IL-21及其受体在银屑病患者外周血和皮损组织中的表达及意义

目的探讨IL-21及其受体在斑块型银屑病患者外周血PBMC和皮损组织中的表达情况及临床意义。方法采用流式细胞仪检测斑块型银屑病58例患者及20例健康对照者外周血PBMC中IL-21、IL-21R的表达;采用实时定量RT-PCR（quantitative real-time, RT-PCR）法检测25例银屑病和15例正常人外周血PBMCs和皮肤组织中IL-21、IL-21R mRNA的表达情况;采用Western印迹法检测皮肤组织中IL-21和IL-21R的表达情况;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测PBMC培养上清液中IL-21的分泌水平。结果流式细胞仪检测发现银屑病患者PBMC中IL-21和IL-21R占CD4+T细胞的百分率明显增加（P<0.01）;Real-time PCR发现IL-21、IL-21R mRNA在银屑病患者的PBMC和皮肤组织中表达均较健康对照者增高（P<0.01,P<0.05）;Western印迹法显示IL-21和IL-21R蛋白在银屑病患者的皮损中表达增高（P<0.01）;ELISA检测发现培养上清中IL-21分泌水平增加（P<0.01）。结论斑块型银屑病患者PBMC和组织中IL-21和IL-21R的表达水平均较健康对照者升高,IL-21可能参与了银屑病的发病过程,并可能成为一个潜在的治疗靶点。     

甲氨蝶呤对寻常型银屑病患者外周血IL-8表达的影响

目的探讨甲氨蝶呤（Methotrexate,MTX）对寻常型银屑病患者外周血中自细胞介素8（Interleukin 8,IL-8）表达调控作用。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）技术检测19例寻常型银屑病外周血治疗前,MTX治疗8周后及19例正常对照者外周血IL-8的表达。结果IL-8在寻常型银屑病外周血中治疗前的表达水平为76．84±31．05pg／ml,经过MTX治疗8周后的表达水平为43．25±31．64pg／ml,正常对照者的表达水平为34．79±15．75pg／ml。IL-8在寻常型银屑病外周血治疗前的表达水平明显高于治疗后及正常对照者的表达水平（P〈0．01）,治疗后的表达水平与正常对照者的表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MTX能抑制寻常型银屑病患者外周血IL-8的表达,这可能是MTX治疗银屑病的作用机制之一。     

STAT4在银屑病患者皮损中的表达及其临床意义

目的 研究银屑病患者皮损内信号转导和转录激活因子4（STAT4）的表达及其临床意义.方法 利用荧光定量聚合酶链反应法测定20例寻常型银屑病患者皮损内及17例正常对照者皮肤中STAT4mRNA的定量表达,采用直线相关回归分析方法分析STAT4mRNA的表达与银屑病病情严重指数（PASI）的关系.结果 银屑病患者皮损内STAT4mRNA高于正常对照者皮肤内的表达水平（P=0.0016）.其表达与患者病情严重程度呈显著的正相关（r=0.78465,P＜0.0001）.结论 STAT4可能在银屑病的发病中其重要作用.     

聚合酶链反应检测银屑病患者皮损中人巨细胞病毒

目的：为了进一步了解人巨细胞病毒（HCMV）与银屑病人发病关系。方法：用针对HCMV染色体上编码蛋白基因的引物进行PCR扩增。对48例银屑病患者皮损中人巨细胞病毒进行检测。结果：48例患者，5例（10．4％）PCR检测阳性，其扩增产物可被限制性内切酶Sau3A切为105bp和185bp二个不同大小的片段，证实扩增产物为预期片段。阳性对照B36也扩出290bp的DNA带，阴性对照均未扩增出。结论：HCMV感染在银屑病发病中有一定的作用。     

白细胞介素-33及其受体ST2在寻常型银屑病皮损中的表达

目的研究白细胞介素-33(IL-33)及其受体ST2在寻常型银屑病(PV)皮损中的表达情况。方法选取PV患者30例(PV组)和非PV患者15例(正常对照组)为研究对象,取PV组患者的皮损区和正常对照组患者的正常皮肤采用免疫组织化学和免疫荧光法检测IL-33和ST2的表达水平。结果与正常对照组比较,PV组患者皮损组织中IL-33及其受体ST2从表皮细胞的基底层到颗粒层均存在高表达。IL-33在PV组患者的阳性表达率为90.00%,高于正常对照组的阳性表达率46.67%(P<0.05)。ST2在PV组阳性表达率为83.33%,高于正常对照组的阳性表达率53.33%(P<0.05)。结论 IL-33及其受体ST2在PV皮损中表达显著增高,提示IL-33和ST2可能在PV的发生发展中发挥着重要的作用。     

进展期寻常型银屑病患者皮损中IL-22的表达

通过应用实时定量PCR以及免疫荧光检测方法对31例进展期寻常型银屑病患者的皮损冰冻标本进行检测,分析其皮损中的IL-22的表达。结果发现,进展期寻常型银屑病患者皮损IL-22 m RNA的表达与正常对照组比较明显增高(P<0.05)。因此认为,IL-22在进展期寻常型银屑病患者的皮损中呈高表达,进而说明其与寻常型银屑病的发病密切相关。     

寻常型银屑病患者血清中IL-17的表达及紫草素对IL-17刺激HaCaT细胞分泌IL-6和IL-23的影响

目的：探讨寻常型银屑病患者血清中白细胞介素17（IL-17）的表达水平及IL-17刺激后HaCaT细胞分泌白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素23（IL-23）的变化,阐明其临床意义及紫草素的干预作用。方法：以25名正常对照者、29例寻常型银屑病患者和不同组别HaCaT细胞（空白对照组、IL-17刺激24h组、IL-17刺激36h组、IL-17刺激48h组、紫草素+IL-17组、环孢素A+IL-17组和IL-17组）为研究对象,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测寻常型银屑病患者血清IL-17水平和HaCaT细胞各组上清液中IL-6、IL-23水平;实时荧光免疫定量-聚合酶链式反应法（RT-PCR）检测各组HaCaT细胞中IL-6和IL-23p19 mRNA表达水平;采用细胞计数盒-8（CCK-8）法检测各组HaCaT细胞活力。结果：与正常对照组比较,银屑病组患者血清IL-17水平明显升高,以重度皮损银屑病组升高最为明显（P < 0.05）;IL-17刺激24、36和48h组HaCaT细胞及其培养上清中IL-6和IL-23水平及其mRNA表达水平均高于空白对照组（P < 0.01）;紫草素+IL-17组和环孢素A+IL-17组HaCaT细胞及其培养上清中IL-6和IL-23水平及其mRAN表达水平均低于IL-17组（P < 0.05）。与空白对照组比较,其他各组细胞活力差异无统计学意义（P > 0.05）。结论：银屑病患者血清IL-17表达水平升高,尤其是重度皮损银屑病患者血清IL-17表达水平升高明显,IL-17可促进HaCaT细胞分泌IL-6和IL-23,呈时间依赖性,紫草素可抑制IL-17的促炎症作用。     

胞浆型磷脂酶A2-δ在银屑病皮损中的表达

目的 探讨胞浆型磷脂酶A2-δ(cytosolic phospholipase A2-δ,cPLA2δ)表达与银屑病皮损的关系.方法 免疫组化法检测银屑病患者皮损组织切片和对照组cPLA2δ的表达;提取银屑病患者皮损组织和对照组的RNA,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测cPLA2δ mRNA表达水平.结果 免疫组化法发现银屑病皮损患者cPLA2δ表达阳性率为100%,其中表达阳性例数、中度阳性例数及强阳性例数之间比较差异无统计学意义(2=1.025,P>0.05).对照组cPLA2δ表达阳性率为7.2%.两组之间cPLA2δ表达阳性率比较差异有统计学意义(2=50.49,P<0.01).银屑病皮损患者cPLA2δ mRNA表达也升高,两组比较差异有统计学意义(t=28.567,P<0.01).结论 cPLA2δ的高表达与银屑病皮损的发生有关,提示cPLA2δ可作为银屑病分子诊断和靶向治疗的靶点.     

IL-13Rα2 mRNA在脑胶质瘤中的表达及意义

目的:探讨白细胞介素13 α2受体(IL-13R α2)与脑胶质瘤发生、发展的关系.方法:采用RT-PCR半定量法检测在20例脑胶质瘤和5例正常脑组织标本中的IL-13R α2表达水平.结果:在5例正常脑组织中缺乏IL-13R α2 mRNA的表达,而20例胶质瘤有13例存在IL-13R α2的表达(阳性率为65%),两者差异有显著性(P＜0.05).低级别(Ⅰ、Ⅱ级)和高级别(Ⅲ、Ⅳ级)脑胶质瘤之间IL-13R α2 mRNA的表达阳性率差异无显著性(P＞0.05),但两者IL-13R α2 mRNA表达的A值差异极为显著(P＜0.05).结论:IL-13R α2在脑胶质瘤中存在表达,且在高级别脑胶质瘤中表达较强;IL-13R α2可能在脑胶质瘤发生、发展过程中发挥重要作用.     

CYR61/CCN1在肝细胞肝癌中的原位表达及其临床意义

目的：观察Cyr61在肝细胞肝癌中表达的意义．方法：采用免疫组化法和RT—PCR共检测65例肝细胞肝癌中Cyr61蛋白和mRNA表达水平,分析其表达与肝癌的临床病理学特征的关系．结果：高分化HCC组织的Cyr61蛋白表达水平高于低分化HCC组织（P〈0．01）;镜下存在静脉浸润、多结节的HCC组织中Cyr61蛋白表达高于无静脉浸润、单结节的HCC组织（P〈0．05）．30例肝癌组织Cyr61mRNA表达均为阳性,86．67％（26／30）癌组织Cyr61mRNA表达低于相应癌旁组织（P〈0．05）．结论：Cyr61可能在肝癌的发生早期发挥重要作用,并与肝癌进程中的间质重建和侵袭转移有关．     

HLA-DR抗原在胃癌组织中的表达

目的探讨HLA-DR在胃癌组织中的表达及其意义,为胃癌的免疫治疗和预后判断提供实验依据。方法采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应检测36例胃癌及正常胃黏膜上皮中HLA-DR抗原的表达情况,并分析其表达与胃癌临床病理特征的关系。结果HLA-DR蛋白在胃癌组织中的阳性表达率(58.3%)显著高于正常胃黏膜上皮(5.60%,P<0.05),并且其在胃癌组织中的阳性表达率随分化程度的降低而显著降低(P<0.05);HLA-DR蛋白的表达与胃癌患者的浸润深度无明显关系(P>0.05);HLA-DR蛋白在有淋巴结转移者中的阳性表达率(43.5%)显著低于无淋巴结转移者(84.6%)(P<0.05)。HLA-DR mRNA在胃癌组织中的阳性表达率(52.9%)及表达水平(0.760±0.158)均显著高于正常胃黏膜上皮(8.30%,0.551±0.027,均P<0.05);HLA-DRαmRNA的表达与与胃癌患者的分化程度和浸润深度无关(P>0.05)。结论HLA-DR的表达可能与胃癌的发生发展有关,并对判断胃癌患者的生物学行为具有一定意义。     

膀胱移行细胞癌中整合素连接激酶的表达及意义

目的 检测膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell carcinoma,BTCC)和癌旁正常膀胱组织中整合素连接激酶(ILK)蛋白和mRNA的表达,探讨其在BTCC发生、发展中的作用.方法 利用免疫组织化学S-P法检测56例BTCC和30例癌旁正常膀胱组织中ILK蛋白的表达,同时运用逆转录聚合酶链反应法检测这些组织标本中ILK mRNA的表达,并与临床病理资料进行相关性分析.结果 56例BTCC中,ILK蛋白阳性表达率为53.6%(30/56),ILK mRNA阳性表达率为58.9%(33/56);而30例癌旁正常膀胱组织中ILK蛋白阳性表达率为10%(3/30),ILK mRNA表达阳性率为13.3%(4/30),ILK mRNA和蛋白在癌组织和癌旁正常膀胱组织表达有显著差异(P＜0.01).临床病理资料的相关性分析显示,BTCC中,ILK mRNA和蛋白的表达分布与病理分级有相关性(P＜0.05),但与临床分期无相关性(P＞0.05).结论 ILK基因转录和蛋白表达可能参与BTCC的发牛过程,ILK可能成为早期发现BTCC的一个肿瘤标志物和治疗BTCC的新靶点.     

非甾体类抗炎药NAG-1在胃癌中表达及意义

目的研究非甾体类抗炎药活化基因-1(NAG-1)在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR和免疫组化检测76例胃癌组织及其相应正常组织NAG-1的表达。结果胃癌组织的NAG-1蛋白的表达程度显著低于正常组织(χ2=47.186,P<0.05)。NAG-1蛋白在胃癌组织中的表达与患者的细胞分化程度有关(χ2=7.506,P<0.05)。而与性别、淋巴结转移、临床分期间的差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR结果显示NAG-1 mRNA在胃癌组织中的相对含量显著低于正常胃黏膜组织。NAG-1 mRNA在高、中分化胃癌中的相对含量显著高于低、未分化(P<0.05)。而与淋巴结转移、临床分期、浸润深度差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NAG-1基因在胃癌组织中的表达下降,可能参与胃癌的发生、发展过程。     

卵巢癌组织中PI3K的表达及意义

目的：研究卵巢癌组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的表达,探讨PI3K在卵巢癌发生及发展中的作用。方法： 应用RT-PCR检测10例卵巢癌组织、10例卵巢良性肿瘤组织及10例正常卵巢组织中PI3K mRNA表达。应用免疫组化方法检测PI3K蛋白在60例卵巢癌、24例卵巢良性肿瘤及24例正常卵巢组织中的表达。结果： PI3K mRNA在卵巢癌组织中表达量高于正常卵巢及卵巢良性肿瘤（P<0.01）,在卵巢良性肿瘤组织中表达量与正常卵巢组织表达量比较差异无显著性（P>0.05）。PI3K 蛋白表达主要定位于细胞质和(或)胞核。PI3K 蛋白在卵巢癌组的阳性表达率明显高于正常卵巢组和卵巢良性肿瘤组（P<0.01）;PI3K蛋白的表达强度与病理分级及临床分期有关,卵巢癌分化越差PI3K 蛋白表达越强（P<0.05）,临床分期越晚,其PI3K 蛋白阳性表达率也越高（P<0.05)。结论： PI3K mRNA和蛋白在卵巢癌组织表达明显增强,PI3K基因在卵巢癌发生及发展中起促进作用。     

Pak1基因在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 研究乳腺肿瘤组织中p21激活激酶1(Pak1) mRNA及其蛋白在正常乳腺组织、良性乳腺肿瘤组织、乳腺癌组织中表达的情况,探讨Pak1与淋巴结转移、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及癌胚表达抗原(CerbB-2)表达的关系.方法 采用实时荧光定量RT-PCR技术检测35例乳腺癌和20例乳腺良性病变、15例远...     

金属蛋白酶诱导因子CD147在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的 探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子CD147在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链反应检测57例人非小细胞肺癌及其相应癌旁正常组织中CD147蛋白表达及mRNA水平,并分析CD147蛋白表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系.结果 CD147蛋白及mRNA在人非小细胞肺癌组织中的阳性率均明显高于癌旁正常组织,且在非小细胞肺癌中CD147蛋白表达与年龄、性别及病理组织学分型无关(P>0.05),与淋巴结转移及TNM分期相关(P<0.05).结论 CD147表达可能与非小细胞肺癌侵袭和转移密切相关,可作为评价非小细胞肺癌恶性程度的重要指标之一.     

Notch1胞内结构域在星形细胞肿瘤中的表达及其临床意义

目的探讨Notch1胞内结构域(intracellular Domain,ICD)在星形细胞肿瘤中的表达规律及其临床意义。方法收集大坪医院2009年1-6月间经手术切除的12例不同级别星形细胞肿瘤及2例瘤周正常脑组织新鲜标本,采用实时定量PCR方法检测Notch1ICD mRNA表达;收集85例有完整随访资料的星形细胞肿瘤存档标本,采用免疫组织化学技术检测Notch1ICD蛋白表达。结果 Notch1ICD在正常脑组织中低或不表达,肿瘤组织中Notch1ICD mRNA水平(4.65±3.04)显著高于正常脑组织(1.13±0.11)(P<0.01);高级别(WHOⅢ和Ⅳ级)星形细胞肿瘤Notch1ICD mRNA表达水平显著高于低级别星形细胞肿瘤(WHOⅡ级)[分别为(6.58±2.63)与(2.49±1.01),P<0.01]。免疫组化结果显示,相对于瘤周正常脑组织,各级星形细胞肿瘤Notch1ICD表达明显增强,并由单纯胞质表达向胞质胞核联合表达及单纯胞核表达过渡;Notch1ICD蛋白表达与组织学分级及患者的存活期有关,Notch1ICD高表达预示着较高的组织学分级和较短的存活时间。结论 Notch信...     

哮喘病人外周血单个核细胞ICAM-1 mRNA表达测定

目的：探讨细胞间粘附分子－1（ICAM－1）在哮喘炎症反应中的作用，进一步了解哮喘发病机制。方法：采用免疫组织化学和RT－PCR方法检测10例支气管哮喘发作患者和10例正常人外周血单个核细胞（PBMCs)ICAM-1表达。结果：哮喘患者PBMCs ICAM-1及ICAM－1mRNA均较正常对照组增高（P＜0．05），哮喘患者PBMCs ICAM－1与ICAM－1 mRNA表达成正相关。结论：ICAM－1参与哮喘炎症反应的发生。     

雷公藤多甙对哮喘患者细胞因子的调控作用

目的：探索雷公藤多甙（TⅡ）对哮喘患者外周血单个核细胞（PBMCs）白细胞介素－4（IL－4）mRNA表达的影响。方法：采用逆转录－聚合酶链反应方法,测定TⅡ治疗前后哮喘患者PBMCsIL－4mRNA的表达情况,并与激素治疗组对照。结果：TⅡ治疗后,哮喘患者PBMCsIL4mRAN表达低于治疗前水平（P＜0．05）。并与激素治疗组对照无显著性差异（P＞0．10）。结论：TⅡ在基因转录水平抑制哮喘患者IL－4的表达,具有抗炎作用。