异丙酚通过调控miR-506对骨肉瘤细胞增殖、迁移侵袭及凋亡的影响

目的:研究异丙酚是否通过调控微小RNA(miRNA/miR)-506影响骨肉瘤细胞增殖、迁移侵袭及凋亡。方法:骨肉瘤HOS细胞分为NC组(未处理)、Pro-L组(1 μg/mL异丙酚)、Pro-M组(5 μg/mL异丙酚)、Pro-H组(10 μg/mL异丙酚)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-506组(转染miR-506 mimic)、Pro+anti-miR-NC组(转染antimiR-NC+10 μg/mL异丙酚)、Pro+anti-miR-506组(转染miR-506 inhibitor+10 μg/mL异丙酚)。应用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法测定细胞增殖,免疫印迹实验(Western blotting)评估细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达,Transwell实验检测迁移侵袭,流式细胞术分析细胞凋亡,荧光定量PCR测定miR-506表达。结果:与NC组比较,Pro-L、Pro-M、Pro-H组HOS细胞的抑制率、p21、Bax蛋白水平、凋亡率和miR-506表达水平逐渐增加,CyclinD1、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白水平、迁移细胞数和侵袭细胞数逐渐减少,且呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-506组HOS细胞的抑制率、凋亡率、p21、Bax蛋白水平比miR-NC组升高,迁移细胞数、侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白水平比miR-NC组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Pro+anti-miR-506组较Pro+anti-miR-NC组降低HOS细胞中miR-506表达水平、抑制率、凋亡率、p21、Bax蛋白水平,提高迁移细胞数、侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论: 1、5、10 μg/mL异丙酚上调miR-506的表达,抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移侵袭,并且促进其凋亡。     

miR-542-3p对骨肉瘤细胞侵袭能力的影响及其靶基因预测

目的 明确miR-542-3p对骨肉瘤细胞系HOS和SAOS2细胞侵袭能力的影响,通过生物信息学建立miR-542-3p靶基因调控网络,并探讨其潜在作用靶点。方法 使用miR-542-3p mimics转染HOS和SAOS2细胞,同时设立正常组（未转染）及阴性对照组（转染miR-neg mimics）,Transwell小室试验检测转染后细胞的侵袭能力。通过美国国立生物信息中心（NCBI）基因表达共享数据库（GEO）联合GEO2R平台,获取并分析miRNA-542-3p与miR-neg转染的U2OS细胞的基因表达谱数据及其差异表达基因,进而使用miRNA预测数据库及Cytoscape软件,预测并建立miR-542-3p靶基因调控网络。实时荧光定量PCR验证miR-542-3p转染HOS和SAOS2细胞后,部分预测目标靶基因的mRNA表达水平变化。结果 miR-542-3p干预组HOS和SAOS2细胞的侵袭能力较正常组和阴性对照组明显降低（P均＜0.05）。数据库差异基因分析表明,miR-542-3p与miR-neg转染的U2OS细胞的表达差异基因共有417个,其中185个基因表达下调。miRNA预测数据库预测的266个靶基因中,有14个与差异基因分析中得到的表达下调基因重合。实时荧光定量PCR分析得出,ILK、TBPL1、ETS1这3个预测靶基因在miR-542-3p干预组中的表达水平显著低于阴性对照组,差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论 miR-542-3p通过下调ILK、TBPL1、ETS1显著抑制骨肉瘤细胞的侵袭能力。     

过载静压下益肾活血通络含药血清对人椎间盘髓核细胞凋亡的影响

目的：探讨在过载静压应力下益肾活血通络方含药血清对人椎间盘髓核细胞凋亡的影响及其相关机制。方法：将人椎间盘髓核细胞分为3组,空白组无任何干预,模型组和中药血清干预组在体外3 MPa压应力干预下作用2、4、6 h后,观察椎间盘髓核细胞的形态、生长状况、超微结构的变化及差异;检测椎间盘髓核细胞的凋亡率及髓核细胞内核因子κB p65（nuclear factor kappa-B p65,NF-κB p65）,Y染色体中性别决定区相关的高迁移率组框9（SRY-related high mobility group-box 9,SOX9）,C/EBP同源蛋白（C/EBP-homologous protein,CHOP）,基质金属蛋白酶-13（matrix metalloprotein-13,MMP-13）蛋白和相对应基因表达情况。结果：同一作用时间下模型组髓核细胞与空白组比较：体积缩小、胞浆减少、生长状况更差;中药血清干预组髓核细胞较模型组体积稍大,形态保存更完整,胞浆更丰富,生长状况更好。同一作用时间下空白组髓核细胞超微结构完整,主级突起、次级突起结构未见断裂,模型组与中药血清干预组超微结构破坏,主级突起、次级突起可见不同程度断裂,两组超微结构未见明显差异。相同作用时间下模型组髓核细胞凋亡率高于空白组,而中药血清干预组髓核细胞凋亡率低于模型组（P<0.05）;随作用时间增加,空白组、中药血清干预组椎间盘髓核细胞凋亡率未见明显差异,模型组椎间盘髓核细胞凋亡率增加。相同作用时间下,中药血清干预组较模型组NF-κB p65、CHOP、MMP-13表达减少,SOX9表达增多（P<0.05）;随作用时间的增加,空白组、模型组髓核细胞的NF-κB p65、CHOP、MMP-13表达增多,SOX9表达减少,且模型组表达程度较空白组大（P<0.05）;通过基因表达总体来看,在相同作用时间下,中药血清干预组髓核细胞基因NF-κB p65、CHOP、MMP-13相对定量较模型组均减少,而SOX9相对定量增多（P<0.05）;空白组髓核细胞基因NF-κB p65、CHOP、MMP-13相对定量比模型组减少,而SOX9相对定量增多（P<0.05）;随作用时间的增加,空白组、模型组髓核细胞的NF-κB p65、CHOP、MMP-13相对定量增多,SOX9相对定量减少（P<0.05）。结论：益肾活血通络方能减少过载静压下髓核细胞的凋亡,具有延缓髓核细胞退变的作用,其机制可能通过抑制髓核细胞NF-κB p65信号通路,使CHOP、MMP-13表达减少,SOX9表达增加有关。     

长链非编码RNA PCAT19对胰腺癌细胞增殖与侵袭的影响及其作用机制

背景与目的 长链非编码RNA PCAT19（lncRNA PCAT19，简称PCAT19）在多种肿瘤中表达上调，且与恶性进展和不良预后密切相关。然而，PCAT19在胰腺癌中的表达、功能及作用机制尚无研究报道。笔者前期通过starBase数据库预测PCAT19可与miR-195-5p互补结合，因此，本研究探讨PCAT19在胰腺癌细胞中的表达与作用，及其与靶基因和相应miRNA的调控关系。方法 用qRT-PCR检测人胰腺导管上皮细胞系（HPNE）和胰腺癌细胞系（PANC-1、SW1990、HS766T、CFPAC-1）中PCAT19及miR-195-5p的表达。用双萤光素酶报告基因分析PCAT19与miR-195-5p的靶向结合作用。将PANC-1细胞分别转染PCAT19沉默序列si-PCAT19（si-PCAT19组）、阴性对照序列（si-NC组）、miR-195-5p抑制序列+si-PCAT19（共转染组）后，用MTT测定细胞增殖能力，Transwell测定细胞侵袭能力，Western blot检测Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白的表达。结果 各胰腺癌细胞系中PCAT19表达水平均明显高于HPNE细胞，而miR-195-5p的表达水平均明显低于HPNE细胞（均P<0.05）。双萤光素酶实验显示miR-195-5p是PCAT19的靶miRNA。与si-NC组PANC-1细胞比较，si-PCAT19组PANC-1中miR-195-5p表达水平明显升高，细胞增殖能力与侵袭能力明显降低，β-catenin、c-Myc和cyclin D1表达水平明显下调（均P<0.05），而共转染组以上各项指标与si-NC组差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论 PCAT19在胰腺癌细胞中表达升高，其可促进胰腺癌细胞增殖和侵袭，机制可能与调控miR-195-5p并影响Wnt/β-Catenin信号通路有关。     

原发性中枢神经系统淋巴瘤Toll样受体4表达水平与弥散加权成像表观弥散系数值的相关性

目的 观察原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)Toll样受体4(TLR4)表达水平与MR弥散加权成像(DWI)表观弥散系数(ADC)值的相关性。方法 回顾性分析17例经病理确诊的PCNSL患者,观察病灶ADC值、TLR4及NF-κB表达水平之间的相关性。结果 PCNSL病灶ADC值为460×10^－6~1 034×10^－6 mm²/s,平均(756±147)×10^－6 mm²/s;TLR4表达水平为0.02~0.11,平均0.06±0.03,NF-κB表达水平为0.04~0.15,平均0.08±0.03。TLR4表达水平与ADC值呈负相关(r=－0.76,P<0.01);NF-κB表达水平与TLR4及ADC值之间无明显相关性(P均>0.05)。结论 PCNSL的TLR4表达水平与其ADC值呈负相关。     

动态牵引支架结合有限内固定与克氏针内固定治疗近指间关节Pilon骨折的病例对照研究

目的:比较动态牵引支架结合有限内固定与克氏针交叉内固定治疗近指间关节Pilon骨折的临床疗效及安全性。方法:自2012年6月至2014年6月,采用动态牵引支架结合有限内固定与克氏针交叉内固定两种手术方案治疗闭合近指间关节Pilon骨折41例45指,全部获得随访。动态牵引支架结合有限内固定组(A组)21例22指,男12例,女9例;平均年龄(30.6±5.6)岁。克氏针交叉内固定组(B组)20例23指,男11例,女9例;平均年龄(30.1±5.3)岁。定期复查X线片,评定关节主动活动范围、骨折愈合时间、感染率及术后关节活动疼痛等指标。结果:根据中华医学会手外科学会上肢部分功能评定试用标准评定,A组功能评定优良19例,B组13例,A组优于B组(Z=2.558,P=0.011).骨折平均愈合时间 A组(7.9±2.1)周,B组(8.1±2.3)周,两组差异无统计学意义(t=-0.304,P=0.762).A组感染5指,B组1指,A组感染率高于B组(χ²=3.287,P<0.05).术后关节活动疼痛VAS评分A组0.18±0.50,B组0.65±0.88,A组关节疼痛低于B组(t=-2.207,P<0.05).结论:动态牵引支架结合有限内固定治疗近指间关节Pilon骨折方法可靠,能有效固定骨折,进行早期功能锻炼,恢复关节功能。     

miR-204-5p/TNFRSF12A轴对甲状腺乳头状癌细胞侵袭能力的影响及机制

背景与目的 前期，笔者通过生物信息学分析和验证发现miR-204-5p在甲状腺乳头状癌（PTC）中呈低表达，并可能是PTC发生发展中的关键分子。因此，本研究进一步探讨miR-204-5p对PTC细胞侵袭能力的影响及机制。方法 采用Transwell实验检测miR-204-5p过表达和敲低对PTC细胞系TPC-1细胞的侵袭能力影响；通过miRDB网站预测miR-204-5p下游靶基因，并采用Western blot实验、Transwell实验、GEPIA数据库分析及双荧光素酶报告基因实验验证。结果 Transwell实验结果显示，过表达miR-204-5p的TPC-1细胞侵袭能力明显降低，而miR-204-5p抑制的TPC-1细胞侵袭能力明显增强（均P<0.05）。miRDB网站预测显示，TNFRSF12A可能为miR-204-5p下游靶基因；Western blot结果显示，过表达miR-204-5p的TPC-1细胞TNFRSF12A表达下调，而miR-204-5p抑制的TPC-1细胞TNFRSF12A表达上调；过表达TNFRSF12A的TPC-1细胞侵袭能力明显增强，TNFRSF12A抑制的TPC-1细胞的侵袭能力明显降低；TNFRSF12A可逆转miR-204-5p对TPC-1细胞侵袭能力的影响（均P<0.05）。GEPIA数据库分析显示，TNFRSF12A在PTC组织中高表达。双荧光素酶报告基因实验结果显示，TNFRSF12A是miR-204-5p的靶基因。结论 miR-204-5p可靶向结合TNFRSF12A mRNA的3''UTR抑制TNFRSF12A的表达，而PTC细胞中miR-204-5p表达下调，削弱了其对TNFRSF12A表达的抑制，从而导致PTC细胞侵袭能力增强。     

脊柱调衡手法与药物治疗退变性脊柱侧凸症的病例对照研究

目的:对比脊柱调衡手法与药物治疗对退变性脊柱侧凸症患者的疼痛及功能状态的影响。方法:2010年7月至2013年6月, 将38例退变性脊柱侧凸症患者采用掷硬币的方法随机分为脊柱调衡手法组(手法组)和药物组。手法组20例, 其中男9例, 女11例, 年龄58～74岁, 平均(66.63±7.73)岁, 病程3～8个月, 平均(5.65±2.58)个月;采用脊柱调衡手法(依次循经理筋、松解痉挛、整骨扳拿、通络放松法)治疗, 时间30 min,1次/d,4 d为1疗程, 共9个疗程。药物组男8例, 女10例, 年龄57～70岁, 平均(63.51±6.61)岁, 病程3～5个月, 平均(4.82±1.43)个月;予口服塞来昔布加盐酸乙哌立松, 4 d为1疗程, 共 9个疗程。观察治疗前后两组患者的VAS评分、脊柱侧凸Cobb角及腰椎ODI评分。结果:治疗后, 手法组VAS评分5.38±0.99与药物组6.36±1.31比较差异有统计学意义(t=2.618,P<0.05);手法组Cobb角(16.51±4.89)°与药物组(19.85±5.03) °比较差异有统计学意义(t=2.074,P<0.05);手法组腰椎ODI评分20.20±2.93与药物组26.01±3.11比较差异有统计学意义(t=5.592,P<0.05).结论:采用脊柱调衡手法治疗退变性脊柱侧凸症, 能够调整脊柱两侧的肌力平衡, 矫正脊柱冠状面失衡, 恢复脊柱正常序列, 减少和消除对神经根的压迫和刺激, 缓解腰腿痛症状, 改善生活质量。     

直接上方入路与后外侧入路在高龄股骨颈骨折半髋置换术中的早期疗效比较

目的:对比分析直接上方入路(direct superior approach,DSA)与后外侧入路(posterior lateral approach,PLA)在高龄股骨颈骨折半髋置换术中的早期临床疗效。方法:回顾性分析2020年1月至 2021 年12月收治的72例接受半髋置换手术老年股骨颈骨折患者的临床资料,其中36例采用微创DSA入路,男10例,女26例,年龄(82.82±4.05)岁;36例采用传统PLA入路,男14例,女22例,年龄(82.79±3.21)岁。比较两组患者围手术期相关指标、不同时间点Harris评分。结果:DSA组手术时间(79.41±17.39) min,比PLA组(98.45±26.58) min更短;切口长度(8.33±2.69) cm,比PLA组(11.18±1.33) cm短;术中失血量(138.46±71.58) ml,比PLA组(173.51±87.17) ml更少;初次下地时间(3.04±0.95) d,比PLA组(4.52±1.10) d更早;住院时长(8.70±1.89) d,比PLA组(10.67±2.35) d短(P<0.05)。两组术前Harris评分差异无统计学意义(P>0.05),术后1个月DSA组Harris功能和总分高于PLA组(P<0.05),而术后12个月两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在半髋置换手术中,DSA入路较PLA入路在手术时间、术中出血量、切口长度、初次下地时间、住院时长以及术后1个月的Harris评分等临床指标更优,在促进高龄股骨颈骨折患者术后早期康复上具有明显优势。     

中医骨伤科学的现代化是可持续发展的必由之路

21世纪，现代科学和现代医学高速发展，中医面临着机遇与挑战。随着人类对健康需求的不断增强和深化，中医已成为世界范围内医学发展关注的热点。而在国内，随着经济体制和社会保障改革的深化，中医产业化也被纳入到国家经济发展规划当中，可以说，新世纪中医飞速发展的大气候已经形成。当前乃至今后，中医的发展必将是国际化的。中医骨伤科学是中医学中一个颇具特色和优势的分支，其发展也必将是国际化的。     

Comparison of postoperative complications of ileal conduits versus orthotopic neobladders

BackgroundRadical cystectomy (RC) and urinary diversion (UD), with either an ileal conduit (IC) or an orthotopic neobladder (NB), is a complex surgery, in which various complications can occur. In this study, we compared postoperative complication rates after a RC and UD performed for the treatment of muscle-invasive bladder cancer or recurring high-risk non-muscle-invasive bladder cancer in our center.MethodsWe retrospectively included 604 patients that underwent UDs from December 1996 to August 2015. Complications were classified by type and severity according to the Clavien-Dindo classification (CDC). Univariate and multivariate analyses were performed to identify predictive factors of short-term (≤30 d), intermediate-term (31–90 d), and long-term (>90 d) complications.ResultsFour hundred and forty-five (74%) and 159 (26%) patients received ICs and NBs, respectively. These groups had significantly different long-term complication rates (IC: 39.7% vs. NB: 49%, P=0.046), but similar short-term (P=0.319) and intermediate-term complication rates (P=0.397). Short-term complications (CDC I–V) were predicted by male gender, age-adjusted Charlson comorbidity index (aCCI) ≥3, and American Society of Anesthesiologists (ASA) score ≥3. Compared to minor short-term complications (CDC I–II), major short-term complications (CDC III–V) were predicted by male gender and a previous abdominal/pelvic surgery, and long-term major complications were predicted by the type of UD (NB).ConclusionsThe increasing risk of short-term complications with increasing aCCI and ASA score can be used when counseling the patients who are planned to undergo a RC with UD. Patients that receive NBs should be informed of the increased risk of reoperations compared to an IC.     

Prevention and management of post prostatectomy erectile dysfunction

Sexual dysfunction is common in patients with prostate cancer (PC) following radical prostatectomy (RP). Review the available literature concerning prevention and management strategies for post-RP erectile function (EF) impairment in terms of preoperative patient characteristics, intra and postoperative factors that may influence EF recovery, and postoperative treatments for erectile dysfunction (ED). A literature search was performed using Google and PubMed database for English-language original and review articles, either published or e-published up to July 2013. The literature still demonstrates a great inconsistency in the definition of what is considered normal EF both before and after RP. Thus, using validated psychometric instruments with recognized cut-offs for normalcy and severity during the pre- and post-operative evaluation should be routinely considered. Therefore, a comprehensive discussion with the patient about the true prevalence of postoperative ED, the concept of spontaneous or pharmacologically-assisted erections, and the difference between “back to baseline” EF and “erections adequate enough to have successful intercourse” clearly emerge as key issues in the eventual understanding of post-RP ED prevention and promotion of satisfactory EF recovery. Patient factors (including age, baseline EF, comorbid conditions status), cancer selection (non- vs. uni- vs. bilateral nerve-sparing), type of surgery (i.e., intra vs. inter vs. extrafascial surgeries), surgical techniques (i.e., open, laparoscopic and robotically-assisted RP), and surgeon factors (i.e., surgical volume and surgical skill) represent the key significant contributors to EF recovery. A number of preclinical and clinical data show that rehabilitation and treatment in due time are undoubtedly better than leaving the erectile tissue to its unassisted postoperative fate. The role of postoperative ED treatment for those patients who received a non-nerve-sparing RP was also extensively discussed. Optimal outcomes are achieved mainly by the careful choice of the correct patient for the correct type of surgery. Despite a plethora of potential rehabilitative approaches, they should be only considered as “strategies”, since incontrovertible evidence of their effectiveness for improving natural EF recovery is limited. Conversely, numerous effective therapeutic options are available for treating post-RP ED.     

内毒素诱导Kupffer细胞所致肝脏损害及S-腺苷蛋氨酸的保护机制

S-腺苷蛋氨酸(SAM)是一种存在于人体所有组织和体液中的生理活性分子,参与体内多种重要的生化反应,对调节肝细胞再生、分化以及肝细胞对各种损伤的敏感程度都是非常重要的.SAM对肝脏的这些作用是通过多种途径实现的,现已证实S-腺苷蛋氨酸及其代谢物methyhhioade-nosine(MTA)能阻断脂多糖(LPS)诱导的kupffer细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达从而对肝脏起到保护作用.S-腺苷蛋氨酸的这些作用可能有益于LPS诱导的肝损伤的临床治疗.     

糖皮质激素对肿瘤坏死因子引起的大鼠中性粒细胞粘附的影响

采用中性粒细胞（ＰＭＮ）与玻璃珠粘附和ＰＭＮ与血管内皮细胞（ＥＣ）粘附两种模型，以肿瘤坏死因子（ＴＮＦ），作为ＰＭＮ的刺激因子，研究糖皮质激素（ＧＣ）对ＴＮＦ引起的大鼠ＰＭＮ粘附的影响，同时给予糖皮质激素受体（ＧＲ）阻断剂ＲＵ３８４８６观察ＧＲ在粘附中的作用。结果发现，ＴＮＦ能明显增强大鼠ＰＭＮ的粘附（Ｐ＜０．０１）；Ｄｅｘ不能抑制经ＴＮＦ预处理的ＰＭＮ的粘附（Ｐ＞０．０５），但有一定的预防作用；经ＴＮＦ预处理再同时给予Ｄｅｘ和ＲＵ３８４８６的ＰＭＮ粘附同样明显增强（Ｐ＜０．０１）。     

糖皮质激素对肿瘤坏死因子引起的大鼠中性粒细胞粘附的影响

采用中性粒细胞(PMN)与玻璃珠粘附和PMN与血管内皮细胞(EC)粘附两种模型,以肿瘤坏死因子(TNF),作为PMN的刺激因子,研究糖皮质激素(GC)对TNF引起的大鼠PMN粘附的影响,同时给予糖皮质激素受体(GR)阻断剂RU38486观察GR在粘附中的作用。结果发现,TNF能明显增强大鼠PMN的粘附(P<0.01);Dex不能抑制经TNF预处理的PMN的粘附(P>0.05),但有一定的预防作用;经TNF预处理再同时给予Dex和RU38486的PMN粘附同样明显增强(P<0.01)。     

胎兔皮肤伤口中糖胺多糖及透明质酸含量分析

目的探讨胎兔皮肤伤口无瘢痕愈合机理。方法 取胎兔,孕兔,成年兔切口及其周围组织,用阿利新蓝比色法,醋酸纤维素膜电脉分离法测定糖胺多糖（GAG）和透明质酸（HA）含量。结果 （1）胎兔正常皮肤（GAG及HA的含量均明显高于孕兔及成年兔（P＜0．01）,手术区,胎兔,孕兔,成年兔在术后3天时GAG及HA均升高（P＜0．05）。但术后第7天,胎兔GAG含量仍维持在高水平,而孕兔及成年兔其含量下降到接近正常水平,。结论 高浓度的HA在胎兔伤口间质的持续存在对胎兔伤口无瘢痕愈合起很重要的作用。