核因子-κB抑制蛋白在动脉粥样硬化中的作用及其中医药研究进展

动脉粥样硬化(AS)的发病机制涉及多种学说,炎症学说是AS发病机制中的重要学说。核因子-κB(NF-κB)是炎症反应中的主要转录因子,参与炎症细胞凋亡和细胞增殖的基因调控。NF-κB抑制蛋白通过调节NF-κB信号通路的活动,调控炎症因子的表达,在AS的发生、发展过程中发挥重要的作用。现探究中医药通过调控NF-κB信号通路干预治疗AS的作用机制,以期为中医药治疗动脉粥样硬化提供更多的思路。     

特发性肾病综合征患者外周血单个核细胞糖皮质激素受体、核因子κB及活化蛋白-1的检测

糖皮质激素 (以下简称激素 )是治疗特发性肾病综合征(INS)的首选药物 ,但部分患者会出现激素抵抗 [1] 。原发性激素抵抗有遗传家族史 ,继发性激素抵抗的发病机制目前尚不完全清楚 ,可能与糖皮质激素受体 (GR)及某些炎症相关转录因子 [核因子κB(NF κB)、活化蛋白 1(AP 1)等 ]的活性异常有关 [2 ] 。本研究通过观察INS患者激素治疗前及治疗过程中外周血单个核细胞 (PBMC)NF κB、AP 1和GRDNA结合活性的变化 ,及其与INS激素敏感性的关系 ,探讨INS患者激素抵抗的机制。一、对象INS患者 18例 ,6个月内未使用激素及其他免疫抑制…     

雷公藤内酯醇降低T淋巴细胞核因子-κB的活性

目的：研究雷公藤内酯醇对Ｔ淋巴细胞核因子－κＢ（ＮＦ－κＢ）活力的影响，进一步研究雷公藤内酯醇免疫抑制作用的机制。方法：利用凝胶迁移率实验（ＥＭＳＡ）检测不同浓度的雷公藤内酯醇对于普通培养状态下和同时使用佛波脂／植物血凝素（ＰＭＡ／ＰＨＡ）激活的Ｊｕｒｋａｔ细胞中ＮＦ－κＢ活力的影响。结果：在普通培养状态下和同时使用ＰＭＡ／ＰＨＡ激活的Ｊｕｒｋａｔ细胞中均存在一定活力的ＮＦ－κＢ，使用ＰＭＡ／ＰＨＡ处理可使Ｊｕｒｋａｔ细胞中ＮＦ－κＢ的活力显著的升高，雷公藤内酯醇可以降低两种培养状况下的Ｊｕｒｋａｔ细胞中ＮＦ－κＢ活力，并以激活状态下更为显著。结论：雷公藤内酯醇降低Ｔ淋巴细胞中ＮＦ－κＢ活力的作用可能是其免疫抑制效应的分子机制之一。     

非甾体类抗炎药经转录活化蛋白-1及核因子-κB信号传导通路抑制结肠癌细胞生长

目的 探讨选择性及非选择性环氧合酶-2抑制剂（COX2）对体外培养的结肠癌细胞生长的影响及其作用的信号传导通路。方法 采用MTT法检测结肠癌细胞增殖；免疫印迹技术检测非甾体类抗炎药对结肠癌细胞外信号凋节蛋白激酶（ERK）/磷酸化（p）ERK、核因子（NF）-κBp65的表达影响；用凝胶迁移电泳技术分析阿司匹林及塞来昔布对结肠癌细胞转录活化蛋白（AP）-1及NF-κB结合活性的影响。结果 阿司匹林及塞来昔布均能有效抑制体外培养的结肠癌细胞生长，并具良好的量一效关系。阿司匹林及塞来昔布不同稗度下调结肠癌细胞COX-2、pERK及NF-κBp65的表达水平，但不影响总ERK-1表达。凝胶迂移电泳分析表明，20％血清或肿瘤坏死因子-α能刺激结肠癌细胞AP1及NF-κB结合活力，阿司匹林及塞来昔布能有效抑制HT-29细胞AP-1及NF-κB活化。塞来昔布能有效抑制SW480细胞AP-1及NF-κB活化。阿司匹林仅对SW480细胞AP-1活性有抑制作用，而对NF-κB活性的影响不明显。结论 选择性及非选抒性COX2抑制剂均能有效抑制结肠癌细胞生长。其作用机制与抑制结肠癌AP-1及NFK-κB信号传导通路有关。     

霉酚酸对内皮细胞核因子-κB及其抑制因子IκBα的影响

目的研究霉酚酸(mycophenolic acid,MPA)对内皮细胞核因子-κB(NF-κB)活力及其抑制因子IκBα的影响.方法利用凝胶迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,     

二甲双胍对大鼠肾小球系膜细胞核因子-κB、单核细胞趋化蛋白-1表达及合成的影响

目的 观察二甲双胍对系膜细胞（MCs）核因子-κB（NF-κB）,单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达合成的影响,并探讨其肾脏保护机制. 方法 体外培养MCs,随机分为正常（Con）组、高糖（HG）组及高糖十不同浓度二甲双胍（M1、M2、M3）组.48 h后收集各组细胞及上清液,采用荧光实时定量RT-PCR检测细胞NF-κB,MCP-1 mRNA含量,Western blot检测NF-κBp65蛋白水平,ELISA检测上清MCP-1蛋白浓度. 结果 （1）与Con组比较,HG组NF-κB mRNA和MCP-1 mRNA的表达增加（P＜0.05）;NF-κBp65的相对表达量增加[（1.04±0.01） vs （0.51±0.15）,P＜0.05],上清MCP-1水平增高[（561.99±23.24）vs（480.73±35.40） pg/ml,P＜0.05];（2）二甲双胍干预后,NF-κB mRNA、MCP-1mRNA表达及NF-κBp65蛋白、上清MCP-1含量均下降（P＜0.05）. 结论 二甲双胍可抑制MCs NF-κB和MCP-1的表达合成,可能与其肾脏保护作用有关.     

心血管疾病的核因子-κB活化及其意义

核因子－κＢ是一种可调控多种细胞基因表达的重要转录因子,参与了多种心血管疾病的病理生理进程。在适当情况下抑制核因子－κＢ的活化,可望为心血管疾病开辟新的治疗途径。     

β-淀粉样蛋白、核因子-κB与阿尔茨海默病

β－淀粉样蛋白沉积是阿尔茨海默病核心的病理改变,对β－淀粉样蛋白毒性作用机制,虽已进行了大量研究,尚不明了。核因子κB是一种在神经系统广泛表达的转录因子,近年发现它可与阿尔茨海默病相互作用而参与阿尔茨海默病的发病;核因子－κB的激活既可介导阿尔茨海默病致炎症介质产生、自由基生成增多、诱发细胞凋亡等病理损伤作用,又是β－淀粉样蛋白发挥正常生理功能所需,具有一定的神经保护作用。对核因子－κB如何介导阿尔茨海默病作用的信号转导机制的深入研究,将为阿尔茨海默病的病因学、治疗学提供新进展。     

雷公藤甲素对胶原诱导的关节炎大鼠滑膜细胞核转录因子κB表达与活性的影响

目的观察雷公藤甲素对胶原诱导的关节炎(CIA)模型大鼠膝关节腔液肿瘤坏死因子(TNF)-琢、白细胞介素(IL)-10含量和对滑膜组织核转录因子资B(NF-资B)表达与活性的影响,探讨雷公藤治疗类风湿关节炎(RA)的可能作用机制。方法于Wistar大鼠背部及尾根部多点皮内注射牛Ⅱ型胶原乳剂制作CIA动物模型,经过雷公藤甲素治疗后,通过酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠膝关节腔液TNF-琢和IL-10含量,免疫组织化学染色(SP)检测NF-资B的表达和凝胶电泳迁移分析法(electrophoreticmobilityshiftassay,EMSA)测定NF-资B活性。结果与正常对照组大鼠相比,CIA模型大鼠关节腔液TNF-琢含量升高(P<0.05),IL-10含量降低(P<0.05),膝关节滑膜组织NF-资B的表达和活性增加(P0.05)。结论雷公藤甲素可能通过下调滑膜细胞NF-资B的表达与活性,降低炎性因子的表达,升高抑炎因子的表达而治疗RA。     

羧甲基壳聚糖抑制白细胞介素-1β诱导的大鼠软骨细胞核因子-κB活化

目的 探讨羧甲基壳聚糖对白细胞介素(IL)-1β诱导下大鼠软骨细胞核因子(NF)-κB活化及一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法 体外培养大鼠膝关节软骨细胞,用10ng/ml IL-1β刺激,并不加或加入不同浓度的羧甲基壳聚糖处理,通过蛋白质免疫印迹(Westem blot)检测NF-κBn和NF-κBc及I-κB表达,通过蛋白质免疫印迹和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析软骨细胞iNOS的表达.采用单因素方差分析.结果 羧甲基壳聚糖能明显抑制IL-1β诱导下软骨细胞I-κB的降解(0.21±0.06)和NF-κB的核转位,降低IL-1β诱导下软骨细胞iNOS和NO的产量.结论 羧甲基壳聚糖可能通过抑制NF-κB信号通路的活化,而下调IL-1β诱导的软骨细胞iNOS表达,从而保护IL-1β刺激下的软骨细胞.     

核因子-κB和激活蛋白-1在恶唑酮诱导的小鼠实验性肠炎中的表达

目的 研究恶唑酮诱导的小鼠实验性肠炎中核因子(NF)-κB和激活蛋白(AP)-1基因表达量的变化,以探索其在发病机制中的意义.方法 7～8周龄的健康昆明小鼠24只,体重25～30 g,均分为正常组和模型组.模型组小鼠采用3%恶唑酮皮肤致敏5 d后,以0.5%恶唑酮(溶解于50%乙醇中)0.15 ml一次性灌肠造模方式建立实验性结肠炎模型.3 d后处死所有小鼠,分别提取外周血单个核细胞(PBMC)、脾脏单个核细胞(SMC)和肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC).经细胞mRNA抽提、逆转录cDNA后进行荧光定量PCR(Taqman探针法)检测NF-κB、AP-1的表达量.并进行结肠炎的组织学评分.结果 模型组NF-κB在SMC、LPMC和PBMC中的表达量均比正常组明显增高(分别为5.62±0.78比3.16±0.59、5.46±0.38比3.18±0.58、5.65±0.56比3.36±0.59,P＜0.01),AP-1亦是如此(分别为5.61±0.54比3.22±0.50、5.50±0.69比3.19±0.40、5.67±0.44比3.27±0.41,P＜0.01).结论 NF-κB、AP-1的活化可能与结肠炎的发病机制有关.     

急性心肌梗死急诊PCI术后无复流与NF-κB、AP-1和GR水平关系的研究

目的探讨核转录因子核因子-KB（NF—κB）、活化蛋白-1（AP-1）和糖皮质激素受体（GR）的核内蛋白水平变化与心肌无复流现象（NR）的关系。方法26例行急诊经皮冠脉介入治疗（PCI）的ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者，经单光子发射型计算机断层（SPECT）心肌灌注显像检测，出现心肌无复流现象。采用Western Blott法检测STEMI急诊PCI术后无复流患者外周血单个核细胞（PBMC）中NF—κB、AP-1和GR的核内蛋白水平的变化及这种变化与NR的关系。结果无复流组患者NF—κBp65、c—Jun／AP-1的蛋白表达水平显著高于复流组（P〈O．05）；无复流组患者GR—α的蛋白表达水平显著低于复流组（P〈0．05）。结论急性心肌梗死（AMI）急诊PCI术后出现心肌无复流患者存在NF—κB、AP-1的激活和GR的抑制。     

活化蛋白-1和巨噬细胞炎性蛋白-1α在实验性关节炎大鼠发病中的分子机制及亚砷酸的影响

目的研究活化蛋白(AP)-1和巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-1α在佐剂性关节炎大鼠发病中的分子机制及亚砷酸(SA)对它们的影响。方法随机将大鼠分成4组:正常对照组(NC组)、模型组(M组)、SA1组(腹腔注射SA0.5mg·kg-·1d-1)、SA2组(腹腔注射SA1.0mg·kg-1·d-1)。免疫组织化学检测各组C-fos、MIP-1α的表达;生化法测C反应蛋白。结果NC组未见C-fos和MIP-1α表达,M组C-fos及MIP-1α大量表达(P<0.05),C反应蛋白水平升高(P<0.01);与M组比较,SA1组及SA2组C-fos、MIP-1α表达降低(P<0.05),C反应蛋白水平下降(P<0.01),且SA2组更明显。结论AP-1和MIP-1α在大鼠佐剂性关节炎发生发展具有重要作用;亚砷酸能下调AP-1和MIP-1α的表达,降低CRP的水平,提示亚砷酸对RA有一定的治疗作用。     

激活蛋白-1在不稳定冠状动脉病变中的作用

目的 探讨冠心病患者激活蛋白-1与冠状动脉(冠脉)粥样硬化病变的关系.方法 根据冠脉造影将142例患者分为冠心病组和对照组.冠心病组根据临床类型、病变类型和病变程度进一步分组.裂解外周血白细胞,测定磷酸化c-Jun吸光度(A),反映活化AP-1数量.结果 磷酸化c-Jun A值冠心病组明显高于对照组(1.43±0.33比0.71±0.13,P<0.001),急性冠脉综合征组明显高于稳定性心绞痛组(1.56±0.28比1.14±0.25,P<0.001).磷酸化c-Jun随冠脉病变类型和程度的加重而增加.结论 AP-1表达量增高与冠脉粥样硬化发生显著相关,其可能作为预测冠脉粥样硬化病变及斑块稳定性的一个指标.     

不同低氧模式对大鼠心肌组织激活蛋白复合物-1的影响

目的 探讨不同低氧模式对大鼠心肌组织氧化还原敏感的转录因子激活蛋白复合物-1(AP-1)的影响,以c-fos表达水平间接代表AP-1的激活.方法 成年雄性Wistar大鼠96只,随机分为3组:间歇低氧组,持续低氧组和常氧对照组.分别于低氧暴露第2周、第4周、第6周和第8周随机抽取8只大鼠麻醉后处死,留取右心室心肌组织,...     

内皮素-1、NF-κB及AP-1对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞纤维连接蛋白表达的影响

目的探讨高糖（HG）对大鼠肾小球系膜细胞（GMC）表达纤维连接蛋白（FN）的影响及内皮素-1（ET-1）、NF-κB和AP-1在FN表达中的作用。方法建立高糖培养条件下的大鼠肾小球系膜细胞模型,在mRNA水平及蛋白水平检测不同条件下的ET-1和FN表达。结果（1）HG组与正常糖浓度（NG）组比较,HG组ET-1及FN的mRNA和蛋白表达显著增加（P〈0.01）。（2）NG组加入ET-1（5nmol/L）后,FNmRNA及蛋白表达增加（P〈0.01）,加入ET-1受体拮抗剂PD142893（10μmol/L）后,HG及ET-1诱导的FNmRNA及蛋白表达均被明显抑制（P〈0.01）。（3）给予NF-κB抑制剂PDTC（10μmol/L）后,HG及ET-1诱导的FNmRNA及蛋白表达均被明显抑制（P〈0.01）。（4）给予JNK特异性抑制剂SP600125（10μmol/L）后,HG及ET-1诱导的FNmRNA及蛋白表达均被明显抑制（P〈0.01）。结论HG增强大鼠GMC表达FN的作用通过ET-1介导,NF-κB和AP-1参与调控ET-1介导的FN表达增加。     

核因子κB与支气管哮喘发病关系及其临床意义

核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是一种调控基因表达的蛋白质核转录因子.它可以调控与炎症免疫反应有关的炎症因子、细胞因子、氧化应激相关酶等的基因表达,从而参与肺部的炎症及免疫反应,在支气管哮喘(简称哮喘)的发病机制中发挥着重要作用.NF-κB抑制剂通过阻断NF-κB激活通路上的多个环节,以达到治疗哮喘的目的,将会成为哮喘治疗研究的热点.     

冠心病患者血浆激活蛋白-1、巨噬细胞游走抑制因子水平和冠状动脉病变的关系

目的探讨冠心病患者血浆巨噬细胞游走抑制因子（MIF）水平和外周血白细胞激活蛋白-1（AP-1）表达量与冠状动脉粥样硬化病变的关系。方法根据冠状动脉造影结果将142例患者分为冠心病组和对照组,冠心病组根据临床类型分为稳定型心绞痛（SAP）亚组和急性冠状动脉综合征（ACS）亚组,根据冠状动脉病变类型分为A型病变亚组、B型病变亚组和C型病变亚组,根据冠状动脉病变程度分为轻度病变亚组、中度病变亚组和重度病变亚组。通过ELISA法测定外周血白细胞裂解液中磷酸化c-Jun吸光度,反映活化AP-1的数量。血浆MIF通过ELISA法测定。结果冠心病组磷酸化c-Jun表达量明显高于对照组（1.43±0.33比0.71±0.13,P〈0.01）,MIF水平明显高于对照组（14.97±4.11 ng/mL比9.07±1.28 ng/mL,P〈0.01）。冠心病组中,ACS亚组磷酸化c-Jun表达量明显高于SAP亚组（1.56±0.28比1.14±0.25,P〈0.01）,MIF水平明显高于SAP亚组（16.66±3.56 ng/mL比11.01±2.12 ng/mL,P〈0.01）。磷酸化c-Jun表达量和MIF浓度随冠状动脉病变类型和冠状动脉病变程度的加重而逐渐升高。结论AP—1和MIF与冠状动脉粥样硬化发生及冠状动脉病变情况显著相关,其可能作为预测冠状动脉粥样硬化病变情况及斑块稳定性的一个指标。AP-1表达量与MIF浓度越高,斑块不稳定性越高．