重组人红细胞生成素对维持性血液透析患者免疫功能及红细胞CR1分子表达的影响

目的研究r-HuEPO对维持性血液透析患者T淋巴细胞亚群及红细胞CR1分子表达的影响.方法32例维持性血液透析患者作为观察组,20例正常人作为对照组.采用流式细胞仪检测正常对照组、维持性血液透析患者治疗前及r-HuEPO治疗后3个月CD3、CD4、CD8及CD4/CD8;采用ELISA检测其红细胞CR1分子表达,同时检测治疗前后Hb水平.结果EPO治疗3个月后,CD4显著升高(P《0.001),CD8、CD4/CD8降低(P《0.05);红细胞CR1分子表达及血Hb的水平均明显升高(P《0.001).结论EPO可通过调节T淋巴细胞及红细胞CR1分子表达来改善维持性血液透析患者的细胞免疫功能.     

肾移植受者移植前免疫细胞亚群的检测及意义

背景：对肾移植受者免疫细胞的研究一直是移植外科的研究热点,但国内外缺少对肾移植受者术前全面、系统的免疫检测研究。目的：探讨肾移植受者术前免疫细胞亚群的比例分布。方法：纳入准备接受初次活体肾移植受者共15例作实验组;以18-40岁健康志愿者15人作对照组,分别抽取外周静脉血进行流式细胞检测。结果与结论：T细胞亚群：肾移植受者CD4+CD25+T细胞占外周血淋巴细胞的比例、CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例均低于健康人群,差异有显著性意义(P <0.05),其余细胞亚群比例差异无显著性意义。B细胞亚群：肾移植受者CD19+/淋巴细胞、CD19+CD5+/淋巴细胞、CD19+CD27+/淋巴细胞均低于健康者,而CD38+IgD-/CD19+高于健康者,差异有显著性意义(P<0.05),其他B细胞亚群比较差异无显著性意义。NK及NKT细胞亚群的比较：肾移植受者NKG2A/NK细胞、NKG2A/NKG2D均低于健康者、而NKG2D/细胞显著高于健康者(P<0.05),NK/淋巴细胞、NKT/淋巴细胞差异无显著性意义。说明肾移植受者移植前进行免疫细胞亚群流式分析,可以了解受者移植前免疫状态,对移植后免疫监测起基础对照作用。     

维持性血液透析患者循环内皮祖细胞变化的临床分析

目的 观察维持性血液透析患者循环内皮祖细胞(circulating endothelial progenitor cells,CEPCs)的变化.方法 以外周血中CD34+/CD133+/KDR + 为循环内皮祖细胞的标志物,对44例维持性血液透析患者和36例健康体检者采用流式细胞仪检测 CEPCs数量;将维持性血液透析患者的CEPCs数量与对照组比较,并根据维持性血液透析患者有无高血压或冠心病史、透析是否充分、血红蛋白水平进一步作亚组分析.结果维持性血液透析患者外周血CEPCs数量显著低于对照组( tCD34+=2.205,tCD34+/CD133+/KDR+ =2.148;均P＜0.05);合并高血压的维持性血液透析患者CEPCs数量较无高血压者显著降低(tCD34+ =2.183,tCD34+/CD133+/KDR+=2.023;均 P＜0.05);有冠心病史的维持性血液透析患者CEPCs数量低于无冠心病史者 (tCD34+=2.136,tCD34+/CD133+/KDR+ = 2.072;均P＜0.05);Kt/V≥1.3组患者CEPCs 数量明显高于Kt/V＜1.3组(tCD34+ =2.276,tCD34+/CD133+/KDR+=2.086;均 P＜0.05);血红蛋白≥110g/L组患者较血红蛋白＜110g/L组患者 CEPCs数量为高(tCD34+=2.707,t CD34+/CD133+/KDR+=2.859;均P＜0.05).结论 充分血液透析、积极控制高血压、改善肾性贫血使血红蛋白达标有助于提高维持性血液透析患者循环内皮祖细胞数量,有助于降低发生心血管并发症的风险.     

B细胞活化因子在部分肾移植受者外周血淋巴细胞异常高表达及可能的生物学意义

背景:B细胞活化因子(B cell activating factor belonging to TNF family,BAFF),经与其受体结合,对B细胞分化、成熟、生存和抗体分泌发挥重要作用,在T细胞应答过程中亦可能起着重要作用.BAFF信号是否在同种肾移植排斥反应过程中起作用值得探讨.目的:分析肾移植受者外周血淋巴细胞上BAFF的表达情况及其可能的生物学作用.设计、时间及地点:病例观察,于2006-06/2007-03在苏州大学附属第三医院泌尿外科进行.对象:86例肾移植随访患者,男60例,女26例,年龄12～62岁.患者均为首次肾移植,血肌酐值在65～267 μmol/L.方法:取患者外周血,以EDTA-Na2抗凝.收集部分患者的移植肾活检标本.主要观察指标:分析外周血单个核细胞上BAFF+、BAFF-R+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+CD127/-low、CD134+、CD4+CD134+和CD19+ BAFF-R+的表达率,计算CD4/CD8比值;对活检组织进行病理分析和免疫组织化学分析.结果:肾移植受者外周血单个核细胞上BAFF的表达率在0.18%～76.97%之间.将15%设为临界值,所有数据分成≥15%组和＜15%组进行统计分析.在≥15%组,BAFF表达率为36.91%,与CD4/CD8比值、CD4+CD25+ CD127-/low T细胞之间不相关.然而,BAFF+细胞数与CD134+细胞和CD4+CD134+细胞存在显著相关性(分别为P＜0.01和P＜0.05).而在＜15%组,各指标之间没有显著相关性.病理诊断证实慢性排斥的移植肾组织,BAFF表达于肾小管上皮细胞胞浆/胞膜.结论:BAFF在肾移植受者外周血单个核细胞的异常高表达可能与同种肾移植排斥反应相关.     

稳定期慢性阻塞性肺疾病患者外周血T淋巴细胞活化标志物表达水平的研究

目的通过研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者外周血T淋巴细胞活化标志物的表达水平,探讨COPD患者的免疫功能状态。方法前瞻性研究,纳入首都医科大学附属北京友谊医院COPD稳定期患者36例(COPD组),肺功能正常的吸烟者22例(吸烟组),体检正常无吸烟史者32例(正常对照组),采用流式细胞学方法,检测三组人群外周血T淋巴细胞亚群,以及外周血CD4+T淋巴细胞及CD8+T淋巴细胞CD69、CD38、人类白细胞抗原-DR(HLADR)的表达水平。结果 (1)COPD组外周血T淋巴细胞各亚群的细胞数量及分布比率与吸烟组、正常对照组差异无统计学意义(P0.05);(2)COPD组外周血CD4+T淋巴细胞CD38表达比率为3.60±1.86%,HLA-DR表达比率为3.80±2.88%;CD8+T淋巴细胞CD38表达比率为6.19±3.33%,HLA-DR表达比率为1.97±1.24%,均高于正常对照组及吸烟组(P0.05);(3)COPD组T淋巴细胞活化标志物的表达水平与患者吸烟指数(每日吸烟数量乘以吸烟年限)呈正相关(P0.05)。结论稳定期COPD患者外周血较正常对照组及吸烟组具有更多活化的T淋巴细胞,COPD患者较健康人群具有更活跃的细胞免疫功能状态。且这种异常的T淋巴细胞激活,可能与COPD患者长期的香烟烟雾暴露相关。     

维持性血液透析患者外周血单个核细胞核因子kB活性及临床意义

背景:临床发现肾移植前维持性血液透析患者外周血单个核细胞核因子kB的活性异常增高.目的:了解肾移植前维持性血液透析患者外周血单个核细胞核因子kB的活性,并探讨其与超敏C-反应蛋白水平、营养不良的关系.方法:检测肾移植前维持性血液透析患者与健康对照人群营养状态、人体学指标、血液生化指标、外周血单个核细胞核因子kB活性及血清超敏C-反应蛋白水平,据血清超敏C-反应蛋白水平将维持性血液透析患者分为非炎症组(<3 mg/L)和微炎症组(≥3mg/L).结果与结论:①维持性血液透析患者单个核细胞核因子kB活性与血清超敏C-反应蛋白水平显著高于健康对照组(P<0.001).②微炎症组营养不良数量及程度、改良主观全面营养评价评分、单个核细胞核因子kB活性及血清超敏C-反应蛋白水平显著高于非炎症组(P≤0.001或P<0.01或P<0.05).⑨非炎症组血红蛋白、血清白蛋白、血清前白蛋白、中臂肌围、中臂围、握力均显著低于健康对照组(P≤0.001),单个核细胞核因子kB活性显著高于健康对照组(P≤0.001),血清超敏C-反应蛋白水平与健康对照组间差异无显著性意义(P>0.05).提示肾移植前维持性血液透析患者普遍存在外周血单个核细胞核因子kB异常活化;随炎症反应加重,C-反应蛋白水平升高,单个核细胞核因子kB活性进一步增强,营养不良加重;说明核因子kB活性可能较血清C-反应蛋白水平更早发现维持性血液透析患者的微炎症状态及预测营养不良.     

肾移植术后T淋巴细胞亚群和NK细胞百分比参考范围的研究

目的初步建立肾移植患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的百分比参考范围。方法 67例健康对照组、169例肾移植患者于肾移植手术后1周清晨采集外周血,用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群和NK细胞百分比。同时按年龄段划分为3组进行统计:≤30岁(青年组)、31~49岁(中年组)、≥50岁(老年组)。结果 (1)建立了肾移植术后T淋巴细胞亚群和NK细胞百分比的参考范围:CD3+56.80%~64.54%;CD4+30.82%~36.43%;CD8+23.45%~27.32%;CD3+CD4+/CD3+CD8+1.35~1.68;NK 6.04%~8.35%。(2)肾移植术后不同性别间的T淋巴细胞亚群和NK细胞差异无统计学意义(P0.05)。(3)肾移植术后不同年龄间的T淋巴细胞亚群和NK细胞差异有统计学意义(P0.05):与老年组比较,青年组和中年组肾移植术后CD8+细胞百分比明显升高,差异有统计学意义(P0.01),CD3+CD4+/CD3+CD8+明显降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论初步建立了肾移植术后的T淋巴细胞亚群和NK细胞的参考范围,同时发现肾移植术后随年龄增长CD8+细胞百分比降低,而CD3+CD4+/CD3+CD8+升高。     

血液透析患者血浆PGE2含量与T细胞亚群和NK细胞活性的关系

目的探讨血液透析患者外周血前列腺素E2(PGE2)含量与T细胞亚群和NK细胞活性的关系.方法应用流式细胞仪和酶联免疫分析法检测透析、未透析和长期维持性透析(透析时间大于7年)患者外周血PGE2、T细胞表面CD3、及其亚群CD4及CD8抗原表达.结果尿毒症未透析组(NHD组)的外周血 NK细胞和T细胞的CD3+、CD4+、CD8+表达及CD4+/CD8+比值均显著低于正常对照组(P<0.05); PGE2含量明显增高,并与CD4+/CD8+细胞比值和NK细胞活性间呈负相关.透析后,尿毒症患者PGE2水平降低,CD3+、CD4+和CD8+值及CD4/+CD8+比值均显著上升(P<0.05), NK细胞活性接近于正常对照组.然而透析时间大于7年的尿毒症患者血浆PGE2水平又显著增高,外周血淋巴细胞数值、CD3+细胞浓度、CD4+/CD8+细胞比值及NK细胞活性均显著低于正常组(P均<0.05).结论PGE2异常增高与细胞免疫功能失衡有关,血液透析能够降低PGE2浓度,改善患者的免疫功能.但长期维持性透析患者免疫功能又呈现恶化状态.     

外周血CD4+CD25high调节性T细胞比例变化在肾移植受者移植后免疫监测中的应用术

背景:相关实验表明调节性T细胞在移植物免疫耐受中起重要作用.目的:观察外周血CD4+CD25high调节性T细胞比例变化与肾移植受者移植后免疫变化的相关性.设计、时间及地点:回顾性病例分析,于2007-09/2008-07在广东省第二人民医院器官移植中心及其实验室完成.参试者:52例病情稳定的维持性血液透析患者行同种异体肾移植治疗.方法:肾移植后患者均服用三联免疫抑制剂.所有患者移植后发生急性移植肾排斥反应以及感染均按照相应指南诊断及治疗.分别于移植前和移植后1,2,4,8,12周以及发生排斥反应和感染时抽血检测外周血CD4+CD25high调节性T细胞.按其免疫力恢复情况分为正常组26例,排斥反应组17例,感染组9例.主要观察指标:用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25high调节性T细胞的比例,所得结果进行相关分析.结果:与正常组比较:排斥反应组CD4+CD25highFoxP3/CD4+的比值降低(P<0.05),而感染组显著增高(P<0.01).与感染组比较:排斥反应组CD4+CD25highFoxP3/CD4+的比值显著降低(P<0.01).结论:肾移植后受者外周血CD4+CD25high调节性T细胞比例与受者免疫状态密切相关.CD4+CD25high调节性T细胞比例的变化可以反应机体的免疫状态的变化,其升高或降低可以作为预测肾移植受者移植后发生感染或排斥反应的指标之一.     

TLR4在肾移植受者中的表达及其临床意义

目的:研究肾移植患者术后早期外周血单核细胞中Toll样受体4(TLR4)的表达改变及其与急性排异反应的关系.方法:首次接受肾移植手术受者60例,流式细胞术测定受者肾移植术前及术后第7、14、21天外周血单核细胞TLR4、CD80表达的百分率;根据肾移植术后两周内发生排斥与否将患者分为排斥组(13例)和非排异组(47例).20例健康成年志愿者标本为正常对照组.急性排异反应诊断标准依据临床表现、实验室检查、超声及移植肾穿刺活检等综合判断.结果:术前外周血单核细胞中TLR4、CD80即有表达,TLR4与对照组相比有统计学意义;术后1周两者表达到达顶峰,其后逐渐下降,排斥组外周血单核细胞TLR4、CD80表达峰值较肾功能正常组明显升高(P＜0.05),且持续时间较长.结论:TLR4、CD80在肾移植术后早期表达升高,并可增加肾移植术后急性排斥反应发生的风险.     

强直性脊柱炎患者外周血T细胞亚群表达的临床意义

目的 探讨强直性脊柱炎(AS)患者外周血中T细胞亚群分布以及在AS细胞免疫中所发挥的作用.方法 采用流式细胞技术检测30例未经治疗的活动期AS患者及30例健康对照人群外周血中的CD4+、CD8+T细胞亚群,并探讨其与Bath AS功能指数(BASFI)、Bath AS测量指数(BASMI)、病程、年龄及血沉(ESR)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)的相关性.结果 AS患者CD4+水平和CD4+/CD8+比值分别为(29.24±9.22)%和0.96±0.49,较正常对照组的(40.09±6.86)%和1.70±0.67显著降低(P均＜0.01);CD8+水平为(32.91±6.86)%,较正常对照组的(25.60±5.97)%明显增高(P＜0.01);AS患者外周血CD4+水平与BASMI呈负相关(r=-0.479,P＜0.01).CD8+与血沉、hs-CRP、BASFI、BASMI呈正相关(r值分别为0.373、0.430、0.462、0.530,P均＜0.05).CD4+/CD8+比值与hs-CRP、BASFI、BASMI呈负相关(r值分别为-0.465、-0.473、-0.426,P均＜0.05).CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值与AS患者的年龄、病程均无明显相关性(P均＞0.05).结论 AS患者外周血存在T淋巴细胞亚群紊乱,其水平与AS的严重程度、活动性有关,提示T细胞亚群失衡在AS的发生发展中具有重要意义.     

唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素1在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者外周血单个核细胞的表达及临床意义

目的 观察唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素1(sialic acid-binding immunoglobulin-likelectin 1,Siglec-1,也称CD169)在冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞上的表达水平,并探讨其与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系.方法 流式细胞术检测57例CHD患者及38名健康对照者外周血CD14CD169双阳性细胞的表达率;生化常规测定所有入选者血脂水平;实时荧光相对定量逆转录(FQ-RT)-PCR方法检测入选对象外周血单个核细胞(PBMCs)中CD169 mRNA的含量.结果 流式细胞仪检测发现,CD169在健康对照组及CHD组淋巴细胞和中性粒细胞上均无表达;CHD组单核细胞CD14CD169双阳性率为(12.7±2.4)%,显著高于健康对照组[(1.0±0.3)%,t=23.2,P<0.01];CHD组CD169 mRNA的拷贝数显著高于健康对照组拷贝数(t=6.59,P<0.01),为健康对照组的3..倍;而CHD血脂正常组和血脂异常组的CD169阳性率[分别为(12.2±2.3)%和(13.4±2.5)%,t=1.87,P>0.05]和mRNA平均拷贝数(分别为健康对照组的3.64和2.79倍,t=0.98,P>0.05)差异均无统计学意义.结论 CD169组成性表达于特定组织巨噬细胞上,健康人外周血单核细胞上并不表达,单核巨噬细胞受到炎症刺激时,CD169表达迅速上调.CD169蛋白及mRNA含量在CHD患者外周血单核细胞上表达显著升高,CHD患者外周血单核细胞已发生巨噬细胞化,单核巨噬细胞介导的免疫炎症反应在CHD发生发展过程中起重要作用.     

肾移植患者外周血人巨细胞病毒特异性CD8+T淋巴细胞频率及其γ干扰素分泌功能的初步研究

目的 研究肾移植患者外周血人巨细胞病毒(HCMV)特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的频率及其γ干扰素(IFN-γ)分泌功能,以期探讨HCMV活化感染的免疫学机制.方法 选取HCMV血清学阳性的HLA-A*0201肾移植患者和健康对照者,将其分为3组:存在HCMV活化感染的肾移植组(9例)、无HCMV活化感染的肾移植组(29例)和健康对照组(54名);运用HLA-A2-NLVPMVATV-五聚体检测外周血中总的HCMV NLVPMVATV特异性CTL,同时以NLVPMVATV体外刺激PBMC,检测IFN-γ分泌性CTL.结果 在健康对照组、元HCMV活化感染的肾移植组和存在HCMV活化感染组中,HCMV特异性CTL频率中位数分别为1.19%(0～19.42%)、1.20%(0～18.40%)和3.2%(0.51%～18.90%),差异无统计学意义(H=5.34,P＞0.05);IFN-γ分泌细胞频率中位数分别为0.72%(0～0.70%),0.47%(0～5.61%)和0.67%(0.07%～4.00%),差异无统计学意义(H=0.58,P＞0.05),但HCMV特异性CTL中IFN-γ分泌细胞的比例分别为(60.18±19.16)%,(39.19±17.22)%和(20.02±13.26)%,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 肾移植组外周血中HCMV NLVPMVATV特异性CTL频率较健康对照组并无降低,但其分泌IFN-γ的比例降低,出现HCMV活化感染组IFN-γ分泌CTL比例降低更为明显.HCMV特异性CTL的IFN-γ分泌功能受损可能是造成肾移植患者HCMV活化感染的因素之一.     

系统性硬皮病患者外周血内皮祖细胞数量及分化功能的研究

目的探讨系统性硬皮病（Systemic scleroderma,SSc）患者外周血内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）数量和分化功能的变化。方法选取女性SSc患者及健康志愿者各20例,抽取外周血20 ml,密度梯度离心法分离单个核细胞,以CD133/CD34、CD133/VEGFR2双荧光标记鉴定细胞,CD34/CD133/VEGFR2三荧光标记流式检测EPCs数量;分别以PE标记抗人CD14,FITC标记抗人CD64,PerCP/Cy5.5标记抗人VEGFR2,流式细胞仪检测单阳性细胞率,进而比较分化功能。结果 SSc患者外周血EPCs表达阳性率（3.18±1.97）%,较健康对照的（20.56±4.37）%明显下降,差异有统计学意义（P〈0.01）;培养7天后,外周血单个核细胞表达单核细胞表面标志CD14＋、CD64＋细胞百分率（32.49±5.41）%、（30.57±4.83）%,与对照组的（14.76±2.37）%、（15.39±2.09）%比较明显增加,差异均有统计学意义（均P〈0.01）,而内皮细胞表面标记KDR＋细胞百分率（68.38±4.65）%与对照组的（89.81±5.13）%比较明显减低,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 SSc患者循环内皮祖细胞数量减少,分化功能降低。     

脓毒症患者辅助性T细胞17和CD4+CD25+调节性T细胞表达及血必净注射液的干预作用

目的 观察脓毒症患者外周血辅助性T细胞17(Th17)及CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的水平,并探讨其意义及血必净注射液的干预作用.方法 ①将64例重症监护病房(ICU)脓毒症患者按疾病严重程度分为脓毒症组(26例)、严重脓毒症组(21例)、脓毒性休克组(17例),同时选取18例健康体检者作为对照组.观察不同严重程度脓毒症患者外周血Th17和CD4+CD25+Treg的表达及其与病情严重程度的关系.②按随机原则将64例患者分为常规治疗组(25例,给予常规集束化治疗)和血必净治疗组(39例,在常规治疗基础上加用血必净注射液50 ml静脉滴注,每日2次),两组均以7 d为1个疗程.入ICU当日和治疗7 d用流式细胞术检测外周血Th17及CD4+CD25+Treg表达,观察血必净注射液的干预作用.结果 ①健康对照组Th17表达率为(0.84±0.29)%,CD4+CD25+Treg表达率为(0.43±0.20)%;脓毒症患者细胞表达均较健康对照组明显升高(均P<0.05),其中Th17表达以严重脓毒症组最高[(3.18±0.84)%],CD4+CD25+Treg 表达以脓毒性休克组最高[(3.28±0.76)%].脓毒症患者CD4+CD25+Treg与急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅰ(APACHE Ⅰ)评分和血乳酸均呈正相关(r1=0.519,r2=0.451,均P=0.01).②与常规治疗组比较,血必净注射液能更有效降低脓毒症患者Th17和CD4+CD25+Treg的异常表达[Th17:(1.72±0.69)%比(2.35±0.81)%,CD4+CD25+Treg:(1.78±1.00)%比(2.30±0.85)%,均P<0.05],纠正免疫平衡紊乱,缩短住ICU时间[(4.7±2.6)d比(7.5±4.3)d,P=0.0023,使脓毒症患者28 d病死率有降低趋势(20.5%比28.0%,P>0.05).结论 脓毒症患者外周血Th17和CD4+CD25+Treg表达增加,且与病情严重程度呈正相关,提示Th17和CD4+CD25+Treg在脓毒症发生发展的免疫机制中可能起着重要作用.血必净注射液能有效降低脓毒症患者Th17和CD4+CD25+Treg的异常表达,有降低脓毒症患者病死率的趋势.

Abstract：

Objective To study the level and significance of T helper 17(Th17)and CD4+CD25+regulatory T cells(Treg)in peripheral blood of patients with sepsis and to evaluate the effects of Xuebijing of Anhui Provincial Hospital were divided into three groups:sepsis group(n=26),severe sepsis group (n=21),and septic shock group(n=17).Eighteen healthy individuals served as controls.The comparison in the expression of Th17 and CD4+CD25+Treg within groups and the correlation between their levels and group(n=25,received routine bundle treatment)and Xuebijing treatment group(n=39,received bundle treatment+Xuebijing treatment).Patients in Xuebijing treated group were given 50 ml Xuebijing injection two times per day in addition to routine bundle treatment.Seven days constituted one course of treatment.The expressions of Th17 and CD4+CD25+Treg of 64 patients on the 1 day and 7 days after treatment were detected by flow cytometry.The effects of Xuebijing injection on the patients were evaluated.Results in control group,and they were lower than that of patients with sepsis(P<0.05).The expression rate of Th17 was higher in severe sepsis group [(3.18±0.84)%]than that of other two groups(P<0.05).Moreover,The expression rate of CD4+CD25+Treg was highest [(3.28±0.76)%]in septic shock group (P<0.05),and it was positive correlated with acute physiology and chronic health evaluation Ⅰ(APACHE routine group,our study indicated that Xuebijing injection could reduce the abnormal expression of Th17[(1.72±0.69)%vs.(2.35±0.81)%,P<0.05] and CD4+CD25+Treg[(1.78±1.00)% vs.(2.30±0.85)%,P<0.05] and decrease length of stay in ICU[(4.7±2.6)days vs.(7.5±4.3)days,P=0.002].It also lowered 28-day mortality of patients with sepsis,but the difference between two groups was not significant(20.5%vs.28.0%,P>0.05).Conclusion The expression of Th17 and CD4+CD25+Treg was increased in sepsis patients and was positively correlated with severity of sepsis,suggesting that they may play an important role in pathogenesis of sepsis.Xuebijing injection could decrease the abnormal expression of Th17 and CD4+CD25+Treg and tend to decrease the fatality rate of sepsis.     

严重烧伤患者外周血树突细胞的变化及临床意义

目的 探讨严重烧伤患者外周血树突细胞(DC)的变化及与烧伤严重程度和脓毒症发生的关系.方法 22例严重烧伤患者根据脓毒症的诊断分为烧伤组(10例)和烧伤脓毒症组(12例);按烧伤总体表面积(TBSA)分为TBSA Ⅰ组(TBSA 30％～50％,14例)和TBSA Ⅱ组(TBSA 51％～80％,8例).采集患者伤后1、3、7、14和20 d外周静脉血,用流式细胞仪检测外周血中髓样树突细胞(mDC,Lineage1- HLA-DR+CD11e+)和浆样树突细胞(pDC,Lineage1-HLA-DR +CD123+)两种DC亚型的数量.以同期10例健康体检者作为对照.结果健康对照组外周血mDC为(0.450±0.150)％,pDC为(0.241±0.084)％.与健康对照组比较,烧伤组患者伤后1、3、7d外周血mDC[(0.257±0.116)％、(0.274±0.086)％、(0.317±0.056)％]和pDC[(0.122±0.058)％、(0.165±0.051)％、(0.177±0.024)％]均显著减少(均P＜0.05),14 d、20 d时mDC、pDC数量恢复至正常水平;烧伤脓毒症组患者伤后1d外周血mDC[(0.230±0.090)％]和pDC[(0.114±0.071)％]即较烧伤组进一步减少(均P＜0.05),至20 d时外周血mDC和pDC仍显著低于烧伤组[mDC:(0.246±0.076)％比(0.412±0.097)％; pDC:(0.097±0.032)％比(0.203±0.039)％,均P＜0.05].与健康对照组比较,TBSA I组患者伤后1、3、7d外周血mDC[(0.266±0.062)％、(0.289±0.071)％、(0.351±0.054)％]和pDC[(0.131±0.025)％、(0.163±0.037)％、(0.178±0.038)％]均显著减少(均P＜0.05),14 d、20 d时mDC、pDC数量恢复至正常水平;TBSAⅡ组患者伤后1d外周血mDC[(0.227±0.070)％]和pDC[(o.112±0.047)％]即较TBSA Ⅰ组进一步减少(均P＜0.05),至20 d外周血mDC和pDC仍显著低于TBSA Ⅰ组[mDC:(0.297±0.072)％比(0.423±0.046)％;pDC:(0.107±0.061)％比(0.197±0.042)％,均P＜0.05].结论严重烧伤患者早期外周血mDC和pDC数量均减少,烧伤程度越严重DC数量减少越明显;外周血DC数量减少导致烧伤后机体免疫功能低下,数量减少明显者易并发脓毒症;烧伤后定期检测外周血DC数量可以作为脓毒症的早期预警指标.     

骨髓单个核细胞Coombs试验阳性的血细胞减少患者补体水平变化及其意义

目的 了解骨髓单个核细胞Coombs试验阳性血细胞减少(CBCPC)患者补体水平的变化,探讨补体在CBCPC患者骨髓造血细胞破坏机制中的作用.方法 对124例CBCPC患者采用ELISA法测定其骨髓上清中的补体膜攻击复合物(C5b-9)、总补体溶血活性(CH50)以及补体C3、C4水平,并采用流式细胞术(FCM)检测CBCPC患者骨髓单个核细胞膜自身抗体结合率,测定23名正常人的骨髓液补体水平;并同时测定其中30例CBCPC患者和7名正常人的外估j血血清补体水平.结果 CBCPC初治组骨髓C5b-9水平[(119.8±54.0)μg/L]高于恢复组[(100.7±33.4)μg/L]和正常对照组[(93.9 ±28.8)μg/L](P<0.05);初治组、恢复组骨髓CH50水平[(33.3±11.5)kU/L,(30.8±10.3)kU/L]高于正常对照组[(24.1±6.4)kU/L](P<0.05);初治组、恢复组骨髓C3水平[(4.9±2.2)mg/L、(5.0±3.5)mg/L]低于正常对照组[(7.0±5.6)mg/L](P<0.05);外周血血清补体水平检测结果与骨髓检测结果一致.CBCPC患者骨髓CH50与C3水平呈负相关(r=-0.303,P=0.007);CH50与C5b-9水平呈止相关(r=0.241,P=0.003).骨髓细胞膜IgM阳性的CBCPC组C5b-9水平[(117.6±55.7)μg/L]高于IgM阴性组[(99.2 ±26.2)μg/L](P<0.05),骨髓CD34+细胞膜IgG结合率、CD34+细胞膜IgM结合昔罨与C5b-9呈正相关(r=0.593,P=0.000;r=0.326,P=0.049),CH50水平与网织红细胞呈正相关(r=0.421,P=0.000),与间接胆红素亦呈正相关(r=0.230,P=0.032).结论 CBCPC患者外周血细胞减少与骨髓单个核细胞自身抗体激活补体破坏造血细胞有关.     

多发性硬化患者外周血CD8+CD28-调节性T细胞的变化

目的 探讨多发性硬化(MS)患者外周血CD8+CD28-T细胞数量的变化及临床意义.方法 采用前瞻性病例对照研究,收集自2005年10月至2008年8月间在温州医学院附属第一医院神经专科病门诊或病房治疗的处于急性活动期的复发缓解型MS患者51例,均符合2005年修改的Mc-Donald诊断标准[2].所有住院患者均给予甲基强的松龙1.0 g/d,连续使用5 d后改为强的松60mg/d,12 d后减量,总疗程不超过6周,对14例MS患者进行治疗前后的动态观察.以20例健康体检者为对照组(NC组),MS组和NC组在年龄、性别构成上差异无统计学意义.采用流式细胞技术检测外周血CD8+CD28-,CD8+CD28+,CD8+及CD4+CD8-T细胞的百分比.两组间均数比较采用独立样本t检验,治疗前后比较采用配对样本t检验,相关性分析采用Pearson相关检验.结果 急性活动期MS组CD8+CD28-T细胞的百分比为(18.48±9.89)%,低于NC组的(24.48±4.86)%(P<0.01),但CD8+CD28+T细胞百分比为(12.23±4.31)%,高于NC组的(8.55±3.49)%(P<0.01),CD8+T细胞的百分比两组比较差异无统计学意义(P>0.05);MS组CD8+CD28-与CD4+CD8-T细胞的百分比呈负相关性(r=0.488,P<0.01);MS患者激素治疗后CD8+CD28-和CD8+CD28+T细胞卣分比与治疗前相比差异无统计学意义(均P>0.05),且治疗后CD8+CD28-T细胞百分比(16.22±4.25)%低于NC组(P<0.01),CD++CD28+T细胞百分比(13.04±4.23)%高于NC组(P<0.01).结论 CD8+CD28-T细胞数日的减少参与了MS的病理过程,并可能通过调节CD4+T细胞起作用;MS急性期激素治疗并不能恢复CD8+CD28-T细胞的数目,激素可能是通过其他途径发生作用.     

慢性肾脏病患者外周血cd36的表达及其临床意义

目的 探讨慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者外周血CD36的表达情况及其可能的影响因素,并观察其与患者的临床心血管疾病的关系.方法 选取上海交通大学医学院附属仁济医院77例CKD患者和10例健康志愿者,收集患者的临床资料,并进行血生化、超声心动图和颈动脉超声检查,流式细胞仪检测外周血CD36水平,比较CKD1～3期、CKD4～5期患者和对照组患者外周血CD36水平,并分析其与血脂代谢、炎症指标、颈动脉斑块及左心室肥厚的关系.结果 CKD 1～3期组(n=36)、CKD 4～5期组(n=41)和对照组患者的外周血CD36的绝对计数分别为(476.73± 191.41)×105/L、(1463.61±592.90)×10 5/L和(68.55±12.73)×105/L,CKD 4～5期组患者的外周血CD36水平显著高于CKD 1-3期组患者(P＜0.01),CKD 1～3期组又显著高于健康对照组(P＜0.01).左心室肥大患者的CD36水平显著高于非左心室肥大患者 [(1255.07±704.20)×105/L 比(805.34±586.20)×105/L,P＜0.05].多元回归分析显示,CD36是影响颈动脉斑块形成的独立危险因素( β=0.295,P=0.010).逐步多元线性回归分析显示,eGFR( β=-0.301)和三酰甘油(β=-0.294)是影响CKD患者外周血CD36水平的独立危险因素(P值均＜0.01).结论 CKD患者的外周血CD36水平显著升高,其与患者的肾功能减退和脂质代谢紊乱密切相关,可能造成动脉粥样斑块的形成及左心室肥大的发生.     

Circhipk3对热射病神经损伤中小胶质细胞极化的影响

目的探讨circhipk3在热射病神经损伤中小胶质细胞的表达情况,初步分析circhipk3对热射病神经损伤中小胶质细胞极化的影响。方法随机(随机数字法)将小鼠分为对照组及热射病0.8 h组(HS 0.8),热射病8 h组(HS 8),热射病24 h组(HS 24)。通过建立小鼠热射病(HS)模型,取得热损伤脑组织,分离小胶质细胞并提取RNA。定量PCR法检测小胶质细胞中M1和M2标志分子,评估小胶质细胞极化方向及类型。检测circhipk3在热射病神经损伤中小胶质细胞的表达水平,通过干预circhipk3在小胶质细胞中的表达,进一步阐明circhipk3对小胶质细胞极化的影响。结果HS 8组在CD45、CD11-b表达较正常组明显上升[(4.41±0.18)vs.(1±0.15),P=0.000]、[(3.47±0.19)vs.(1±0.15),P=0.000],而HS 24组的CD45、CD11-b较HS 8组明显下降[(1.34±0.15)vs.(4.41±0.18),P=0.000]、[(1.38±0.21)vs.(3.47±0.19),P=0.001]。同时HS 8组在CD206、FIZZ、Arg1表达较对照组开始上升[(1.59±0.16)vs.(1±0.12),P=0.014]、[(1.62±0.15)vs.(1±0.15),P=0.002]、[(2.23±0.28)vs.(1±0.19),P=0.004],而HS 24组的CD206、FIZZ、Arg1较对照组显著升高[(2.67±0.20)vs.(1±0.12),P=0.002]、[(2.19±0.15)vs.(1±0.15),P=0.000]、[(3.04±0.18)vs.(1±0.19),P=0.001];circhipk3 mimicis显著增高Arg1表达[(7.26±0.06)vs.(3.86±0.06),P=0.000];同时circhipk3 inhibitor促进CD45及HO-1表达[(2.96±0.03)vs.(1.63±0.09),P=0.000]、[(2.52±0.10)vs.(1.30±0.02),P=0.000]。结论热射病早期神经损伤中小胶质细胞以M1型为主,HO-1可能是小胶质细胞M1型标记物之一,circhipk3在小胶质细胞中高表达主要促进其向M2型转化。