双修饰壳聚糖载丝裂霉素C纳米粒在大鼠体内的药动学研究

目的研究双修饰壳聚糖载丝裂霉素C纳米粒在大鼠体内的药动学特征。方法2组大鼠分别静脉注射4mg·kg^-1丝裂霉素C纳米粒和丝裂霉素C注射剂后,采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS）测定给药后不同时间点血浆中丝裂霉素C的浓度,计算主要药动学参数。结果丝裂霉素C的线性范围20-1000μg·L^-1,最低定量限为20μg·L^-1,提取回收率均〉95％,日内、日间精密度RSD均〈15％。双修饰壳聚糖载丝裂霉素C纳米粒和丝裂霉素C注射剂t1／2分别为（2．64±0．11）h、（0．49±0．049）h;AUC0-∞分别为（2．01±0．11）mg·h·L-1、（0．93±0．075）mg·h^-1·L^-1;Vz分别为（1．52±0．18）L、（0．63±0．065）L;CL分别为（6．95±0．70）mL·min^-1、（15．47±1．89）mL·min^-1,2者均有显著性差异。结论该方法灵敏、准确、专一,适用于丝裂霉素C的药动学研究。与丝裂霉素C注射剂相比,双修饰壳聚糖栽丝裂霉素C纳米粒具有缓释和长循环的作用。     

注射用丝裂霉素纳米粒质量标准研究

目的:建立注射用丝裂霉素纳米粒(MMC-PBCA-NP)的质量标准。方法:采用透射电镜观察纳米粒形态,马尔文激光粒度分析仪测定粒径及分布,高效液相色谱法测定纳米粒中MMC含量,依据2005年版《中国药典》附录注射剂的规定对3批样品进行相关质量检查,并考察制剂初步稳定性。结果:本品为浅紫色疏松饼状物,载药纳米粒外观为圆球形,平均粒径、包封率和载药量分别为100.0nm、85.8%、7.0%,各检查项目均符合《中国药典》的有关规定,初步稳定性良好。结论:所建质量标准可为该制剂工业化生产提供质量检验依据。     

壳聚糖纳米粒的研究进展

壳聚糖是一类带正电的直链多糖，具有良好的生物相容性和生物可降解性，且具有多种生物活性，能有效增加药物通过眼部、鼻腔及胃肠道粘膜上皮的吸收，降低药物的吸收前代谢，提高药物的生物利用度，因此壳聚糖在缓控释给药系统中具有广阔的应用前景，但其溶解性能有待于进一步提高。本文就壳聚糖纳米粒的制备方法、作物特点及应用作一概述。     

RGD-FasL羟乙基壳聚糖缓释纳米粒制备及生物学研究

目的使用羟乙基壳聚糖制备纳米颗粒(NPs),用来包载RGD-FasL融合蛋白(RF),鉴定其功能并评估其在肝癌治疗中的作用。方法采用离子凝胶法制备RF羟乙基壳聚糖缓释纳米粒(RF-NPs);通过透射电镜、动态光散射法考察其理化性质;用紫外分光光度仪检测蛋白浓度来计算其载药率、包封率和体外释放度;通过MTT比色法检测对H22细胞增殖活性的影响,应用H22细胞建立小鼠肝癌模型进行体内抑瘤研究。结果制备的RF-NPs呈球形或类球形,平均粒径198.3 nm,Zeta电位+25 mV,包封率较高,且具有缓释效果,150 mg/L浓度时对H22细胞抑制率大于70%,并能在小鼠体内产生比较明显的抑瘤效果。结论离子凝胶法制备RF-NPs的条件缓和、方法简单,是癌症治疗中具有很好的前景的蛋白药物载体。     

辛伐他汀对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

目的研究辛伐他汀对小鼠肝癌细胞H22抑瘤作用的影响.方法采用小鼠H22肝癌细胞实体瘤模型进行体内抑瘤实验,观察荷瘤动物的生长情况和肿瘤生长曲线,测定肿瘤生长抑制率,以及生存期的改变.结果辛伐他汀对小鼠的H22实体瘤生长具有明显的抑制作用,抑瘤率达50%以上.未发现生存期的改变.结论辛伐他汀具有较强的体内抗肿瘤作用.     

壳聚糖纳米粒制备的研究进展

载药纳米粒作为药物、基因传递和控释的载体,是近年来出现的药物控释和缓释的新剂型。壳聚糖具有较好的生物黏附性、促吸收效应和酶抑制载体作用等特性。壳聚糖纳米粒作为一种新型药物载体,已成为目前国内外研究开发的热点。本文就壳聚糖纳米粒制备的研究进展情况进行了综述。     

壳聚糖纳米粒制备技术研究进展

目的：介绍壳聚糖的应用及其作为新型药物载体材料制备纳米粒的技术研究进展，为深入研究提供参考。方法：在广泛查阅文献的基础上，通过归纳和分类完成资料整理。结果：壳聚糖研究历史悠久，用于纳米粒制备的工艺方法较多，尤其用其包载基因、多肽及某些抗肿瘤药具有独到优势。结论：壳聚糖作为可生物降解的纳米粒载体材料具有重要的科研和应用价值。     

猫爪草不同提取物对移植性肝癌H22小鼠的抗肿瘤作用

目的：探讨猫爪草不同提取物对移植性肝癌H22小鼠的抗肿瘤作用.方法：采用系统溶剂法提取分离猫爪草获得石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水5个提取物.建立移植性肝癌H22小鼠模型后,检测各提取物灌胃给药10 d后的抑瘤率、生命延长率、肺脏指数、肝脏指数、脾脏指数和胸腺指数等.结果：石油醚提取物高、中、低剂量组对H22小鼠的肿瘤生长均无明显的抑制作用.氯仿、乙酸乙酯、正丁醇提取物高、中、低剂量组的抑瘤率（%）依次分别为51.78,48.80,33.33;55.51,45.10,31.36;32.71,25.08,24.64;生命延长率（%）分别为10.58,60.09,58.23;-1.05,56.91,45.09;60.98,59.76,50.84;水提物高、中、低剂量组的生命延长率（%）分别为74.98,74.76,50.05.水提物可以增加脾脏指数和胸腺指数.结论：猫爪草氯仿、乙酸乙酯和正丁醇提取物具有一定体内抗肿瘤作用,而水提取物具有一定的免疫调节作用.     

去甲基斑蝥素N-乳糖酰壳聚糖纳米粒的吸收机制及小鼠抑瘤作用研究

目的:研究去甲基斑蝥素N-乳糖酰壳聚糖纳米粒(NCTD-GC-NPs)的吸收机制和小鼠抑瘤作用。方法:以表观透过系数为指标,考察NCTD-GC-NPs(80μg·mL-1)及其分别与环孢素A(50μmol·L-1)、去氧胆酸钠(100mmol·L-1)、叠氮化钠(25mmol·L-1)、氧化苯胂(25mmol·L-1)联用后对结肠癌Caco-2细胞转运的影响;将接种肝癌细胞H22后的小鼠随机分为空白组、对照组(NCTD原料药2mg·kg-1)和NCTD-GC-NPs低、中、高剂量组(0.5、2、4mg·kg-1),每组10只,每日灌胃给药1次,连续给药8d,考察各组小鼠体重和抑瘤率。结果:环孢素A、去氧胆酸钠和叠氮化钠均能明显促进NCTD-GC-NPs在Caco-2细胞的转运(P<0.05或P<0.01),氧化苯胂对转运无明显影响;各组小鼠体重无明显变化;与对照组比较,NCTD-GC-NPs中、高剂量组的抑瘤率明显增强(P<0.05或P<0.01)。结论:NCTD-GC-NPs主要通过主动转运穿过小肠上皮细胞,能明显抑制肝癌肿瘤细胞H22的生长。     

灵芝孢子油对H22荷瘤小鼠肿瘤生长及瘤细胞VEGF表达的影响

目的观察灵芝孢子油对荷H22瘤小鼠肿瘤生长及瘤细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,探讨该药抑制肿瘤的作用是否与抑制肿瘤血管生成有关。方法小鼠右腋皮下接种H22瘤细胞(浓度1×107/ml),0.2 ml/只,给药12天后,处死动物,剥离瘤块称重,计算肿瘤生长抑制率,用免疫组织化学法检测各组小鼠肿瘤组织中VEGF的表达程度。结果与模型组比较,灵芝孢子油对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有明显抑制作用(P<0.05,P<0.01)。造模后各组小鼠VEGF均为阳性表达,灵芝孢子油各组可降低小鼠H22瘤组织中VEGF的阳性表达(P<0.05,P<0.01)。结论灵芝孢子油对H22移植性癌细胞生长有抑制作用,可降低瘤细胞中血管生成调控基因VEGF的表达。     

艾迪滴丸对H22荷瘤小鼠化疗的增效减毒作用

目的:观察艾迪滴丸对荷瘤小鼠化疗后的增效减毒作用。方法:建立移植性H22肿瘤小鼠模型,分别观察艾迪滴丸单用以及与阈下量的环磷酰胺(CPA)、5-氟尿嘧啶(5-FU)合用时的抑瘤率;艾迪滴丸与治疗量CPA合用时的体质量、外周血白细胞数和骨髓有核细胞数。结果:艾迪滴丸与CPA、5-FU合用后抑瘤率升高,艾迪滴丸对CPA治疗H22荷瘤小鼠所引起的体质量、外周血白细胞数和骨髓有核细胞数下降有明显的升高作用。结论:艾迪滴丸可增强化疗药的抑瘤效果,减轻化疗不良反应。     

白花蛇舌草多糖对S180和H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究

目的研究白花蛇舌草多糖对S180和H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫器官的影响。方法应用肉瘤S180、肝癌H22荷瘤小鼠作为动物模型,连续灌胃给药10 d后脱颈椎处死,剥离肿瘤、胸腺、脾脏,称质量,计算抑瘤率及胸腺、脾脏指数。结果分别以30,20和10 mg.kg-1剂量的白花蛇舌草多糖灌胃,对肉瘤S180的抑制率分别为36.09%,28.66%和17.54%,对肝癌H22的抑制率分别为49.68%,40.47%和27.19%,相比模型组有显著性差异(P<0.05),对荷瘤小鼠的胸腺指数、脾脏指数无明显影响。结论白花蛇舌草多糖对S180和H22荷瘤小鼠均有抗肿瘤作用,并呈现一定的量效关系。     

榄香烯联合氟尿嘧啶对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的观察榄香烯联合氟尿嘧啶（5-FU）对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法小鼠左腋窝下皮下种瘤造实体瘤模型。将35只荷瘤小鼠等分为5组,分别以榄香烯高剂量（100mg·kg^-1）、榄香烯低剂量（50mg·kg^-1）、5．FU（20mg·kg^-1）、榄香烯低剂量（50mg·kg^-1）联合5．FU（20mg·k^-1）及生理盐水（0．2mE）处置10d,记录各组小鼠治疗期间体质量及移植瘤的体积并计算抑制率,HE染色法观察各切片中瘤组织的差异。结果荷瘤小鼠经药物处置5d后,各用药组瘤体积较生理盐水对照组均有缩小,差异有统计学意义（P〈0．05）,联合组优于单独用药组;对小鼠体质量影响,联合组及5-FU组均大于榄香烯组及对照组;组织切片中可见各用药组对瘤组织不同程度的破坏。结论榄香烯能有效地抑制H22肿瘤的生长,可以作为化疗药5-Fu的辅助药物。     

丝裂霉素C磁性纳米微球的制备

目的:以丝裂霉素C为药物模型,研究磁性纳米抗肿瘤药物的制备工艺及方法。方法:采用正交设计优化工艺并筛选,以纳米级Fe_3O_4为磁性核心,人血清白蛋白为膜材,利用乳液固化法制备包载丝裂霉素C 的磁性纳米微球,并借助透射、扫描电镜观察微球形态,通过激光粒度分析仪作粒度分析,利用高效液相色谱(HPLC)测量载药量及包封率,以磁性测试仪进行体外磁响应性测定。结果:该优化的磁性纳米微球在电镜下呈表面光滑的核壳样球型微粒,平均粒径为217.7nm,微球载药量为7.89%,包封率为90.5%,体外饱和磁化强度为21.85emu·g~(-1)。结论:磁性纳米载药微球为肿瘤的主动靶向治疗提供了一种可能的新剂型,有较好的临床应用前景。     

丝裂霉素C的心肌毒性作用

丝裂霉素C对心肌细胞有明显毒性作用,电子显微镜观察显示小鼠在体心肌细胞肌丝集合体断裂、溶解,细胞核染色质集聚、核膜皱缩等;对体外培养心肌细胞可引起搏动频率减慢、节律失常,乳酸脱氢酶释放增加,严重者细胞停搏甚至固缩或脱落,对心肌细胞的DNA合成也有明显抑制作用。     

Preparation of camptothecin-loaded targeting nanoparticles and their antitumor effects on hepatocellular carcinoma cell line H22

Abstract

Camptothecin (CPT) is an effective anticancer agent against various cancers but the clinical application is limited because of its poor water solubility, low bioavailability and severe toxic side effects. The aim of the present study was to evaluate the feasibility of using targeted NPs as a high-performance CPT delivery system that targets liver cancer cells through intravenous (i.v.) administration route. CPT was incorporated into biotin-F127-PLA or F127-PLA polymeric nanoparticles (NPs) by a dialysis method. The preparation of the targeting NPs was performed by conjugating biotin-F127-PLA NPs with anti-3A5 antibody. The antitumor effect of the CPT-loaded nanoparticles against H22 cells in vitro was determined using an MTT assay. Tissue distribution and tumor inhibition in vivo were also evaluated. Survivin mRNA expression was assessed by real-time polymerase chain reaction. Results showed that the targeted CPT NPs exhibited regular spherical shapes with a mean diameter of approximately 180?nm. In vitro release of the targeted CPT NPs exhibited an initial burst (40%) within 12?h, followed by a slow release. Cytotoxicity test against H22 cells indicated that the targeted CPT NPs exerted significant antitumor effects. Compared with free CPT and non-targeted CPT NPs, the targeted CPT NPs showed superior inhibition ratio against tumor in vivo, which may be associated with reduced survivin mRNA expression. The results suggested that the new targeted CPT NPs may be a promising injectable delivery system for cancer therapy.     

聚肌胞对丝裂霉素C所诱发小鼠骨髓细胞染色体畸变的抑制作用

在ip丝裂霉素C(MMC,5.20 mg·kg~(-1))前24h内将聚肌胞(polv I:C)sc给小鼠,可明显抑制MMC所诱发的小鼠骨髓细胞染色体畸变频率,具有剂量效应关系,Poly I:C(0.50 mg·kg~(-1))sc后4和12h对染色体畸变的抑制作用最强,而polvI:C(0.50 mg·kg~(-1))sc后4 h所取小鼠血清亦具有抑制染色体畸变的作用,结果提示polvI:C和其诱导的小鼠血清均可预防MMC对遗传物质的损伤作用。     

臭牡丹提取物对H22荷瘤小鼠体内抑瘤作用及对相关蛋白表达的影响

目的 研究臭牡丹提取物对H22实体移植瘤的抑制作用及与B淋巴细胞瘤/白血病-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达的相关性。方法 皮下接种H22瘤株建立小鼠H22实体移植瘤模型。60只荷瘤鼠随机分为模型组、5-氟尿嘧啶（5-Fu）组和臭牡丹高、中、低剂量（2.18、1.09、0.55 g/kg）组,每组12只,各组分别给予生理盐水、5-Fu（25 mg/kg,1次/d）及不同浓度的臭牡丹提取物干预。连续给药14 d后处死,检测小鼠体质量变化、抑瘤率及脾脏和胸腺指数;Western blot法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,臭牡丹高、中剂量组小鼠的肿瘤质量均显著降低（P<0.01）,胸腺和脾脏指数显著增加（P<0.05）;同时Bax蛋白的表达水平显著上调,Bcl-2蛋白的表达显著降低（P<0.01）。结论 臭牡丹提取物能够抑制H22实体移植瘤生长,其机制可能与上调Bax/Bcl-2比值和免疫调节有关。