素-6（IL-6）的含量。结果模型组心肌结构显示散在纤维化，抗ADP／ATP载体抗体、抗β1受体抗体检出率分别为77．78％、100．00％。给药组TNF—α及IL-6含量较空白模型组下降明显（P〈0．05），3种剂量给药组之间无统计学意义。结论保心合剂对扩张型心肌病具有免疫调节及心肌保护作用。     

扩张型心肌病新型抗钙通道抗体的发现

目的:观察扩张型心肌病(DCM)患者血清中是否独立存在抗心肌细胞L型钙离子通道(Human Cav1.2)自身抗体(简称:抗钙通道抗体)。方法:以合成多肽片段作为抗原,用ELISA法检测DCM患者(DCM组)及正常人(正常对照组)(各60例)血清中的抗钙通道抗体和抗心肌细胞线粒体内膜ADP/ATP载体蛋白(ANT)抗体。用亲合层析法提纯DCM患者(DCM组)血清中的抗钙通道抗体,以制备的大鼠抗Human Cav1.2α1亚单位多克隆抗体作为阳性对照,用免疫印记技术,免疫荧光组织化学技术检测DCM患者血清中抗钙通道抗体。结果:ELISA检测60例DCM患者中29例抗钙通道抗体阳性(29/60,阳性率48.33%),明显高于正常对照组(4/60,6.67%,P<0.01)。抗钙通道抗体和抗ANT抗体检出结果无一致性(P>0.05)。免疫印记中亲合层析法提纯的DCM患者抗钙通道抗体可特异地识别240000的多肽(Human Cav1.2α1c亚单位),结果与阳性对照相符。抗钙通道抗体经抗原充分吸附后特异性识别被阻断。免疫荧光实验显示,抗钙通道抗体能特异性地结合在大鼠心室肌细胞膜上。结论:DCM患者血清中存在新型的抗钙通道抗体。     

器官特异性抗心肌自身抗体与扩张型心肌病

近年来已证实扩张型心肌病(DCM)患者血清中存在器官特异性抗心肌自身抗体,这些抗体与心肌细胞特定抗原分子结合,引起心肌损害。DCM特异性抗心肌抗体的产生与人类白细胞抗原(HLA)Ⅱ类具有相关性。本文就特异性抗心肌抗体与DC-M的关系作一综述。     

扩张型心肌病与心肌自身抗体的研究进展

近年来,随着免疫学、病毒学、分子生物学理论与技术的发展,抗心肌抗体与扩张型心肌病（DCM）的关系越来越受重视。抗心肌抗体的产生和参与DCM的资料累积已近50年。例如抗β肾上腺能受体抗体、抗ATP/ADP运载蛋白抗体、抗M胆碱能受体抗体和抗肌球蛋白重链抗体等,均可激活机体免疫系统使心肌细胞肿胀和坏死,是心脏受累的重要指标。本文主要对DCM与心肌自身抗体的相关发病机制作一综述。     

系列抗心肌多肽自身抗体对扩张型心肌病的诊断价值

目的 :探讨抗人工合成多肽自身抗体在扩张型心肌病 ( DCM)诊断中的价值。方法 :根据计算机预测心肌 ADP/ ATP载体 ( ANT)、β1 受体、M2 受体和肌球蛋白重链 ( MHC)抗原决定簇的氨基酸序列并合成多肽片段 ,以此片段作为抗原 ,同时用天然抗原对比 ,以酶联免疫吸附方法检测 48例 DCM患者 ( DCM组 )和 48例健康献血员 (对照组 )血清中抗心肌多肽自身抗体。结果 :DCM组中抗 ANT抗体、抗 β1 受体抗体、抗 M2 受体抗体和抗MHC抗体阳性分别有 31、2 6、2 0和 2 3例 ,与对照组比较有显著性差异 ( P <0 .0 0 5 ) ,且与天然心肌抗原检测结果高度一致 ( P <0 .0 1)。结论 :人工合成多肽可代替天然心肌抗原用于检测抗心肌自身抗体 ,抗心肌多肽抗体检测可以作为 DCM免疫学诊断方法     

热休克蛋白60与扩张型心肌病

热休克蛋白60主要定位于细胞线粒体内,但人体在正常和应激情况下均可在外周循环中检测到热休克蛋白60及其抗体.热休克蛋白60在扩张型心肌病患者心肌中异位表达明显增加,其血清抗体水平也明显上升,它可能通过促炎症反应、免疫调节、抗凋亡等多种机制参与扩张型心肌病的发生和发展.     

抗人心肌线粒体抗体在病毒性心肌炎和扩张型心肌病中的检测及其意义

目的检测病毒性心肌炎(VMC)和扩张型心肌病(DCM)患者血清中是否有抗人心肌线粒体抗体存在及其意义。 方法以人心肌线粒体作抗原,应用免疫点印迹在29例VMC(VMC组)、24例DCM(DCM组)、33例其它心脏病(OCD组)及20例健康献血者(HBD组)进行抗人心肌线粒体抗体检测,用免疫印迹方法检测其抗原分子量。 结果VMC组(12例,41.4%)DCM组(10例,41.7%)抗人心肌线粒体抗体阳性明显高于OCD组(2例,6.1%)及HBD(0%);②抗体阳性的VMC和DCM患者中有43.8%的心肌肌钙蛋白T升高,抗体阴性者为12.0%(P＜0.05)有显著性差异;③人心肌线粒体特异性抗原的分子量为30KD。 结论①在VMC和DCM患者血清中存在抗人心肌线粒体抗体,说明部分VMC及DCM与自身免疫有关,该抗体是引起心肌损伤的因素之一,对该抗体的检测可作为VMC和DCM的辅助诊断手段之一;②该抗体的特异性抗原可能为人心肌线粒体腺苷酸转位酶。     

不同时期应用抗L3T4单抗治疗的自身免疫性心肌病小鼠免疫球蛋白G亚型分析

目的:探讨不同阶段应用抗L3T4单抗治疗自身免疫性心肌病对小鼠血清抗线粒体ADP/ATP载体抗体和免疫球蛋白G(IgG)亚型的影响。方法:将24只小鼠随机分为4组,每组6只。用含有人线粒体ADP/ATP载体肽的免疫液免疫近交系Balb/C小鼠建立类扩张型心肌病(DCM)模型(DCM组);以不含肽免疫液免疫小鼠作为对照组;在同时用含有ADP/ATP载体肽的免疫液的第0、1、2天连续3d以400μg抗L3T4单抗免疫小鼠获得早期治疗组;在给予ADP/ATP载体肽的免疫液第4个月初始连续3d给予抗L3T4单抗治疗获得中期治疗组。以ELISA法检测其血清中抗ADP/ATP载体抗体水平和IgG亚型(IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3)的变化;采用流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4 T细胞内γ干扰素(IFN-γ)/白细胞介素(IL)-4的表达。结果:早期治疗组与对照组小鼠抗ADP/ATP载体抗体检测均为阴性,而中期治疗组与DCM组抗体均为阳性。DCM组各亚类水平均较对照组明显升高;早期治疗组IgG1、IgG2b和IgG3的产生均受到抑制,其水平接近对照组;中期治疗组IgG1水平介于DCM组和早期治疗组之间,IgG2b和IgG3的生成与DCM组差异无统计学意义,但显著高于早期治疗组;而治疗组与DCM组IgG2a水平则差异无统计学意义。早期治疗组小鼠IFN-γ/IL-4百分含量与对照组相比差异无统计学意义,但明显低于DCM组;中期治疗组IFN-γ的百分含量较DCM组更高,IL-4的百分含量介于DCM组和早期治疗组之间。结论:抗L3T4单抗治疗能够抑制DCM小鼠血清中的抗ADP/ATP载体抗体及IgG1亚型的生成和Th2相关细胞因子IL-4的百分含量,且以早期治疗的效果更明显。     

扩张型心肌病患者抗ADP／ATP载体抗体对心肌细胞电压依赖性钙通道活性的影响

应用全细胞膜片钳技术观察扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者抗ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体对豚鼠心室肌细胞钙电流（ⅠＣａ）的影响，发现该抗体激活电压依赖性钙通道，增加心肌细胞Ⅰｃａ，Ⅰｃａ峰值的增长幅度为１００～８４０ｐＡ，增长率１３％～５６％（ｎ＝２８），具有抗体浓度依赖性，异搏停能够抑制该效应。正常人血清无此作用（ｎ＝４）。提示：抗体介导心肌细胞Ⅰｃａ增加和钙超负荷是ＤＣＭ心肌损伤的原因之一。