乙型肝炎病毒E抗原抗体系统的变化与慢性肝病预后 …

为了探索乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｅ抗原抗体系统的变化与慢性肝病的肝损程度及肝癌发生是否有关系，本文采用Ｅｌｉｓａ法对２４３例不同慢性肝病患者进行乙型肝炎病毒Ｅ抗原抗体系统检测，同时采用ＰＣＲ法进行ＨＢＶ ＤＮＡ的检测，其结果提示：１８０例－ＨＢｅ阳性的血清检出１０１例ＨＢＶ ＤＮＡ阳性，其阳性率为５６％；同时发现抗－ＨＢｅ的检出率在肝细胞癌组，肝炎后肝硬化组，慢性肝炎组分别为８３％，７８％，７５％，     

细胞凋亡与乙型肝炎病毒感染相关肝病

乙型肝炎病毒(HBV)感染人体可引起从急性肝炎到肝细胞癌的一系列临床表现.细胞凋亡(apoptosis)是由基因控制的细胞自主性死亡过程,是HBV感染相关性肝病中重要的调节因子.本文从乙型肝炎、肝细胞癌等方面就细胞凋亡在HBV感染所致肝炎、肝癌发病机理中的作用作一简要综述.     

乙型肝炎病毒e抗原的纯化及其在人血清抗体检测中？…

目的 方法利用Ｚｈｏｕｊｉａｎ教授提供的重组质粒ＤＮＡ ｐＢＶ２２０／ｅＡｇ，转染ＤＨ５＾α细胞经３０℃培养３小时，４２℃培养６小时温度诱导后，提取乙型肝炎病毒ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）。经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ层折 纯化后免疫打点分析，收集阳性蛋白。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，考马斯亮蓝Ｇ２５０染色，显为单一的蛋白带，用免疫印迹法（Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ）和免疫打点（ｌｍｍｕｎ     

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝纤维化标志物的关系

目的研究慢性乙型肝炎患者血清HBV复制水平和肝纤维化血清学标志物的关系。方法入选临床确诊为慢性乙型肝炎的157例患者，其中49例为早期肝硬化，采用荧光定量PCR检测血清HBVDNA水平，放射免疫法和酶免疫法检测肝纤维化血清标志物：透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原N端肽和Ⅳ型胶原，对血清HBVDNA水平和肝纤维化标志物的关系进行研究分析，并对49例早期肝硬化患者和108例无肝硬化患者的血清HBVDNA及肝纤维化血清标志物水平进行比较。结果慢性乙型肝炎患者的血清HBVDNA水平和肝纤维化标志物水平无显著相关性（P〉0．05），早期肝硬化患者的血清肝纤维化标志物水平显著高于无肝硬化的患者，而HBVDNA水平却低于无肝硬化的患者（P〈0．05）。结论慢性乙型肝炎患者的血清HBVDNA水平和肝纤维化标志物水平无显著相关性。     

乙型肝炎病毒e抗体在HBV感染中的作用

长期以来,病毒载量和谷丙转氨酶水平是判断抗-HBe阳性慢性乙型肝炎是否需要治疗的关键指标,而忽略了抗-HBe本身在疾病进展中的作用.目前,随着对抗-HBe研究的不断增多,逐渐对抗-HBe在HBV感染中的作用产生了新的认识,本文对发生血清学转换后HBV-DNA病毒载量的变化、抗-HBe与肝组织病变的关系等方面进行综述.     

慢性乙型肝炎患者病毒基因型分布及与临床关系

目的了解邯郸市乙肝病毒基因型分布情况，并探讨其与临床的关系。方法采用PCR—RFLP方法对邯郸108份HBV感染者的血清进行基因型分型，并结合转氨酶和HBV—DNA结果，分析乙肝病毒基因型的临床意义。结果邯郸市慢性乙肝人群感染的HBV主要以C基因型为主，占93．5％，B基因型占6、5％。不同性别感染基因型差异无统计学意义。肝生化指标ALT、AST、TB比较提示c基因型患者的肝脏炎症似乎比B型患者重，但差异无统计学意义。C基因型的患者血清HBeAg阳性率高于B基因型。C基因型的患者血清HBV—DNA略高于B基因型，但无统计学差异。结论邯郸市慢性乙肝人群感染的HBV主要以C基因型为主。C基因型患者血清HBeAg阳性率高于B基因型，C基因型患者与B基因型相比肝脏炎症较重，HBV—DNA略高，但差异无统计学意义。     

不同慢性肝病患者血清中乙型肝炎病毒DNA定量检？…

目的 探讨乙型肝炎病毒ＤＮＡ含量的临床意义。了解乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）免疫标志不同状态的慢性肝病患者血清ＨＢＶＤＮＡ浓度及共临床意义。方法 应用建立的竞争性聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法定量检测慢性肝炎（ＣＨ）５１例、肝硬化（ＬＣ）３６例、原发性肝癌（ＰＨＣ）３８例的血清ＨＢＶ ＤＮＡ浓度。结果 ＨＢＶＤＮＡ阳性的ＣＨ患者血清ＨＢＶ ＤＮＡ浓度为４．３６ｌｏｇ１０ＨＢＶＤＮＡ拷贝／５０μｌ，ＬＣ为４．     

乙型肝炎病毒E抗原肝细胞作用蛋白AK026018表达谱芯片的研究

目的 应用基因芯片技术,筛选能被乙型肝炎病毒E抗原（HBeAg）肝细胞作用蛋白AK026018反式调节的靶基因,初步研究该蛋白的生物学功能.方法 应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,从HepG2细胞中扩增编码AK026018蛋白的全基因,构建真核表达载体,转染肝母细胞瘤系HepG2,提取总mRNA,逆转录为cDNA,与转染空白表达载体pcDNA3.1的HepG2细胞进行DNA芯片分析并比较.结果 经限制性内切酶分析和DNA序列测定鉴定构建的重组表达载体正确.在8464个基因表达谱的筛选中,发现有122个基因有差异表达,其中78种基因表达水平显著下调,45种基因表达水平显著上调.结论 成功地应用DNA芯片技术筛选出HBeAg结合蛋白新基因AK026018的反式调节蛋白,证明该基因对于肝细胞基因表达谱有显著影响.     

Chronic viral hepatitis B and C: an argument against the conventional classification of chronic hepatitis

The classification of chronic hepatitis distinguishing benign chronic persistent hepatitis from severe chronic active hepatitis was constructed without knowledge of well-defined aetiological factors. Better understanding of the different hepatitis-viruses has shed new light on this subject. Chronic viral hepatitis B and C each show typical histological patterns. The validity of the conventional classification has been evaluated by a comparative study of chronic viral hepatitis B and C. 130 biopsies from 110 patients with chronic hepatitis C (CH-C) proven serologically by antibodies (second generation testing) were compared with 105 biopsies from 73 patients with chronic hepatitis B (CH-B). These were scored semi-quantatively. In CH-C, lymphoid follicles and/or aggregates were found in 88.5%, fatty degeneration in 51%, bile duct lesions in 46.2%, and Mallory body-like material in the hepatocytes in 9.2%. The portal lymphocytic infiltration generally predominated over the necro-inflammatory lesions of the parenchyma. Chronic persistent hepatitis (defined by the presence of portal hepatitis) was present exclusively in CH-C. Chronic lobular hepatitis was found exclusively in CH-B. We conclude that the histological criteria described for CH-C are highly suggestive of the diagnosis, that the artificial subdivision of chronic hepatitis into CPH and CAH is obsolete and that the histological assessment of chronic hepatitis should consist of a grading of inflammatory activity (minimal, mild, moderate, severe) and staging of fibrosis (extent of distortion of architecture). The final diagnosis should be based on the demonstration of the aetiological agent.     

e抗体阳性的慢性乙型肝炎病人携带乙肝病毒前C区变异的研究

某些抗－ＨＢｅ（＋）的慢性乙型肝炎病人血清仍可检出ＨＢＶＤＮＡ。本工作对９例这类病人的病毒基因组，在聚合酶链反应后直接进行序列分析，发现８例其前Ｃ区第８３位核苷酸发生Ｇ→Ａ（Ａ８３）点突变，使编码色氨酸（ＴＧＧ）的第２８个密码变异为终止密码（ＴＡＧ）。其中２例Ａ８３变异发生在ＨＢｅＡｇ→抗－ＨＢｅ血清转换过程中。分析１例肝内ＨＢＶＤＮＡ，亦与其血清有相同的Ａ８３变异。以３例抗－ＨＢｅ（＋）的慢性无症状携带者为对照，均无Ａ８３变异。本文６例为慢性活动性肝炎，３例为慢性重症肝炎。变异病毒逃避了免疫清除，可能与病变持续活动甚至重症化有关。     

乙型肝炎病毒基因型与拉米夫定治疗疗效关系的研究

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因型与拉米夫定治疗疗效的关系及其机理。方法对拉米夫定治疗的228例慢性乙型肝炎患者的临床资料进行收集和整理,分析HBV基因型与拉米夫定治疗疗效的关系;并对各HBV基因型影响拉米夫定疗效的可能因素进行探讨。结果HBV基因型B型对拉米夫定治疗的应答率为40.6%,C基因型的应答率为21.2%,两组应答率差异有显著性(P<0.05);B基因型的HBeAg的血清转换率为26.3%,C基因型为12.4%,统计学方法处理有显著性差异(P<0.05)。拉米夫定治疗期间的YMDD变异发生率B基因型组为13.2%,C基因型组为37.4%,两组差异有显著性统计学意义(P<0.05)。结论拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者,HBVB基因型的疗效优于C基因型,其疗效机理可能与拉米夫定治疗后C基因型容易发生YMDD变异有关。     

乙型肝炎患者HBV M和HBV DNA的相关性研究

目的 探讨乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）血清学标志（ＨＢＶ Ｍ）与ＨＢＶ ＤＮＡ检测结果的相关性与临床意义。方法 对４１４例乙型肝炎的ＨＢＶ Ｍ和ＨＢＶ ＤＮＡ检测结果进行比较。ＨＢＶ Ｍ用ＥＬＩＳＡ定量分析法检测,ＨＢＶ ＤＮＡ用斑点杂交法检测。结果 急性、慢性乙型肝炎患者中ＨＢＶ ＤＮＡ的阳性率与乙型肝炎肝硬化患者的ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率比较,差异有显著性;ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性组的ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率比较,差异无显著性;ＨＢｓＡｇ和／或ＨＢｅＡｇ的滴度与ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率呈正相关关系。结论 ＨＢＶ ＤＮＡ是评价ＨＢＶ活动最理想的标志;抗－ＨＢｅ的出现不能作为ＨＢＶ复制停止的指标;ＨＢｓＡｇ的滴度和ＨＢｅＡｇ的滴度变化可作为临床评价病毒复制程度和     

慢性乙型肝炎患者肝脏病理特点与血清HBeAg和HBV DNA的关系

目的 了解慢性乙型肝炎患者病理特点与血清HBeAg和HBVDNA的关系.方法对1057例慢性乙型肝炎患者进行肝脏病理检查,采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA,用化学发光法检测血清HBeAg.结果 HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者的炎症及纤维化程度(G4和S4分别为7.83%和12.17%)较HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者高(G4和S4分别为3.39%和5.44%);HBeAg阳性的患者中HBV DNA滴度低的患者炎症及纤维化程度较高(HBV DNA 104～105 G3G4和S3S4分别为45.64%和30.20%),而HBeAg阴性的患者则是HBV DNA滴度高的炎症及纤维化程度较高(HBV DNA106～107 G3G4为54.55%和HBV DNA 108～109S3S4为42.85%).结论慢性乙型肝炎患者的肝脏病理与血清HBeAg及HBV DNA水平有不同相关性,对HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者要及早进行肝脏病理检查和抗病毒治疗.     

HBV核心启动子突变与临床表现及病毒复制的关系

目的探讨HBV核心启动子nt 1 762～1 764突变与肝病严重性的关系以及对e系统状态和病毒复制的影响.方法采用半套式突变特异PCR(msPCR)技术检测97例各型肝病患者血清nt 1 762～1 764突变株的感染状况.结果经测序和扩增产物电泳证实,采用我们设计的引物建立的msPCR方法检测HBV感染者血清nt 1 762～1 764突变株和野生株的特异性强,方法可靠.急性肝炎、慢性肝炎轻度、中度、重度及肝硬化患者nt 1 762～1 764突变株感染比例分别为2/5、7/43、10/31、1/3和7/15,肝硬化患者nt 1 762～1 764突变株感染率显著高于慢性肝炎轻度患者(P＜0.025).在92例慢性HBV感染者中,野生株(25/92)、突变株(42/92)和混合感染者(25/92)血清HBeAg阳性率分别为80.0%、56.0%和64.3%;HBV DNA含量分别为(4.4±8.5)×10 8、(1.1±1.6)×10 9和(1.4±1.8)×10 9拷贝/ml;ALT异常率分别为44.0%、52.0%和42.6%;ALT水平分别为(58.6±79.0)、(57.1±75.2)和(62.6±90.3)IU/L,以上各组之间比较差异无统计学意义.结论msPCR技术检测nt 1 762～1 764突变灵敏特异.nt 1 762～1 764突变与肝病严重性有密切关系,这种相关性与突变株的e系统状态、高病毒复制无任何关系.     

原发性肝癌患者214例乙肝两对半及抗-HCV检测结果探析

目的探讨乙肝病毒(HBV)及丙肝病毒(HCV)感染模式与原发性肝癌(PHC)间的关系。方法选取我院于2012年1月至2015年1月间收治的PHC患者214例,抽取其早晨空腹静脉血5m L,分离获得血清,采用罗氏公司Elecsys2010型全自动化学发光免疫分析仪检测患者的乙肝两对半指标,采用酶联免疫法(ELISA)检测患者血清丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)水平。结果 214例PHC患者中,HBV的感染率高达87.85%,显著高于未感染者,其中HBs Ag阳性感染率为68.22%,显著高于HBs Ag阴性感染率19.63%,并且又以"小三阳"模式所占比例最高,达48.13%,显著高于"大三阳"模式的12.15%及其余10种感染模式所占比例,差异均有统计学意义(P<0.05)。同时HCV的感染率为16.82%,HBV与HCV双重感染率为10.75%;其中感染HCV并HBs Ag阳性感染者所占比例为0.93%,显著低于感染HCV并HBs Ag阴性感染者比例9.82%及仅感染HCV者的比例6.07%,差异有统计学意义(P<0.05)。HBs Ag阳性感染者感染HCV的几率为1.37%,显著低于HBs Ag阴性感染者感染HCV的几率47.62%及未感染HBV者感染HCV的几率53.85%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HBV感染极有可能是致使PHC发生的主要因素,而HBs Ag阳性感染在其中居主导地位,且又以"小三阳"感染模式的PHC患者占多数。同时HCV感染也不容忽视,特别是HBV与HCV的双重感染更应该引起大家的重视。     

Cost-effectiveness and long-term outcomes of liver transplantation using hepatitis B core antibody-positive grafts with hepatitis B immunoglobulin prophylaxis in Korea

Background/AimsHepatitis B core antibody (anti-HBc)-positive donors are used as an extended donor pool, and current guidelines recommend the usage of nucleos(t)ide analogues (NAs) as prophylaxis for preventing de novo hepatitis B virus infection (DNH). We analyzed the long-term outcomes of a large cohort of liver transplantation (LT) patients receiving anti-HBc-positive grafts and evaluated the risk of DNH when hepatitis B immunoglobulin (HBIG) monotherapy was used as prophylaxis. We also compared the cost-effectiveness of HBIG and NAs.MethodsWe retrospectively reviewed 457 patients with anti-HBc-positive grafts and 898 patients with anti-HBc-negative grafts who underwent LT between January 2001 and December 2018. We compared recipient characteristics according to the anti-HBc status of the donor, and compared the costs of using NAs for the rest of the patient’s life and using HBIG to maintain hepatitis B surface antibody titers above 200 IU/L.ResultsThe 1-, 5-, and 10-year patient survival rates were 87.7%, 73.5%, and 67.7%, respectively, in patients with anti-HBc-positive grafts, and 88.5%, 77.4%, and 70.3%, respectively, in patients with anti-HBc-negative grafts (P=0.113). Among 457 recipients with anti-HBc-positive grafts, 117 (25.6%) were non-HBV recipients. The overall incidence of DNH was 0.9%. When using HBIG under insurance coverage, the cumulative cost was lower compared with using NA continuously without insurance coverage in Korea.ConclusionsAnti-HBc-positive grafts alone do not affect patient survival or graft survival. HBIG monoprophylaxis has good outcomes for preventing DNH, and the patient’s long-term cost burden is low in Korea because of the national insurance system in this cohort.     

14株抗乙型肝炎表面抗原单克隆抗体与变异表面抗原的反应模式及应用

目的制备抗乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)的单克隆抗体,检测单克隆抗体与15种变异HBsAg的反应模式。用筛选出的单抗建立快速检测变异HBsAg的ELISA实验方法,并做初步评价。方法用中国乙型肝炎病毒感染者血清中分离的HBsAg免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合技术制备抗-HBs单克隆抗体。检测不同单克隆抗体与野生及变异HBsAg的反应性。筛选出两种可以较好识别变异HBsAg的单克隆抗体McAb2和McAb3,建立两种抗体ELISA检测HBsAg的方法。结果制备了14株抗-HBs单抗。经过初筛,有4种可以较好识别包括G145R在内的大多数变异HBsAg。优化了McAb2和McAb3检测HBsAg的条件,检测HBsAg的灵敏度较好,检测变异HBsAg的能力优于2种现行国产HBsAg检测试剂盒。结论用本实验制备的单抗可以很好地识别包括G145R在内的大多数变异HBsAg。