细胞凋亡检测方法的研究进展

目的 对目前国内外用于细胞凋亡的检测方法进行综合评价。方法 结合国内外相关文献分析讨论细胞凋亡各种检测方法的原理及应用范围。结果 各种方法均具有一定的优缺点及应用范围。结论 选择多种适当的方法进行综合检测,常可得到较准确的结果。     

四种细胞凋亡检测方法的比较

近年来细胞凋亡一直是生命科学和医学领域各专业的研究热点.本文综述了电镜检测法、DNA琼脂糖凝胶电泳检测法、流式细胞术和TUNEL法四种细胞凋亡的检测方法,并对各种方法的优点及局限性做一简要比较.在选择细胞凋亡检测方法时,要充分了解各种方法的原理和应用范围,进行综合考虑.多种检测方法的联合应用常可获得更准确的结果.     

细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验及其与ATP法的比较

目的 探讨细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验的可行性。方法 采用末端标记法直接检测顺氯胺铂等6种化疗药物诱导4例卵巢癌实体瘤细胞凋亡的结果。并与三磷酸腺苷生物发光法（ATP法）检测结果进行对比。结果 同一种化疗药物对不同来源的癌细胞的细胞凋亡诱导程度不同，与ATP法比较二者的检测结果存在一致性（P0=0.75)。结论 上述结果提示，细胞凋亡检测能直接用于 了解药物诱导肿瘤细胞凋亡的程度，若作为一种药物敏感性试验方法与ATP法组合应用，将有可能提高临床应用效果。     

细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验及其与ATP法的比较

目的　探讨细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验的可行性。方法　采用末端标记法直接检测顺氯胺铂等 6种化疗药物诱导 4例卵巢癌实体瘤细胞凋亡的结果 ,并与三磷酸腺苷生物发光法 (ATP法 )检测结果进行对比。结果　同一种化疗药物对不同来源的癌细胞的细胞凋亡诱导程度不同 ,与 ATP法比较二者的检测结果存在一致性 (P0 =0 .75 )。结论　上述结果提示 ,细胞凋亡检测能直接用于了解药物诱导肿瘤细胞凋亡的程度 ,若作为一种药物敏感性试验方法与 ATP法组合应用 ,将有可能提高临床应用效果     

原位细胞凋亡的检测—POD法

细胞凋亡是许多正常的生理过程所必须的 ,在许多病理条件下 ,凋亡抑制的调节失衡在癌症、艾滋病、心脏病、中枢神经系统的退行性变等疾病中起着重要的作用 [1 ] 。由于细胞凋亡可由抗癌药物、放射及高热等启动 ,因此细胞凋亡的研究已趋向于热门。在检测细胞凋亡的众多方法中 ,POD法因其简便、快速及高敏感性而获得了较为广泛的应用。我教研室采用细胞凋亡原位杂交检测试剂盒 (北京中山公司提供 )对 5 0例子宫颈癌的病例分 5次进行了检测。每次均设阳性及阴性对照 ,使实验成功率达到了 10 0 %。介绍如下。1　方法1.1　石蜡切片脱蜡置蒸馏水…     

TUNEL法检测ER(-)乳癌细胞凋亡和Ki-67表达的研究

目的：探讨雌激素受体阴性乳癌细胞中Ki-67与细胞凋亡之间的关系。方法：通过1．25（OH）2D3诱发雌激素受体阴性乳癌细胞株MDA－MB－435s凋亡,采用MTT法检测细胞增殖情况,TUNEL法检测细胞凋亡指数,免疫组化法检测Ki-67阳性表达指数,进行相关性分析。结果：在10^-8mmol/L 1.25(OH)2D3诱发MDA－MB－435s凋亡过程中,肿瘤细胞 凋亡指数与Ki-67阳性表达指数呈负相关。结论：对凋亡指数及Ki-67阳性表达指数的综合分析,可全面反映细胞凋亡和增殖的平衡状态,对于判断肿瘤细胞的增生具有参考价值。     

细胞凋亡对乳腺癌预后影响的实验研究

探讨乳腺癌细胞凋亡的发生情况及对预后的影响。方法：初发乳腺癌的石蜡组织切片共７８例，运用末端标记法检测细胞凋亡，计算凋亡细胞占肿瘤细胞的百分比，求得凋亡指数。结果细胞凋亡的凋亡指数平均为３．２７１，同淋巴结的转移度、Ｐ５３蛋白有明显相关。     

几种凋亡细胞检测方法的比较

在细胞凋亡的基础研究领域 ,如有关凋亡信号转导、基因调控等方面的研究 ,以及在细胞凋亡的应用研究领域 ,诸如将细胞凋亡作为化疗药物的筛选模式、检测肿瘤组织切片中凋亡细胞数以评价肿瘤预后等 ,都涉及到凋亡细胞的识别与检测这一基本问题 ,因此 ,选择合适的检测凋亡细胞的方法便成为各个实验室必须解决的问题。本文结合相关文献及在研究中的体会 ,就凋亡细胞与坏死细胞的区别、几种常用凋亡细胞检测方法适用范围及应用中的影响因素、结果分析等简述如下。1　凋亡细胞与坏死细胞的区别在凋亡检测时必须将其与坏死区别开来 ,而将二者加以…     

末端转移酶原位标记法检测细胞凋亡

建立一种用末端转移酶标记对凋亡的细胞进行原位检测的方法。方法：在末端转移酶催化下，将地高辛修饰的核苷酸掺入凋亡细胞中的ＤＮＡ断裂缺刻，再用显色法检测被标记的ＤＮＡ，从而检出凋亡细胞。结果：本实验建立了一种灵敏、特异、有效的凋亡检测方法。结论：末端转移酶介导的原位标记法是研究凋亡的一个非常有用的工具。     

热刺激对原代培养神经元部分生物学特性的影响

目的 :研究热刺激对神经元形态及凋亡的影响 ,观察不同温度下神经元活力的变化 .方法 :利用倒置相差显微镜观察高温后神经元的形态学改变 .应用Klenow法对不同高温后神经元进行凋亡检测 ,应用图像分析仪对检测的结果进行分析 .MTT法进行平均吸光度检测 .结果 :高温处理后神经元出现形态学改变 .Klenow法检测发现未经高温处理的对照组神经元平均灰度为 69.5 4± 2 .70 ,高温处理后平均灰度升高 ,3 9℃时达高峰 13 3 .4 0± 4 .4 9,而后随着温度升高 ,平均灰度逐渐降低 .MTT法测定显示随着温度升高细胞活力逐渐降低 .结论 :高温处理神经元可诱导其凋亡 ,3 9℃时达高峰 .神经元细胞活力随温度升高而降低 .     

扩张型心肌病的心肌损伤与细胞凋亡

目的:探讨扩张型心肌病的心肌损伤与细胞凋亡的关系.方法:采用宝灵曼公司的细胞凋亡原位检测试剂盒(Tunel)对14例扩张型心肌病心肌组织进行检测.结果:14例扩张型心肌病心肌组织中11例检测出有凋亡细胞,凋亡细胞阳性指数(AI)范围在33.14±12.56～26.51±11.21之间.结论:在扩张型心肌病的发生发展中有细胞凋亡机制参与.     

末端转移酶原位标记法检测细胞凋亡

目的：建立一种用末端转移酶标记对凋亡的细胞进行原位检测方法，方法：在末端转移酶催化下，将地高辛修饰的核苷酸掺入凋亡细胞中的ＤＮＡ断裂缺刻，再用显色法检测被标记的ＤＮＡ，从而检出调亡细胞。结果：本实验建立了一种灵敏，特异，有效的凋讯检测方法。结论：末端转移介导的原位标记法是研究凋亡的一个非常有用的工具。     

阿司匹林诱导人宫颈癌Siha细胞凋亡及其抑制作用的研究

目的研究阿司匹林(aspirin)对宫颈癌Siha细胞凋亡和增殖的机制。方法培养人宫颈癌Siha细胞,加入不同浓度阿司匹林(1.0 mmol/L、5.0 mmol/L、10.0 mmol/L)干预培养,HE染色观察Transwell小室穿梭能力;划痕愈合实验观察迁移能力;应用流式细胞技术检测Siha细胞凋亡和细胞周期的变化;应用Giemsa染色观察细胞形态学的改变;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测阿司匹林对宫颈癌Siha细胞bcl-2及bax蛋白表达的影响。结果阿司匹林表现出明显地抑制人宫颈癌Siha细胞的迁移、增殖以及促进凋亡(P<0.05),且伴随浓度的递增和时间的延长,抑制作用更明显。结论阿司匹林具有较强的抗人宫颈癌作用,其机制可能与阿司匹林诱导宫颈癌细胞凋亡,并抑制其增殖有关。     

Caspase家族与心脏移植细胞凋亡

目的 探讨移植心脏的功能状态和心脏细胞的凋亡速度及凋亡数量密切关系。caspase蛋白酶家族对移植心脏细胞凋亡的影响。方法 通过综合国内外文献，对目前caspase酶原激活、效应机制等的研究进展概括总结，并对心脏移植中相关病理过程与caspase的激活进行阐述。结果 移植排斥、缺血再灌注损伤均可通过caspase的激活，诱发移植心脏细胞过度凋亡。结论 心脏移植时缺血一再灌注损伤及移植后的排斥反应等，均与细胞凋亡及其调控基因存在密切关系。     

地塞米松上调肝癌细胞株HepG2中bcl-xl表达的研究

目的 探讨地塞米松(dexamethasone,DEX)对肝癌细胞株HepG2中bcl-xl表达的影响.方法 应用不同浓度的地塞米松及顺铂(cisplatin,DDP)处理HepG2细胞后,应用噻唑蓝法检测细胞活性,利用免疫细胞化学法检测凋亡相关基因bcl-xl和caspase-3的表达.结果 在DDP浓度一定时,0.1～1.0 μmol/L浓度范围内DEX对DDP抑制人肝癌细胞株HepG2生长有不同程度的拮抗作用,并能抑制顺铂诱导肝癌细胞发生凋亡,上调bcl-xl的表达,降低caspase-3活性的表达.结论 在用DDP治疗肝癌前用DEX进行预处理后可能通过bcl-xl抗凋亡通路,抑制caspase-3活性,拮抗DDP诱导细胞凋亡.     

内皮抑素联合血管抑素诱导白血病细胞凋亡

目的　探讨重组人内皮抑制素因子 (rhES)联合人血管抑制素因子 (hAS)诱导白血病细胞凋亡的作用。方法　采用克隆 pCX的表达产物和用亲和层析及胰蛋白酶消化进行重组人内皮抑制素(rhES)和人血管抑制素 (hAS)的制备和纯化 ;以原代白血病细胞为靶细胞 ,应用MTT法、DNA琼脂糖电泳、流式细胞术检测白血病细胞凋亡。结果　内皮抑制素和血管抑制素联合对白血病细胞的生长、增殖有抑制作用 ,同时对白血病细胞具有诱导细胞凋亡作用 ,与单独相比有差异 (P <0 .0 1 )。结论　联合应用两种血管形成抑制因子对白血病细胞具有阻止细胞生长、增殖和诱导细胞凋亡的协同作用     

1H-MRS在诊断细胞凋亡上的应用

随着高分辨核磁共振扫描仪及其相应软件的发展和应用,核磁共振频谱的研究范围越来越广泛,磁共振频谱为长期以来各种研究方法未能较好的在活体水平解决的细胞凋亡的代谢物变化问题提供了较新的无创的可重复的可靠的方法.本文就细胞凋亡发生过程中的生化代谢及病理改变,现阶段核磁共振频谱在细胞凋亡中的研究成果和存在问题及其在临床的应用前景,做一综述.     

细胞凋亡的MTT染色法检测

目的研究MTT染色法用于检测细胞凋亡的可行性。方法以As2O3诱导K562细胞建立凋亡细胞模型,并比较以下3种方法检测凋亡的结果。MTT染色法检测、直接在光镜下进行形态学观察以及DNA凝胶电泳。结果MTT染色法可准确判定细胞凋亡,并可清晰分辨正常细胞、凋亡细胞和死亡细胞。结论MTT染色法是一种简单、可行的检测细胞凋亡的方法。     

细胞凋亡的MTT染色法检测

目的 研究MTT染色法用于检测细胞凋亡的可行性。方法 以As2O3诱导K562细胞建立凋亡细胞模型，并比较以下3种方法检测凋亡的结果。MTT染色法检测、直接在光镜下进行形态学观察以及DNA凝胶电泳。结果 MTT染色法可准确判定细胞凋亡，并可清晰分辨正常细胞、凋亡细胞和死亡细胞。结论 MTT染色法是一种简单、可行的检测细胞凋亡的方法。     

正常与异位子宫内膜Bcl-2表达与细胞凋亡的关系

目的 :探讨 Bcl- 2和细胞凋亡与在位及异位子宫内膜的关系。方法 :应用免疫组化法对61例正常月经周期子宫内膜及卵巢子宫内膜异位症患者进行 Bcl- 2检测。同时用 TUNEL法对其中 34例标本进行凋亡检测。结果 :正常位置的子宫内膜分泌期及月经期凋亡细胞较多 ,增生期内膜及异位内膜无凋亡。 Bcl- 2蛋白在增生期含量高 ,分泌期低落 ,月经期消失 ,异位内膜中高于增生期( P<0 .0 5 )。结论 :细胞凋亡与子宫内膜脱落有关 ;异位子宫内膜细胞通过抗凋亡基因 Bcl- 2的高表达而抑制细胞的凋亡过程 ,延长生命周期