扶正消瘤颗粒对乳腺癌SKBR-3 细胞HER-2 mRNA 及蛋白表达的影响

目的：观察扶正消瘤颗粒对乳腺癌SKBR-3 细胞HER-2 mRNA 及蛋白表达的影响。方法：将30 只SD 大鼠随机分成扶正消瘤颗粒L 组、M 组、H 组,3 组大鼠分别予1 倍、2 倍、3 倍量的扶正消瘤颗粒灌胃3 d 后,制备扶正消瘤颗粒的大鼠含药血清。体外培养HER-2 阳性的人乳腺癌SKBR-3 细胞, 对数生长期细胞随机取5 组, 分别是空白对照组、赫赛汀（Herceptin） 组及扶正消瘤颗粒的大鼠含药血清低、中、高剂量组（L 组、M 组、H 组）,进行相应干预。采用实时PCR 检测HER-2 mRNA 表达,Western Blot 检测HER-2 蛋白表达。结果：扶正消瘤颗粒3 个剂量组及Herceptin 组的HER-2 mRNA 含量与空白对照组比较,在24 h、48 h、72 h 3 个时间点均有下降（P＜0.01）,提示3 种剂量的大鼠含药血清和Herceptin 均能抑制SKBR-3 细胞的HER-2 mRNA 表达。L 组24 h 和48 h 的HER-2 mRNA 含量及M 组48 h 的HER-2 mRNA 含量与Herceptin 组比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;L 组72 h,M 组24 h 及72 h,H 组24 h、48 h、72 h 的HER-2 mRNA 表达量与Herceptin 组比较,差异均有统计学意义（P＜0.01,P＜0.05）。扶正消瘤颗粒3 个剂量组及Herceptin 组24 h 的HER-2 mRNA 含量均最低,48 h 的HER-2 mRNA 含量较24 h 升高,72 h 的mRNA 含量又降低。与空白对照组进行比较,Herceptin 组和L 组的SKBR-3 细胞HER-2 蛋白量均下降,差异均有统计学意义（P＜0.01）;与Herceptin 组比较,M 组及H 组的HER-2 蛋白量较高,差异均有统计学意义（P＜0.01）。L 组的HER-2 蛋白量与Herceptin 组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：扶正消瘤颗粒的大鼠含药血清能明显抑制乳腺癌SKBR-3 细胞HER-2 mRNA 表达和HER-2 蛋白表达,其抑制作用较Herceptin 要差一些,扶正消瘤颗粒低剂量的含药血清效果更好。     

HER-2过表达乳腺癌治疗研究进展

HER-2基因成为近年来乳腺癌研究热点,它是一种与乳腺癌相关的癌基因,与乳腺癌的发生、发展及转移有密切关系,HER-2目前被认为是新的判断乳腺癌预后的独立指标。在治疗方面,Herceptin作为一种以癌基因为靶的治疗方式,使HER-2阳性的乳腺癌转移患者受益匪浅,近年来,中医中药凭借其特有优势在HER-2过表达乳腺癌的治疗中发挥作用。     

大黄酸／大黄素抗多药耐药肿瘤细胞研究

肿瘤细胞多药耐药是导致肿瘤化疗失败的主要原因之一，也是白血病、肿瘤缓解后复发的重要根源。如何加强对耐药肿瘤细胞的杀灭是目前肿瘤研究领域的重要课题。大黄酸、大黄素与阿霉素、柔红霉素等抗癌药均属于蒽醌类化合物。我们以对阿霉素、柔红霉素已经产生抗药性的三株...     

大黄酸对Caco-2细胞多药耐药蛋白转运体表达的影响

目的:探讨大黄酸对人结肠腺癌上皮细胞(Caco-2)多药耐药蛋白mRNA表达的影响。方法:用大黄酸作用于Caco-2细胞,采用荧光定量PCR(real time PCR)法检测转运体MRP1-5 mRNA的表达量,数据分析采用2-ΔΔCT法。结果:高(5.00 mg.L-1)低(2.50 mg.L-1)质量浓度大黄酸均可以显著上调Caco-2细胞MRP3 mRNA表达(P<0.05或P<0.01);低浓度大黄酸可以显著下调Caco-2细胞MRP5 mRNA表达(P<0.05);大黄酸对MRP1,MRP2和MRP4 mRNA的表达没有显著影响。结论:大黄酸可能通过上调Caco-2细胞MRP3 mRNA的表达和下调MRP5 mRNA的表达而影响其口服药物的生物利用度。     

子宫内膜癌中PTEN蛋白、HER-2蛋白的表达及意义

目的检测子宫内膜癌组织中PTEN蛋白及HER-2蛋白表达并探讨其意义。方法采用免疫组织化学法检测60例子宫内膜癌、32例正常子宫内膜组织中PTEN蛋白及HER-2的表达。结果子宫内膜癌组织中PTEN蛋白为缺失表达,高于正常子宫内膜组织（P〈0.05）,而且PTEN表达在G1级肿瘤高于G2、G3级（P均〈0.05）,PTEN蛋白缺失率与肿瘤组织类型有关（P〈0.05）,与肌层浸润、淋巴结转移及病理分期无明显关系（P均〉0.05）。子宫内膜癌组织中HER-2蛋白表达为高表达,HER-2的表达与肿瘤组织学分级、病理学分期以及肿瘤浸润子宫肌层深度均显著相关（P均〈0.05）,其表达与组织学类型、有无淋巴结转移均无关（P均〉0.05）。HER-2与PTEN的表达呈明显负相关。结论 PTEN表达缺失与临床病理参数无关,蛋白表达缺失常发生于细胞分化较差的子宫内膜癌。PTEN蛋白表达缺失与HER-2表达水平有关。     

子宫内膜癌中PTEN蛋白、HER-2蛋白的表达及意义

目的检测子宫内膜癌组织中PTEN蛋白及HER-2蛋白表达并探讨其意义。方法采用免疫组织化学法检测60例子宫内膜癌、32例正常子宫内膜组织中PTEN蛋白及HER-2的表达。结果子宫内膜癌组织中PTEN蛋白为缺失表达,高于正常子宫内膜组织(P<0.05),而且PTEN表达在G1级肿瘤高于G2、G3级(P均<0.05),PTEN蛋白缺失率与肿瘤组织类型有关(P<0.05),与肌层浸润、淋巴结转移及病理分期无明显关系(P均>0.05)。子宫内膜癌组织中HER-2蛋白表达为高表达,HER-2的表达与肿瘤组织学分级、病理学分期以及肿瘤浸润子宫肌层深度均显著相关(P均<0.05),其表达与组织学类型、有无淋巴结转移均无关(P均>0.05)。HER-2与PTEN的表达呈明显负相关。结论 PTEN表达缺失与临床病理参数无关,蛋白表达缺失常发生于细胞分化较差的子宫内膜癌。PTEN蛋白表达缺失与HER-2表达水平有关。     

端粒酶与HER-2蛋白对胸水性质判断的价值

目的通过对胸腔积液中的端粒酶活性、胸液及血清HER-2蛋白浓度联合检测,探讨它们在胸腔积液性质鉴别诊断中的价值。方法抽取87例恶性胸腔积液患者血液及胸腔积液后采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测胸液端粒酶活性,酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测血清、胸液HER-2蛋白的浓度,检测同期35例良性胸腔积液作对照。结果恶性胸腔积液患者胸液中端粒酶活性、HER-2蛋白浓度、血清HER-2蛋白浓度较良性胸腔积液患者显著增高(P均<0.05);胸液中HER-2蛋白诊断恶性胸腔积液敏感性为85%,特异性为91%,正确率为88%,端粒酶诊断恶性胸腔积液敏感性为88%,特异性为90%,正确率90%;血清HER-2蛋白诊断恶性胸腔积液中敏感性为84%,特异性为92%,正确率为85%;胸液中端粒酶、HER-2蛋白、血清HER-2蛋白联合检测的敏感性为67%,特异性98%,正确率为79%。结论端粒酶、HER-2蛋白检测对良恶性胸腔积液的鉴别诊断有一定的临床意义,联合检测端粒酶、HER-2对恶性胸腔积液诊断具有较高价值。     

解毒化浊方对HER-2阳性乳腺癌细胞PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达的影响

目的观察解毒化浊方血清对HER-2阳性乳腺癌细胞PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达的影响,探讨解毒化浊方治疗HER-2阳性乳腺癌的作用机制。方法将雌性Wistar大鼠分为对照组、中药组、西药组、联合组4组,分别给药制备含药血清,再以给药血清干预SK-BR-3细胞,采用Western blot检测HER-2、p-HER-2蛋白表达以及PI3K/Akt通路相关蛋白p-Akt、Bad、p-Bad表达。结果 Western blot检测显示,中药组、西药组、联合组HER-2、p-HER-2灰度比较对照组均降低;西药组、联合组HER-2、p-HER-2、p-Akt灰度比较对照组明显降低,西药组、联合组较对照组HER-2、p-HER-2、p-Akt表达含量差异有统计学意义(P0.05)。中药组、西药组、联合组Bad、p-Bad灰度比较对照组降低,总Bad表达含量各组间差异无统计学意义(P0.05)。西药组、联合组p-Bad表达含量差异有统计学意义(P0.05)。结论解毒化浊方具有下调PI3K/Akt信号通路中相关蛋白表达,协同抑制剂发挥减毒增效的抗肿瘤作用。     

探讨扶正消瘤颗粒对HER-2阳性乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨扶正消瘤颗粒对人表皮生长因子受体2(HER-2)阳性乳腺癌SKBR-3细胞增殖和凋亡的影响。方法:对SKBR-3细胞株进行体外培养,接种至6孔培养板中,随机分为5组。1、2、3倍剂量组分别以含有1、2、3倍扶正消瘤颗粒药物成分的血清处理细胞株,空白对照组以不含药血清处理细胞株,赫赛汀组以赫赛汀处理细胞株。处理72h后分别应用流式细胞仪及噻唑蓝(MTT)比色法对SKBR-3细胞凋亡、增殖情况进行分析。结果:用药后,赫赛汀组及2倍剂量组SKBR-3细胞增殖率均低于对照组;1、3倍剂量组SKBR-3细胞增殖率均高于对照组和赫赛汀组,差异均有统计学意义(P<0.05)。用药后,1、2、3倍剂量组和赫赛汀组SKBR-3细胞早期凋亡率、晚期凋亡率、总凋亡率均显著高于空白对照组,且2、3倍剂量组均高于赫赛汀组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:对于HER-2阳性乳腺癌SKBR-3细胞,扶正消瘤颗粒可明显促其凋亡,同时2倍扶正消瘤颗粒剂量可对乳腺癌SKBR-3细胞增殖发挥显著抑制作用。     

大黄牡丹汤中大黄不同配伍对大黄酸含量变化的影响

【摘　要】大黄牡丹汤中大黄不同配伍对大黄酸含量变化的影响席先蓉李邦银*陈维敏(贵阳中医学院药学系贵阳550002)大黄牡丹汤出自《金匮要略》,由大黄、牡丹皮、桃仁、冬瓜仁和芒硝组成,为历代治疗肠痈的代表方剂。肠痈多由热毒蓄结肠中,血瘀成痈,可用荡热逐瘀攻下法治之,使瘀热脓血随大便而去,则肠痈得愈。方中君药大黄泻热逐瘀,荡涤肠中热毒瘀滞,结合型大黄酸与游离大黄酸分别为大黄的部分泻下及抑菌有效成分,其作用与该方清热通里攻下     

乳岩宁方对MCF-7荷瘤裸鼠HER-2/nue蛋白表达及对生存质量的影响

目的:观察乳岩宁方对MCF-7乳腺癌荷瘤裸鼠HER-2蛋白表达及生存质量的影响,并探讨其作用机制。方法:人乳腺癌细胞株MCF-7接种于裸鼠右侧胸壁第二乳垫部皮下,选取27只荷瘤成功裸鼠随机分为对照组、乳岩宁组、平消胶囊组。记录各组裸鼠饮食、体重变化情况;第18天,处死裸鼠取肿瘤,称重,计算抑瘤率;Western Blotting检测肿瘤组织中HER-2蛋白的表达。结果:乳岩宁组体重净降明显低于对照组、平消胶囊组(P<0.01);乳岩宁组和平消胶囊组裸鼠的自主活动次数明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);乳岩宁组和平消胶囊组的瘤重均低于对照组(P<0.01);乳岩宁组、平消胶囊组HER-2蛋白表达均低于对照组(P<0.01)。结论:乳岩宁方具有一定的抑瘤作用,可能通过抑制肿瘤组织中HER-2/nue基因蛋白的表达来实现的,乳岩宁方还能提高荷瘤裸鼠的体重和自主活动次数,改善生存质量。     

中药复方联合三苯氧胺对MCF-7乳腺癌细胞HER-2基因及MAPK信号传导通路的影响

目的:观察中药复方联合三苯氧胺(tamoxifen,TAM)对MCF-7乳腺癌细胞增殖的MAPK信号转导通路及人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor,HER-2)基因mRNA表达的影响,探讨中药复方抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖的信号传导途径.方法:将造模成功...     

不同浓度血通灵对人乳腺癌细胞侵袭作用及基质金属蛋白酶-9蛋白表达的影响

目的探讨血通灵对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭转移作用机制。方法 Transwell侵袭实验检测不同浓度血通灵对细胞侵袭作用的影响,初步明确药物抗肿瘤转移的物质基础;应用明胶酶谱法检测血通灵对MDA-MB-231细胞分泌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响;Western blot检测不同浓度血通灵干预后细胞中MMP-9蛋白表达的变化。结果不同浓度血通灵均能显著抑制细胞分泌MMP-9能力、细胞侵袭能力和细胞内MMP-9蛋白表达,该抑制作用呈剂量依赖关系。结论血通灵可能通过下调MDA-MB-231细胞中MMP-9蛋白表达而降低活性MMP-9的分泌,抑制细胞的侵袭能力。     

白花丹素对乳腺癌细胞凋亡和自噬的影响

目的观察白花丹素对乳腺癌细胞凋亡及自噬的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用不同浓度白花丹素作用于乳腺癌MCF-7和BT549细胞,CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位(MMP),流式细胞术检测细胞凋亡情况,免疫荧光检测细胞内LC3B蛋白表达,Western blot检测细胞内Bax、Bcl-2、LC3B、AMPK和p-AMPK蛋白表达。结果不同浓度白花丹素可抑制乳腺癌MCF-7和BT549细胞生长,抑制细胞克隆形成,其IC50分别为15.9μmol/L和13.51μmol/L;16、32μmol/L白花丹素处理后,MCF-7细胞MMP降低,ROS水平升高,Bcl-2蛋白表达降低,Bax、LC3BⅡ、p-AMPK蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。使用AMPK抑制剂(10μmol/L Dorsomorphin)或自噬抑制剂(5 mmol/L 3-MA)与白花丹素(32μmol/L)同时处理MCF-7细胞后,LC3BⅡ、p-AMPK蛋白表达较单独使用白花丹素(32μmol...     

松树皮原花青素对乳腺癌细胞增殖和转移作用

目的:研究松树皮提取物原花青素(PMBE)对人乳腺癌MCF-7细胞体外转移及侵袭作用的影响,并初步探讨其作用机制。方法:不同浓度PMBE作用于体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞,采用MTT法检测其对细胞增殖抑制作用的影响;通过划痕实验检测PMBE对细胞转移能力的影响;体外侵袭实验(Transwell小室)检测PMBE对细胞侵袭能力的影响;最后应用免疫印迹(Western-blot)方法检测PMBE对MCF-7细胞基质金属蛋白酶-9表达水平的影响。结果:随着PMBE浓度的增加,MTT法检测结果表明,PMBE在体外对MCF-7细胞有明显的增殖抑制作用,半数致死浓度(IC_(50))值为(71±2.1)μg·m L~(-1);PMBE质量浓度为5、15μg·m L~(-1)时,细胞划痕的闭合能力分别下降25%、36%,细胞侵袭能力下降59%、79%;PMBE能显著抑制MCF-7细胞MMP-9蛋白的表达。结论:PMBE能有效抑制乳腺癌增殖和转移,其作用机制可能与降低乳腺癌细胞运动能力有关,PMBE有潜力开发为治疗乳腺癌的药物。     

Cox-2在乳腺癌中的表达及其意义

目的：探讨癌基因Cox-2在乳腺癌组织中的表达及其与临床特征之间的关系．方法：应用免疫组化技术，检测52例人乳腺良恶性疾病中Cox-2蛋白的表达，分析其与淋巴结转移、激素受体状态的关系。结果：Cox-2表达阳性率为47．5%（19／40），与阴性激素受体状态密切相关，但与淋巴结转移无关（p〉0．05），10例良性乳腺疾病及2例正常乳腺组织中仅有1例乳腺囊肿病Cox-2表达阳性．结论：Cox-2与乳腺癌的发生、转移及预后均有密切关系，对其进行免疫组化检测对评估乳腺癌的预后及选择靶向治疗对象会更有意义。     

大黄素对肝癌细胞SMMC-7721抑制作用及P53、C-myc蛋白的表达

目的 研究大黄素对肝癌细胞 SMMC-7721 的生长抑制作用和 P53、C-myc 蛋白的表达。方法 应用 MTT法观察大黄素、5-FU 对 SMMC-7721 的生长抑制作用,免疫组化法染色(SP 法)测定细胞凋亡时 P53、C-myc 蛋白的表达情况。结果 大黄素对肝癌细胞 SMMC-7721 有明显的生长抑制作用,其 IC50为 21.6 mol/L。大黄素对 SMMC-7721的抑制作用优于 5-FU(P<0.05);大黄素作用于细胞后,P53、C-myc 蛋白均有一定程度下调,而 C-myc 下调较 P53明显。结论 大黄素对 SMMC-7721 有明显的生长抑制作用,作用于 SMMC-7721 后 P53、C-myc 蛋白的表达均有下调。