甘草附子汤对胶原诱导性关节炎小鼠Th17和Treg细胞的影响

目的 探讨甘草附子汤(Gancaofuzi decoction, GCFZ)对胶原诱导型关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)小鼠辅助性T细胞17(T helper cell 17, Th17)和调节性T细胞(Regulatory T cell, Treg)失衡的调节作用。方法 该研究包括4组小鼠：正常对照组(Control组),模型对照组(CIA组),GCFZ 2.4 g·kg^-1组和GCFZ 4.8 g·kg^-1组。检测各组小鼠足肿胀度、关节炎指数;苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining, HE)观察小鼠踝关节组织病理学变化;流式细胞仪检测脾脏Th17和Treg细胞比例;酶联免疫吸附试验检测血清白介素17(interleukin-17,IL-17)、白介素6(interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)和白介素10(interleukin-10, IL-10)水平。结果 与正常组比较,CI...     

基于Th17/Treg细胞平衡探讨抗纤益心方对自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制

目的:探讨抗纤益心方干预自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制,及其与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞平衡的关系。方法:将60只SPF级BALB/c健康8周龄雄性小鼠按1∶5的比例随机分为正常组和造模组,在第0,7,28天于造模组小鼠腹股沟、腋下、背部多处皮下注射猪心肌肌球蛋白乳化液0.2 m L(含猪心肌肌球蛋白0.1 mg)以制备心肌免疫损伤小鼠模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组,抗纤益心方组(KYP),缬沙坦组(Valsartan),抗纤益心方组给予抗纤益心方20.4 g·kg^-1·d^-1灌胃,缬沙坦组给予缬沙坦12 mg·kg^-1·d^-1灌胃,正常组和模型组给予同计算量的生理盐水灌胃,连续灌胃4周后取材,苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色检测心肌组织中病理损伤情况,酶联免疫吸附法检测小鼠血清中B型钠尿肽(BNP),抗心肌抗体,白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-10(IL-10)的表达,流式细胞术检测脾脏Th17,Treg细胞的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心肌组织B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠脾脏转录因子维A酸相关孤独受体γt(RORγt),叉头框蛋白P3(Fox P3)m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠心肌病理损伤增加,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17升高,IL-10降低(P<0.05),脾脏Th17细胞表达水平升高,Treg细胞的表达水平降低(P<0.05),心肌组织Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),Bax/Bcl-2值升高,脾脏RORγt m RNA表达升高,Fox P3 m RNA表达降低,RORγt/Fox P3升高(P<0.05);与模型组比较,抗纤益心方组及缬沙坦组心肌病理损伤减轻,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17降低,IL-10升高(P<0.05),脾脏Th17细胞表达水平降低,Treg细胞的表达水平升高(P<0.05),心肌组织Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),Bax/Bcl-2降低,脾脏RORγt m RNA表达降低,Fox P3 m RNA表达升高,RORγt/Fox P3值降低(P<0.05)。结论:抗纤益心方可能通过调节Th17/Treg细胞平衡改善心肌免疫损伤。     

黄芩汤对溃疡性结肠炎小鼠Th17/Treg、Th1/Th2细胞平衡的影响

目的：研究黄芩汤对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠道辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)、Th1/Th2细胞平衡的影响。方法：60只雄性C57BL/6J小鼠,按体质量随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(0.2 g·kg^-1),黄芩汤低、中、高剂量组(4.55、9.1、18.2 g·kg^-1),除正常组外均予以2.5%右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮水5 d诱导UC,连续灌胃给药7 d后处死小鼠,取肠系膜淋巴结(MLNs)和结肠组织,流式细胞术检测小鼠肠系膜淋巴结Th17/Treg、Th1/Th2,流式细胞微球芯片捕获技术检测结肠组织白细胞介素(IL)-2、IL-17A、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-10等细胞因子含量,对结肠组织样本进行病理切片观察,并采用免疫组化法检测结肠组织中T细胞表达的T-box(T-bet)、GATA结合蛋白-3(GATA-3)、IL-17A、叉头蛋白P3(FoxP3)的表达水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠结肠组织中转化生长因子-β(TGF-...     

黄芪甲苷对结肠炎小鼠的抑炎作用及对外周血Th17细胞比例的影响研究

探讨黄芪甲苷对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的抑炎作用及对外周血辅助性T细胞(Th17)比例的影响。采用2%葡聚糖硫酸钠(DSS)建立结肠炎小鼠模型,阳性对照组以及黄芪甲苷低、高剂量组小鼠分别灌胃相应药物,计算疾病活动指数(DAI),ELISA法检测血清白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)含量,HE染色法观察结肠组织病理学变化,流式细胞仪检测外周血Th17细胞/调节性T细胞(Treg)比例,蛋白印迹法检测叉头蛋白p3(Foxp3)、视黄酸相关孤儿核受体γt(ROR-γt)蛋白相对表达量。结果显示,正常小鼠结肠组织结构完整,杯状细胞未减少,腺体排列整齐,无黏膜糜烂、出血,无阳性细胞浸润;模型组小鼠结肠组织黏膜结构严重破坏,腺体排列紊乱或缺失,可见血管扩张、充血,大量炎性细胞浸润;各药物治疗组结肠组织病理损伤出现不同程度减轻。与正常组比较,模型组Th17细胞百分比、IL-17和TNF-α含量、ROR-γt蛋白相对表达量升高,TGF-β含量、Treg细胞百分比、Foxp3蛋白相对表达量降低;与模型组比较,阳性对照组、黄芪甲苷低剂量组、黄芪甲苷高剂量组DAI评分、组织病理学评分、Th17细胞百分比、IL-17和TNF-α含量、ROR-γt蛋白相对表达量降低,TGF-β含量、Treg细胞百分比、Foxp3蛋白相对表达量升高;与阳性对照组比较,黄芪甲苷低剂量组DAI评分、组织病理学评分、Th17细胞百分比、IL-17和TNF-α含量、ROR-γt蛋白相对表达量升高,TGF-β含量、Treg细胞百分比、Foxp3蛋白相对表达量降低;与黄芪甲苷低剂量组比较,黄芪甲苷高剂量组DAI评分、组织病理学评分、Th17细胞百分比、IL-17和TNF-α含量、ROR-γt蛋白相对表达量降低,TGF-β含量、Treg细胞百分比、Foxp3蛋白相对表达量升高;阳性对照组与黄芪甲苷高剂量组比较,各指标差异无统计学意义。结果表明,黄芪甲苷可抑制结肠炎小鼠的炎症反应,降低Th17细胞比例。     

通迪胶囊对Ⅱ型胶原诱导性关节炎小鼠的影响

目的 观察通迪胶囊对Ⅱ型胶原诱导性关节炎小鼠的影响.方法 建立鸡Ⅱ型胶原诱导性关节炎小鼠模型,随机分为正常组、模型组、通迪胶囊组(0.55 g/kg)、甲氨蝶呤组(2.055mg/kg),各组于初次免疫后16d开始灌胃给药,给药50 d.HE染色观察各组小鼠关节病理变化;ELISA法检测小鼠血清因子C-反应蛋白(C-Reactive protein,CRP)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;流式细胞术检测小鼠Th1、Th2、Th17和Treg脾脏细胞水平.结果 通迪胶囊组小鼠的关节损伤减轻,血清因子CRP、TNF-α水平较模型组降低(P<0.05),Th1/Th2及Th17/Treg细胞比例较模型组降低(P<0.05).结论 通迪胶囊可以调节CD4+T淋巴细胞亚群Th1/Th2、Th17/Treg细胞比例平衡,降低炎性因子的水平,减轻小鼠关节病理损伤,缓解关节炎症状.     

宣肺平喘方对哮喘小鼠气道炎症及Th17/Treg平衡的影响

目的:探讨宣肺平喘方对卵清蛋白(OVA)致敏哮喘小鼠模型气道炎症及Th17/Treg平衡的影响。方法:55只6~8周雌性Balb/C小鼠随机分为正常组、模型组、泼尼松组(7.5 mg·kg-1·d-1)、宣肺平喘方低、高剂量组(16.72,66.88 g·kg-1·d-1),每组11只。除正常组用生理盐水注射及气道雾化外,其余各组小鼠均采用OVA致敏及激发的方法建立哮喘模型,各干预组于哮喘激发后给予相应的药物灌胃,正常组、模型组用生理盐水,连续15 d,末次给药后处死小鼠,取肺组织进行病理切片及苏木素-伊红(HE)染色,酶联免疫吸附法(ELISA)法检测小鼠血清白细胞介素(IL-4),转化生长因子-β(TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,流式细胞术检测血液中Th17细胞和Treg细胞的比例。结果:与模型组比较,各治疗组的肺组织损伤均有减轻,IL-4,TNF-α水平均低于模型组(P0.05),TGF-β水平均高于模型组(P0.05),血液中Th17细胞水平低于模型组,Treg细胞水平高于模型组。宣肺平喘方低、高剂量组在降低IL-4,TNF-α水平,升高TGF-β水平方面与泼尼松组比较无统计学差异,在降低血液Th17细胞比例,升高血液Treg细胞比例方面优于泼尼松组。结论:宣肺平喘方对哮喘小鼠的肺组织黏膜损伤具有一定的保护作用,其机制可能与下调Th17细胞水平,上调Treg细胞水平,恢复Th17/Treg细胞平衡,从而使得血清中炎症因子IL-4,TNF-α的含量降低,抑炎因子TGF-β的含量增加有关。     

辐照红细胞输注对肝癌患者CD4~+T细胞亚群失衡的影响

目的研究输注辐照红细胞对肝癌患者外周血CD4+T细胞亚群Th1/Th2、Th17/Treg失衡及相关细胞因子的影响。方法选择64例肝癌患者为研究对象,其中输注辐照红细胞患者38例作为辐照组,输注普通悬浮红细胞患者26例作为未辐照组。分别于输血前及输血后14 d,采用流式细胞术检测2组患者外周血Th1、Th2、Th17及Treg细胞比率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测2组患者血清白细胞介素-2 (IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4、IL-6、IL-17、IL-10水平。结果输血后14 d,辐照组Th1细胞比率、Th2细胞比率、Th1/Th2比值、Th17细胞比率、Treg细胞比率、Th17/Treg比值及血清IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-17、IL-10水平与输血前比较差异均无统计学意义(P均0. 05);未辐照组外周血Th1细胞比率、Th1/Th2比值、Th17/Treg比值和血清IL-2、IFN-γ水平均明显低于输血前及辐照组(P均0. 05),Th2细胞比率、Treg细胞比率及血清IL-4、IL-6、IL-17、IL-10水平均明显高于输血前及辐照组(P均0. 05),2组Th17细胞比率比较差异无统计学意义(P 0. 05)。结论输血引起的Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子失衡可能与异体血中的白细胞和血浆成分有关,肿瘤患者输辐照红细胞可减轻输血引起的免疫抑制。     

阳和汤对自身免疫性甲状腺炎模型大鼠辅助性T细胞亚群的影响

目的观察阳和汤对自身免疫性甲状腺炎大鼠辅助性T细胞(Th细胞)亚群平衡偏移的影响。方法 30只大鼠随机分为正常组、模型组和阳和汤组各10只,模型组和阳和汤组大鼠采用猪甲状腺球蛋白配合高碘饮水的方式建立自身免疫性甲状腺炎大鼠模型。造模后阳和汤组予阳和汤配方颗粒(药物浓度0.5 g/ml)1 ml/100 g灌胃,模型组及正常组予等量生理盐水灌胃,每日1次,各组连续灌胃10周。检测各组大鼠血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(Tg Ab)及甲状腺功能[包括促甲状腺激素(TSH)、血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、血清游离甲状腺素(FT4)]水平;脾脏提取T淋巴细胞,采用流式细胞检测技术测定Th1、Th2、Th17、调节性T细胞(Treg)表达情况,计算Th细胞亚群比例。结果与正常组比较,模型组和阳和汤组大鼠TSH明显降低,血清FT3、FT4、TPOAb、TgAb明显升高(P<0.01)。与模型组比较,阳和汤组大鼠FT4、TPOAb、TgAb明显降低(P<0.05或P<0.01)。与正常组比较,模型组Th1细胞占总淋巴细胞百分比、Th1/Th2、Th17占总淋巴细胞百分比、Th17/Treg升高,Th2细胞占总淋巴细胞百分比降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,阳和汤组Th1/Th2、Th17占总淋巴细胞百分比、Th17/Treg降低,但仍高于正常组(P<0.05或P<0.01)。各组大鼠Treg占总淋巴细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05)。结论阳和汤可降低自身免疫性甲状腺炎模型大鼠甲状腺自身抗体滴度,降低大鼠脾脏Th17细胞百分比及Th1/Th2、Th17/Treg值,从而改善大鼠甲状腺自身免疫反应。     

活血药、益气活血药对肺癌转移过程中Th17/Treg细胞平衡及其机制影响

目的:观察苏木、苏木+黄芪对Lewis荷瘤小鼠肺癌转移过程脾Th17/Treg细胞及其平衡机制影响,为中药逆转肿瘤炎性微环境中免疫逃逸和抑制肿瘤转移机制提供实验依据。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,观察肺转移抑制率;流式细胞术检测各组小鼠脾Th17/Treg细胞百分比动态变化;RT-PCR检测各组小鼠CD4+T淋巴细胞Foxp3、RORγtmRNA动态表达水平。结果:从各组药物抑制肺转移率看出,益气活血药苏木+黄芪优于单纯活血药苏木(P<0.05),与环磷酰胺组相似(P>0.05);除苏木黄芪组外,各荷瘤组小鼠脾Th17与Treg细胞随时间迁移呈现出上升趋势,且苏木黄芪组较其余各组有显著差异(P<0.05),Th17/Treg比值亦随时间迁移呈现出上升趋势,与正常组比较均存在比值的平衡失调;Th17与Treg细胞关键转录分子RORγt、Foxp3呈现出与Th17和Treg细胞相应的动态改变。结论:益气活血药苏木+黄芪组在抑制肿瘤形成过程中的炎性微环境优于单纯活血药苏木组和环磷酰胺组;各组药物对肿瘤转移机制均有一定的抑制作用,但益气活血药优于单纯活血药和化疗药物。     

补肾温阳中药对哮喘小鼠Foxp3-mRNA表达及CD4~+CD25~+调节性T细胞水平的影响研究

目的建立哮喘样气道炎症小鼠动物模型。观察补肾温阳中药对哮喘小鼠Foxp3-mRNA表达与活化以及对CD4+CD25+调节性T细胞的数量、分化与功能的影响,探讨补肾温阳法在防治过敏性哮喘气道炎症的作用机制。方法 100只BALB/c小鼠随机分成4组:正常对照组、哮喘模型组、中药干预组及中药+抗体干预组,除正常对照组外,其余各组均以卵白蛋白(OVA)致敏激发方法建立小鼠哮喘模型,中药+抗体干预组小鼠于激发前30min事先给予抗IL-10&抗TGF-β抗体滴鼻。同时,中药干预组组、中药+抗体干预组于实验的第1天至第21天,每只小鼠给予补肾温阳中药(用淫羊藿、巴戟天、补骨脂免煎颗粒配制500μl)灌胃qod,哮喘模型组、正常对照组予等量的生理盐水作对照。观察各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数结果;取小鼠左肺组织作病理切片观察炎症改变;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组BALF上清细胞因子IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度及血清IgE水平;分离小鼠脾脏细胞,以流式细胞仪方法检测CD4+CD25+Treg细胞比例;用RT-PCR方法检测转录因子Foxp3-mRNA的表达。结果哮喘模型组、中药+抗体干预组小鼠BALF中细胞总数以及淋巴细胞、中性粒细胞和EOS百分比分别均高于正常对照组、中药干预组(分别为P<0.01、P<0.05、P<0.05和P<0.01),而巨噬细胞百分比与正常对照组、中药干预组相比较,则分别有所降低(P<0.05)。正常对照组、中药干预组BALF中IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度分别高于哮喘模型组(P<0.01)和中药+抗体干预组(P<0.05);中药干预组BALF中IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度低于正常对照组(P<0.05);哮喘模型组BALF上清细胞因子(IL-10、IFN-γ、TGF-β1)浓度高于中药+抗体干预组(P<0.05)。血清IgE水平正常对照组、中药干预组均分别低于哮喘模型组(均为P<0.01)及中药+抗体干预组(均为P<0.05);中药干预组血清IgE水平低于正常对照组(P<0.05)。哮喘模型组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、FoxP3-mRNA表达水平较正常对照组、中药干预组均明显减低,差异有统计学意义(分别为P<0.01,P<0.05);与哮喘模型组、中药+抗体干预组比较,中药干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、FoxP3-mRNA表达水平显著增高,差异有统计学意义(均为P<0.05);与正常对照组比较,中药干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、FoxP3-mRNA表达水平较低,差异有统计学意义(P<0.01);与哮喘模型组比较,中药+抗体干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、FoxP3-mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(均为P<0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞、FoxP3-mRNA、细胞因子(IL-10、IFN-γ、TGF-β1)均参与了支气管哮喘的发病过程,补肾温阳中药可通过上调CD4+CD25+调节性T细胞数量、诱导FoxP3-mRNA的表达与活化、降低血清IgE水平及增加IL-10、IFN-γ、TGF-β1含量等机制来达到减轻哮喘炎症的作用。     

小檗碱通过抑制Th1恢复IFN-γ/IL-4平衡减轻迟发型超敏反应

目的:观察小檗碱对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity,DTH)模型小鼠的作用并探讨其机制。方法:32只小鼠随机分为对照组、DTH组、小檗碱组、DTH+小檗碱组,制备DTH模型给予小檗碱处理;测量小鼠足垫肿胀厚度,苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)法观察炎性细胞浸润,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测足垫组织匀浆中γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-4(interleukin-4,IL-4)的表达,制备脾脏单个核细胞,刀豆蛋白(concanavalin A,Con A)实验观察IFN-γ水平,卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏实验检测上清IFN-γ、IL-4表达。结果:小檗碱处理明显降低小鼠足垫肿胀程度,减少炎症细胞浸润,抑制足垫组织中IFN-γ、TNF-α炎性因子释放,并减少脾脏组织中IFN-γ的分泌,抑制Th1反应,恢复IFN-γ/IL-4平衡(P<0.01,P<0.001),差异均有统计学意义。结论:小檗碱通过抑制Th1反应,恢复IFN-γ/IL-4平衡发挥对迟发型超敏反应的抑制作用。     

人脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病足患者Treg/Th17/Th1细胞亚群的表达变化

目的:初步探讨人脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病足Treg/Th17/Th1细胞亚群表达的变化。方法:选择2型糖尿病并糖尿病足患者5例,采用人脐带间质干细胞治疗。治疗前后检测外周血中CD4+CD25hiTreg/Th17及Th17/Th1细胞比例,并分析其与细胞因子(FoxP3,IL-17,INF-γ,C-RP,TNF-α,VEGF)的相关性。结果:采用人脐带间质干细胞治疗术后4周,CD4+CD25hiFoxP3+Treg/Th17细胞的比例均较治疗前明显升高(P<0.05),而Th17/Th1细胞比例无明显变化,血清中VEGF治疗后升高(P<0.05),C-RP和TNF-α水平较治疗前降低(P<0.01),术后12周,CD4+CD25hiFoxP3+Treg、Th17、Th1细胞百分比,血清中VEGF,C-RP和TNF-α水平与术前比无明显统计学差异(P>0.05)。结论:T2DM糖尿病足患者存在CD4+CD25hiFoxP3+Treg细胞数量的紊乱,人脐带间质干细胞治疗糖尿病足治疗后CD4+CD25hi-FoxP3+Treg细胞较治疗前显著升高。     

雷公藤甲素微乳凝胶对CIA大鼠T细胞相关因子调节作用研究

目的:观察雷公藤甲素微乳凝胶(TP-MBGs)外用对CIA大鼠T细胞相关因子表达水平的影响,以探究其治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:将56只CIA模型大鼠随机分成空白组、模型组、基质组、TP灌胃组、TP微乳高剂量组、TPMBGs高、中、低剂量组,给药28 d后处理,采用ELISA法检测各组大鼠皮肤(CD1α、Ig A)、血清(IFN-γ、IL-6、TNF-α、ColⅡ、IL-10)及滑膜细胞上清液(IL-1、PGE_2、TNF-α)中相关细胞因子的表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组皮肤中CD1α、血清中IFN-γ、IL-6、TNF-α和滑膜细胞上清液中IL-1、PGE2、TNF-α的表达水平明显升高;与模型组比较,TP-MBGs中剂量组血清中的TNF-α及IL-6、滑膜细胞上清液中的IL-1及TNF-α表达水平显著降低; TP-MBGs高剂量组皮肤中CD1α、血清中的TNF-α及IFN-γ、滑膜细胞上清液中的IL-1及TNF-α的表达水平显著降低。结论:雷公藤甲素微乳凝胶外用治疗类风湿性关节炎,可能通过调节皮肤免疫功能及抑制相关细胞因子的分泌,从而起到局部及全身治疗作用。     

放化疗联合热疗治疗中晚期宫颈癌的疗效及对CD4~+T细胞平衡失调的影响

目的观察同步热放化疗治疗中晚期宫颈癌的临床疗效及对体内CD4~+T细胞平衡失调的影响。方法将200例中晚期宫颈癌患者随机分为2组,同步放化疗组(CRT组)给予同步放化疗治疗,深部热疗加同步放化疗组(H+CRT组)在同步放化疗基础上给予盆腹腔深部局部热疗,比较2组临床疗效及生存期。同时选择同期健康体检女性100例作为健康对照组,检测健康对照组及CRT组、H+CRT组治疗前后外周血Th1、Th2、Th17、Treg细胞百分率及IFN-γ、Fox P3蛋白水平和IL-4、IL-17水平。结果 H+CRT组临床总有效率明显高于CRT组(P0.05),生存期明显长于CRT组(P0.05)。与健康对照组比较,宫颈癌患者外周血Th1细胞百分率、Th17/Treg比值及IFN-γ蛋白水平均明显降低(P均0.05),Th17、Treg细胞百分率及Fox P3蛋白水平和IL-17、IL-4水平均明显升高(P均0.05),虽然Th2细胞百分率与健康对照组比较差异无统计学意义(P0.05),但是Th1/Th2比值明显低于健康对照组(P0.05),出现Th1/Th2漂移。治疗后,Th1、Th2、Th17、Treg细胞百分率及IFN-γ、Fox P3蛋白水平和IL-4、I-17水平均明显恢复(P均0.05),且H+CRT组各指标恢复程度明显优于CRT组(P均0.05)。结论中晚期宫颈癌患者体内出现CD4~+T细胞平衡失调,热疗可以通过纠正CD4~+T细胞的水平达到抗肿瘤的目的。     

电针对溃疡性结肠炎小鼠脾脏淋巴细胞Treg/Th17免疫平衡的影响

目的:观察电针对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠的治疗效应,并从调节性T细胞(Treg)与辅助性T细胞Th 17免疫平衡的角度探讨针灸治疗UC的机制。方法:健康雄性昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、电针组,每组8只。采用3%葡聚糖硫酸钠法复制UC模型。电针组选取"关元""足三里"连续治疗5d,每天10min。观察各组小鼠体质量、大便黏稠度及出血情况,计算疾病活动指数;结肠组织HE染色,观察远端结肠组织病理形态学变化;流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞Treg、Th 17细胞水平。结果:电针对UC小鼠具有治疗效应,其疾病活动指数明显降低(P0.05),结肠组织病理改变得到改善。与空白组相比,模型组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平下调,CD3+CD8+IL-17+Th 17细胞水平上调,差异具有统计学意义(P0.05);电针治疗后,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平上调,CD3+CD8+IL-17+Th 17细胞水平下降,与模型组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:电针可能通过对UC小鼠Treg/Th 17免疫平衡的影响起到治疗UC的作用。     

针灸治疗对狼疮性肾炎小鼠Th17/Treg细胞及其细胞因子表达影响的研究

目的:观察针灸治疗对狼疮性肾炎小鼠的影响,并探讨针灸对调节性T细胞(Treg)及辅助性T细胞17 (Th17)分化及其细胞因子表达的调控作用。方法:将MRL/lpr狼疮性肾炎模型小鼠随机分为针灸组、地塞米松组、模型组,每组10只。另取10只C57BL/6小鼠作为正常组。采用HE染色法检测小鼠肾脏病理改变;PI单染流式细胞术检测各组小鼠肾脏组织中Th17/Treg比例;采用q RT-PCR和ELISA法检测肾脏中叉头样转录因子3 (Foxp3)、维A酸相关孤儿受体-γt (RORγt)及白细胞介素-17 (IL-17)的水平。结果:与正常组比较,模型组肾小球肾炎、间质性肾炎以及血管病变评分、Th17/Treg比值及RORγt、IL-17蛋白及mRNA表达水平均显著升高(P<0.05),Foxp3蛋白及mRNA表达水平均下降(P<0.05)。与模型组比较,地塞米松组、针灸组肾小球肾炎、间质性肾炎以及血管病变评分、Th17/Treg比值及肾脏组织RORγt、IL-17蛋白及m RNA表达水平均显著降低(P<0.05);Foxp3蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05)。结论:针灸能显著减少狼疮性肾炎小鼠肾脏RORγt及IL-17表达,增加Foxp3水平,调控Th17/Treg比例,改善肾脏病理改变,从而对MRL/lpr狼疮肾炎小鼠肾脏起到保护作用。     

痹痛定胶囊对类风湿性关节炎患者辅助T细胞的影响

目的研究痹痛定胶囊对类风湿性关节炎(RA)患者辅助T细胞(Th1/Th2)的影响。方法通过酶联免疫法检测RA患者及健康人血清标本中γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的水平。结果RA患者组血清IFN-γ、IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值显著高于健康对照组(P<0.01);经痹痛定胶囊治疗后RA患者IFN-γ、IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值均明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论痹痛定胶囊可通过抑制血清中IFN-γ和IL-4水平而抑制体液免疫和细胞免疫功能,提示痹痛定胶囊可调节RA患者体内Th1/Th2细胞的激活状况。     

补肾固表颗粒对免疫低下小鼠血清IL-2、IFN-γ及NK细胞活性、脾淋巴细胞增殖的影响

目的探究补肾固表颗粒对免疫低下小鼠血清IL-2、IFN-γ、TNF-α、NK细胞及脾淋巴细胞增殖的影响。方法将60只ICR雄性小鼠随机分成6组,即空白对照组,模型组,玉屏风组,补肾固表颗粒高、中、低剂量组。除空白对照组外,其余各组腹腔注射环磷酰胺50 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续3 d,建立免疫抑制动物模型。各组给予相应药物灌胃,连续28 d。采用MTT比色法检测脾淋巴细胞增殖情况,LDH法检测NK细胞杀伤活性,ELISA法检测血清IL-2和IFN-γ水平。结果与模型组比较,补肾固表颗粒可增强免疫低下小鼠脾淋巴细胞增殖能力(P0.05),提高脾淋巴细胞杀伤率(P0.001),使血清IL-2、IFN-γ和TNF-α含量显著升高(P0.01)。结论补肾固表颗粒可以增强免疫低下小鼠脾淋巴细胞转化和杀伤能力,提高血清IL-2、IFN-γ和TNF-α分泌水平,从而改善机体的免疫功能。     

蠲痹颗粒醇提物抑制Th17 细胞表达治疗类风湿关节炎作用机制研究

目的：研究蠲痹颗粒醇提物抑制致病性Th17细胞表达治疗类风湿关节炎(RA)的作用机理,阐述扶阳学派及吴生元教授运用扶阳理论治疗RA的分子机制。方法：构建牛Ⅱ型胶原诱导的DBA/1小鼠关节炎(CIA)模型,模型小鼠按随机数字表法分为CIA模型组(Model组)和蠲痹颗粒醇提物干预组(JBKL组)各10只。苏木精-伊红(HE)染色检测CIA小鼠关节炎病理损伤程度;流式细胞术检测Th17、Treg细胞表达水平;荧光定量PCR法检测Th17细胞相关基因的表达。结果：与Model组比较,JBKL组小鼠关节组织学评分降低(P<0.05)。与Model组比较,JBKL组Foxp3⁺CD4⁺T (调节性T细胞)表达水平上调(P<0.05)。与Model组比较,JBKL组小鼠脾淋巴细胞IL-17⁺CD4⁺比例降低(P<0.05),Treg/Th17比值增加(P<0.05)。JBKL组小鼠脾淋巴细胞IL-17A、IL-23p19、IL-21、IFN-γ的mRNA表达水平低于Model组,Th17...     

健脾清化方药物血清对慢加急性肝衰竭患者体外T淋巴细胞及其细胞因子的影响

目的:本研究通过健脾清化方大鼠含药血清和空白对照组血清体外培养湿热型HBV相关慢加急性肝衰竭患者淋巴细胞,观察患者T细胞亚群以及细胞上清液中IFN-γ、TNF-α、IL-18、IL-10水平变化,探讨健脾清化方对慢加急性肝衰竭患者T细胞分化的影响及细胞上清液中细胞因子的影响。方法:分离20例HBV相关慢加急性肝衰竭证属湿热型患者外周血淋巴细胞,分别应用健脾清化方大鼠含药血清和空白对照组血清体外培养,流式细胞仪检测T细胞亚群的变化,ELISA定量检测细胞上清液中IFN-γ、TNF-α、IL-18、IL-10水平变化。结果:含药血清刺激细胞后,CD_3~+、CD_4~+百分比较空白血清组上升,CD8+百分比较空白血清组下降,CD_4~+/CD_8~+比值较空白血清组上升,细胞上清液中TNF-α、IFN-γ、IL-18水平呈下降趋势,IL-10水平呈上升趋势,两组差异有统计学意义(P0.001)。结论:健脾清化方可以提高CD_3~+、CD_4~+百分比及CD_4~+/CD_8~+比值,降低CD_8~+百分比,改善T细胞亚群紊乱状态,健脾清化方可降低慢加急性肝衰竭患者外周血淋巴细胞上清液中TNF-α、IFN-γ、IL-18水平,提高IL-10水平,改善Th1/Th2失衡状态,减轻肝脏损伤程度,延缓病情发展。