亚硒酸钠对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

目的 探讨亚硒酸钠对大鼠胚胎的致畸性。方法 采用胚胎肢芽细胞培养方法，观察亚硒酸钠对大白鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果 试验显示亚硒酸钠对大鼠肢芽细胞半数抑制分化浓度（ID50）为10．92μmol/L，半数抑制细胞增殖浓度（IP50）为7．95μmol/L。结论 亚硒酸钠的IP50／ID50值为0．728（＜6）,表明亚硒酸钠只是一种细胞毒性物质，而非致畸物。     

同型半胱氨酸对大鼠胚胎肢芽细胞增殖的分化的影响

目的 进一步研究同型半胱氨酸（ＨＣＹ）的致畸性及作用机制。方法 应用大鼠胚胎肢芽细胞微团培养法了解ＨＣＹ对胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果 随着剂量的增加,ＨＣ Ｙ表现了对胚胎肢芽细胞的促进和抑制双相作用。半数抑制分化浓度（ＩＣ５０）是５,０ｍｍｏｌ／Ｌ,当加入Ｓ９时,ＩＣ５０减至３．５ｍｍｌ／Ｌ;半数抑制增殖浓度是９．５ｍｍｏｌ／Ｌ,当加入Ｓ９时,ＩＣ５０为５．８ｍｍｏｌ／Ｌ。结论 ＨＣＹ对胚     

稳恒磁场对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

利用大鼠胚胎肢芽细胞进行原代培养,培养物经不同强度的稳恒磁场作用,研究稳恒磁场对增殖和分化的影响,并利用图象分析细胞形态的变化.结果显示强度大于40mT的稳恒磁场能明显抑制肢芽细胞增殖和分化,集落形成率明显减少,并显示剂量效应关系.拟合细胞分化和增殖抑制曲线,计算得大鼠胚胎肢芽细胞半数分化抑制强度(ICD50)为52mT,半数存活抑制强度(ICV50)为40mT.表明抑制细胞分化、增殖可能是稳恒磁场致发育危害的重要作用.     

乙醛对大鼠胚胎肢芽细胞增殖分化的影响研究

目的研究乙醛的发育毒性和致畸性。方法从１３天龄大鼠胚胎中分离肢芽细胞,体外施予不同剂量的乙醛（０１,０２,０５,２０,８０,１６０,３２０ｍｍｏｌ／Ｌ）连续培养５天,根据肢芽细胞蛋白质合成和集落形成抑制水平反映乙醛的致畸性。结果乙醛在０１ｍｍｏｌ／Ｌ即能影响肢芽细胞的增殖分化,而在２０ｍｍｏｌ／Ｌ以上时细胞则大量死亡,显示其细胞毒性。其ＩＰ５０,ＩＤ５０分别为６８４ｍｍｏｌ／Ｌ,５５０ｍｍｏｌ／Ｌ。增殖分化抑制曲线经拟合后判断乙醛是一种非特异性增殖分化抑制物。结论乙醛具有发育毒性作用和潜在的致畸作用。     

对—壬基酚对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

目的：了解对－壬基酚（p-NP)的体外发育毒性特点，为揭示对－壬基酚的发育毒性作用机制提供实验依据。方法：采用微团培养观察不同浓度的对－壬基酚（0－17.5mg/L)对体外培养的Wistar大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果：对－壬基酚对大鼠胚胎肢芽细胞的增殖和分化均有抑制作用，表现为染毒组肢芽细胞集落形成率降低，细胞毒性试验吸光度值下降，并有明显的剂量－反应关系。对－壬基酚对肢芽细胞的50％增殖抑制浓度（IP50）和50％分化抑制浓度（IP50）分别为15．85mg/L和11.86mg/L,IP50/ID50=1.34。结论：按照Renault等人推荐的体外致畸分类标准，对－壬基酚属于阳性致畸物，对大鼠胚胎肢芽细胞的分化和增殖均有特异性抑制作用。     

盐酸克伦特罗体外抑制大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的研究

目的探讨盐酸克伦特罗对大鼠胚胎肢芽细胞的影响。方法采用大鼠胚胎肢芽细胞培养方法,观察盐酸克伦特罗对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果盐酸克伦特罗对大鼠胚胎肢芽细胞增殖、分化均有抑制作用;细胞增殖:y^=0.507-0.000 7x,r=-0.949(P<0.01);细胞分化:y^=87.63-0.286x,r=-0.945(P<0.01),存在明显的剂量—反应关系,并呈显著性负相关;胚胎肢芽细胞半数抑制细胞增殖浓度(IP50)为0.34μg/L,半数抑制分化浓度(ID50)为0.09μg/L,IP50/ID50=3.78。结论盐酸克伦特罗可抑制大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化作用。     

同型半胱氨酸对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

目的 进一步研究同型半胱氨酸(HCY)的致畸性及作用机制。方法 应用大鼠胚胎胚芽细胞微团培养法了解HCY对胚胎胚芽细胞增殖和分化的影响。结果 随着剂量的增加,HCY表现了对胚胎肢芽细胞的促进和抑制双相作用。半数抑制分化浓度(IC_(50))是5.0mmol/L,当加入S9时,IC_(50)减至3.5mmol/L;半数抑制增殖浓度是9.5mol/L,当加入S9时,IC_(50)为5.8mmol/L。结论 HCY对胚胎细胞分化的影响更为显著,对大鼠致畸作用不明显。     

对-壬基酚对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

目的 了解对-壬基酚(p-NP)的体外发育毒性特点,为揭示对-壬基酚的发育毒性作用机制提供实验依据。方法 采用微团培养观察不同浓度的对-壬基酚(0～17.5 mg/L)对体外培养的Wistar大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果 对-壬基酚对大鼠胚胎肢芽细胞的增殖和分化均有抑制作用,表现为染毒组肢芽细胞集落形成率降低,细胞毒性试验吸光度值下降,并有明显的剂量-反应关系。对-壬基酚对肢芽细胞的50％增殖抑制浓度(IP_(50))和50％分化抑制浓度(IP_(50))分别为15.85 mg/L和11.86 mg/L,IP_(50)/ID_(50)=1.34。结论 按照Renault等人推荐的体外致畸分类标准,对-壬基酚属于阳性致畸物,对大鼠胚胎肢芽细胞的分化和增殖均有特异性抑制作用。     

砷对大鼠肢芽细胞增殖和分化的影响

为了进一步阐明三氧化二砷的发育毒性，本研究应用Ｆｌｉｎｔ等人建立的胚胎肢芽细胞微团培养法，探讨了不同浓度砷对体外培养的ＳＤ大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果表明砷对大鼠肢芽细胞的增殖和分化均有抑制作用，呈明显的剂量－反应关系；砷对肢芽细胞的５０％增殖抑制浓度（ＩＰ５０）和５０％分化抑制浓度（ＩＤ５０）分别为０．７０ｍｇ／Ｌ和０．２１ｍｇ／Ｌ；ＩＰ５０／ＩＤ５０值为３．３，揭示砷对大鼠肢芽细胞分化的影响要远大于对细胞增殖的影响。根据Ｒｅｎａｕｌｔ等人推荐的体外致畸判断标准，砷属于强致畸物。实验结果提示砷对大鼠肢芽细胞分化的抑制作用可能并非其细胞毒性作用所致，这是砷致畸作用的重要基础之一。此外还初步探讨了大鼠肢芽细胞异常分化的分子机制。     

碱性橙Ⅱ对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

目的探讨碱性橙Ⅱ对13日龄SD大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。方法分离13日龄SD大鼠胚胎肢芽细胞进行微团培养,不同浓度的碱性橙Ⅱ(0.0、12.5、25.0、50.0、100.0、200.0和400.0 mg/L)作用于肢芽细胞,采用CCK8试剂盒检测碱性橙Ⅱ对细胞增殖的影响,采用阿利新蓝8GX染色方法检测碱性橙Ⅱ对肢芽细胞分化的影响。结果随着碱性橙Ⅱ染毒浓度的增加,胚胎肢芽细胞分化为软骨细胞集落数逐渐减少,细胞增殖率下降,均具有较明显的剂量-效应关系(r细胞毒性=0.958,r细胞分化=0.946);碱性橙Ⅱ对肢芽细胞的半数增殖抑制浓度(p ID50)和半数分化抑制浓度(d ID50)分别为240.6和69.3 mg/L,对细胞分化的抑制作用大于对增殖的抑制作用。结论碱性橙Ⅱ对胚胎肢芽细胞的增殖和分化有抑制作用,可能对大鼠胚胎具有潜在的发育毒性。     

氯化三丁基锡对小鼠肢芽细胞遗传毒性的实验研究

目的了解环境污染物氯化三丁基锡(TBTCl)对小鼠胚胎肢芽细胞的遗传毒性。方法将孕12 d昆明种小鼠颈椎脱臼处死,分离胚胎,切取肢牙,剪碎,0.125%胰酶消化,用无血清的Ham’s F12基础培养基将其制成单细胞悬液。加入不同浓度的TBTCl,使其终浓度分别为:0、0.1、0.2、0.4、0.8 mg/L。37.5℃恒温孵育2 h,取细胞悬液做彗星实验。结果TBTCl染毒组随染毒剂量的浓度的增高,肢芽细胞彗星拖尾率和尾长分别从对照组的4.0%和(9.7±4.3)μm上升到0.8 mg/L TBTCl组的61.7%和(26.9±12.5)μm,呈明显的剂量-反应(效应)关系。结论TBTCl能损伤昆明种小鼠胚胎肢芽细胞DNA,具有遗传毒性。     

小鼠胚胎肢芽器官培养中锌对骨形成的影响

目的 通过研究锌缺乏／过量在骨形成过程中骨密度的变化,探讨锌影响骨代谢的机制,为发挥在骨质疏松中的治疗作用提供科学依据。方法 应用自制浸没式一次通气旋转装置对16天孕龄小鼠胚胎肢芽器官进行培养,采用钼钯X－ray乳腺机分析骨密度的变化。结果 锌缺乏组迁量补锌组Ⅲ与对照组相比,骨质较薄,长骨长度较短,骨密度降低,补锌组Ⅰ、Ⅱ与对照组相比,骨密度明显升高,长骨长度较长,骨质较厚。结论 提示适量补锌有促进骨形成,提高骨密度的潜在作用。     

锌对乳癌细胞生长,增殖与基因表达的影响

应用细胞培养技术、图象细胞分析仪（ＩＣＭ）和分子杂交的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ法研究锌对中国人乳癌细胞株ＢＣａＰ－３７的生长、增殖和基因表达的影响。生长曲线结果显示，血浆生理浓度（２０．０μｍｏｌ／Ｌ的锌对细胞生长没有显著抑制作用（Ｐ〉０．０５），而两组高浓度的锌（４００．０μｍｏｌ／Ｌ，７００．０μｍｏｌ／Ｌ）对细胞生长具有显著抑制作用（Ｐ〈０．０１），抑制率为２４．１２％－９８．００％，并伴     

防龋剂氟化物对牙髓细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响

用四氮唑溴盐（ＭＴＴ）染色法和以对硝基苯磷酸脂（ＰＮＰＰ）为底物检测不同浓度ＮａＦ对大鼠牙髓细胞的影响。实验结果显示１０ｐｐｍＦ－开始对牙髓细胞增殖产生抑制（Ｐ＜０．０１）；５０ｐｐｍ影响最大，细胞形态发生改变，圆缩死亡细胞明显增多。Ｆ－抑制细胞碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性，浓度增高，抑制增强。提示一定浓度Ｆ－对牙髓细胞某些功能活动具有抑制作用，且随浓度增高而增强     

锌对神经细胞增殖和分化作用的影响

目的探讨锌对神经细胞增殖和分化作用。方法NT2细胞在锌鳌合剂TPEN作用下,检测神经的凋亡情况,用MTT方法检测细胞的增殖活性．细胞的神经发育标志蛋白GFAP和NeuN的表达情况。结果随着TPEN浓度的增高,细胞核荧光强度越强,凋亡越强;细胞增殖活性越低,GFAP和NeuN蛋白表达越低。结论锌对神经细胞增殖和分化有较严重的抑制作用。     

新生大鼠心肌细胞原代培养

目的探讨酶法分离新生大鼠心肌细胞过程中的各种影响因素,对Simpson经典方法进行改进,提高原代心肌细胞存活率及搏动率。方法采用低浓度的胰酶消化3～4次后,再用低浓度的Ⅱ型胶原酶消化一次,用短时间的2次差速贴壁法分离培养心肌细胞。结果在分离培养新生鼠心肌细胞过程中,胰酶和胶原酶合用,并改变差速贴壁时间,得到高存活率和高纯度的心肌细胞,细胞搏动率高,持续时间久。结论分离培养大鼠心肌细胞时,低浓度的胰酶和胶原酶合用,并用2次差速贴壁,可提高原代心肌培养的存活率和纯度,使细胞搏动良好。