基于cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路探讨柴胡加龙骨牡蛎汤抗抑郁的作用机制

目的：该研究基于环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路探究柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性不可预见性温和应激(CUMS)法制备的大鼠抑郁模型的干预作用。方法：随机数字表法将60只SD大鼠分为正常组、模型组、柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组和氟西汀组。除正常组外,其他各组进行49 d的CUMS制备大鼠抑郁模型。第29天开始给药,柴胡加龙骨牡蛎汤组低、中、高剂量组分别给予柴胡龙骨牡蛎汤颗粒剂2.89、5.78、11.56 g·kg^-1,氟西汀组给予盐酸氟西汀胶囊2.06 mg·kg^-1。旷场实验和强迫游泳实验观察大鼠行为学表现,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定大鼠海马组织5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、cAMP水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠海马组织PKA、CREB、BDNF mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马组织PKA、BDNF蛋白表达水平;免疫组化法(IHC)检测CREB定位表达;...     

健脾补肺方对幼龄哮喘大鼠cAMP/PKA/CREB信号通路的影响

目的 观察健脾补肺方对卵蛋白（OVA）致敏并攻击复制的幼龄哮喘大鼠模型气道炎症、高反应性及环磷酸腺苷（cAMP）信号通路活性的影响。方法 雄性SD大鼠75只,随机选取15只作为正常组,剩余大鼠随机分为哮喘模型组,健脾补肺方组（8.37 g·kg^-1·d^-1）,氨茶碱组（40 mg·kg^-1·d^-1）和地塞米松组（0.1 mg·kg^-1·d^-1）,每组15只。用0.2% OVA的氢氧化铝凝胶10点致敏,并以1% OVA生理盐水溶液雾化攻击复制幼龄大鼠哮喘模型,并给予相应的药物处理。小动物肺功能仪观察大鼠气道高反应（AHR）变化,支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞计数及分类计数观察炎症细胞数量变化,苏木素-伊红（HE）,马松（Masson）和碘酸雪夫氏（PAS）染色观察肺组织病理学变化;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中白细胞介素（IL）-4,IL-5,IL-13,γ干扰素（IFN-γ）,肿瘤坏死因子（TNF）-α和血浆中cAMP水平变化;免疫组化法观察肺组织蛋白激A（PKA）蛋白表达变化,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）观察肺组织环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB） mRNA和蛋白表达变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠气道阻力（RL）明显增加而Cdyn明显降低（P<0.05）,BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞比例显著升高,外周血IL-4,IL-5,IL-13,TNF-α水平显著升高而IFN-γ水平显著降低（P<0.01）,肺组织病理改变明显;cAMP水平显著下降,肺组织中PKA和CREB的表达显著下调（P<0.01）。与模型组比较,健脾补肺方可以抑制AHR,降低BALF中的白细胞总数和嗜酸性粒细胞比例及RL（P<0.05）,改善大鼠肺组织病理改变,增加Cdyn（Cdyn）,上调大鼠血清中cAMP水平和肺组织中 PKA和CREB表达（P<0.01）。结论 健脾补肺方能够改善幼龄哮喘大鼠的AHR,抑制气道炎症,减轻肺组织损伤,其机制可能与上调cAMP/PKA/CREB通路活性相关。     

芍药汤介导不同信号通路治疗溃疡性结肠炎作用机制的研究进展

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)是一种复杂的慢性炎性反应性肠病,与环境、饮食、药物和生活方式等危险因素密切相关,这些因素可能会影响宿主微生物群或对抗原的免疫反应。目前随着全球UC发病率的持续上升,深入研究UC的发病机制和寻求新的治疗靶点具有重要意义。中医药治疗疾病具有多途径、多靶点的特点,在中国有着悠久的临床应用历史。芍药汤已被广泛用于治疗肠道湿热证相关的各种疾病,对UC治疗有效,但作用机制尚不清楚。查阅近几年关于芍药汤通过不同信号通路治疗UC的作用机制进行总结分析,旨在为今后寻求芍药汤治疗UC的新靶点提供重要依据。     

柴胡皂苷A 调节cAMP/PKA/CREB 信号通路对失眠大鼠的改善作用及机制研究

目的 基于cAMP/PKA/CREB 通路探讨柴胡皂苷A 对失眠大鼠的改善作用及机制。方法 将75 只SD 大鼠随机分为空白组、模型组、柴胡皂苷A 低剂量组（0.625 mg·kg-1）、柴胡皂苷A 高剂量组（2.500 mg·kg-1）、艾 司唑仑组（0.1 mg·kg-1）,每组15 只。采用腹腔注射苯丙氨酸（PCPA,0.1 mg·kg-1）复制失眠大鼠模型。观察大 鼠一般情况及昼夜节律;采用戊巴比妥钠翻正实验测定大鼠睡眠潜伏期及睡眠持续时间;观测大鼠睡眠时相, 记录慢波睡眠第1 期（SWS1）、慢波睡眠第2 期（SWS2）、快速眼球运动睡眠期（REMS）时长以及总睡眠时长 （TST）;qRT-PCR 法测定下丘脑节律基因Clock、Bmal1 mRNA 及钟控基因Rev-erbα、Rorα mRNA 的表达水 平;免疫荧光法测定海马组织NeuN 表达水平;ELISA 法测定脑组织中的cAMP 水平;Western Blot 法测定脑 组织中Clock、Bmal1、Rev-erbα、Rorα 及cAMP/PKA/CREB 通路相关蛋白表达水平。结果 与空白组比较,模 型组大鼠昼伏夜出的节律紊乱,极度兴奋,易激惹,睡眠减少;睡眠潜伏期明显延长（P＜0.05）,睡眠持续时 间及SWS1、SWS2、REMS、TST 均明显缩短（P＜0.05）;神经元排列紊乱,NeuN 阳性神经元IOD 值明显降低 （P＜0.05）; 脑组织Clock、Bmal1、Rev-erbα、Rorα mRNA 及蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）; 脑组织 cAMP、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB 蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。与模型组比较,给药组大鼠的攻击性 明显减弱,昼伏夜出有节律性,活动减少,睡眠增多;睡眠潜伏期明显缩短（P＜0.05）,睡眠持续时间及 SWS1、SWS2、REMS、TST 均明显延长（P＜0.05）;神经元排列紊乱情况有所恢复,NeuN 阳性神经元IOD 值 明显升高（P＜0.05）;脑组织Clock、Bmal1、Rev-erbα、Rorα mRNA 及蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）;脑 组织cAMP、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB 蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）。结论 柴胡皂苷A 可能通过激活 cAMP/PKA/CREB 通路改善失眠大鼠的昼夜节律。     

补骨脂甲素介导cAMP/PKA/CREB信号通路调控促进骨髓MSC成骨分化作用研究

目的:观察补骨脂甲素不同剂量单体对大鼠骨髓间充质干细胞PKA、CREB mRNA及蛋白表达的影响,探讨补肾中药防治骨质疏松症的分子生物学机制。方法:以成骨转化诱导液组作为阳性对照组,小牛血清组为空白对照组,用高、中、低3种剂量补骨脂甲素对大鼠骨髓间充质干细胞分别干预6、9、12 d。ELISA法检测第6、9、12天,大鼠骨髓间充质干细胞ALP蛋白含量;ELISA法及qRT-PCR法检测第9天大鼠骨髓间充质干细胞PKA、CREB mRNA及蛋白表达。结果:各用药组均能提高大鼠骨髓间充质干细胞ALP蛋白表达,第9天达到峰值。补骨脂甲素能够上调PKA、CREB mRNA及蛋白表达,补骨脂甲素高剂量组效果最显著。结论:补骨脂甲素能够促进大鼠骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞,其作用机制可能与cAMP/PKA/CREB信号通路的活化有关。     

从cAMP/PKA/CREB信号通路探讨醒脑益髓汤对血管性痴呆模型大鼠海马神经元的影响

目的：从cAMP/PKA/CREB信号通路探讨醒脑益髓汤对血管性痴呆(VD)模型大鼠海马神经元凋亡的影响。方法：将60只大鼠随机分为假手术组和造模组,其中假手术组10只,造模组50只。假手术组仅分离动脉,不结扎;造模组采用双侧颈总动脉永久结扎法(2VO)建立血管性痴呆大鼠模型,随机分为5组,分别为：生理盐水组、多奈哌齐组、醒脑益髓汤低、中、高剂量组,给予生理盐水、多奈哌齐及不同剂量中药灌胃30天后,通过定位航行实验和空间探索实验观察大鼠行为学改变,用TUNEL法检测海马CA1神经元凋亡,用Elisa法检测神经元环磷酸腺苷(cAMP)及激酶A(PKA)含量,用Western Blot检测环磷酸腺效应元件结合蛋白(CREB)和下游脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果：与假手术组大鼠比较,造模组大鼠出现在平台所在象限的次数及游泳时间均增加(P<0.01),海马CA1神经元凋亡细胞明显增加,cAMP、PKA、CREB及BDNF的蛋白表达水平明显下调(P<0.01);与模型组比较,多奈哌齐组和醒脑益髓汤低、中、高剂量组大鼠的学习记忆能力明显提高,海马CA1神经元凋亡细胞减少,c...     

丹皮酚通过调节真杆菌属介导的TGR5/PKA/CREB信号通路抑制酒精性肝损伤的作用机制

目的 探究丹皮酚是否通过调节真杆菌属介导的G蛋白胆汁酸偶联受体5（TGR5）/蛋白激酶A（PKA）/环腺苷单磷酸反应结合元件（CREB）信号通路对酒精性肝损伤小鼠发挥保护作用。方法 将C57BL/6小鼠随机分成5组：正常组、模型组、丹皮酚组（480 mg·kg^-1）、抗生素组（Abs组）和抗生素+丹皮酚组。Lieber-DeCarli液体饲料喂养C57BL/6小鼠造模第2天起灌胃给药,连续10 d。测定小鼠血脂、肝功能、炎症因子及氧化应激水平,通过苏木素-伊红（HE）染色法和油红O染色观察肝脏组织形态变化和脂肪堆积情况,采用16S rDNA测序检测空白组、模型组和丹皮酚组小鼠肠道菌群多样性变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测丹皮酚对小鼠回肠组织闭锁小带蛋白-1（ZO-1）、紧密连接蛋白-1（Claudin-1）和TGR5/PKA/CREB信号通路相关蛋白表达水平的影响。结果 相较于空白组,模型组小鼠的血脂、肝功能、氧化应激水平,炎症因子的表达升高（P<0.01）,肝脏脂肪空泡明显,回肠黏膜损伤严重,且回肠组织ZO-1、Claudin-1和TGR5/PKA/CREB蛋白含量显著下降（P<0.01）,肠道菌群发生改变,变形菌门明显增多,拟杆菌门与厚壁菌门的比值降低;杜氏杆菌属、乳杆菌属、双歧杆菌属等菌属相对丰富度降低,埃希氏-志贺氏菌属、摩根氏菌属、普罗维登斯菌属、变形杆菌属的相对丰度显著增加。与模型组比较,丹皮酚明显降低了乙醇饲料诱导的肝损伤小鼠的血脂、肝功能、氧化应激水平,炎症因子的表达（P<0.05）,减少肝脏脂肪空泡,改善并恢复了回肠肠道屏障,恢复了肝细胞和回肠细胞正常结构。改善了由乙醇引起的肠道菌群紊乱的情况,使真杆菌属等有益菌属相对丰富度增加。回肠组织中ZO-1、Claudin-1、TGR5/PKA/CREB蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论 丹皮酚对小鼠酒精性肝损伤具有保护作用,作用机制是通过调节真杆菌属介导的TGR5/PKA/CREB信号通路达到抗炎效果和改善肠道屏障来实现的。     

补阳还五汤通过cAMP/PKA/PPARγ 通路调控脂质代谢抗大鼠脑缺血再灌注损伤的作用

目的 探究补阳还五汤通过cAMP/PKA/PPARγ 通路调控脂质代谢抗大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机理。 方法 将60 只大鼠随机分为假手术组、模型组、丁苯酞组及补阳还五汤低、中、高剂量组。采用短暂性大脑 中动脉栓塞法制备脑缺血再灌注模型,补阳还五汤低、中、高剂量组予不同剂量补阳还五汤灌胃（6.413、 12.825、25.65 g·kg-1）,丁苯酞（NBP）组予丁苯酞灌胃（54 mg·kg-1）,假手术组和模型组予等体积蒸馏水灌胃, 连续14 d。对大鼠进行神经行为学评分,HE 染色观察大脑病理变化,试剂盒检测缺血侧磷酸胆碱（PC）、磷脂 酰乙醇胺（PE）、甘油二酯（DAG）、游离脂肪酸（FFA）含量,RT-qPCR 和Western Blot 法检测环磷酸腺苷 （cAMP）、蛋白激酶A（PKA）、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）中mRNA 及蛋白表达。结果 与假手术 组比较,模型组神经功能缺损评分明显升高（P＜0.01）;缺血侧皮质出现病理形态损伤;PC、PE 含量降低, DAG、FFA 含量升高（P＜0.01）;cAMP 的mRNA 升高（P＜0.05）。与模型组比较,补阳还五汤低剂量组神经功 能缺损评分降低（P＜0.05）,补阳还五汤中、高剂量组和丁苯酞组神经功能缺损评分明显降低（P＜0.01）;各给 药组细胞排列相对规整,细胞间隙减小,正常细胞增多;补阳还五汤中、高剂量组和丁苯酞组PC、PE 明显升 高,DAG、FFA 明显降低（P＜0.01）;补阳还五汤低剂量组PC 升高,FFA、DAG 明显降低（P＜0.05,P＜ 0.01）;补阳还五汤低剂量组 PPARγ 的mRNA 表达升高（P＜0.05）,补阳还五汤中、高剂量组和丁苯酞组 cAMP、PKA、PPARγ 的mRNA 及蛋白表达升高（P＜0.05,P＜0.01）。结论 补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤 大鼠具有神经保护作用,其机制可能与调控cAMP/PKA/PPARγ 信号通路关键因子的表达,调节脂质代谢有关。     

归芪白术方联合奥沙利铂通过调节VIP/cAMP/PKA/AQPs信号通路保护胃癌荷瘤小鼠肠道屏障

目的：探讨归芪白术方联合奥沙利铂通过血管活性肠肽(VIP)/环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)信号通路调控下游水通道蛋白3(AQP3)和水通道蛋白4(AQP4)从而保护胃癌荷瘤小鼠肠道屏障的作用。方法：将密度为1×10⁷个/mL的胃癌细胞株MFC制成细胞悬液,经荷瘤小鼠右腋下接种细胞悬液0.2 mL,构建胃癌荷瘤小鼠模型,造模成功后将小鼠随机分为5组,模型组、奥沙利铂组(10mg·kg^-1)、奥沙利铂加归芪白术方高、中、低剂量组(17.68、8.84、4.42 g·kg^-1),每组10只,另外余10只作为空白组。各组小鼠经灌胃或腹腔注射中药、奥沙利铂或生理盐水,治疗14 d。末次给药后,次日眼球取血分离血清并取其结肠样本。苏木素-伊红(HE)染色观察组织形态的变化。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中D-乳酸(D-LA)、二胺氧化酶(DAO)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测各组小鼠结肠组织中VIP、cAMP、PKA、AQP3...     

脾气虚证大鼠与鱼藤酮损伤大鼠之间下丘脑cAMP/PKA信号通路变化的研究

目的:探讨脾气虚证大鼠与鱼藤酮损伤大鼠之间下丘脑c AMP/PKA信号通路变化。方法:30只SPF级雄性大鼠,随机分为正常组,脾气虚组,鱼藤酮高剂量组(2.0 m L/kg),中剂量组(1.5 m L/kg),低剂量组(1.0 m L/kg),每组6只。采用ELISA法检测各组大鼠下丘脑组织c AMP活性,Real Time PCR法和Westernblot法检测蛋白激酶(cyclic-AMP-dependent protein kinase,PKA)、糖原磷酸化酶(glyeogenphospholase,Gp)、磷酸化酶激酶(phosphorylase kinase,PHK)的mRNA及其表达量。结果:与正常组大鼠比较,脾气虚证组及鱼藤酮3组大鼠的下丘脑组织c AMP活性及PKA、Gp、PHK mRNA和蛋白的表达均有不同程度的减弱,鱼藤酮中剂量组的结果与脾气虚证组最为相似。结论:脾气虚证大鼠与鱼藤酮损伤大鼠之间下丘脑c AMP/PKA信号通路的变化存在相关性,其中c AMP-PKA信号通路可能参与调控。     

基于IL-6/STAT3通路探讨芍药汤对溃疡性结肠炎Th17/Treg平衡的调节机制

目的：探讨白细胞介素-6(IL-6)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)通路在湿热内蕴证溃疡性结肠炎(UC)辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡中的作用及芍药汤的干预机制。方法：将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、美沙拉嗪组(0.42 g·kg-1)、芍药汤低、中、高剂量组(11.1、22.2、44.4 g·kg-1),除空白组外,其他各组采用复合病因造模建立湿热内蕴证溃疡性结肠炎模型,各组分别给予生理盐水、美沙拉嗪组、芍药汤低、中、高剂量治疗14 d。末次给药24 h后处死大鼠提取脾脏、结肠组织,采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理学改变,免疫组化(IHC)法检测结肠组织白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β₁(TGF-β₁)水平;流式细胞术检测脾脏Th17/Treg细胞水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织IL-6、STAT3蛋白水平。结果：与空白组比较,模型组结肠出现充血、糜烂等病变,脾Treg细胞百分比显著降低(P<0.01),Th17细胞百分比显著升高(P&...     

柴芍安神解郁颗粒对脑卒中后抑郁症大鼠JAK1/STATA3和cAMP/PKA/CREB信号通路调控机制研究

目的:通过复制脑卒中后抑郁症(PSD)大鼠模型,探讨柴芍安神解郁颗粒(CSG)通过调控JAK1/STATA3和cAMP/PKA/CREB信号通路抗PSD的分子机制。方法:取60只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀胶囊组(1.8 mg·kg~(-1))、解郁安神颗粒组(0.90生药g·kg~(-1))、CSG高剂量组(CSG-H,11.52 g生药·kg~(-1))和CSG低剂量组(CSG-L,5.76 g生药·kg~(-1)),每组10只,采用大脑中动脉线栓栓塞法+慢性不可预知温和应激法(CUMS)复制PSD大鼠模型,各给药组于CUMS干预第1天等容量灌胃给药,连续8周,行大鼠糖水试验后,取血清和海马,测血清炎性因子(IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α)及海马JAK1、STAT3、cAMP效应元件结合蛋白1(CREB1)和蛋白激酶A/B(PRKACA/B)蛋白的表达(WB法)。结果:与空白组比较,模型组的大鼠蔗糖水消耗量和蔗糖水偏好比、脑重量均有显著性减少(P0.01),大脑指数、海马指数、海马JAK1、CREB1蛋白表达具有显著性减少(P0.05);血清炎性因子(IL-1β、IL-2、IL-6和TNF-α)均有显著性增加(P0.01);海马PRKACA/B蛋白有显著性增加(P0.05);与模型组比较,CSG-L组和CSG-H组大鼠治疗后蔗糖水消耗量、蔗糖水偏好比及海马PRKACA/B、CREB1蛋白均有显著性增加(P0.01),CSG-L组和CSG-H组大鼠海马JAK1、STAT3蛋白表达均有显著性增加(P0.01);CSG-H组血清炎性因子均有显著性减少(P0.05),CSG-L组血清炎性因子(IL-1β、IL-2、IL-6)均有显著性减少(P0.05)。结论:CSG可能通过下调JAK1/STAT3通路,并上调cAMP/PKA/CREB通路,从而抑制由炎症继发海马神经细胞损伤,促栓塞后大鼠海马神经细胞的存活、再生和损伤后修复,从而改善PSD大鼠抑郁。     

加味柴芍六君颗粒调节溃疡性结肠炎肠道微生态的作用及机制

目的:研究加味柴芍六君颗粒调节溃疡性结肠炎患者肠道微生态的作用及机制。方法:将90例溃疡性结肠炎患者按随机数字表随机分入两组中,治疗组48例,给予加味柴芍六君颗粒口服治疗;对照组42例,给予柳氮磺胺吡啶肠溶片口服治疗。在服药前及治疗3个月后进行临床症状评分、肠镜下评分、肠道菌群测定、血清白细胞介素-10、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子α和干扰素γ测定。结果:加味柴芍六君颗粒治疗溃疡性结肠炎疗效显著,比柳氮磺胺吡啶肠溶片疗效更优;两组患者肠道菌群变化明显,均为乳酸菌和双歧杆菌的含量增加,肠球菌、大肠杆菌含量减少;两组患者血清白细胞介素-10、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子α和干扰素γ有变化,均为白细胞介素-1β、白细胞介素-10含量上升,肿瘤坏死因子α和干扰素γ含量下降。结论:加味柴芍六君颗粒能有效治疗溃疡性结肠炎,其可能的机制为调整肠道菌群及促使体内促炎因子分泌增加、抑制抑炎因子水平下降。     

芍药汤对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜免疫屏障的干预作用

目的:探讨芍药汤对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜免疫屏障的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组,模型组,美沙拉嗪组(0.067 g·kg~(-1)),芍药汤低、中、高剂量组(1.8,3.6,7.2 g·kg~(-1)),采用TNBS诱导溃疡性结肠炎模型,对应给予生理盐水、美沙拉嗪、芍药汤灌胃治疗7 d,采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理学改变,免疫组化法和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肠黏膜中CD4~+T淋巴细胞数量和分泌型免疫球蛋白A(SIg A)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肠黏膜损伤程度评分及病理学评分显著升高(P0.01);CD4~+T淋巴细胞,SIg A蛋白表达显著下降(P0.01);与模型组比较,各给药组大鼠结肠黏膜损伤程度评分及病理学评分显著下降(P0.01),肠黏膜CD4~+T淋巴细胞,SIg A表达明显升高(P0.05,P0.01);与美沙拉嗪组及芍药汤低剂量组比较,芍药汤中、高剂量组肠黏膜损伤程度评分和病理学评分显著下降(P0.01),芍药汤中、高剂量组大鼠肠黏膜中CD4~+T淋巴细胞及SIg A蛋白表达明显升高(P0.05)。结论:芍药汤可通过增加肠黏膜中CD4~+T细胞数量及SIg A分泌的表达,起到减轻肠黏膜损伤,保护肠黏膜免疫屏障功能作用。     

肠炎清口服液改善小鼠溃疡性结肠炎肠道黏膜通透性的作用机制

目的: 建立三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型,研究肠炎清口服液对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜通透性的影响及其可能的作用机制. 方法: 用TNBS对雄性BALB/c小鼠进行造模,将造模后的实验动物随机分成正常组,模型组,柳氮磺吡啶肠溶片组(SASP,0.5 g·kg^-1),肠炎清口服液低、中、高剂量组(0.176,0.352,0.528 g·kg^-1);采用ELISA法检测各组BALB/c小鼠血浆二胺氧化酶(DAO)活性;通过RT-qPCR及Western blot检测方法,观察各组小鼠结肠部位紧密连接相关蛋白水闸蛋白1(claudin-1)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)的基因表达与蛋白表达. 结果: 肠炎清口服液各剂量组的小鼠血浆中DAO的活性显著低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);ZO-1,occludin,claudin-1 mRNA在肠炎清口服液高、中、低剂量组小鼠体内表达水平均高于模型组小鼠,且差异具有显著性(P<0.05),且随着给药剂量的增大,claudin-1,ZO-1,occludin mRNA表达水平表现出一定的量效关系;Western blot结果显示,ZO-1及occludin蛋白在肠炎清口服液高、中、低剂量组的表达水平均高于模型组小鼠,且表达差异显著(P<0.05). 结论: 肠炎清口服液在小鼠溃疡性结肠炎中的作用机制与肠道黏膜通透性有密切关系;肠炎清口服液可能是通过调节紧密连接蛋白ZO-1,occludin,claudin-1的表达,从而改善小鼠肠道黏膜通透性.