乳腺癌组织Cox-2和ER β mRNA表达及其相关性研究

目的：探讨乳腺癌组织中还氧化酶-2（Cox-2）与雌激素受体β（ER β）mRNA的表达及其相关性。方法：以β-actin基因为内参照，应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术，检测35例乳腺癌患者的乳腺癌组织、相应癌旁组织和相应正常乳腺组织中Cox-2和ER β mRNA表达，应用Gene Tools软件对RT—PCR产物电泳带进行半定量分析。结果：35例样本中，癌组织Cox-2 mRNA表达（29例）明显增高，全距为0．03～0．99，与相应癌旁组织表达（全距0．01～0．52）和正常乳腺组织表达（很弱或无表达）差异有统计学意义，P〈0．05。Cox-2 mRNA表达与年龄、原发肿瘤大小和TNM分期无关，P〉0．05；而与淋巴结转移状况有关，P〈0．05。癌组织中ER β mRNA表达水平（全距0～0．74）低于相应癌旁组织（全距0～0．90）和相应正常乳腺组织（全距0～1．14），P〈0．05。ER β mRNA表达与年龄无关，P〉0．05；而与原发肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移状况有关，P〈0．05。Cox-2 mRNA的表达与ER β mRNA表达无明显相关。结论：Cox-2和ER β的mRNA表达与乳腺癌生物学特性有关，Cox-2与ER β mRNA表达无明显相关。     

ERα和ERβ在乳腺癌和癌旁组织内的表达

目的检测ERα和ERβ在乳腺癌及癌旁组织内的表达，探讨其与乳腺癌发生、发展的关系。方法选取原发性可手术乳腺癌97例和癌旁组织61例，采用免疫组化S-P法测定ERα、EERβ的表达。结果ERα、ERβ均在细胞核内表达。癌旁组织内ERβ阳性表达率高于ERα（分别为91．8％和42．6％，P〈0．01），两者差异无显著性（P〉0．05）。ERβ在癌旁组织、腋窝淋巴结阴性（阳性率为81．6％）和阳性（阳性率为50．8％），三组中表达差异具有显著性（P〈0．01），且ERβ在腋窝淋巴结阴性和阳性癌组织中表达的差异亦具有显著性（P〈0．01）。ERα在三组内表达的差异无显著性（P〉0．05）。结论ERβ，ERα均为细胞核受体。ERβ在癌旁和癌组织内广泛表达，且在癌旁组织内阳性表达率高于ERα，ERβ表达降低与乳腺癌腋窝淋巴结转移有因果关系；而ERα的表达与乳腺癌发生及腋窝淋巴结转移无关。     

乳腺癌组织中BRMS1mRNA表达及意义

[目的]探讨BRMS1mRNA在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌临床病理特征的关系。[方法]采用Trizol提取组织总RNA，将mRNA转录成cDNA，用实时荧光定量聚合酶链反应（RFQ-PCR）技术检测乳腺组织BRMS1mRNA表达，以BRMS1mRNA和GAPDHmRNA含量的比值表示BRMS1表达水平。[结果]乳腺癌组织中BRMS1mRNA的表达水平明显低于癌旁组织（P〈0．01），也明显低于正常乳腺组织（P〈0．01），BRMR1mRNA低表达与临床病理分期和淋巴结转移有关（P〈0．05，P〈0．01），而与患者年龄、癌肿大小、病理类型无关（P〉0．05）。[结论]乳腺癌组织中BRMS1mRNA的低表达与乳腺癌的发展与转移有关，可能成为判断乳腺癌转移的一个标志物。     

MTA1表达与乳腺癌浸润转移的关系

[目的]探讨转移相关基因1（metastasis assiciated gene 1,MTA1）在乳腺癌浸润与转移中作用。[方法]用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术联合Zvmed^TM免疫组化方法分别检测55例乳腺癌、癌旁组织中MTA1mRNA和蛋白表达情况。[结果]MTA1 mRNA在乳腺癌中阳性表达率为52．7％（29／55）．在癌旁乳腺组织的阳性率23．6％（13／55）：两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。MTA1蛋白在乳腺癌组织中阳性表达率为49．1％（27／55）,在癌旁乳腺组织中阳性表达率为16．4％（9／55）：两者比较有统计学差异（P〈0．01）。MTA1在乳腺癌组织中的阳性检出率与临床分期、淋巴结转移数目（〉4）、病理分级和C-erbB-2阳性相关（P〈0．05）,与年龄、ER、PR无明显关系（P〉0．05）。[结论]MTA1对乳腺癌浸润、转移可能有促进作用。有可能成为预测乳腺癌浸润与转移的参考指标。     

抑癌基因ING1在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨ING1基因在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌发生发展的作用。方法采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PER）方法检测51例乳腺癌组织、30例癌旁正常组织、12例乳腺良性肿瘤组织中ING1基因mRNA的表达情况。分析乳腺癌组织中ING1mRNA的表达与临床病理特征的关系。结果乳腺癌组织中ING1mRNA的表达水平（0．5458±0．2310）低于癌旁正常组织（0．6625±0．1699）。ING1mRNA表达水平在癌组织与癌旁正常组织、良性肿瘤三组间比较的差异有统计学意义（P〈0．05）;ING1mRNA在乳腺癌组织中的表达水平与病理类型及淋巴结转移有密切关系（P〈0．05）,与其他病理学特征无关（P〉0．05）。结论ING1mRNA表达水平低下可能与乳腺癌的发生发展及预后密切相关,有可能成为乳腺癌基因治疗的新靶点。     

乳腺癌组织磷酸化STAT3表达及其与淋巴结转移关系的研究

目的：研究乳腺癌组织中磷酸化STAT3（pSTAT3）的表达情况，及其与病变性质、淋巴结转移、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和c-erbl3-2表达的关系。方法：选择乳腺浸润性导管癌45例和乳腺癌旁组织12例，应用Envision免疫组化法对其进行pSTAT3蛋白的检测，并进行相关统计分析。结果：pSTAT3在乳腺癌组织中的阳性表达率（60．0％）明显高于癌旁组织中的阳性表达率（16．7％），P〈0．01。pSTAT3在有淋巴结转移患者癌组织中的阳性表达率（77．8％）比没有淋巴结转移患者癌组织中的阳性表达率（48．10A）明显升高，P〈0．05。pSTAT3在PR阳性患者癌组织中的阳性表达率（72．3％）比PR阴性的阳性表达率（37．5％）明显升高，P〈0．05。pSTAT3的表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小及ER和c-erbB-2的表达未见相关性，P〉0．05。结论：pSTAT3蛋白的表达增强可能与乳腺癌淋巴结转移以及PR有关，提示STAT3基因可能参与了乳腺癌的发生、发展和预后过程。     

乳腺癌组织中环氧化酶-2 mRNA的表达及其临床病理意义

目的：探讨环氧化酶－2（COX－2）mRNA在乳腺癌中的表达以及与乳腺癌临床病理特征的关系。方法：以β-actin基因为参照,应用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术,检测30例乳腺癌组织及癌旁正常腺体中COX－2 mRNA的表达。应用条带密度分析软件,定量分析RT－PCR产物电泳带密度。结果：30例癌组织中,28例COX－2 mRNA表达水平明显增高,全距为0.05-0.91,中位数为0.53;癌旁正常腺体中无表达或表达很弱,全距为0－0.09,中位数为0。癌组织与正常腺体中COX－2的表达差异有显著性（P＜0．05）。COX－2的高表达与淋巴结的转移有关（P＜0．05）,而与年龄、癌肿的大小、临床病理分期、病理类型无关（P＞0．05）。结论：乳腺癌组织中COX－2 mRNA表达水平高于正常腺体,其表达与乳腺癌的发生、发展及淋巴结转移有关。     

增殖抑制基因在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的：探讨新的增殖抑制基因（hypevplasia suppressor gene，HSG）在乳腺癌组织中的表达及其意义。方法：应用免疫组织化学和原位杂交法检测55例乳腺癌标本和18例癌旁正常乳腺组织标本中HSG的表达。应用Image Proplus数码图像分析系统测定组织切片的积分吸光度（D）值，分析其与临床病理参数的相关性。结果：HSGmRNA及其蛋白的阳性染色主要集中于细胞质，呈棕黄色颗粒。55例乳腺癌标本中HSG mRNA及其蛋白的阳性表达率分别为40．00％（22／55）和41．82％（23／55），而癌旁正常乳腺组织的表达率分别为83．33％（15／18）和88．89％（16／18），2组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。在乳腺癌组织中HSGmRNA及其蛋白的低表达与组织学分级、淋巴结转移和雌激素受体（estrogen receptor，ER）有关（P〈0．05），与肿瘤大小和年龄等无关（P〉0．05）。结论：HSG在不同乳腺组织中的表达量不同，提示HSG可能与乳腺癌的发生、发展有密切关系。     

hMAM检测乳腺癌骨髓微转移及其意义

目的：检测乳腺癌骨髓中hMAM mRNA表达，判断骨髓微转移状况，探讨其与生物学因子及预后的关系。方法：采用RT—PCR法检测骨髓组织中hMAM mRNA表达；免疫组化SP法检测乳腺癌组织中ER、PR、Cath—D及VEGF的表达。结果：102例Ⅰ～Ⅲ期乳腺癌患者骨髓组织hMAM mRNA表达阳性率37．3％。ER、PR阴性及弱阳性的患者骨髓hMAM mRNA表达率高（P〈0．001，P〈0．05）；骨髓hMAM mRNA表达随Cath—D、VEGF蛋白表达增强而呈增高趋势（P〈0．05，P〈0．05）。，乳腺癌患者骨髓hMAM阳性者易发生远处转移（P〈0．05）。结论：乳腺癌骨髓微转移与癌组织中某些生物学因子有一定相关性；骨髓hMAM阳性患者发生远处转移机会高，微转移检测可以作为判断乳腺癌预后的指标之一。     

PokemonmRNA在乳腺癌中的表达及与c—myc相关性分析

目的：探讨人乳腺癌中原癌基因c—myc和PokemonmRNA在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌发生、转移的相关性。方法：收集浸润性导管癌组织、痛旁乳腺组织、正常乳腺组织各45、20和20例,用原位杂交法检测PokemonmRNA表达,并用免疫组织化学法检测浸润件导管癌c—myc表达,并进行统计分析。结果：乳腺癌细胞质PokemonmRNA的表达率为71．2％（37／45）,显著高于癌旁正常乳腺组织40％（8／20）、乳腺增生组织25％（5／20）,三者有显著性差异（P〈0．05）,细胞质c—myc阳性率分别为86．67％、60．0％、50．0％,三者有显著性差异（P〈0．05）。细胞质PokemonmRNA表达与乳腺癌淋巴结转移、组织学分级相关（P〈0．05）。细胞质c—myc表达与乳腺癌腋窝淋巴结转移相关（P〈0．05）。45例乳腺癌细胞质PokemonmRNA与c—myc表达呈正相关（1=0．585,P〈0．05）。结论-PokemonmRNA的表达可能在乳腺导管癌的组织发生中起关键作用,c—myc的过度表达可能与乳腺癌Pokemon基因转录激活有关。     

乳腺癌组织Cox-2和VEGF表达及与激素受体关系的研究

目的：研究环氧化酶-2（Cox-2）及血管内皮细胞生长因子（VEGF）在乳腺癌发生发展中的相关作用。方法：应用免疫组织化学法检测128例乳腺癌组织中Cox-2、VEGF及ER和PR的表达。结果：Cox-2及VEGF在乳腺癌组织中的表达有明显正相关（r1=0．852，P〈0．05），并且在激素受体阴性组患者的表达高于阳性组患者，（χcox-2^2=12．40，χVEGF^2=8．85，P〈0．01）。结论：Cox-2及VEGF在乳腺癌的表达具有提示预后的作用，其相应抑制剂有一定的临床应用前景。     

p120ctn 和 Her －2在 ER、PR 阴性乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨连环蛋白 p120（p120ctn）和人表皮生长因子受体－2（Her －2）在 ER、PR 阴性乳腺癌组织中的表达情况及其与临床病理特征的关系。方法：用免疫组化方法检测87例雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）阴性乳腺癌组织及其中41例癌旁乳腺组织和33例乳腺纤维腺瘤组织中 Her －2及 p120ctn 的表达情况。结果：87例 ER、PR 阴性乳腺癌组织中 p120ctn 蛋白在细胞膜异常表达率为63．2％（55／87）,Her －2阳性表达为60．9％（53／87）。41例癌旁乳腺组织中 p120ctn 蛋白在细胞膜异常表达率为7．3％（3／41）,Her －2无阳性表达;33例乳腺纤维腺瘤组织中 p120ctn 异常表达率为9．1％（3／33）,Her －2亦无阳性表达。p120ctn 异常表达、Her －2阳性表达在 ER、PR 阴性乳腺癌组织与癌旁乳腺组织、乳腺纤维腺瘤组织中差异显著（P ＝0．000）。p120ctn 的异常表达和 Her －2的阳性表达与癌组织的组织学分级和淋巴结转移均显著相关（P＜0．05）,与患者的月经、年龄、肿瘤大小和临床分期无关（P ＞0．05）。p120ctn 的异常表达和 Her －2的阳性表达在 ER、PR 阴性乳腺癌组织中呈显著正相关关系（r ＝0．952,P ＝0．000）。结论：p120ctn 的异常表达和Her －2阳性表达在 ER、PR 阴性乳腺癌的发生、发展中可能起到协同作用。联合检测对评估预后以及为基因靶向治疗提供初步依据。     

散发性乳腺浸润性导管癌中BROA1表达及临床意义

目的：研究散发性乳腺浸润性导管癌（invasive ductal carcinoma,IDC）（breast cancer 1 BRCA1）基因的表达及其与其临床病理特征之间的关系。方法：采用免疫组化sP三步法检泖167例乳腺浸润性导管癌,53例乳腺腺病患者的石蜡标本BRCA1的表达。从病理科的档案提取患者的年龄,肿物大小,淋巴结转移情况,ER,PR,Her-2表达结果,分析BRCA1的表达和患者的年龄,肿物大小,淋巴结转移情况及ER,PR,Her－2表达的关系。结果：BRCA1蛋白在IDC组织表达率56．7％（38／67）,癌旁组织表达率80．0％（36／45）,乳腺腺病组织表达率92．5％（49,53）。阳性细胞定位除细胞核外,也见于胞浆。IDC癌组织与癌旁组织、乳腺腺病组织比较,BRCA1阳性表达率均下降,均有显著性差异（P〈0．05）。BRCAI的表达与淋巴结转移呈负相关（r=-0．137,P〈0．05）,与ER、PR、Her－2的表达均呈负相关（r值分别为－0．439,－0．250,－0．363,P〈0．05）,与年龄、肿物大小无明显相关性（P〉0,05）。结论：BRCA1蛋白可作为估计乳腺癌生物学行为和预后的潜在指标。     

Galectin-3表达与乳腺癌进展、转移关系的研究

目的研究galectin-3表达与乳腺癌进展及淋巴结转移的关系。方法应用组织芯片技术和免疫组织化学方法对117例浸润性乳腺癌和41例乳腺良性病变（乳腺纤维腺瘤及乳腺小叶增生）的galectin-3表达进行检测。结果Galectin-3在乳腺癌和乳腺良性病变中的阳性率分别为87．61％（99／113）和29．73％（11／37），乳腺癌组galectin-3表达率明显高于乳腺良性病变组（P〈0．001）。乳腺癌中galectin-3阳性表达与淋巴结转移（P〈0．005）、肿瘤低分化（P〈0．05）、ER阴性（P〈0．05）及c-erbB-2阳性表达（P〈0．05）有关，但与TNM分期、患者年龄及PR、E—cadherin表达的关系尚无统计学意义。结论乳腺癌中galectin-3表达可能促进肿瘤演进，并可能增加患者发生淋巴结转移的风险。     

PPARγ蛋白与PTEN蛋白表达及其相关性在人乳腺癌中的研究

目的：探讨人乳腺癌组织中过氧化物酶体增殖因子激活受体（peroxisomeproliferators—activatedre—ceptorgmma,PPARY）和第十染色体同源丢失性磷酸酶一张力蛋白基因（phosphataseandtensinhomologydele—tedonchromosometen,PTEN）蛋白表达的相关性。方法：采用免疫组化S—P法,检测20例人乳腺癌组织、癌旁组织中PTEN与PPARγ的表达情况。结果：PPARγ和PTEN的表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤直径大小、TNM分期、病理学类型、孕激素受体（PR）及Her-2表达情况无显著相关性（P〉0．05）;肿瘤组织高分化组患者的PPARγ蛋白表达阳性率显著高于低分化组（P〈0．05）;腋窝淋巴结转移阴性者PTEN的表达显著高于≥4个淋巴结转移者（P〈0．0125）;雌激素受体（ER）阳性者PTEN的表达显著高于ER阴性者（P〈0．05）;癌旁组织PPARγ和PTEN的表达显著高于癌肿组织（P〈0．01）;PPARγ与PTEN蛋白在乳腺癌的表达成显著正相关（P〈0．01）。结论：人乳腺癌中PPARγ与PTEN蛋白表达相关联,并可能参与乳腺癌的发生、发展、浸润与转移。     

乳腺癌中肾上腺髓质素的表达及其与癌组织分化、转移间的关系

目的:探讨乳腺癌组织中肾上腺髓质素（adrenomedullin, ADM）的表达情况及其临床意义。方法：取河北医科大学第四医院外一科2005年3月至2005年4月手术切除的32例乳腺癌组织,以及同组病例距癌组织外缘5 cm外的癌旁乳腺组织,采用RTPCR检测人乳腺癌细胞株MCF7和32例乳腺癌组织及癌旁组织中ADM mRNA的表达情况,免疫组织化学染色检测32例乳腺癌组织中ER、PR、CerbB2的表达情况,并分析ADM mRNA 与临床病理指标之间以及与ER、PR、GerbB2表达间的关系。结果：人乳腺癌MCF7细胞株呈ADM mRNA阳性表达。乳腺癌组织中ADM mRNA阳性表达率为75%（24/32）,显著高于癌旁5 cm外乳腺组织（0%,0/32;P<0.01）。人乳腺癌组织ADM mRNA的表达与肿瘤大小、TNM分期、病理类型、ER、PR和CerbB2等临床病理指标无关,但与组织学分级（P<0.01）和腋窝淋巴结转移有关（P<0.05）。结论： ADM mRNA在乳腺癌组织中表达增加,其强阳性表达与组织学分化差或腋窝淋巴结转移密切相关。     

ERβ在乳腺癌中表达的意义

目的：探讨ERβ表达与乳腺癌临床及病理参数的关系。方法：应用免疫组化En Vision二步法检测155例手术切除的乳腺癌标本中ERβ的表达情况。结果：155例标本中ERβ的阳性表达率为42．6％，ERβ的表达与绝经、淋巴结转移以及有无远处转移无关，而与肿块大小及乳腺癌的TNM分期显著相关（P〈20．001，P〈0．01）。ERβ在乳腺导管内癌及伴微浸润中的表达明显高于在浸润性导管癌中的表达，差异有显著性（P〈0．05），而浸润性导管癌、黏液腺癌、浸润性小叶癌之间，导管内癌及伴微浸润、黏液腺癌、浸润性小叶癌之间，导管内癌及伴微浸润、黏液腺癌之间比较差异均无显著性（P〉0．05）。结论：ERβ与乳腺癌的发生、发展及预后有关，可作为反映乳腺癌生物学行为的指标。     

ER、PR、Her-2在乳腺癌中的表达

目的探讨乳腺癌组织中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人类表皮生长因子受体-2（Her-2）的表达与临床特征的关系。方法用免疫组织化学法检测311例乳腺癌组织中ER、PR、Her-2的表达。结果311例乳腺癌组织中Her-2阳性表达明显低于ER和PR,分别为87例（27．97％）、185例（59．49％）和195例（62．70％）。与非浸润性乳腺癌相比,ER、PR在浸润性乳腺癌中的表达明显减少（P〈0．05）。ER的表达随乳腺癌TNM分期增加而减少（P〈0．05）,而PR和Her-2的表达与TNM分期兀关（P〉0．05）：与无腋窝淋巴结转移者相比,有腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织中ER表达明显减少,Her-2表达明显增加（P〈0．05）。结论ER、PR、Her-2与乳腺癌的临床特征密切相关,其可能参与乳腺癌的生物学行为调控,常规检测ER、PR、Her-2的表达可为乳腺癌治疗提供依据。     

FLIP基因在乳腺癌组织中表达的初步研究

目的：探讨FLIP基因（包括蛋白和mRNA水平）在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌生物学行为的影响方法：采用免疫组化和荧光实时定量PCR技术，检测乳腺浸润性导管癌和正常乳腺组织中FLIP蛋白及mRNA的表达。结果：FLIPL/S蛋白在浸润性导管癌中的平均染色积分为6．13±0.34，在正常乳腺组织中的平均染色积分为2．68±0.30，两组有显著性差异（P〈0．05）、FLIPS、FLIPs mRNA在浸润性导管癌中的含量均高于正常乳腺组织（P〈0．05）结论：FLIP在乳腺癌组织中高表达,可能通过阻断凋亡通路参与乳腺癌的发生。     

端粒酶hTERT mRNA表达在乳腺癌进展中的意义及其与p53的相关性

目的 探讨端粒酶hTERT mRNA表达在人乳腺癌发生、发展中的意义,观察肿瘤抑制基因p53与hTERT mRNA表达的关系。方法 收集浸润性导管癌标本25例,导管原位癌标本18例,导管上皮不典型增生标本20例,导管上皮单纯性增生标本7例,癌旁正常乳腺组织标本12例。用原位杂交法检测hTERT mRNA表达,并用免疫组化方法检测乳腺导管癌的p53蛋白表达。结果 hTERT mRNA在癌旁正常乳腺组织、乳腺导管单纯性增生中未见表达;在导管不典型增生、导管原位癌、浸润性导管癌中的阳性率分别为25．0％、83．3％和88．0％。导管原位癌、浸润性导管癌组织hTERT mRNA表达明显高于癌旁正常乳腺组织、乳腺导管单纯性增生和导管不典型增生组织（P〈0．05）。hTERT mRNA表达与浸润性导管癌肿块大小及淋巴结转移与否无关（P〉0．05）。43例乳腺导管癌中,hTERT mRNA表达与p53蛋白表达呈正相关（r=0．5540,P〈0．01）。结论 端粒酶hTERT mRNA表达可能在乳腺导管癌的组织发生中起关键作用,半定量原位检测hTERT mRNA表达,可为导管上皮不典型增生与导管原位癌的鉴别诊断提供帮助。p53突变可能与乳腺导管癌hTERT基因转 录激活有关。