门静脉高压症脾功能亢进时脾脏巨噬细胞功能变化的研究

目的 观察门静脉高压症脾功能亢进时脾脏巨噬细胞(Mψ)的功能变化.方法 选取西安交通大学医学院第二附属医院2005年9月至2006年3月收治的门静脉高压症脾功能亢进患者12例,均为慢性乙型肝炎患者(实验组),同期外伤脾破裂患者4例(正常对照组).所有患者均行脾脏切除术.贴壁培养法分离纯化脾脏组织Mψ,RPMI-1640培养液将收获的细胞制备成细胞悬液,应用Vybant Phagocytosis Assay试剂盒、人TNF-α EliSpot试剂盒、DQTM ovalbumin试剂盒检测脾脏Mψ的吞噬、分泌及抗原呈递功能.结果 与正常脾脏Mψ相比,门静脉高压症脾功能亢进脾脏Mψ的吞噬率、抗原呈递阳性细胞比例和分泌TNF-α的阳性细胞数(每105个细胞中阳性分泌细胞数)明显增高(86.4±7.1比61.8±4.1,26.3±1.6比15.6±1.8,387.0±24.3比240.3±13.0,P<0.01).结论 门静脉高压症时脾脏Mψ吞噬、抗原呈递和分泌功能明显增强,细胞处于活化状态,进一步说明门静脉高压症时脾脏没有完全丧失免疫功能,但可能处于某种紊乱状态.     

DEN联合NMOR诱导建立具有转移潜能的肝癌模型

目的 探讨二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)联合N-亚硝基吗啉(N-nitrosomorpholine,NMOR)诱导建立具有转移潜能的SD大鼠肝癌模型以及合适的剂量和周期.方法 5周龄雄性SD大鼠110只,分成4组:DEN+NMOR组(60只)、DEN组(20只)、NMOR组(20只)以及正常对照组(10只).第1天DEN+NMOR组和DEN组大鼠按100mg/kg腹腔注射DEN1次,NMOR组和对照组给予等量的生理盐水腹腔注射.第2天DEN+NMOR组和NMOR组给予含质量分数为1×10-4NMOR的饮水自由饮用,DEN组和对照组饮用灭菌自来水.实验共进行20周.结果 16周时DEN+NMOR组、DEN组、NMOR组及正常对照组肝癌发生率分别为60%(6/10)、20%(1/5)、0(0/5)、0(0/2);20周时分别为88%(21/24)、17%(1/6)、14%(1/7)、0(0/2).DEN+NMOR组16周及20周肝癌肺转移率分别为33%(2/6)和48%(10/21),其他组未发现肺转移.结论 (1)用DEN启动,NMOR促进的方法诱导建立SD大鼠肝癌模型操作简便、效果确切、成瘤周期短,有一定的肺转移率.(2)按100mg/kg给予1次DEN腹腔注射,给予含质量分数为1×10-4NMOR的饮水连续20周可能是有效的剂量和周期.     

肝脏缺血-再灌注2相损伤对胰岛β细胞分泌功能的影响

目的 研究大鼠肝脏缺血-再灌注2相损伤对胰岛β细胞分泌功能的影响.方法 36只SD大鼠随机分为假手术组(C组)和IR组,每组18只.IR组制成肝脏缺血1 h再灌注12 h的70%肝脏I/R损伤模型.每组取10只大鼠,再灌注12 h后采血,测定血糖及血胰岛素浓度并计算胰岛素分泌指数.每组另各取8只大鼠,进行高血糖钳夹试验.结果 IR组血糖水平明显高于C组[(9.02±1.37)mmol/L vs.(5.52±0.95)mmol/L](P<0.01),胰岛素浓度也显著高于C组[(116.45±10.87)mU/L vs.(73.65±22.87)mU/L](P<0.01),但IR组胰岛素分泌指数显著低于C组[(462.80±46.28) vs.(1 046.54±30.21)](P<0.01).高血糖钳夹试验显示,IR组2相胰岛素分泌量显著低于C组[(83.17±6.01)mU/L vs.(99.80±10.81)mU/L](P<0.05),葡萄槠代谢率也明显低于C组[(29.68±4.92)mg·kg-1·min-1 vs.(53.16±3.45)mg·kg-1·min-1](P<0.01),胰岛素敏感性指数显著低于C组[(30.97±8.11) vs.(64.34±7.21)](P<0.01).结论 肝脏缺血-再灌注损伤12 h后,大鼠胰岛β细胞分泌功能受损,外周组织的胰岛素敏感性明显下降.     

银杏叶提取物对黄曲霉毒素B_1诱导的大鼠肝癌的化学预防作用

目的 探讨银杏叶提取物(EGb761)对黄曲霉毒素B_1(AFB_1)致大鼠肝癌(HCC)发生发展的干预作用及其机制.方法 A组(AFB_1组28只)、B组(AFB_1+EGb761组29只)和C组(对照组14只)3组大鼠,定期肝活检并于第64周全部处死,观察实验肝癌发生过程中大鼠肝组织病理学、肝癌发生率、丙二醛(MDA)及8-羟基鸟嘌呤核苷(8-OHdG)蛋白表达的变化.结果 B组大鼠诱癌各时期肝脏损害均较A组轻,增生性病变发生亦较迟,肝癌诱发率(26.92%)明显低于A组(76.00%)(P<0.01),对照组无肿瘤发生.在各检测点(实验第14、28、42、64周),B组大鼠肝组织MDA含量(nmoL/mg蛋白)分别为0.14±0.01、0.24±0.01、0.36±0.01、0.60±0.01,均显著低于A组的0.27±0.01、0.66±0.01、0.56±0.01、0.93±0.02(P<0.05),在第64周时还明显低于C组的0.84±0.03(P<0.05);B组在第28、42和64周时8-OHdG蛋白的表达强度均显著低于A组(P<0.05).结论 EGb761能够明显抑制AFB_1诱发大鼠肝癌的发生,这可能与其降低了自由基所致的脂质过氧化反应、减轻AFB_1诱导的氧化损伤有关.     

门静脉高压症脾功能亢进脾巨噬细胞吞噬功能的变化及其与脾亢程度的相关性

目的　观察门静脉高压症患者脾功能亢进(脾亢)时,脾脏巨噬细胞(MΦ)吞噬功能及其与外周血细胞计数变化的相关性。方法　肝硬化门静脉高压症脾亢患者20例(脾亢组),外伤性脾破裂患者6例(对照组)。术前检测患者外周血细胞计数,并收集其手术切除的脾脏,用玻片贴壁法分离培养脾脏MΦ,鸡红细胞吞噬法检测MΦ的吞噬功能。结果　脾脏MΦ吞噬率:脾亢组为(12 6±3 0)%,显著高于对照组(6 9±0 5)%,P<0 01;吞噬指数:脾亢组为0 146±0 035,显著高于对照组0 076±0 008,P<0 01。外周血白细胞计数与脾MΦ的吞噬率负相关(r=-0 472,P<0 05),与吞噬指数也呈负相关(r=-0 625,P<0 01);外周血血小板计数与脾MΦ吞噬率负相关(r=-0 485,P<0 05),与吞噬指数负相关(r=-0 523,P<0 05)。结论　门静脉高压症脾亢脾MΦ吞噬功能增强可能是引起脾亢发生及决定脾亢程度的重要因素。     

挤压综合征模型肾脏细胞凋亡的研究

目的 观察挤压综合征模型大鼠肾脏细胞的凋亡.方法 将雄性Wistar大鼠22只随机分为两组,正常组10只,实验组12只.实验组复制挤压综合征模型,解除压力后12h眼眶取血检测血清学指标,取肌肉、肾脏行苏木素-伊红(HE)染色,肾脏同时行TUNEL(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling)染色.观察致伤后肌肉和肾脏病理变化及肾脏细胞凋亡情况.结果 实验组大鼠血清尿素氮、肌红蛋白、钾离子、肌酐、肌酸激酶较正常组明显升高(P<0.01),血清钙离子显著下降(P<0.01).实验组大鼠肾脏组织每400倍视野中凋亡细胞数明显高于正常组(22.07±2.64比0.08±0.28,P<0.01). 结论挤压综合征中大鼠肾小管上皮细胞出现明显凋亡.     

选择性脾胃区减断分流术对肝脾血流动力学的影响

目的 探讨肝硬化门静脉高压患者行选择性脾胃区减断分流术(SDDS-GSR)后肝脾血流动力学的改变及临床意义.方法 前瞻性收集41例行SDDS-GSR术治疗患者的超声检查资料,按术前、术后2周及术后1年分为3期,并以21例正常体检患者为对照进行研究.结果 (1)脾脏厚度在术后2周(47±8)mm及术后1年(46±8)mm较术前(60±9)mm显著减小(P<0.01).(2)术后2周门静脉直径(1.13±0.19)cm较术前显著变窄(P<0.01),脾动脉直径(0.49±0.08)cm较术前显著变窄(P<0.05),肝动脉直径(0.40±0.07)cm较术前显著增宽(P<0.05).术后1年门静脉直径(0.89±0.17)cm均较术前显著变窄(P<0.01).(3)术后2周门静脉血流量(649±294)ml/min和脾动脉血流量(446±254)ml/min较术前显著减小(P<0.01),肝动脉血流量(612±295)ml/min较术前显著增加(P<0.01).术后1年肝动脉血流量(401±152)ml/min与术前和正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 肝硬化门静脉高压症患者肝脾血流动力学参数发生异常变化;SDDS-GSR有助于纠正肝硬化门静脉高压症患者肝脾血流动力学的紊乱状态.     

肝硬化对大鼠异丙酚镇静效力的影响

目的 探讨肝硬化对大鼠异丙酚镇静效力的影响.方法 健康雄性SD大鼠58只,体重180～220 g,随机分为3组,正常对照组(C组,n=18)、轻度肝硬化组(M1组,n=20)和重度肝硬化组(M2组,n=20).M1组和M2组采用四因素法制备大鼠轻度肝硬化和重度肝硬化模型.模型制备成功后,静脉注射异丙酚,第1只大鼠的剂量为5.912 mg/kg,应用序贯法确定下一只大鼠的剂量,相邻剂量比为0.85,以翻正反射消失作为判断异丙酚镇静起效的标准.采用序贯法计算异丙酚镇静效应的半数有效剂量(ED50).结果 与C组比较,M1组及M2组异丙酚镇静效应的ED50降低(P＜0.05或0.01);与M1组比较,M2组异丙酚镇静效应的ED50降低(P＜0.05).结论 肝硬化可强化大鼠异丙酚的镇静效力.     

内皮祖细胞移植对大鼠肝硬化作用的研究

目的 探讨内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)移植对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的大鼠肝硬化的作用.方法 本组38只SD大鼠中8只大鼠为正常对照,其余30只采用25%的CCl4/橄榄油灌胃制备肝硬化模型.再将肝硬化大鼠分为3组,每组10只.12周后直接处死的为肝硬化模型组,门静脉输入大鼠EPCs为EPCs移植组,经门脉输入生理盐水为移植对照组.移植4周后检测移植组和移植对照组大鼠肝组织胶原Ⅲ(collagen Ⅲ,COL Ⅲ)、平滑肌动蛋白(smooth muscle actin α,α-SMA)和Ki67的表达,检测外周血肝功能和血凝分析.结果 肝硬化模型组大鼠肝脏体积增至正常时的2倍.EPCs移植组大鼠与肝硬化模型组比较,肝组织学活动指数(histological activity index,HAI)(F=75.062,P<0.01),丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)(F=29.942,P<0.05),门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)(F=16.618,P<0.05)和总胆红素(total bilirubin,TBIL)(F=9.911,P<0.05)水平降低,白蛋白(albumin,Alb)(F=4.944,P<0.05)和Ki67(F=45.966,P<0.01)水平升高,纤维化面积(F=25.025,P<0.05)减少,α-SMA(F=7.86,P<0.05)和COL Ⅲ(F=135.787,P<0.01)表达降低;与正常肝脏相比,移植对照组HAI,ALT,AST和TBIL水平升高,Alb和Ki67水平降低,纤维化面积增加,α-SMA和COL Ⅲ表达升高(P<0.05).移植对照组大鼠凝血酶原时间延长,差异有统计学意义(P<0.05). 结论移植EPCs可以促进大鼠肝硬化的肝细胞增生,减轻肝纤维化程度.     

帕瑞昔布钠预先干预对经前期综合征模型大鼠的作用

目的 研究帕瑞昔布钠预先干预对经前期综合征(premenstrual syndrome,PMS)模型大鼠的作用. 方法 36只Wistar大鼠依阴道涂片法确定大鼠动情周期,分别将处于动情后期的大鼠采用完全随机分组方法分为:正常组(C组),模型组(M组),模型+帕瑞昔布钠组(A组).采用慢性束缚应激法复制PMS模型,持续7d.造模第5天～7天,A组给予帕瑞昔布钠肌注0.72 mg/kg.造模成功后,于第8天处死大鼠.免疫组化检测大鼠子宫内膜组织环氧化酶-2(cycloxygenase-2,COX-2)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的表达,Western blot法检测大鼠大脑海马组织COX-2、PGE2的表达. 结果 ①M组和A组大鼠子宫内膜COX-2表达高于C组,差异有统计学意义(P＜0.01);与M组(0.46±0.11)比较,A组(0.31±0.12)子宫内膜COX-2表达显著降低32％(P＜0.05).②M组和A组子宫内膜PGE2表达较C组显著增加(P＜0.01);与M组(0.49±0.08)比较,A组(0.39±0.09)子宫内膜PGE2表达显著降低18.9％ (P＜0.05).③M组和A组大鼠海马组织COX-2表达高于C组,差异有统计学意义(P＜0.01);与M组(0.91±0.03)比较,A组(0.72±0.05)大鼠海马组织COX-2表达显著降低20.8％(P＜0.05).④M组和A组大鼠海马组织PGE2表达较C组显著增加(P＜0.01);与M组(1.13±0.03)比较,A组(0.92±0.06)大鼠海马PGE2表达显著降低18％(P＜0.05). 结论 帕瑞昔布钠预先干预能降低PMS模型大鼠子宫内膜及大脑海马部位COX-2、PGE2的表达.     

Terlipressin促进肝癌合并肝硬化半肝切除术后肝再生的前瞻性非随机研究

目的 探讨Terlipressin（特利加压素）促进肝硬化肝癌半肝切除术后肝再生的临床疗效。方法 前瞻性非随机分析2017年10月至2018年8月福建医科大学孟超肝胆医院符合标准的68例肝硬化肝癌患者并行半肝切除的临床资料,按肝切除术后有无使用Terlipressin分为试验组（37 例）和对照组（31 例）。采用IQQA-Liver系统对所有患者术前、术后5 d及2 个月的CT图像进行三维可视化重建,计算术后5 d肝再生率（liver regeneration rate, LRR5 d）、术后2 个月肝再生率（LRR2 mon）、肝继续再生率（ΔLLR=LRR2 mon-LLR5 d）。比较两组患者肝切除术后肝再生率、肝功能变化、并发症等。结果 试验组和对照组基线资料具有可比性,肿瘤最大直径、肿瘤数目、术前AFP水平、术前HBV-DNA滴度等无统计学差异（P＞0.05）。两组之间LRR5 d未见统计学差异[（16.97±7.62）% vs（ 16.06±10.22）%,P＞0.05],但试验组LRR2 mon、ΔLLR明显高于对照组[（28.69±16.94）% vs（ 20.55±10.37）%,P=0.023;（12.63±13.29）% vs（ 3.58±9.13）%,P=0.002]。试验组患者术后肝功能恢复时间更短,术后腹腔感染发生率更低（P＜0.05）,但是两组之间严重并发症发生率无统计学差异（P＞0.05）。结论 Terlipressin不仅能促进肝癌合并肝硬化患者术后的康复,也能促进半肝切除术后肝再生,但该结论需要更加强有力的证据。     

结直肠癌术前肝动脉联合区域动脉灌注化疗对肿瘤增殖凋亡的影响

目的 探讨结直肠癌术前肝动脉联合区域动脉灌注化疗(PHRAIC)对肿瘤增殖凋亡的影响. 方法 将2001年6月至2007年6月收治的509例Ⅱ期和Ⅲ期结直肠癌患者随机分成PHRAIC组(n=256)和对照组(n=253),评价两组术前和术后组织标本的坏死程度、Ki67、P16、Bax、bel-2、survivin、凋亡率和细胞周期. 结果 两组一般临床资料无统计学差异.PHRAIC组术前标本的各项评价与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).PHRAIC组介入前后标本坏死程度3级者分别为3.1%和22.7%,4级者分别为0和13.5%(P<0.05);Ki67标记指数介入前后分别为48.6±17.1和38.4±13.3(P<0.05);BAX、bel-2和sttrvivin过表达率分别为48.0%和77.0%、75.0%和43.0%、52.0%和31.6%(P<0.05);凋亡率分别为4.3%±2.2%和16.7%±6.4%(P<0.05);PHRAIC组介入后病理标本S期比例为21.8%±10.7%,低于介入前的42.1%±11.2%(P<0.05);G0-G1的比例为57.1%±18.1%,高于介入前的35.1%±12.1%(P<0.05).所有患者均获得随访,平均随访(42±14)个月.PHRAIC组和对照组Ⅲ期患者术后5年肝转移率分别为18.9%和27.3%,转移复发率分别为26.3%和38.0%,总生存率分别为81.0%和60.4%,中位生存期分别为45和40个月,差异均有统计学意义(P<0.05);两组Ⅱ期患者间上述指标间无明显差异. 结论 术前肝动脉联合区域动脉灌注化疗可抑制肿瘤细胞的增殖,促进凋亡,降低Ⅲ期结直肠癌患者术后肝转移的发生率,延长生存期.     

肝性低氧血症与肺功能、一氧化氮和内皮素-1相关性研究

目的探讨肝性低氧血症患者肺功能、一氧化氮、内皮素-1的变化情况及三者的作用和相互关系。方法测定60例肝硬化患者（肝硬化组）及30例健康人（对照组）肺功能、一氧化氮、内皮素-1及相关临床生化参数。结果肝硬化组一氧化氮水平明显高于对照组[分别为（86．74±32．49）、（52．46±8．77）μmol／L,P〈0．01],内皮素-1水平则明显低于对照组[分别为（25．16±15．49）、（55．82±21．33）ng／L,P〈0．01],肺功能指标均明显低于对照组（P〈0．01）。一氧化氮与内皮素-1呈负相关（r=-0．287,P=0．026）,二者均与肝性低氧血症无相关性（P〉0．05）。结论肝性低氧血症在肝硬化早期肺功能即有改变,一氧化氮及内皮素-1虽共同参与肝硬化发展,但非促成肝性低氧血症的因素。     

腹腔镜直肠癌前切除术中保留左结肠动脉与否的临床对照研究

目的探讨腹腔镜直肠癌前切除术中处理肠系膜下动脉时保留左结肠动脉（left colic artery,LCA）的可行性与应用价值。方法回顾性分析我院2009年3月～2012年12月113例腹腔镜直肠癌前切除术的临床资料,术者随意分为两组,其中保留LCA组72例,不保留LCA组41例,比较2组术中出血量、手术时间、术后排气时间、末端回肠造口情况、肠系膜下动脉（inferior mesenteric artery,IMA）根部淋巴清扫数目、IMA根部淋巴结转移率及预后情况。结果2组术中出血量[（60．8±23．8）mlVS．（55．7±22．7）ml,t=1．115,P=0．267],手术时间[（133．8±14．6）minvs．（128．3±21．1）min,t=1．623,P=0．107],术后排气时间[（2．6±0．8）dVS．（2．8±0．9）d,t=-1．161,P=0．248],IMA根部淋巴结清扫数目[（3．0±1．3）VS．（3．3±1．1）,t=-1．237,P=0．219],IMA根部淋巴结转移率[6．9％（5／72）VS．7．3％（3／41）,x。：0．006,P=0．941]差异均无显著性。保留LCA组均无须游离结肠脾曲及做末端回肠造口;不保留LCA组3例因近端肠管血运障碍需游离结肠脾曲（P=0．046）,3例吻合后加做末端回肠造口（P=0．046）。保留LCA组术后无吻合漏,不保留LCA组2例吻合口漏（P=0．130）。2组术后随访3—48个月,中位随访24个月,保留LCA组1例局部复发,4例肝转移,不保留LCA组1例局部复发（P=1．000）,2例肝转移（P=1．000）。结论腹腔镜直肠癌前切除术中处理IMA时保留LCA可以有效保障近端肠管血运。     

残胃癌的临床病理特点及淋巴转移规律分析

目的 探讨残胃癌临床病理特点和淋巴转移规律及其与原发性胃癌的差异.方法 比较1994年3月至2008年8月收治的56例残胃癌和1171例原发性胃癌临床病理与淋巴结转移情况,探讨残胃癌临床病理特点和淋巴转移规律.结果 本组残胃癌患者56例,占同期胃癌患者的4.6%.与原发性胃癌患者相比,残胃癌患者在发病年龄较高[(64.3±9.0)比(58.3±12.6)岁]、淋巴结阳性率较高(31.8%比25.5%)、Borrmann分型(较晚)及联合脏器切除率较高(57.1%比26.4%),差异均有统计学意义(X~2值为18.800、11.679、9.177、25.190;P均<0.05);与原发性胃癌行淋巴结廓清的病例相比,残胃癌No. 10、11组淋巴结转移阳性率较高(X~2值为5.558、6.099;P均<0.05);而原发性胃癌No.2、3、8组淋巴结转移率较高(X~2值为15.508、6.003、4.084;P均<0.05).残胃癌空肠系膜淋巴结转移率为24%(6/25),周围结缔组织浸润发生率高(8/56).结论 残胃癌患者具有与原发性胃癌不同的临床病理特征,淋巴结转移有一定规律可循;近端胃癌D2淋巴结廓清术和空肠系膜淋巴结清扫是残胃癌的标准手术,但应注意联合脏器切除.     

Metastasis of hepatocellular carcinoma to spleen and small intestine

Metastasis of cancer to the spleen or small intestine is rare. We encountered a case of hepatocellular carcinoma (HCC) with splenic and jejunal metastases. A 60-year-old man was referred to us in February 2005 with a diagnosis of splenic tumor. Since 2001, he had been treated repeatedly for HCC with liver cirrhosis due to hepatitis C virus infection; partial liver resection, transcatheter arterial chemo-embolization, and radiofrequency ablation therapy had been performed. In October 2004, he had undergone partial pulmonary resection due to metastasis of HCC to the lung. The splenic tumor, which was detected by computed tomography, seemed to be a metastasis of HCC. Splenectomy was performed for the splenic tumor, and a jejunal tumor was discovered and also resected. Both the splenic and jejunal tumors were diagnosed pathologically as metastases from the HCC. After repeated treatment for HCC, metastases can appear in various organs; thus, careful observation is necessary during follow-up.     

门静脉动脉化对梗阻性黄疸时肝胆切除术后肝再生的影响

目的 观察慢性、梗阻性黄疸小型猪肝-胆切除术中限流性部分门静脉动脉化(PP-VA)对术后残肝再生能力的影响.方法 利用梗阻性黄疸小型猪模型,模拟进行联合半肝切除的肝门部胆管癌扩大根治性手术.实验分组:无黄疸对照组(A组)、门静脉动脉化组(B组)及非门静脉动脉化组(C组).对照观察根治术中应用限流性PPVA在术后30 d内对残肝再生的作用.结果 术后即刻及第30天门静脉PO2:B组高于C组[(47.33±2.43)比(35.38土4.06)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)、(48.50±4.44)比(35.55±2.55)mm Hg,P<0.01、P<0.01].肝细胞有丝分裂指数:术后第14及21天B组高于C组[(12.55±2.85)%比(6.85±2.10)%、(15.25±1.99)%比(11.88±1.15)%,P<0.05、P<0.05].术后第14、21天肝脏体积再生率B组分别高于C组[(24.56±6.15)%比(11.96±5.43)%、(70.63±9.83)比(44.92±7.42)%,P<0.05、P<0.01].结论 限流性PPVA可促进慢性梗黄小型猪肝-胆切除术后残肝再生,从而预防肝功能衰竭.     

ISO-1对小鼠大肠癌肝转移的影响

目的 研究选择性巨噬细胞移动抑制因子(MIF)互变异构酶活性抑制剂ISO-1对BALB/c小鼠大肠癌肝转移的影响及其可能机制. 方法微孔迁移法检测ISO-1对CT26细胞体外侵袭的影响.盲肠造疝原位移植瘤块术建立小鼠大肠癌肝转移模型,将30只成功建模小鼠分为3组,每组10只.每周两次腹腔注射相同体积ISO-1(0.2 ml,20 mg/kg)、5%DMSO和无菌生理盐水(NS)溶液.治疗4周后处死小鼠,肝脏连续病理切片、HE染色,比较各组的肝转移率.L-多巴色素甲酯测定小鼠血清MIF互变异构酶活性;ELISA测定血清中血管内皮生长因子(VEGF)水平;CD31染色标记肿瘤微血管内皮细胞测定肿瘤微血管密度(MVD).结果 100 μmol/L ISO-1作用24 h后CT26细胞穿透聚碳酸酯膜细胞数显著减少[(151±19)比(178±9),P<0.01].ISO组比DMSO组小鼠血清MIF互变异构酶活性为51%比81%,P<0.01.ISO-1组、DMSO组与NS组肝转移率分别为10%、60%与70%(x2=8.30,P<0.05).ISO-1组、DMSO组与NS组小鼠血清VEGF的水平分别为(15±7)pg/ml、(63±10)pg/ml与(67±8)pg/ml,P<0.01.ISO-1组、DMSO组与NS组原位肿瘤组织MVD分别为17±4、36±7与38±5,P<0.01.结论 在体外ISO-1减少了CT26细胞的迁移,在体内降低了大肠癌肝转移的发生.其可能机制为ISO-1抑制MIF互变异构酶活性,下调VEGF表达,减少MVD.     

结肠腺癌中微小RNA-134-5p的表达及与肝转移的关系

目的检测结肠腺癌中微小RNA(microRNA,miR)-134-5p的表达,分析其与细胞增殖的关联性,探讨其与肝转移的关系。方法2013年4月至2014年8月,收集大连大学附属中山医院确诊为结肠腺癌并行手术治疗的患者共69例作为研究对象,选取肿瘤组织作为观察组,选取距肿瘤的边缘>5 cm的正常结肠组织作为对照组。应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测二组中miR-134-5p的表达。应用免疫组织化学法检测观察组中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,组间比较采用t检验。结果miR-134-5p在观察组中的表达明显低于对照组(1.15±0.38比1.55±0.42,t=6.670,P<0.01),差异有统计学意义,miR-134-5p的表达在不同肿物最大径(1.01±0.26比1.35±0.25,χ²=3.110,P<0.05)、有无脉管累犯(0.85±0.25比1.32±0.27,χ²=4.990,P<0.05)、不同浸润深度(1.02±0.30比1.35±0.31,χ²=3.040,P<0.05)、有无淋巴结转移(0.95±0.22比1.28±0.40,χ²=3.540,P<0.05)和不同TNM分期(0.98±0.29比1.36±0.28,χ²=3.980,P<0.05)的分组中差异均有统计学意义。相关分析显示miR-134-5p与PCNA呈负相关(r=-0.560,P<0.05)。随访中肝转移者miR-134-5p的表达低于无肝转移者(0.78±0.11比1.44±0.32,t=6.950,P<0.05),随访显示miR-134-5p的表达与生存时间相关(χ²=4.330,P<0.05),差异均有统计学意义。结论miR-134-5p在结肠腺癌组织中低表达,对肿瘤的形成和进展有重要作用,miR-134-5p异常表达时可能对细胞增殖有促进作用。miR-134-5p的表达可能与预后有关。     

核心蛋白聚糖在移植肝慢性排斥反应中的表达及意义

目的 探讨核心蛋白聚糖(DCN)在移植肝慢性排斥反应(CR)患者肝组织及血清中的表达及意义.方法 以免疫组织化学(SP法)检测正常人16例、肝硬化20例、移植肝无CR 46例及合并CR 8例患者肝组织中DCN的表达情况,以酶联免疫方法(Elisa法)测定各组血清中DCN的含量情况.结果 移植肝并CR与无CR组织及正常组织中DCN均呈阴性表达,肝硬化组织中呈阳性表达,移植肝并CR阳性表达率、平均吸光度与肝硬化组织相比,有显著性差异(25%vs 55%,0.1249±0.0039 vs 0.2357±0.0396,P<0.01),与正常肝及移植肝无CR组相比,差异无统计学意义;移植肝并CR患者血清中DCN含量明显升高,与正常人、肝硬化及移植肝无CR组相比,有显著性差异(54.0833±6.0325μg/L vs 1.0232±0.9105 μg/L,12.6202±1.5370μg/L,17.7102±2.3562 μg/L,P<0.01),DCN血清浓度与排斥反应程度呈正相关.结论 DCN在移植肝并CR患者肝组织中呈阴性表达,而在血清中呈明显升高,提示其可能参与CR的发生、发展,同时血清DCN测定有可能成为移植肝CR早期诊断、发展及预后的非创伤性重要指标.