As2O3对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤抑制作用及机制

目的 探讨不同剂量的三氧化二砷(As2O3)对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其机制.方法 将4×106个SKOV3细胞接种于裸鼠皮下,建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为As2O3高、中、低剂量组及生理盐水组(空白对照)、卡铂(CBP)组(阳性对照),连续给药10 d,停药后24 h处死裸鼠,计算移植瘤的瘤质量、抑瘤率及caspase-3基因表达水平的变化,并检测用药后裸鼠的肝、肾功能及血常规.结果 As2O3对移植瘤生长的抑制作用具有剂量依赖性,各剂量As2O3组及CBP组瘤质量与生理盐水组比较均有统计学意义(F=17.931,P<0.05);As2O3作用后caspase-3基因的表达较空白对照组升高,差异有统计学意义(F=31.821,q=2.89～3.84,P<0.05).同时,As2O3各组与CBP组相比,未表现出明显的肝、肾及血液学毒性.结论 As2O3对人卵巢癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制可能与上调caspase-3基因的表达及诱导细胞凋亡有关.     

人卵巢癌顺铂耐药细胞SCID小鼠腹腔移植模型的建立及其生物学特性的实验研究

目的建立人卵巢癌顺铂耐药细胞严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)小鼠腹腔移植动物模型,探讨其生物学特征.方法以卵巢癌SKOV3细胞作对照,将SCID小鼠腹腔注射人卵巢癌SKOV3/CDDP细胞1×107/ml,建立SCID小鼠顺铂耐药卵巢癌腹腔移植模型,观察小鼠活动、原位移植成瘤率、肿瘤生长以及形态学特征.免疫组化检测卵巢癌相关抗原CA125以及耐药相关基因GST-π和Topo-Ⅱ的共表达率.结果两组SCID小鼠均100%成瘤,病理组织和免疫组化检测,从移植瘤细胞形态学、生长特性和分泌CA125等方面未见明显改变.SKOV3/CDDP组耐药相关基因GST-π和Topo-Ⅱ共表达明显增高(P＜0.05).结论该卵巢癌SKOV3/CDDP细胞SCID小鼠腹腔移植模型,模拟了人卵巢癌腹腔播散的生物学行为,且能保持细胞的耐药性,是研究卵巢癌生物治疗较理想的动物模型.     

三氧化二砷对615系小鼠皮下移植性胃癌的抗癌作用及机制研究

目的:观察不同剂量三氧化二砷(As 2O3)对于实体型胃癌移植瘤615系小鼠模型的抑瘤及诱导凋亡作用.方法:40只615系小鼠皮下注射鼠前胃癌细胞株MFC建立移植瘤模型,然后随机分为5组,每组各8只.分别在腹腔内注射5-Fu、生理盐水及不同剂量的As2O3(1、2、4 mg·kg-1·d-1),给药8 d,末次给药24 h后计算抑瘤率,流式细胞术观察凋亡率,透射电镜观察凋亡细胞超微结构,免疫组化半定量分析凋亡调控基因Bcl-2、Bax的表达情况.结果:As2O3对移植瘤生长有明显抑制作用,表现为瘤细胞超微结构出现凋亡征象且凋亡率增加,以2 mg·kg-1·d-1组作用最明显;免疫组化显示As2O3作用下Bcl-2基因阳性细胞数降低,Bax阳性细胞数则上升.结论:As2O3主要是通过诱导细胞凋亡对荷胃癌鼠皮下移植瘤具有明显抑制作用.     

As2O3对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用

目的 探讨不同剂量三氧化二砷(As2O3)对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用及机制.方法 将4×106个Hela细胞接种于裸鼠皮下,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为As2O3低剂量(1.0 mg/kg)、中剂量(2.5 mg/kg)、高剂量(5.0 mg/kg)组及生理盐水空白对照组、顺铂阳性对照组,腹腔连续给药10 d,停药后24 h处死裸鼠留取标本计算抑瘤率,流式细胞仪检测细胞凋亡率, RT-PCR方法检测移植瘤组织caspase-3基因的相对表达量,免疫组化SP法检测磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)的表达.结果 各剂量As2O3组及顺铂组瘤质量与生理盐水组相比均有统计学意义(F=39.14,P<0.05);As2O3高、中、低剂量组流式细胞仪检测时均出现典型凋亡峰,凋亡率分别为17.89%、17.19%、18.52%;As2O3作用后caspase-3基因的表达较生理盐水组明显升高,差异均有统计学意义(F=8.76,q=3.06～5.81,P＜0.05);As2O3各剂量组pERK的表达较生理盐水组降低.结论 As2O3 对人宫颈癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制与上调caspase-3基因的表达诱导细胞凋亡,下调pERK的表达与抑制MAPK信号传导通路有关.     

三氧化二砷抑制人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长及机制的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对人卵巢癌细胞株 3AO细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及作用机制。方法 :4× 10 6个 3AO细胞接种于裸鼠皮下 ,采用不同浓度As2 O3 腹腔注射治疗 ,与顺铂 (cDDP)进行对比 ,计算移植瘤的体积、瘤重、抑瘤率及Fas、FasL基因表达水平的变化。结果 :As2 O3 对移植瘤生长的抑制作用明显优于cDDP ,且具有剂量低赖性 ;As2 O3 作用后Fas基因的表达呈升调节 ,而FasL基因的表达无明显变化。结论 :As2 O3 对人卵巢癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用 ,其机制与Fas基因的过度表达有关。     

三氧化二砷抑制食管癌细胞EC-9706体内增殖及机制研究

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对食管癌细胞系EC-9706的体内增殖抑制作用及可能机制。方法:以不同剂量的As2O3作用于裸鼠移植瘤模型,每周测量裸鼠移植瘤的大小,绘制肿瘤生长曲线;采用Western blot法检测Pim-3和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白的表达变化。结果:不同剂量的As2O3均能明显抑制裸鼠移植瘤的生长,以4 mg/kg As2O3组的抑制作用最强,肿瘤重量抑制率和肿瘤体积抑制率分别为81.13%和81.48%。Pim-3和Bcl-2蛋白的表达受到抑制。结论:As2O3可能通过抑制Pim-3使Bcl-2表达降低,促进肿瘤细胞凋亡。     

大黄素增强砷剂对食道癌细胞的促凋亡作用

目的在体外培养的食道癌细胞株和食道癌细胞的体内移植瘤动物模型上,考察天然物质大黄素通过提高活性氧水平增强砷剂(As2O3)诱导凋亡的作用,同时探讨大黄素造成的氧化还原状态改变对凋亡与抗凋亡信号转导机制的影响。方法在食道癌细胞株上联合应用大黄素与As2O3,检测细胞凋亡率、线粒体细胞色素C释放、生存相关转录因子NF-κB活性及下游抗凋亡蛋白survivin表达;在食道癌移植瘤动物模型上应用不同剂量大黄素与As2O3腹腔注射化疗,化疗后检测瘤体质量,瘤组织切片上检测凋亡、NF-κB入核和下游抗凋亡蛋白survivin表达。结果大黄素增强As2O3诱导的凋亡,促进线粒体细胞色素C释放,抑制NF-κB促转录活性;大黄素与As2O3合用增强裸鼠移植瘤凋亡,抑制NF-κB入核,并下调survivin表达。结论大黄素能够促进体内外食道癌细胞的凋亡,机制涉及增强促凋亡信号转导和抑制抗凋亡信号转导,提示了大黄素的作用机制和应用的可行性。     

大黄素增强砷剂对食道癌细胞的促凋亡作用

目的 在体外培养的食道癌细胞株和食道癌细胞的体内移植瘤动物模型上,考察天然物质大黄素通过提高活性氧水平增强砷剂(As2O3)诱导凋亡的作用,同时探讨大黄素造成的氧化还原状态改变对凋亡与抗凋亡信号转导机制的影响.方法 在食道癌细胞株上联合应用大黄素与As2O3,检测细胞凋亡率、线粒体细胞色素C释放、生存相关转录因子NF-κB活性及下游抗凋亡蛋白survivin表达;在食道癌移植瘤动物模型上应用不同剂量大黄素与As2O3腹腔注射化疗,化疗后检测瘤体质量,瘤组织切片上检测凋亡、NF-κB入核和下游抗凋亡蛋白survivin表达.结果 大黄素增强As2O3诱导的凋亡,促进线粒体细胞色素C释放,抑制NF-κB促转录活性;大黄素与As2O3合用增强裸鼠移植瘤凋亡,抑制NF-κB入核,并下调survivin表达.结论 大黄素能够促进体内外食道癌细胞的凋亡,机制涉及增强促凋亡信号转导和抑制抗凋亡信号转导,提示了大黄素的作用机制和应用的可行性.     

Survivin在人乳腺癌裸鼠移植瘤中的表达及As2O3处理后表达变化

目的探讨Survivin在人乳腺浸润性导管癌裸鼠移植瘤中的表达及As2O3的抑制作用.方法复制人乳腺浸润性导管癌裸鼠移植瘤模型,抽签法随机分为阴性对照(生理盐水)组、阳性对照(DDP 1.5 me/kg)、实验1组(As2O3 1.5me/kg)、实验2组(As2O3.0 mg/kg),用原位杂交、免疫组化法分别检测瘤组织中survivin mRNA及survivin、caspase-3蛋白的表达.结果阴性(生理盐水)对照组中,survivin mRNA、survivin蛋白均主要呈中度阳性表达,其阳性表达分别为82.42%、78.85%;实验组1、实验组2中度阳性表达随着As2O3剂量的增加而下降(P＜0.01),二组的survivin mRNA、survivin蛋白阳性表达分别为25.96%、6.90%和18.00%、5.85%,与阳性和阴性对照组的表达比较呈明显下降趋势.原位杂交、免疫组化法检测结果一致.而caspase-3蛋白的阳性表达与survivin相反.结论 Survivin在人乳腺浸润性导管癌裸鼠移植瘤中高表达,而As2O3有显著抑制其高表达的作用,且呈剂量依赖性.     

As2O3对人子宫内膜癌细胞HEC-1-B皮下移植瘤抗肿瘤作用

目的 检测不同浓度As2O3对人子宫内膜癌HEC-1-B细胞裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用及对瘤细胞内磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK)表达的影响,进一步探讨As2O3的抗肿瘤机制.方法 建立人子宫内膜癌HEC-1-B细胞皮下移植瘤模型,随机分为实验组,即As2O3低剂量(1.0 mg/kg)、中剂量(2.5 mg/kg)、高剂量(5.0 mg/kg)剂量组,生理盐水(NS)组及顺铂组(5 mg/kg),腹腔内注射给药,连续8 d.观察用药前后裸鼠体质量改变.剥取瘤组织,计算药物的抑瘤率.检测用药后裸鼠的肝肾功能及血常规.透射电镜观察细胞变化,流式细胞仪检测细胞凋亡周期和细胞凋亡率,免疫组化法检测p-ERK的表达.结果 不同浓度As2O3和顺铂均有不同程度抑制肿瘤细胞生长、促进肿瘤细胞凋亡的作用,其中As2O3低剂量组的抑瘤率为34.3%,p-ERK的表达率为37.5%,该组在亚G1期出现典型的凋亡峰,且As2O3低剂量组与NS组比较,凋亡率、瘤质量差异均有显著意义(F=27.20、33.92,q=9.19、13.34,P<0.05).As2O3低剂量组与顺铂组相比,无明显血液及肝肾毒性.结论 低剂量As2O3组能明显抑制肿瘤细胞HEC-1-B生长,且毒副作用轻,可能与阻滞细胞周期,抑制p-ERK表达有关.     

亚砷酸抗裸鼠人肝癌作用及机制研究

目的：探讨亚砷酸体内对人肝癌细胞的作用、毒副作用及机制。方法：人肝癌细胞BEL-7402体外培养，取指数生长期细胞裸鼠皮下接种，成瘤后腹腔分别连续注射不同浓度亚砷酸、5—Fu及生理盐水，观察不同浓度亚砷酸治疗组及对照组瘤块大小、抑癌率和裸鼠一般状态的变化，光镜下观察肝肾结构的改变，并进行血常规检测。结果：亚砷酸可明显抑制瘤块增长，2．5mg／Lg亚砷酸10天的抑瘤率为53．42％，5mg/kg亚砷酸5天、10天的抑瘤率分别为79．28％、96．58％，而且无明显肝肾损害，对造血系统无影响。结论：亚砷酸可抑制体内肝癌结节生长，而且对肝、肾及造血系统没有明显的毒副作用。     

Anti-tumor effect of bufalin on the orthotopic transplantation tumor model of human hepatocellular carcinoma in nude mice

Objective: To investigate anti-tumor effect of bufalin on the orthotopic transplantation tumor model of human hepatocellular carcinoma in nude mice. Methods: BEL-7402 cells of human hepatocellular carcinoma were inoculated to form subcutaneous tumors in nude mice by subcutaneous injection. Then the subcutaneous tumors were implanted into the liver of nude mice, and the orthotopic transplantation tumor models of human hepatocellular carcinoma were established. Seventy-five models were randomized into 5 groups ( n = 15) . Bufalin was injected intraperitoneally into the 3 groups at dose of 1.5,1 and 0.5 mg/kg for day 15 - 24, respectively. NS group were injected equal volume saline as above and adriamycin were injected intraperitoneally into ADM group at dose of 8.0 mg/kg for day 15. Ten mice in each group were killed at day 25 and detected on morphological and ultrastructural changes in myocardium, brain, liver, kidney and tumor tissues by pathology and electron microscope. The survival time in each group     

三氧化二砷对人鼻咽癌小鼠移植瘤生长抑制和诱导分化的初步研究

目的：研究三氧化二砷(As203)对人鼻咽低分化鳞癌可移植瘤在SCID小鼠体内生长的抑制作用，并初步研究其对细胞分化的影响。方法：以人鼻咽低分化鳞癌细胞株CSNE-l为研究对象，观察腹腔注射As203(5mg/kg)对人鼻咽癌在SCID小鼠体内生长情况。用光学显微镜和电子显微镜观察形态结构变化、免疫组化方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果：腹腔注射As203后，鼻咽癌SCID小鼠移植瘤生长抑制，抑瘤率75．4％。同时，瘤组织中癌细胞密度减少，细胞皱缩，脑浆红染，瘤组织分化渐成熟，出现角化细胞和角化珠；间质结缔组织增多。透射电镜下肿瘤细胞均出现成熟分化，核浆比例减少，脑浆中细胞器增多，出现大量张力原纤维并围绕核周，可见细胞明显角质化，细胞表面微小突起增多，桥粒增多，细胞之间以桥粒互相连接。癌细胞PCNA在阴性对照组呈高表达，阳性细胞指数(PI)达95％，As203组的细胞PC—NA表达明显减少，PI55％(P＝0．001)。结论：As203抑制SCID小鼠体内人鼻咽低分化鳞癌的生长，这种抑制作用可能与其能够诱导癌细胞向成熟方向分化有关。     

漆黄素及漆黄素纳米粒对卵巢癌细胞作用的研究

目的 探讨一种新的饮食性黄酮类化合物——漆黄素及漆黄素纳米粒对人卵巢癌细胞株SK0V3的抗增殖和促凋亡作用。 方法 体外实验采用MTT法测定漆黄素和漆黄素纳米粒作用后对卵巢癌细胞存活率的影响，选取下一步实验的药物浓度。裸鼠荷瘤后取肿瘤块制成SKOV3细胞混合液。取15只裸鼠腹腔接种人卵巢癌SKOV3细胞混合液肿瘤造模，第5天随机分成3组尾静脉注射药物，每3 d注射1次，每次0.2 mL，共12次:A组为肿瘤模型组（注射50 mL/L葡萄糖溶液），B组为漆黄素组（注射1.25 mg/kg漆黄素），C组为漆黄素纳米粒组（注射1.25 mg/kg漆黄素的米粒）。治疗结束后记录肿瘤质量，取心、肝、脾、肺和肾切片行HE染色观察组织病理损害，肿瘤组织切片通过Ki67免疫组织化学染色检测SKOV3细胞增殖，TUNEL法检测SKOV3细胞凋亡。 结果 MTT结果显示，随漆黄素及漆黄素纳米粒质量浓度的增加，SKOV3细胞的存活率减小；漆黄素及漆黄素纳米粒半数抑制浓度（IC₅₀）值分别为125~250 μg/mL和62.5~125 μg/mL，故选择工作浓度为125 μg/mL。共11只小鼠完成体内肿瘤造模并存活至实验结束（A组3只，B组4只，C组4只）。A组裸鼠腹腔内散在菜花状肿瘤结节，B、C组仅见极小颗粒状肿瘤结节，B、C组腹腔内肿瘤质量相当（P>0.05），但均低于A组（P<0.05）。各组心、肝、脾、肺和肾切片HE染色均未见明显损害。与A组相比，B组和C组肿瘤组织增殖指数Ki67均降低，细胞凋亡率均升高（P<0.05），但B组和C组之间差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 漆黄素及漆黄素纳米粒均具有抗卵巢癌细胞增殖和促进其凋亡的作用，安全性好。     

三氧化二砷对裸鼠人乳腺癌移植瘤的作用及机制

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对乳腺癌移植瘤的作用及其机制。方法建立BALB／C—nu／nu裸鼠ER阴性MDA—MB-435s人乳腺癌移植瘤模型,分别以不同浓度的As2O3、顺铂和生理盐水（NS）腹腔内注射,观察移植瘤的瘤重及抑瘤率。并用免疫组化检测乳腺癌石蜡标本中PTEN和Caspase-7的表达。结果As2O3高剂量组、As2O3低剂量组、顺铂组均能明显抑制裸鼠皮下肿瘤的生长,抑瘤率分别为48．68％、32．80％、66．67％。用药后移植瘤组织中PTEN和Caspase-7蛋白阳性细胞数显著增多（P〈0．05）。结论As2O3能明显抑制乳腺癌移植瘤的生长,其作用机制可能是通过上调PTEN和Caspase-7的表达,促进细胞的凋亡来抑制人乳腺癌细胞的生长。     

Effect of Ad-p16 Combined with CDDP or As_2O_3 on Human Bladder Cancer Cells

Summary:To evaluate the therapeutic efficiency of combined use of p16-expressing adenovirus andchemotherapeutic agents CDDP or As_2O_3 on human bladder cancer cell line EJ,the human bladdercancer cell line EJ were transfected with adenovirus-mediated p16 gene(Ad-p16),with administra-tion of cisplatin(CDDP)or arsenic trioxide(As_2O_3).The cell growth,morphological changes,cellcycle,apoptosis and molecular changes were measured using cell counting,reverse microscopy,flowcytometry,cloning formation,immunocytochemical assays and in vivo therapy experiments to evalu-ate the therapeutic efficacy of such combined regimen.Ad-p16 transfer and CDDP or As_2O_3 adminis-tration to EJ cells could exert substantially stronger therapeutic effects than the single agent treat-ment.Especially in in vivo experiments,combined administration of p16 and CDDP or As_1o_3 inducedalmost tumor diminish compared to the partial tumor diminish induced by single agent.Moreover,delivery of Ad-p16,or administration of minimal-dose CDDP     

双氢青蒿素对前列腺癌裸鼠种植瘤Bcl-2和Bax表达的调控

目的研究双氢青蒿素(DHA)诱导前列腺癌细胞凋亡作用及其机制。方法采用人前列腺癌PC-3细胞株建立裸鼠种植瘤模型,将20只模型鼠随机平均分为对照组、溶剂(DMSO)组、DHA200μmol/kg体质量组和DHA100μmol/kg体质量组,经13d干预后,电镜观察肿瘤组织形态学表现;免疫组化检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达水平;TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡。结果与对照组及DMSO组比较,DHA治疗组电镜观察肿瘤组织中散在凋亡细胞及凋亡小体;免疫组化检测凋亡相关基因Bcl-2表达减弱、Bax表达增强,差异均有统计学意义(P<0.05);TUNEL检测结果显示肿瘤组织细胞凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论DHA具有较强的诱导前列腺癌细胞凋亡作用,这种作用可能是通过下调Bcl-2和上调Bax表达实现的。     

骨髓干细胞移植治疗对肝豆状核变性早期TX小鼠脑肾铜代谢的影响

【目的】 探讨骨髓干细胞移植对于疾病早期肝豆状核变性模型鼠———TX小鼠脑、肾组织铜代谢的影响。【方法】4~5周龄的雄性DL小鼠50只为供体;2月龄的TX小鼠50只为受体(雌∶雄=3:2),随机分为移植组和对照组各25只(雌∶雄=3:2)。分离供体小鼠骨髓干细胞并标记CM-DiI荧光,经尾静脉注入移植组TX小鼠体内,每只小鼠0.2 mL(1.2 × 107个细胞),对照组动物注入等量平衡盐液体。移植后的1、2、4、8、12周处死动物检测脑、肾铜含量情况,并以CM-DiI荧光示踪技术考察干细胞在受体鼠脑、肾组织的分布情况。【结果】 移植治疗后脑和肾脏铜含量(脑铜平均28.7 mg/kg,肾铜平均31.7 mg/kg)较对照组(脑铜平均34.5 mg/kg,肾铜平均36.9 mg/kg)均有下降趋势,达到对照组铜含量的70% ~ 98%;移植后第4周时治疗组脑铜含量(28.4 ± 5.5) mg/kg,仅为对照组(40.1 ± 6.9) mg/kg的70%, 改变有统计学意义(P < 0.05)。示踪研究在移植后各时间点均可于脑内检测到供体细胞,肾脏未检测到供体细胞。【结论】疾病早期TX小鼠接受骨髓干细胞移植治疗,对脑内铜代谢有一定改善作用,对肾脏铜代谢无明显改善作用。     

应用福爱乐医用胶粘贴法构建人胃癌组织块原位移植模型

［摘要］目的: 利用福爱乐医用胶构建人胃癌组织块裸鼠原位移植模型,为研究胃癌的病理生理过程及实验研究提供理想的动物模型。方法: 以人胃癌SGC 7901细胞株反复接种传代于BALB/C裸鼠皮下形成的皮下移植瘤组织块为材料,利用福爱乐医用胶将其粘贴在30只裸鼠胃大弯侧浆膜下,分别在术后4、6、8周随机取10只裸鼠观察原位移植瘤的生长状况、移植成功率及转移情况。结果： 原位移植瘤成瘤率为100％。随着饲养时间的延长,胃癌腹腔淋巴结转移、肝脏黏连等出现率逐渐增高。结论： 利用福爱乐医用胶粘贴法能够安全、便捷地建立人胃癌裸鼠原位移植瘤模型,并可模拟胃癌的临床发生发展过程。     

三物白散通过影响FXR表达逆转Th1/Th2漂移发挥抗肝癌免疫应答作用

目的:探讨三物白散干预肝癌原位移植瘤小鼠Th1/Th2细胞因子水平、回肠组织中法尼醇X受体(farnesoid X re-ceptor,FXR)的表达及其和肠道菌群间的关系.方法:将ICR小鼠随机分为5组,即空白组、模型组、三物白散(56.47 mg· kg-1)组、万古霉素(5 mg· kg-1)组、消胆胺(2％消胆...