双染技术在腺鳞癌鉴别诊断中的应用

近年来,应用免疫酶组化双标法在同一切片上显示两种或两种以上抗原的新技术报道甚多。本文介绍一种在同一切片上应用免疫组化中PAP法显示腺鳞癌组织中鳞癌细胞内细胞角蛋白抗原;和应用组织化学AB法(Alcain blue),粘液卡红法,PAS反应及AB—PAS染色显示腺     

抗兔附睾蛋白抗体对人精子体外受精实验的观察

作者曾经从兔附睾尾液中分离出两种特异性蛋白,命名为 ESP0_1 42kd 和 ESP_2 20kd,并免疫兔子获得相应的两种自身抗体(ESP_(1AB)和 ESP_(2AB))。通过免疫细胞化学定位方法的观察和硝基纤维素薄膜转移的 PAP 酶免疫法的测定,证明两个抗体均对     

免疫印迹法的ABC免疫酶染色

<正> 研究细胞膜抗原较常用的技术有免疫印迹法(Western Blotting)、~(125)I标记或~(25)S-甲硫氨酸标记活细胞后电泳放射自显影等方法,而以前者最为普遍。但免疫印迹法需用同位素,一些实验室受到限制,故有采用免疫酶技术如AB法、PAP法等,但     

几种鼠源性单克隆PAP制剂在免疫组织化学研究中的比较

应用单桥PAP法对四种鼠源性PAP制剂在免疫组织化学研究中的性能特点进行了比较,观察了它们的染色效价、特异性显色深度,显色速度,背景显色程度以及敏感性的异同。发现几种国产制剂(WH,WX及本室产品)与国外产品(Sigma)相比,除敏感性与显色速度稍逊外,其它特性均相似。     

ABPAP法在免疫组织化学中的应用

PAP法与ABC法的应用已成为免疫组织化学较为成熟的方法,应用也非常广泛,灵敏性也较高。但由于种种条件限制,存在某些缺点,因此我们将PAP法与ABC法(即ABPAP法)联合应用以提高单一方法的敏感性,阳性检测率,节约一抗。方法基本原理为:PAP法后连续再用ABC法,其生物素二抗是与PAP复合物的Fc段结合,使     

PAP法和双PAP法在人淋巴瘤研究中桥抗体引起的交叉染色及消除方法

本文用琼脂免疫双扩实验和省略了第一抗体的PAP法,双PAP法研究了7份来源不同的羊抗兔IgG抗体(桥抗体)与人免疫球蛋白的交叉反应及消除方法。4份高效价的桥抗体在琼脂免疫双扩实验中与人Υ球蛋白有交叉,在双PAP法染色中与人淋巴瘤组织内免疫球蛋白有严重的交叉而致假阳性结果。其中3份抗体高浓度时在PAP法染色中也与人免疫球蛋白有交叉。双PAP法染色中的交叉反应在高于适宜桥抗体浓度时仍可发生。在桥抗体溶液中加入5％的正常人血清可以有效地消除桥抗体所致的交叉染色。本文讨论了这种交叉反应的机理并提出了克服的方法。     

肺泡蛋白沉积症的病理学特点与诊断

目的探讨肺泡蛋白沉积症（PAP）的病理学特点及其诊断方法。方法对39例PAP进行了常规的光镜观察,并用淀粉酶消化后过碘酸雪夫染色（D—PAS）、淀粉酶消化后黏液卡红（D-黏卡）、奥新兰（AB）进行组织化学染色。结果肺活检及尸检肺组织的病理改变有如下特点：（1）肺泡腔内及部分小支气管腔内充满嗜伊红性细颗粒状蛋白性物质,并有针状裂隙。（2）蛋白性物质中杂有多少不等的退变的肺泡上皮细胞及脱落的肺泡上皮细胞。（3）肺泡Ⅱ型上皮细胞增生。（4）肺泡间隔毛细血管充血,间质炎症不明显。（5）支气管壁炎症不明显。（6）周围肺组织代偿性肺气肿。支气管肺泡灌洗液（BALF）石蜡包埋切片显微镜下可见片状嗜伊红性细颗粒状蛋白性物质,其中可见针状裂隙。组织化学染色结果肺泡腔内或BALF中嗜伊红性细颗粒状蛋白性物质D—PAS阳性（呈红色）,D-黏卡阴性,AB弱阳性（淡蓝色）或阴性。肺活检及BALF取得标本是诊断PAP的重要方法和途径。结论典型的PAP肺泡腔内或BALF中出现均质嗜伊红性细颗粒状蛋白性物质并有针状裂隙,蛋白性物质D—PAS阳性,D-黏卡阴性具有诊断意义。     

抗体—SPA—PAP法在免疫病理检测中的应用

利用葡萄球菌蛋白A(SPA)和许多哺乳动物IgG分子具有亲合性,可以与任何片段IgG分子结合,不受一抗种属特异性限制,只需一套PAP试剂盒就可以对不同种属来源的一抗进行检测,敏感性明显高于SPA-PAP法及PAP法。     

分沁抗碱性磷酸酶单克隆抗体的杂交瘤细胞系的建立及应用

近年来,免疫酶技术已广泛应用于病理诊断及科研中,但应用较多的是PAP法及ABC法,最近提出一种以碱性磷酸酶代替过氧化物酶作标记的桥联酶标技术,即碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶技术(简称APAAP法)。该法原理类似PAP法,用桥联第二抗体连接第一抗体和碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶抗体复合物。作者运用杂交瘤技术建立了分泌抗碱性磷酸酶单克隆抗体的细胞系,制备出碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶免疫复合物,并成功地将其应用于免疫组化染色。 用牛小肠碱性磷酸酶(Ⅰ型)免疫     

免疫金银法与PAP、双PAP法敏感性的观察

从免疫金染色法(Immunogoldstaining,IGS)发展而成的免疫金银染色法(Immunogold silver staining,IGSS),使金颗粒再吸附上银颗粒,敏感性得到了显著提高。有人认为IGSS法的敏感性比酶抗酶法(PAP)高40～200倍。但是在实际工作中,我们观察到的PAP及双PAP法的最佳-抗稀释浓度(一般在500～5000),往往也适用于IGSS法。影响免疫细胞化学敏感性的因     

对一种新粘液组化染色法的评价

近年来,粘液组织化学染色在诊断胃肠道肿瘤及癌前病变方面已显示出重要价值。由于方法本身不够完善,临床应用还很局限。1985年,Reid等报道了一种新的粘液组化方法即:KOH/AB 1.0/PAPS方法,该法能同     

抗HCV—HRP结合物的制备及其在检测肝组织HCAg中的应用

采用ELISA筛选抗HCV阳性血清,以改良过碘酸盐法制备抗HCV-HRP结合物,用作第一抗体,与兔抗HRP及兔PAP—道建立了改良单桥PAP法。将其试用于检测肝组织中HCAg,并与直接酶标法进行比较。由于本法能消除以同源性抗体作一抗时内源性IgG及其类似物干扰,克服PAP应用中种系限制,其敏感性,显色强度及阳性细胞数目均明显优于直接EHA,在免疫组化研究中具有较高应用价值。     

28例胃肠道恶性淋巴瘤临床病理分析

对28例原诊断为胃肠道淋巴瘤的切片重新阅片,并用双PAP法进行了免疫组化染色,部分病例作AB染色。28例中,男性23例。女性5例,男女之比为4.6:1;年龄以29～39岁多见,计16例;胃10例,肠18例(回肠9例,空肠4例,结肠2例,盲肠2例,十二指肠1例);病程1年以内者16例,1年以上者     

应用两种免疫组化酶法染大鼠室旁核含神经垂体素1的细胞

我们应用辣根过氧化物酶抗辣根过氧化物酶(PAP)和卵白素生物素辣根过氧化物酶复合体(ABC)法染色,识别室旁核内含神经垂体素1(NP 1)的神经元。以0.1％辣根过氧化物酶(HRP)与福氏不完全佐剂的乳剂免疫家兔,获得兔抗HRP抗血清,免疫球蛋白(IgG)含量为43mg/ml,双向琼脂扩散试验抗血清效价1∶32。依改良Sternberger法制备PAP:     

应用四种免疫组化方法比较乙脑病毒抗原的定位

<正> 本文应用PAP法、HRP-SPA、免疫荧光间接法及酶标抗体间接法四种免疫组化方法对我院于1956～1984年经尸检诊断的8例流行性乙脑(包括可疑1例)标本乙脑病毒抗原定位检查,并对四种方法的敏感性进行了比较。现总结如下。     

ABS技术及其在组织病理学的应用

近20年来,免疫酶技术发展很快,在组织病理研究的应用中,大体上经历了酶标法。PAP法(Peroxidase Antiperoxidase)和ABS技术(Avidin Biotin System,生物素一抗生物素系统)三个阶段。1970年Sternberger建立的PAP法敏感性较荧光法高1,000倍左右。1981年许世明建立的ABC法(Avidin-Biotin-Peroxidase Complex Method,ABS技术之一种)敏感性较PAP法又高4～40倍。由于免疫酶技术方法不断改进,敏感性不断提高,再加上操作简单,国外用该法进行医学科研和外科病理诊断已越来越普遍。免疫酶技术,尤其是ABS技术国内开展尚不多,本文综合文献并我们的工作,对该技术作一介绍。     

纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物单克隆抗体的制备及鉴定

目的 :制备纤溶酶 α2 抗纤溶酶复合物 (PAP)的单克隆抗体(mAb)。方法 :以从血浆中纯化的PAP免疫BALB/c小鼠。按常规方法融合 ,以固相等分子浓度的纤溶酶原、α2 抗纤溶酶(α2 AP)及PAP为抗原 ,建立间接ELISA筛选杂交瘤细胞培养上清 ,并对杂交瘤细胞分泌的mAb的特异性和亲和力进行鉴定。结果 :共获得 2 4株可稳定分泌特异性mAb的杂交瘤细胞。其中 ,针对PAP分子中纤溶酶结构的mAb 16株 ,针对α2 AP结构的mAb 1株 ,针对新抗原 (PAP分子中新出现的不同于前体分子纤溶酶原及α2 AP的抗原决定簇 )结构的mAb 7株。这些腹水中抗PAPmAb的滴度为 2× 10 -4～ 1× 10 -8,其中 4株mAb的亲和常数为 5 .6 2× 10 -9～ 3.5 8× 10 -11mol/L之间。结论 :成功地制备针对PAP新抗原的具有高亲和力的mAb ,为建立不受其前体分子干扰的PAP特异性检测方法 ,研究纤溶系统的激活状态提供了工具。     

应用ROC曲线分析血清PSA系列在前列腺癌中的诊断价值

应用ROC曲线分析tPSA、PSA密度(PSAD)、fPSA/tPSA、前列腺酸性磷酸酶(PAP)等指标在前列腺癌(PCa)诊断中的价值。经活检或术后病理证实良性前列腺增生(BPH)组患者53例,PCa组患者49例。用化学发光法测定血清tPSA和fPSA,RIA法测定PAP,经直肠超声(TRUS)测定前列腺体积。结果表明PCa组血清tPSA、PSAD、PAP检测值均较BPH组升高(P<0.01),PCa组血清fPSA/tPSA较BPH组降低(P<0.01)。tP-SA、PSAD、fPSA/tPSA比值、PAP在ROC曲线下的面积从大到小为PSAD>tPSA>PAP>fPSA/tPSA。在保持91.9%的敏感性时,tPSA、PSAD、fPSA/tPSA、PAP截点值分别是7.6、0.27、0.03、0.70,特异性是47.4、78.6、0.0、46.4。PSAD较tPSA、PAP、fPSA/tPSA能更好地检出PCa。对于tPSA处于诊断灰色区间(4ng/mL~10ng/mL)的患者时,PSAD较tPSA有更高的诊断特异性。     

ABC法在单纯疱疹病毒感染快速检测中的初步应用

本文在兔单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)模型眼研究用培养24h联合ABC法染色(C-ABC)快速检测HSV感染,并在感染HSV-1的Vero细胞制成的抗原片上比较了ABC法、PAP法、IEA和IFA在检测HSV抗原的敏感性。结果C-ABC方法检测HSV感染的相对敏感性为95.8％,特异性为100％,其阳性率与单纯培养7天结果接近,而显著大于单纯培养24h的阳性率(P<0.01)。抗原片敏感性比较表明ABC法较PAP法、IEA及IFA敏感8～64倍。提示用细胞培养联合ABC染色是一种较常规抗原检测方法更敏感、特异的HSV感染快速检测方法。     

正常胃肠道上皮粘液性质及其显示方法

应用组织化学方法包括PAS,AB/PAS,HID/AB,OR/AB,PAPS,mPAS,PB/KOH/PAS,PAT/KOH/PAS,PATB/KOH/PAS观察正常胃肠道粘膜分泌粘液的成分.对各种组织化学方法进行了比较,并对国内尚无报告的新方法进行了介绍.在正常胃粘膜表面上皮及胃窦腺体以分泌中性粘液为主.小肠主要分泌氮乙酰化唾液酸粘液,大肠上皮分泌以硫酸粘液及氧乙酰化唾液酸粘液为主.